三氧化二砷与肿瘤细胞凋亡的关系

中药砒霜 (三氧化二砷 ,As2 O3 )及砷制剂对肿瘤的治疗是近年来的研究热点 ,特别是对白血病的治疗为人们所关注。砷作为抗肿瘤药物在我国已有百年历史 ,中医传统方剂青黄散、十味丸等治疗不同类型的白血病确有一定疗效 ,经鉴定其中有效成分为含砷中药。 1992年 ,哈尔滨医科大学确定了三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病 (acutepromyelocyteleukemia ,APL)的疗效〔1〕。 2 0世纪 90年代中期 ,上海第二医科大学附属瑞金医院陈国强等〔2〕从细胞和分子生物学角度阐明了其作用机理 ,确定As2 O3 对全反式维甲酸 (ATRA)耐药的病例可获较高的…     

中药放疗增敏散对鼻咽癌放疗增敏作用的临床观察

笔者从1999年10月～2001年10月采用中药放疗增敏散配合放射治疗30例鼻咽癌患者,并与单纯放射治疗30例进行临床对比观察,现报告如下.     

消痞颗粒对慢性萎缩性胃炎伴不典型增生大鼠胃黏膜增殖和凋亡的影响

目的探讨慢性萎缩性胃炎伴不典型增生的发病机制及消痞颗粒对其作用的机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、自然恢复组、消痞颗粒组、维酶素组,每组12只。采用幽门弹簧插入术加灌胃高盐热糊法复制大鼠模型,正常组、模型组于第16周造模成功后处死;消痞颗粒组大鼠于手术1周后,给予浓度为0.6g/ml的消痞颗粒溶液灌胃0.5ml/（100g.d）;自然恢复组大鼠于造模16周后,蒸馏水灌胃0.5ml/（100g.d）;维酶素组大鼠手术1周后,以浓度为0.4g/ml维霉素混悬液0.5ml/（100g.d）灌胃,各组均每周灌胃6天,12周后采用免疫组化法检测胃黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达。结果模型组与自然恢复组PCNA阳性细胞面密度、Bcl-2均明显高于正常组（P<0.05或P<0.01）;Bax低于正常组（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,其余各组PCNA阳性细胞面密度差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。消痞颗粒组PCNA面密度明显低于自然恢复组（P<0.05）,消痞颗粒组与维酶素组比较差异无统计学意义（P>0.05）。消痞颗粒组Bcl-2较模型组明显减弱（P<0.05）,Bax明显升高（P<0.01）;消痞颗粒组与维酶素组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论降低胃癌癌前病变大鼠胃黏膜中的PCNA、Bcl-2表达、升高Bax表达可能是消痞颗粒改善慢性萎缩性胃炎伴不典型增生有效机制之一。     

姜黄煎对大鼠血管损伤后Bcl-2与Bax和p53的表达影响意义

目的:探讨姜黄煎对大鼠血管损伤后血清中Bcl-2与Bax和p53的表达影响意义。方法:模拟PCI术,采用ELISA法检测144只大鼠血清中Bcl-2与Bax和p53含量。其中姜黄煎干预组36只,生理盐水干预组36只,并与36只假手术组和36只正常组作为对照。结果:姜黄煎组,生理盐水组,假手术组,血清Bcl-2与Bax和p53含量与正常对照组比较差异明显(P0.05);假手术组血清Bcl-2水平含量接近于正常对照组,差异不明显(P0.05);姜黄煎组血清Bcl-2与Bax含量和p53含量与生理盐水干预组,假手术组比较有明显差异(P0.05);与正常对照组比较差异不明显(P0.05)。结论:姜黄煎可上调大鼠Bcl-2蛋白表达,使Bax的蛋白表达明显下降,说明Bc1-2过量表达,Bax/Bc1-2的比值增大,能抑制内皮细胞过度凋亡。二者的比例是决定细胞是否发生凋亡的重要调控因素。同时姜黄煎能够阻滞细胞周期降低P53蛋白的表达,迅速恢复内皮功能,保持完整血管内皮结构。因此,Bcl-2与Bax和p53参与了再狭窄的病理生理变化。检测患者血清Bcl-2与Bax和p53含量的异常变化,可能有助于评估血管损伤后凋亡因子对血管内皮功能和结构的影响。     

补肾复方对初老大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2Bax表达的影响

目的：研究补肾复方对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax表达的影响。方法：采用12月龄的Wistar雌性大鼠，随机分为模型对照组，补肾复方高、中、低剂量组，阳性对照组,另设4月龄青年对照组和18月龄老年对照组。采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2，Bax蛋白表达的影响。结果：与青年组比较。初老组、老年组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达明显降低（P〈0．05），Bax表达明显增高（P〈0．05）。Bcl—2／Bax比例降低：经药物干预后，补肾复方高、中、低剂量组及阳性对照组，均能上调Bcl-2表达（P〈0．05）。下调Bax表达（P〈0．05）。使Bcl-2／Bax比例增高；其中高剂量组的Bcl-2，Bax变化表达明显，达到青年组水平（P〉0．05）。结论：上调初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达，下调Bax表达，可能是补肾复方延缓卵巢衰老的机制之     

槐米中槲皮素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖与凋亡作用的研究

目的 探讨槐米中拼皮素对人鼻咽癌CNE2细胞的增殖与凋亡的作用.方法 应用台盼蓝拒染法检测不同浓度槲皮素作用细胞24,48,72 h后的增殖状况;hoechest33342荧光染色观察细胞凋亡形态.结果 随着槲皮素浓度增加和作用时间的延长,槲皮素对人鼻咽癌CNE2细胞的抑制作用越明显.细胞培养48 h后,荧光染色观察随着药物浓度增加,凋亡细胞增多并且越来越明显,当浓度达到60 μmol/L时,镜下出现了大量不完整的细胞核和细胞碎片.结论 槐米中槲皮素可以有效地抑制人鼻咽癌CNE2增殖,诱导细胞凋亡,为临床上治疗鼻咽炎提供了新的实验依据.     

榄香烯注射液对鼻咽癌细胞株CNE1增殖和凋亡的影响

目的:探讨榄香烯注射液对鼻咽癌细胞株CNE1增殖和凋亡的影响.方法:分别用20,10,5,2.5,0g·L-1榄香烯注射液处理CNE1细胞12,24,48 h后,Prestoblue法检测细胞的增殖抑制率,光镜观察细胞形态变化,Hoeehst-PI双染、流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果:榄香烯注射液对CNE1细胞的增殖有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,处理12,24,48 h的IC50值分别为(10.70±0.26),(7.06±0.11),(5.52±0.10) g·L-1;光镜下显示,给药后细胞大量凋亡,折光性下降;榄香烯注射液可诱导CNE1细胞凋亡.结论:榄香烯注射液能抑制CNE1细胞增殖并诱导其凋亡.     

鹿茸多肽对缺血动物模型心肌细胞线粒体凋亡相关基因蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的:探讨鹿茸多肽对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达蛋白的影响.方法:采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心肌缺血模型.随机分为假手术组,模型组,维生素c阳性对照组和鹿茸多肽高、中、低剂量组,每组10只.造模后灌胃给药21 d,用Bcl-2及Bax表达蛋白包被的酶联免疫试剂盒测定大鼠心肌细胞线粒体中Bcl-2、Bax蛋白的表达量.结果:鹿茸多肽组与模型组比较,Bcl-2蛋白的表达量增加,而Bax蛋白的表达量减少,Bcl-2/Bax比值升高.结论:鹿茸多肽对心肌缺血大鼠有一定的保护作用,其抗心肌凋亡机制可能与上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白的表达有关.     

地黄寡糖对血管性痴呆大鼠海马区神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:探讨中药提取物地黄寡糖(rehmannia glutinosa oligosaccharides,ROS)对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.方法:选用SD成年大鼠,随机分为伪手术组、模型组和地黄寡糖高、低剂量组(9.0,45 g·kg-1·d-1).采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制作血管性痴呆大鼠模型,采用行为学评分法评价大鼠的行为学障碍程度,HE染色法观察大鼠海马CA1区病理组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠海马CA1区的神经元细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠海马区凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-相关x蛋白(Bax)的表达含量的变化,并检测大鼠海马组织匀浆中神经毒性氨基酸谷氨酸及海马组织和血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果:ROS能够显著改善缺血再灌注型血管性痴呆的大鼠的行为学障碍,降低其行为学评分(P＜0.01),减轻海马CA1区神经组织的病理性改变,降低神经元凋亡细胞比例(P＜0.01),并显著升高血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元细胞中Bcl-2蛋白表达(P＜0.01)、降低Bax蛋白表达(P＜0.01),Bcl-2/Bax显著升高,从而抑制了该区域神经元细胞的凋亡.此外,ROS给药能够显著减少血管性痴呆大鼠血清及海马组织中MDA的积累(P＜0.01),提高SOD的活性(P＜0.01),降低海马组织中谷氨酸的水平(P＜0.01).结论:ROS能够显著减少脑缺血再灌注损伤所致的大鼠海马CA1区神经元凋亡,其作用机制可能是通过调控Bcl-2/Bax相关蛋白的表达来实现的.此外与ROS减少组织中谷氨酸的水平和MDA的含量,提高SOD活性等,也提示ROS对血管性痴呆有一定的治疗作用.     

癫痫发病与细胞凋亡调控因子P53、Bcl-2、Bax关系的中西医研究进展

通过对近十年中外文献的分析归纳,总结了癫痫与细胞凋亡的关系;相关凋亡调控因子P53、Bcl2、Bax在细胞凋亡及癫痫发病中的作用,以及中医药抗痫治疗对细胞凋亡因子的干预作用研究现状,结果提示:P53、Bcl2、Bax在神经细胞凋亡中发挥着重要的调控作用,但其在癫痫发病机制中对神经元凋亡调控的作用机制及中医药干预研究尚属薄弱环节,有待今后进一步加强。     

慢性胃炎患者舌象与细胞凋亡的相关性研究

目的：探讨慢性胃炎不同舌象、舌上皮细胞凋亡特征及其形成机理。方法：选择109例慢性浅表性胃炎患者作为观察对象,采用舌象、舌上皮细胞凋亡指数(AI)、凋亡基因相关蛋白p53、Bcl-2和Fas等为指标进行观察。结果：(1)不同舌质和舌苔的AI差异显著;分别以淡白舌与薄白苔和白厚苔为最高。(2)不同舌象的p53、Bcl-2和Fas表达阳性率,呈现相应的变化。相关蛋白表达不仅与舌色有关,而且与舌苔颜色和厚度有关。结论：舌象形成与细胞凋亡具有密切关系,p53、Bcl-2和Fas参与了细胞凋亡的调控,共同构成了本病舌象形成的细胞学基础。     

补肾复方对初老大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 Bax表达的影响

目的:研究补肾复方对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的影响.方法:采用12月龄的Wistar雌性大鼠,随机分为模型对照组,补肾复方高、中、低剂量组,阳性对照组,另设4月龄青年对照组和18月龄老年对照组.采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)方法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2,Bax蛋白表达的影响.结果:与青年组比较,初老组、老年组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达明显降低(P＜0.05),Bax表达明显增高(P＜0.05).Bcl-2/Bax比例降低;经药物干预后,补肾复方高、中、低剂量组及阳性对照组,均能上调Bcl-2表达(P＜0.05),下调Bax表达(P＜0.05).使Bcl-2/Bax比例增高;其中高剂量组的Bcl-2,Bax变化表达明显,达到青年组水平(P＞0.05).结论:上调初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达,下调Bax表达,可能是补肾复方延缓卵巢衰老的机制之一.     

白附子提取物抑制人胃癌 SGC-7901 细胞增殖及诱导凋亡的机制研究

 目的 探讨白附子提取物对人胃癌 SGC-7901 细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及其可能机制。 方法 分别采用噻唑蓝（ MTT ）法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、光镜观察细胞结构变化、 Hoechst33342/PI 荧光染色检测细胞凋亡、 Western blotting 法检测 caspase-3 、 Bax 和 Bcl-2 蛋白表达。 结果 0.072~7.2 mg · L^-1 白附子提取物处理 24 h 后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;光镜下可观察到细胞凋亡形态的改变; Western blotting 结果显示,半胱氨酸蛋白酶（ caspase-3 ）酶原蛋白的激活, Bcl-2 蛋白表达的降低和 Bax 蛋白表达上调。 结论 白附子提取物通过影响 SGC-7901 细胞的增殖、周期和凋亡相关蛋白的表达发挥凋亡诱导作用。     

斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bcl-2、p53基因表达的影响

目的研究斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的影响。方法采用流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠处理前后人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的变化。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24h均可使Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达下降。结论斑蝥酸钠可抑制Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达。     

三氧化砷对大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的:观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法:40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375 mg/kg、0.75 mg/kg、1.5 mg/kg 3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16周,采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达.结果:①与对照组相比,中剂量组(0.75 mg/kg)和高剂量组(1.5 mg/kg)生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P＜0.01).生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P＜0.01),Bpax表达明显升高(P＜0.01);②每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=-0.563,P＜0.01);③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825.P＜0.01),与Bax表达呈正相关(r=0.710,P＜0.01),结论:一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的袁达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性.     

木犀草素对小鼠T淋巴细胞体外增殖及凋亡的作用

目的:研究木犀草素对小鼠T淋巴细胞体外增殖及凋亡作用的影响。方法:设置刀豆蛋白A(Con A)组和空白组,设置3个木犀草素药物组,终质量浓度分别为2.5,5,10 mg·L-1,细胞毒性活性检测-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)和Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞凋亡通路蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)表达水平。结果:CCK-8实验结果显示3个木犀草素药物组细胞数明显低于Con A组和空白组(P0.01),差异有统计学意义。TUNEL实验结果显示,Con A组的凋亡细胞数量显著低于3个木犀草素药物组(P0.01),差异有统计学意义。流式细胞仪检测结果显示3个木犀草素药物组的细胞凋亡率显著高于Con A组和空白组(P0.01),细胞凋亡率随着药物浓度增加而增高,呈明显的量-效关系。Western blot检测结果显示,2.5,5 mg·L-1木犀草素药物组中Bcl-2表达量高于对照组,Bax表达量低于对照组;10 mg·L-1药物组中Bcl-2表达量低于对照组,Bax表达量高于对照组。结论:2.5,5,10 mg·L-1木犀草素能够抑制T淋巴细胞增殖,能够诱导T淋巴细胞凋亡,10 mg·L-1木犀草素可能主要通过下调Bcl-2,上调Bax影响线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡,2.5,5 mg·L-1木犀草素可能通过其他通路诱导细胞凋亡。     

雷公藤甲素对人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究雷公藤甲素影响人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡的作用及机制。方法:采用细胞药理学实验方法,人肝癌细胞株Bel-7402与雷公藤甲素(10μg/mL、5μg/mL及0.25μg/mL)共培养,MTT法检测其对Bel-7402细胞增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组织化学(SABC)染色法检测Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:作用48h后雷公藤甲素(10μg/mL、5μg/mL、0.25μg/mL)3个剂量对Bel-7402细胞增殖均有显著抑制作用,P<0.01,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达38.67%,且呈量效关系,3个剂量组间有显著性差异,P<0.01。雷公藤甲素(10μg/mL、5μg/mL、0.25μg/mL)能有效诱导Bel-7402细胞凋亡,作用显著,P<0.01,且呈显著的量效关系。雷公藤甲素(10μg/mL、5μg/mL、0.25μg/mL)用药组Bax、Bcl-2表达与对照组比较,无显著性差异,P>0.05。结论:雷公藤甲素能抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖和诱导其凋亡,其诱导Bel-7402细胞凋亡的作用机制可能不是通过Bax、Bcl-2途径。     

益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的：研究益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响。方法：将实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组和非穴组。针刺组取膻中、中脘、气海、血海和足三里行针刺法。采用原位TUNEL法检测细胞凋亡情况，免疫组织化学染色ABC法检测Bcl-2、Bax蛋白表达，所测数据进行统计学分析。结果：经检测发现模型大鼠存在较多细胞凋亡现象，针刺组大鼠皮层中Bcl-2表达数目、染色强度及胞浆着色面积较高，而Bax表达相对较低。结论：益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠能增加Bcl-2表达，抑制Bax表达，从而减少大鼠脑细胞凋亡，并促进其存活。     

钩吻总碱对人结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的:探讨钩吻总生物碱提取物(钩吻总碱)促进人结肠癌HT-29细胞凋亡的机制。方法:钩吻总碱体外干预HT-29细胞24 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法评估其对细胞增殖的影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)观察HT-29细胞的凋亡情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察HT-29细胞B型淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2 mRNA表达情况,利用紫外分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶-3(Caspase-3)表达量的变化。结果:钩吻总碱可抑制HT-29细胞增殖,200 mg·L~(-1)钩吻总碱干预24 h后,对HT-29细胞增殖的平均抑制率达54.17%。DAPI染色及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)观察到钩吻总碱可促进HT-29细胞凋亡。RT-PCR观察到钩吻总碱能降低HT-29细胞Bcl-2 mRNA表达(P0.05),对Bax mRNA表达无明显影响,提高了Bax/Bcl-2 mRNA表达(P0.05)。利用紫外分光光度法检测到随着钩吻总碱浓度的升高,HT-29细胞的Caspase-3表达呈上升趋势(P0.05)。结论:钩吻总碱能有效地抑制HT-29细胞的增殖,促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能与通过Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡相关。     

内障丸对青春期PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2及Bax的影响

目的：探讨内障丸对青春期PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2及Bax表达的影响。方法：以23日龄幼年SD清洁雌性大鼠为研究对象,应用皮下埋植左炔诺孕酮硅胶棒联合皮下注射HCG法建立青春期PCOS动物模型,运用免疫组织化学SABC方法及光、电镜技术等方法,检测大鼠造模前后及给药前后卵巢颗粒细胞Bcl-2,Bax的表达情况。结果：造模后模型组颗粒细胞Bcl一2,Bax,Bcl-2／Bax表达水平与正常对照组差异明显,运用阳性目标面密度进行比较,经治疗后内障丸高、中、低剂量组Bcl-2表达均强于Bax。其中高剂量组的表达与正常组接近。在对照组中,Bax表达较Bcl-2强。结论：内障丸可以抑制多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及卵泡闭锁,而且可以使多囊卵巢大鼠卵泡闭锁时间提前,减轻卵巢多囊样改变,从而改善卵巢功能。