白色念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药机制探讨

目的探讨白色念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药机制。方法从复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)患者分离出白色念珠菌,采用NCCLS公布的《酵母菌液基稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案》(M-27方案)进行体外药敏试验,分离出氟康唑(FLC)及伊曲康唑(ITC)的耐药株;随机选择4株耐FLC和ITC白色念珠菌耐药株,分别用A1-A2、B1-B2、C1-C2、D1-D2、E1-E2、F1-F2 6对引物进行PCR扩增,将其产物测序,并与NCBI网站提供的白色念珠菌参考株进行比对、分析。结果4株耐FLCI、TC白色念珠菌的CYP 51基因全序列比对、分析,发现有32个碱基发生了突变,但引起氨基酸的突变只有5个,分别是:第116位遗传密码GAT变成GAA,导致该位置的天冬氨酸(D)突变为谷氨酸(E)(D116E 1株);第117位遗传密码GCT变成GGT,导致该位置的丙氨酸(A)突变为甘氨酸(G)(A117G 1株);第266位遗传密码GAA变成GAC,引起该位置的谷氨酸(E)突变为天冬氨酸(D)(E266D 2株);第488位的遗传密码GTT变成ATT,导致该位置的缬氨酸(V)突变为异亮氨酸(I)(V488I 1株);其中有1株菌分别在第266和488位同时发生了突变。结论本研究发现5个有意义的碱基突变,引起其编码的氨基酸发生了突变,其中A117G的突变目前尚未见相关报道,它在耐药机制中的作用尚需进一步探讨。     

耐唑类白色假丝酵母菌临床株CYP51基因的研究

目的 探讨白色假丝酵母菌临床株CYP51基因突变与对唑类抗真菌药物耐药的关系,从分子水平了解白色假丝酵母菌的耐药机制.方法 纸片扩散法初步筛选呼吸道感染对耐唑类白色假丝酵母菌,按NCCLS公布的M-27方案测定初筛耐药株对氟康唑和伊曲康唑的MIC,设计3对引物,对分离的2株耐唑类白色假丝酵母菌(2007H株,2007T株)进行PCR,扩增CYP51基因;扩增产物纯化后,进行测序并与GenBank序列(X13296)相比较分析.结果 PCR扩增产物大小与预期结果一致;测序分析表明.成功扩增到白色假丝酵母菌CYP51基因,与X13296序列相比较,两个耐药株都存在有义突变和无义突变,两株白色假丝酵母菌共有22个碱基突变;突变发生氨基酸替换的有F105L、K128T、Y132H、T199I、R267H、G464S和G467K,其中,两株菌都有Y132H和G467K突变,F71L、W244R、T311N和T352I为新发现的突变,同时,也发现了9个未发生氨基酸替换的突变.结论 白色假丝酵母菌对唑类抗真菌药物的耐药与CYP51基因突变有关,且为多位点突变,研究发现了新的突变点,它在耐药机制中的作用需进一步研究.     

结核病患者院内念珠菌属感染及药物敏感性

目的了解结核病患者医院内对念珠菌属的二重感染和药物敏感性试验结果。方法对2002年1月~2004年12月3年间共6 280份临床送检的标本进行真菌培养;并对部分阳性念珠菌样品进行5-氟胞嘧啶(5-FC)、氟康唑(FLC)、酮康唑(KET)和伊曲康唑(ITC)4种抗真菌药物的敏感性试验。结果6 280份标本共分离出念珠菌属2 767株,分离率为44.06%;其中白色念珠菌检出2 006株,阳性率占31.94%,其他依此为光滑念珠菌344株(5.48%)、热带念珠菌206株(3.28%)、克柔念珠菌95株(1.51%)和其他念珠菌与真菌116株(1.85%);对4种抗真菌药物的敏感率分别依次为:5-FC 93.79%I、TC 62.76%、FLC 51.03%和KET 47.59%。结论由于结核病需长期用药,因而念珠菌属的二重感染率较高,使患者病情加重,在4种抗真菌药物中,以5-氟胞嘧啶的抗念珠菌活性为最佳。     

布鲁氏菌利福平耐药株rpoB基因突变特征分析

目的分析布鲁氏菌利福平耐药株rpoB基因的突变特征。方法选取分离自新疆维吾尔自治区的4株布鲁氏菌利福平耐药株(JSY-26、G-9、WSY-13、AW-3株)DNA, 采用PCR扩增利福平rpoB基因, 并对核苷酸序列进行测序。以布鲁氏菌利福平耐药标准株(RB51株)和利福平敏感株(ALT-8株)的rpoB基因序列为参照, 应用Mega 7.0软件比对分析4株布鲁氏菌利福平耐药株rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistance determination region, RRDR)内外的碱基突变位点及类型。结果经序列比对分析, JSY-26和WSY-13株均在rpoB基因RRDR 1 576 bp处发生单碱基点突变, 碱基由鸟嘌呤(guanine, G)突变为腺嘌呤(adenine, A);G-9株在rpoB基因RRDR 1 606 bp处发生单碱基点突变, 碱基由胞嘧啶(cytosine, C)突变为A。AW-3株在rpoB基因RRDR外2 536、2 537、2 626、2 636、2 654 bp处出现3种类型共5处突变, 分别为插入突变3处[胸腺嘧啶(t...     

ERG5基因在白色念珠菌耐唑类药物中的突变及高表达

目的探讨临床分离白色念珠菌ERG5基因突变、高表达与唑类抗真菌药物耐药的关系。方法对36株临床白色念珠菌进行药物敏感性试验,并对其ERG5基因进行扩增测序,将测序结果与Gen Bank中已发表的序列(Gen Bank序列号:AF069572)进行比对,分析基因突变情况;抽提白色念珠菌临床菌株的总RNA,并反转录合成c DNA,采用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)方法检测ERG5基因的表达水平。结果 36株白色念珠菌临床菌株中,共检测出ERG5基因存在1个错义突变位点;氟康唑耐药组有11株发生ERG5高表达,占61.11%,敏感组中5株发生高表达,占31.25%。耐药菌株组ERG5基因的表达量ΔCt值与敏感组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论白色念珠菌ERG5基因的高表达可能与FCA产生耐药有关,并未发现ERG5耐药菌株在同一位点发生错义突变,白色念珠菌ERG5基因突变、高表达在耐药中的作用还有待于进一步研究证实。     

吉林省耐多药结核分枝杆菌rpoB基因突变特征分析

目的分析吉林省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征,为耐多药结核病快速诊断方法的建立提供科学依据。方法采用DNA测序技术对吉林省287株耐多药结核分枝杆菌进行rpoB基因序列检测,分析检测菌株rpoB基因突变特征。结果 287株耐多药结核分枝杆菌中201株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因发生突变,突变率为70.03%(201/287)。碱基突变发生在前3顺位的是rpoB 531(39.72%)、rpoB 526(18.82%)、rpoB 516(5.92%)。287株耐多药结核分枝杆菌rpoB基因共发现碱基突变、缺失、插入等40种基因突变类型。其中,单位点碱基突变、双位点碱基突变、多位点碱基突变、碱基缺失、碱基插入的发生率分别为60.63%(174/287)、6.27%(18/287)、1.39%(4/287)、1.39%(4/287)、0.70%(2/287)。结论吉林省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药相关基因最常见突变为rpoB 531、rpoB 526和rpoB 516。     

耐伊曲康唑烟曲霉菌对泊沙康唑的敏感性分析

目的测定耐伊曲康唑烟曲霉菌对泊沙康唑的敏感性,探讨cyp51A基因突变对其敏感性的影响,提高对耐伊曲康唑烟曲霉菌的认识。方法选择2012年2月-2013年12月3株耐伊曲康唑烟曲霉菌,参照欧洲抗菌药物敏感试验委员会(EUCAST)E.DEF 9.2方法,测定其对泊沙康唑的最低抑菌浓度(MIC),进行烟曲霉菌cyp51A基因提取、扩增、测序,将所得序列同GenBank中烟曲霉菌标准株AF.338659的cyp51A序列进行比对,查看有无突变序列。结果 3株耐伊曲康唑烟曲霉菌对泊沙康唑的MIC分别为0.03、0.06、0.03mg/L,均判定为对泊沙康唑敏感;其均存在cyp51A基因突变,突变位点分别为M220I、TR/L98H和TR/L98H。结论泊沙康唑对耐伊曲康唑烟曲霉菌在体外表现为较好的敏感性,且其敏感性与烟曲霉菌cyp51A基因突变无明显相关。     

流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌药物敏感性的评价

目的 比较评介流式细胞术快速药敏试验(FCST)和CLSI M27一A2常量液体培养基稀释法、ATB FUN-GUS3半固体培养基法检测白色假丝酵母菌对常用抗真菌药物敏感性符合率.方法 用FCST法和CLSI M27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3同时测定46株临床分离的白色假丝酵母菌对氟康唑(FLC)、酮康唑(KET)、伊曲康唑(ITC)、伏立康唑(VRC)等药物的药敏性并进行比较分析.结果 FCST法与M27-A2比较,FLC、KET、ITC和VTC的符合率分别为91.3%、100.0%、80.4%和93.5%; FCST法与ATBF3比较,FLC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、91.3%、和93.5%.结论 FCST法具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点;FCST法与M27-A2、ATBF3法测定FLC、KET、ITC和VRC对白色假丝酵母菌的敏感性有较高的符合率,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景.     

260株念珠菌分离鉴定及耐药性分析

目的探讨引起医院感染常见酵母样真菌种类及其耐药性特点,为临床感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的依据. 方法采集2 680份住院患者标本分离培养,分离出酵母样真菌260株,采用科码嘉念珠菌显色培养基(CHRO-Magar)培养,API-20CAUX酵母样真菌鉴定试条进行鉴定;念珠菌药敏试条(ATB-Fungus)进行念珠菌药敏试验. 结果 260株酵母样真菌以念珠菌为主,其中白色念珠菌155株(59.6%),热带念珠菌51株(19.6%),克柔念珠菌27株(10.3%),光滑念珠菌11株(4.2%);白色念珠菌对两性霉素B(AMB)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、制霉菌素(NYS)、酮康唑(KTC)、益康唑(ECO)、咪康唑(MTC)、氟康唑(FLC)的耐药率分别为9.0%、5.8%、10.3%、43.0%、40.9%、43.7%、9.0%;热带念珠菌分别为3.9%、9.8%、19.0%、 61.9%、57.1%、61.9%、21.4%;克柔念珠菌为14.8%、14.8%、14.8%、14.8%、25.0%、25.0%、16.6%;光滑念珠菌为0.0、0.0、36.6%、18.1%、36.6%、36.3%、66.6%. 结论目前引起我院患者真菌感染的念珠菌仍以白色念珠菌为主,其次是热带念珠菌及克柔念珠菌,这些念珠菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、制霉菌素较敏感,对酮康唑、益康唑、咪康唑产生了较强的耐药性.     

耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG基因家族突变研究及唑类药物抑菌分析

目的研究耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG11、ERG3和ERG5基因突变,及分离株对酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑的抑菌分析。 方法收集221株经质谱仪鉴定为白色念珠菌的菌株,微量肉汤稀释法进行氟康唑、酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑药敏试验,得出四种药物对白色念珠菌最小抑菌浓度（MIC）值;根据CLSI M27-A3筛选出氟康唑非敏感白色念珠菌,提取DNA后扩增ERG11、ERG3与ERG5基因,进行双向测序,与GenBank中的标准菌株基因序列（SC5314和AF069752）进行BLAST比对分析。 结果白色念珠菌对氟康唑耐药率为9.05%;对白色念珠菌MIC值进行比较,酮康唑的MIC值均低于克霉唑和硝酸咪康唑,差异有统计学意义（P＜0.05）。克霉唑与硝酸咪康唑比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。ERG11、ERG3、ERG5分别发现18、17、12种错义突变。 结论酮康唑对白色念珠菌抑菌率总体比克霉唑、硝酸咪康唑强。耐氟康唑白色念珠菌ERG11、ERG3、ERG5基因出现若干错义突变位点,某些位点突变导致氨基酸变异可能与耐药产生有关。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。