应用PCR－SSCP银染法检测结肠癌组织中p53基因突变

应用ＰＣＲ－单链构象多态分析（ＳＳＣＰ）银染技术分析了２１例结肠癌和正常结肠粘膜组织ｐ５３基因第五～第八外显子。发现了９例（４３％）的结肠癌组织出现了反映ｐ５３基因突变的异常条带。结果显示ｐ５３基因的突变与结肠癌的发生和发展有关。应用非同位素的银染方法，能简单、快速检测基因多态性，并避免同位素的危害，对结肠癌的基因诊断有潜在性应用价值     

应用改进的PCR—SSCP银染色法检测卵巢上皮肿瘤p53基因突变？…

目的：探讨ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法检测基因点突变的准确性和检测卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因的点突变率。方法：建立ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了３６例卵巢上皮癌，１２例卵巢上皮交界瘤和１５例良性卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因第５￣９外显子的点突变。结果：ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染正常时出现２条带，突变时出现３条带，卵巢上皮癌ｐ５３基因突变率为３０．６％；第５、６、７、８、９外显子分别为１、１、６、３、０例，突变率在临     

PCR－SSCP法检测胃癌P53基因突变

应用多聚酶链反应和单链构象多态性分析法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测１９例冰冻胃癌组织Ｐ５３基因第７外显子ＤＮＡ片段扩增及突变情况，同时应用免疫组化法（ＩＨＣ）检测相应胃癌石蜡包埋组织中Ｐ５３蛋白的表达。结果发现４例（２１．１％）胃癌组织Ｐ５３基因第７外显子发生突变。而Ｐ５３蛋白表达率达４７．４％（９／１９）。Ｐ５３基因突变及Ｐ５３蛋白表达与肿瘤发生部位、组织学类型、淋巴结转移及肿瘤分期无关（Ｐ＞０．０５）。提示在胃癌发生和演变过程中，Ｐ５３基因突变是重要事件，其中第７外显子是突变热区之一。     

应用PCR—SSCP银染法检测结肠癌组织中P53基因突变

应用ＰＣＲ－单链构象多态分析银染技术分析了２１例结肠癌和正常结肠粘膜组织Ｐ５３基因第５－第八外显子。发现了９例的结肠癌组织出现了反映Ｐ５３基因突变的异常条带。     

PCR－SSCP法检测胃癌p53基因异常

ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测胃癌ｐ５３基因异常李滨，童坦君（北京医科大学生物化学及分子生物学系１０００８３）胃癌是一种常见的发病广泛的人类恶性肿瘤，抗癌基因ｐ５３的夫活在胃癌的发生过程有重要作用。本文首先利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子杂交法检测１１例胃癌标本及１...     

应用PCR—SSCP方法检测肺癌,肠癌中p53基因突变

目的 研究ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测肺癌、肠癌中Ｐ５３基因突变的方法改进及突变率。方法 用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,银染技术检测４例肺和７例大肠癌组织标本中Ｐ５３基因外显子５－８。结果 肺癌Ｐ５３基因突变率为７５％,肠癌Ｐ５３基因突变率为４２．９％。结论Ｐ５３基因突变与肺癌、肠的发生密切相关,ＰＣＲ－ＳＳＣ 染技术简便快速、灵敏安全的基因突变检测方法,可应用于肿瘤的临床基本诊断 。     

应用PCR—SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本Ｐ５３基因经５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／０，葡萄胎６－２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生Ｐ５３基因突变。提示Ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程听一个重要事件，葡萄胎应属于生滋养细胞肿瘤 。     

PCR－SSCP－EB染色法检测大肠癌中P53基因外显子5～8的突变

应用一种建立的非放射性ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）技术──ＥＢ（演化乙锭）染色法对３０例大肠癌组织中Ｐ５３基因外显子５～８的突变进行了检测，结果显示突变率达６６．７％（２０／３０），表明Ｐ５３基因突变在大肠癌的发生过程中可能起了重要作用。实验还表明本方法具有简单、快速、敏感、安全、重复性好等特点和推广应用价值。     

人喉癌P_（53）、Rb基因突变的PCR－SSCP检测

应用聚合酶链式反应一单链构象多态分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析）技术，检测了喉癌中抗癌基因Ｐ５３第５～８和１１外显子及Ｒｂ基因第２０外显子的突变。结果表明：Ｐ５３、Ｒｂ基因突变与癌组织病理分化程度有关，中、低分化癌的突变例数明显多于高分化癌；Ｐ５３、Ｒｂ基因突变失活与喉癌发生、发展及恶性度有关。应用上述快速敏感的检测方法检测Ｐ５３、Ｒｂ基因突变，对判断喉癌恶性度及估计预后有一定的实用价值。     

银染PCR—SSCP法检测食管癌P^53基因突变

目的：探索快速、有效、简便的检测食管癌Ｐ＾５３基因突变的方法,以利于食管癌的早期诊断和研究。方法：用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测本院６３例食管切除标本的Ｐ＾５３基因突变（选突变多发位点５、６、７、８外显子）。结果：食管癌Ｐ＾５３基因突变发生于第５、６、７、８外显子,总突变率６８％,鳞癌、腺癌、未分化癌中Ｐ＾５３突变率差异不显著;鳞状上皮不典型增生中Ｐ＾５３突变率为６１．８％。结论：Ｐ＾５３基因突变可     

PCR－SSCP银染法检测胃和结、直肠癌APC基因突变

目的：探讨国人胃癌和结、直肠癌的ＡＰＣ基因突变情况。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，分析了１４例胃癌和１４例散发性结、直肠癌的ＡＰＣ基因第１５外显子第６段和第７段的突变情况。结果：１４份结直肠癌原发灶样品中有１份ＡＰＣ基因第１５外显子第７段出现异常电泳条带，而１４份胃癌及其６份胃癌转移性淋巴结样品中却未观察到ＡＰＣ基因的异常电泳条带。结论：本组胃癌及淋巴结转移灶中未发现ＡＰＣ基因突变，而结、直肠癌的ＡＰＣ基因突变率为７％。     

应用改进的PCR-SSCP银染色法检测卵巢上皮肿瘤p53基因突变的研究

目的：探讨ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法检测基因点突变的准确性和检测卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因的点突变率。方法：建立ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了３６例卵巢上皮癌，１２例卵巢上皮交界瘤和１５例良性卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因第５～９外显子的点突变。结果：ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染正常时出现２条带，突变时出现３条带；卵巢上皮癌ｐ５３基因突变率为３０．６％；第５、６、７、８、９外显子分别为１、１、６、３、０例；突变率在临床各期、组织学分级和组织学类型之间无明显差异；卵巢上皮交界瘤仅１例ｐ５３基因第７外显子发生突变，良性卵巢瘤无１例发生突变。结论：ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法检测卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因点突变准确率高，有助于区分卵巢上皮肿瘤的良恶性     

银染色法结合PCR—SSCP技术检测LDH亚单位变异

目的：应用单链构象多态技术检测乳酸脱氢酶基因变异。方法：使用银染色法结合ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析变异基因。结果：乳酸脱氢酶的变异发生在Ｈ基因的外显子４上。结论：用银染色法代替放射性标记的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析更适于常规实验室应用。     

应用PCR—SSCP银染技术检测非小细胞癌p53基因点突变

我们应用聚合酶链反应－单链构像多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术对３１例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中ｐ５３基因第５，６，７，８，外显子进行检测，结果发现有１５例（４８．３８％）发生基因突变，其中第７外显子８例，第５，８外显子各３例，第６外显子１例，说明５～８外显子为突变热点区域；ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术是一种敏感，快速，经济，实用检测点突变方法。     

PCR对SSCP检测p53基因杂合性缺失的影响

对比观察了常规ＰＣＲ及半巢式ＰＣＲ对ＳＳＣＰ检测乳腺用ｐ５３基因杂合性缺失的影响。结果显示，半巢式ＰＣＲ能将石蜡包埋组织ｐ５３基因第４外显子ＤＮＡ片段ＰＣＲ扩增成功率由８２．５％提高到１００％，但应用半巢式ＰＣＲ产物对１３例杂合子病人ＳＳＣＰ分析显示，乳腺癌组织ｐ５３基因杂合性缺失由常规ＰＣＲ─ＳＳＣＰ检出阳性６例降低至１例。本研究结果表明，半巢式ＰＣＲ虽能提高ＰＣＲ的敏感性，但由于乳腺癌组织往往混杂有一些正常组织成分，二次ＰＣＲ扩增增加了正常组织ＤＮＡ对肿瘤组织ＤＮＡ的影响，因而不适用于乳腺癌ｐ５３基因杂合性缺失的研究。     

p53基因PCR—SSCP银染检查痰标本诊断肺癌

目的 了解痰标本检测肺癌患Ｐ５３基因突变的可行性及其对临床诊断的意义。方法 采用改良Ｓａｃｃｏｍａｎｎｏ法浓缩及保存痰标本，部分涂片找癌细胞，其余标本进行痰细胞ＤＮＡ提取及多聚酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）。共检测箬诊肺癌患１５例（涂片或活检找到癌细胞），临床高度怀疑肺癌患５例（涂片或活检均阴性），２例非肿瘤患（１例为结节病，另为右中叶肺炎），同时采用正常肿组织标本作对     

人喉癌P53,Rb基因突变的PCR—SSCP检测

应用聚合酶链式反应－单链构象多态分析技术，检测了喉癌中抗癌基因Ｐ５３第５－８和１１外显子及Ｒｂ基因第２０外显子的突变。结果表明：Ｐ５３、Ｒｂ基因突变与癌组织病理分化程度有关，中、低分化癌的突变例数明显多于高分化癌；Ｐ５３、Ｒｂ基因突变失活与喉癌发生、发展及恶性度有关。     

用非同位素PCR－SSCP方法检测p53基因第4外显子多态性

本研究通过对比不同凝胶组成成分及电泳条件，建立了非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法以检测ｐ５３基因第４外显子第７２密码子的多态性。对３５例正常组织ＤＮＡ的研究结果显示，ｐ５３基因这位点的杂合率和纯合率分别为４８．６％（ＣＣＣ／ＣＧＣ），４５．７％（ＣＧＣ／ＣＧＣ）和５．７％（ＣＣＣ／ＣＣＣ）．本法简单、快速，能有效地检测基因多态性，并可进一步应用于对肿瘤细胞ｐ５３基因杂合性缺失的分析。