简介全自动免疫组化染色机

免疫组化染色就是用免疫学方法进行组织化学染色,免疫组织化学技术是利用已知的特异性抗体与特异性抗原结合的特点,通过化学反应使标记于特异性抗体上的显色剂显现出颜色,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的技术。免疫组化     

免疫组化技术（二）

2 免疫组化理论 2.1 免疫组织化学免疫组织化学是一项用抗原-抗体相互作用鉴别细胞或组织成分(抗原)的技术,抗体连接的位点可通过抗体直接标记或使用二级标记法鉴别.     

酶消化及微波抗原修复在免疫组化中的应用

酶消化及微波抗原修复在免疫组化中的应用龙晓霞（北京中山生物技术有限公司１００００６）免疫组织化学技术是利用抗原抗体特异性反应原理，对组织或细胞内的抗原物质进行定性和定位的组织学技术。它在基础医学研究和临床医学诊断中发挥着重要作用。在对已知抗原的检测中...     

何谓抗原？抗原具有什么性能？

答：抗原是一类能够刺激机体免疫系统，使之发生免疫应答，产生抗体和／或致敏淋巴细胞等免疫物质，同时又能在体内外与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的物质。抗原具有两种性能：（1）刺激机体产生免疫反应的免疫原性；（2）与相应抗体和／或致敏淋巴细胞发生特异性结合的反应原性。在某些特定条件下，抗原也可引起机体产生免疫耐受性。     

S-P法免疫组化染色探讨

免疫组织化学（免疫组化）技术是利用已知的特异性抗体或抗原能够特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的抗体上的显示剂，例如金属离子、酶、同位素等，显示一定的颜色。     

抗原修复后内源性生物素对免疫组化染色影响的消除

免疫组织化学是应用免疫学原理，利用特异抗体与组织切片中的抗原相结合，附以可见的标记物，在组织原位使抗原抗体结合物显现出来。免疫组织化学技术因其结果定位明显，操作简单，实验室条件及设备技术要求不高，已被广泛应用于临床病理诊断及各种科研工作。但由于组织在福尔马林中固定，经常导致抗原决定簇被封闭，阻碍了抗原与抗体的结合。因此，抗原修复技术在免疫组化操作过程中成为一个极其重要的环节。我们针对不同的抗原，采用不同的修复方法，取得较为理想的效果。     

免疫组织化学技术在切片中的应用

免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）,对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法等。     

知识角

何谓抗原?抗原具有什么性能?答:抗原是一类能够刺激机体免疫系统,使之发生免疫应答,产生抗体和/或致敏淋巴细胞等免疫物质,同时又能在体内外与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的物质。抗原具有两种性能:(1)刺激机体产生免疫反应的免疫原性;(2)与相应抗体和/或致敏淋巴细胞发生特异性结合的反应原性。在某些特定条件下,抗原也可引起机体产生免疫耐受性。———摘自《护士继续教育手册》·知识角·免疫对机体有何功能?答:免疫功能有三项:(1)免疫防护即抵抗病原微生物的入侵;(2)免疫稳定即清除自身的衰老或损伤的细胞;(3)免疫监视即清除…     

免疫球蛋白（Ig）和抗体这两个概念是否相同？为什么？

答：免疫球蛋白是广泛存在干哺乳动物血清、淋巴液、组织液和外分泌液中的一种具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。抗体是B细胞接受抗原刺激后分泌的具有免疫功能的，即能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。所有的抗体都是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并不都是抗体。如：多发性骨髓瘤病人血清中的免疫球蛋白，虽然其化学结构与抗体相似，但通常无免疫功能，不易查到抗体活性，因此不能称之为抗体。     

什么是免疫耐受性？

抗原刺激机体，通常可引起免疫应答，表现为特异性抗体和／或致敏淋巴细胞形成。但是，在某些情况下，机体接受抗原刺激后，不能产生上述免疫应答，这种状态称为免疫无应答性。免疫无应答性可分为非特异性和特异性两大类。非特异性免疫无反应性，是指机体对任何抗原刺激均不应答的状态。特异性免疫无应答性是指机体经某种抗原诱导后形成的特异性免疫无应答状态。机体的免疫系统经某种抗原的诱导后产生的针对这种抗原的免疫无反应性又称为免疫耐受性。     

免疫组织化学方法在人/山羊嵌合体人源细胞鉴定中的应用

目的在胎山羊宫内移植人造血干细胞(hHSC)获得人／山羊嵌合体基础上，应用免疫组织化学技术分析嵌合体实验山羊肝、肺和肾组织中人源细胞的生长及分化情况。方法对7头经荧光激活的细胞分选(FACS)、荧光原位杂交(FISH)和分子生物学方法鉴定为阳性的实验山羊，在出生后不同时间取其肝、肺和肾组织，制作石蜡切片，然后采用免疫组织化学的EnVision系统，用特异性人增殖期细胞核抗原(PCNA)单抗、人肝细胞特异性抗原(HSA)单抗及人β—2微球蛋白(β—2M)单抗鉴定这些组织中的人源细胞。结果7头实验山羊的肝组织中有一定比例的PCNA和HSA抗体阳性染色细胞，肺和肾组织内有PCNA及β—2M抗体阳性染色细胞，正常人的肝、肺和肾细胞也呈阳性染色，而非hHSC移植的正常山羊的肝、肺和肾组织中未见有阳性染色细胞。结论胎山羊宫内移植hHSC所形成的嵌合体的肝脏中有人源细胞存活，并检测到表达人肝细胞特异抗原的人肝样细胞。免疫组化鉴定的阳性结果与分子生物学等方法的鉴定结果相符。此外，在嵌合体山羊肺和肾组织中也发现有人源细胞。     

免疫细胞化学方法对照设置

利用抗体为媒介显示培养细胞或组织切片中的局部结构是一种十分有用的方法,已经成功地应用于很多重要的发现之中,包括基于同一原理的免疫细胞化学、免疫组织化学以及免疫荧光在内的多种具体方法。本文泛指基于抗原抗体结合反应多种方法统称的免疫细胞化学（immunocytochemistry,IHC）。     

敬告读者

目的探讨用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)时复合抗原片的应用价值。方法分别用3种抗原片(Hep-2型细胞／灵长类肝组织复合片，Hep-2型细胞片，鼠肝匀浆片)检测抗核抗体，比较检出率和特异性。结果复合抗原片的检出率高、特异性好。结论运用Hep-2型细胞／灵长类肝组织复合抗原片检测ANA，有利于对自身免疫性疾病的初步筛选和判断。     

几种抗原修复方法研究

由于常规福尔马林固定和石蜡包理过程造成的抗原封闭与结构改变，限制了一些抗体在免疫组织化学中的应用。为了恢复组织的抗原性，提高免疫组织化学的检测阳性率，我们应用高压锅，微波炉和胰蛋白酶分别对石蜡切片进行处理。结果显示，一些抗体过去只能用于冰冻切片，经前处理后可用于石蜡切片，一些抗体的敏感性增强，经高压锅处理的免疫染色重复性较微波炉处理得好，个别抗体适用于酶消化。总之，在免疫组织化学染色过程中应根据抗原抗体的特性选用适当的前处理方法。     

免疫组化技术在肿瘤学中的应用

免疫组织化学（immunohistochemistry）又称免疫细胞化学（immunocytochemistry），是利用抗原与抗体特异性结合的原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原或抗体进行定位、定性或定量检测的一门技术。它是免疫学和传统的组织化学（histochemistry）互相结合而发展起来的，也可以称为原位免疫学（in situ immunology）。免疫组化技术以其特异性强、敏感度高、操作简便并且将形态学改变与功能和代谢结合起来等优点得到了最为广泛的推广和应用。尤其是在肿瘤病理学中已经成为常规的诊断方法，它不仅提高了肿瘤的诊断和鉴别诊断的准确性，而且在探讨肿瘤病因和发病机制、组织起源、功能分类、指导治疗、判断预后等各方面起到了不可估量的作用。     

印迹技术测定血清神经元抗核抗体

报告８例肺小细胞癌患者血清和脑脊液中存在特异性神经元抗核抗体。亲和免疫细胞组织化学显示患者血清中抗体滴度高达１：３２０００，ＣＳＦ中高达１：４０００。免疫印迹技术发现抗体识别神经元胞核提取物中３５－４０ｋｄ的蛋白抗原。     

免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经千细胞的生物学特征

背景：骨髓间充质干细胞在一定条件下可分化成为多种结缔组织细胞，也可分化成神经系统的神经元和神经胶质细胞。 目的：观察采用免疫磁珠法分离成人骨髓来源神经干细胞的生物学特征。 设计、时间及地点：以患者自身骨髓组织为观察对象的实验，于2003—03／2007-06在菏泽市立医院检验科完成。 材料：骨髓组织来自菏泽市立医院神经内科住院的中风、老年性痴呆、帕金森病、脑缺血等神经系统疾病患者。 方法：利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合，在磁场作用下使结合磁珠与其他细胞分离，从而获得神经干细胞，再将所分离的纯化神经干细胞接种到含体积分数为0．20胎牛血清的Eagles MEM培养液，再在培养基中加入碱性成纤维因子和表皮生长因子进行原代培养。 主要观察指标：采用免疫组织化学染色与免疫荧光染色鉴定细胞，并采用流式细胞术测定细胞DNA含量。 结果：在相差显微镜下观察培养的神经干细胞，细胞形态丰满，胞核及核仁清晰可见，神经突起粗大，网络稠密。免疫组织化学和免疫荧光染色显示，细胞神经元特异性烯醇化酶、神经蛋白、胶质纤维酸性蛋白酶、微管相关蛋白为阳性。传代后的细胞用流式细胞术测定DNA含量为正常二倍体，无诱发突变。 结论：利用免疫磁珠表面的特异性抗体与骨髓组织中神经干细胞抗原相结合方法从成人骨髓分离出神经干细胞，在神经化学和形态上已具备神经细胞的特征。     

自身抗体

自身抗体是指以自身组织为靶抗原的抗体。免疫是机体多细胞克隆、多分子间相互刺激、制约和作用的一种网络反应，目的在于保持身体的纯一性。一般情况下，自身抗原不产生相应的抗体，但当身体抗原变性、损伤、移位以及免疫功能失调、免疫耐受破坏、原发或继发性免疫功能缺陷或障碍和免疫识别紊乱时，也能出现自身免疫，产生抗自身抗原的抗体。最初仅将对机体产生免疫损伤的免疫反应称为自身免疫反应，现在认为自身免疫反应是维持机体平衡最基本的生理条件之一，对机体具有良好的保护作用，如对衰老、退化、恶变、变性细胞或组织的清除等。健…     

自身抗体检测与质量控制

自身免疫 (autoimmunity)泛指机体免疫系统受某些内因、外因或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原发生的免疫应答反应 ,出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象。因自身免疫招致组织器官损伤或功能障碍所致疾病称自身免疫性疾病。自身免疫性疾病患者血循环中针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体 ,称为自身抗体。1　自身抗体的特性　　自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志。每种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。病人血液中存在高效价自身抗体是自身免疫病的特点之一 ,也是临床确…     

自身免疫性疾病及其实验诊断

1 自身免疫病的发病机制 自身免疫性疾病是由于机体的正常组织被自身的免疫活性细胞或自身抗体所破坏而产生组织损伤的病理过程,其发病机制是自我识别功能的破坏,导致免疫耐受的脱失和自身抗体的形成,而引起自身抗体或致敏淋巴细胞与自身组织抗原起免疫反应. 1．1 自身抗体的形成,包括隐蔽抗原的释放和自身组织抗原的改变. 1．2 免疫稳定功能失调：机体的免疫稳定功能即免疫的`自我识别'功能,它是组织抗原与免疫活性细胞相互作用的结果,如1,免疫稳定功能减弱;2、免疫活性细胞突变. 2 自身免疫性疾病的分类与判断标准 2．1 自身免疫性疾病大…