肝X受体激动剂对ApoE基因敲除小鼠主动脉壁C-反应蛋白和CD40配体表达及平滑肌细胞含量的影响

目的 探讨肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂T0901317对高脂饲养ApoE基因敲除(apolipoprotein E gene knockout,ApoE-/-)小鼠在动脉粥样硬化病变形成的早期动脉壁内C-反应蛋白(CRP)和CD40配体(CD40L)表达及平滑肌细胞含量的影响.方法 8周龄雄性ApoE-/-小鼠12只,按随机数字表法分入LXR激动剂T0901317组和二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组,每组6只.均给予高脂饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别给予LXR激动剂T090131720 mg·kg-1·d1-或相当剂量的DMSO腹腔注射.麻醉处死小鼠后,取小鼠主动脉,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片,采用免疫组化法检测主动脉壁内CRP、CD40L和平滑肌细胞α-actin的表达,以Image Pro Plus 6.0软件进行图像分析.结果 LXR激动剂组动脉壁CRP表达水平较对照组明显减少(P＜0.05),LXR激动剂组动脉壁CD40L表达水平较对照组明显减少(P＜0.05),动脉粥样硬化斑块内平滑肌细胞α-actin表达水平与对照组比较没有统计学差异(P＞0.05).结论 LXR激动剂可能通过抑制ApoE-/-小鼠动脉壁中CRP和CD40L的表达,减轻血管壁的炎症反应,从而发挥抗动脉粥样硬化形成的作用.     

麝香保心丸对小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的探究麝香保心丸在载脂蛋白E(ApoE)敲除小鼠中的抗动脉粥样硬化作用及其作用机制。方法2019年9月—2020年8月于武汉科技大学实验动物中心进行实验。ApoE基因敲除雄性小鼠60只,按照随机数字表法分为2组,各30只。干预组小鼠予麝香保心丸(25 mg/kg)研沫+生理盐水灌胃,对照组予生理盐水(与干预组等体积)灌胃。2组小鼠均高脂饲养20周后处死,取主动脉树及主动脉窦染色,比较2组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积,取血液检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,免疫荧光法及PCR法检测小鼠主动脉组织白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,PCR及Western-blot法检测小鼠主动脉组织肝细胞X受体-α(LXRα)、LXRβ、ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ABCG1表达水平。结果干预组小鼠主动脉树及主动脉窦部斑块面积均低于对照组(t/P=3.021/0.019、3.238/0.001);血清TG、TC、LDL-C水平均低于对照组(t=5.074、6.327、4.492,P均<0.001),而HDL-C水平高于对照组(t/P=3.138/0.001)。干预组小鼠主动脉组织IL-6及TNF-αmRNA水平明显低于对照组(t/P=3.027/0.017、2.478/0.019),主动脉组织LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCG1 mRNA均高于对照组(t=5.276、6.137、4.565、5.136,P均<0.01)。结论麝香保心丸通过抑制炎性反应和促进胆固醇流出,可达到抗动脉粥样硬化的目的。     

烟酸对C57BL/6J小鼠脂肪组织、血脂和主动脉粥样硬化的影响

目的 以C57BL/6J小鼠为载体,以烟酸为干预药物,探索脂肪组织、血脂和主动脉粥样硬化三者间的潜在关系.方法 将28只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(n=8)、模型组(n=10)和烟酸干预组(n=10),分别给予普通饲料、高胆固醇饲料、高胆固醇饲料+1%烟酸(w/w)处理.14周后酶法和免疫比浊法检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和载脂蛋白A-I(apoA-I)的含量;HE染色观察主动脉病理形态学改变;高效液相色谱法检测主动脉壁和腹股沟皮下脂肪组织胆固醇含量:RT-PCR检测腹股沟皮下脂肪组织LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA的表达.结果 对照组、模型组和烟酸干预组脂肪组织胆固醇含量分别为(3.13±0.19)、(20.81±1.97)和(4.00±0.81)mg/g;相对于模型组,烟酸干预可分别上调脂肪组织胆固醇外流调控子LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA 144%、47.3%和73.8%,降低血清TG、TC和LDL-C而升高HDL-C和apoA-I;Pearson相关分析显示动脉壁胆固醇含量与内膜厚度/中膜厚度比值正相关(r=0.58,P＜0.05);烟酸干预组血管壁良性重塑,内膜变薄、内膜厚度/中膜厚度比值降低,内皮下间隙脂质沉积尤其是胆固醇蓄积减少.结论 烟酸干预促进了外周脂肪组织的胆固醇逆向转运,使得血液中脂质谱发生变化,进而影响了动脉壁内皮下间隙脂质尤其是胆固醇的蓄积,使血管壁发生良性重塑、动脉粥样硬化斑块消退.     

南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠主动脉壁MIF及MMP-9表达的影响

目的观察南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠在动脉粥样硬化斑块形成的早期阶段主动脉壁中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响。方法8周龄雄性ApoE基因敲除小鼠12只,按随机数字表法分为南蛇藤素干预组和对照组,每组6只,均给予高脂饮食饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别予以2mg.kg-1.d-1南蛇藤素和相当剂量的溶剂二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射,每日1次,连续用药4周;小鼠处死后行主动脉连续石蜡切片,HE染色观察组织形态学改变,测定ApoE基因敲除小鼠主动脉根部粥样斑块面积,同时采用免疫组化方法观察主动脉壁MIF和MMP-9蛋白表达的强度。结果图像分析测量结果显示对照组形成了早期斑块;南蛇藤素干预组斑块面积较对照组明显减小(P<0.01),斑块面积/动脉壁横切面积也明显降低(P<0.01);南蛇藤素干预组与对照组比较,MIF、MMP-9的表达均明显降低(P<0.01)。结论南蛇藤素可能通过下调ApoE基因敲除小鼠主动脉壁MIF、MMP-9表达,发...     

肝X受体在乳腺癌组织中的表达及其对MCF-7细胞增殖的影响

目的 研究肝X受体(liver X receptors,LXRs)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.方法 采用免疫组化法检测LXRs在人乳腺癌组织中的蛋白表达;采用LXR激动剂T0901317处理人乳腺癌MCF-7细胞,流式细胞术检测BrdU标记MCF-7细胞的增殖情况.结果 ①LXRα和LXRβ在乳腺正常组织基本不表达,但LXRα在不同乳腺癌病变(导管原位癌和浸润性导管癌)中表达增高(P＜0.05),在浸润性导管癌尤为明显;LXRβ在不同乳腺癌病变中不表达.②T0901317(10μM)处理明显抑制MCF-7细胞的增殖率(P＜0.05).结论 乳腺癌组织LXRα蛋白表达明显增高,激活LXRα能够显著抑制MCF-7细胞的增殖.     

Effect of serum amyloid P component deficiency on formation of atherosclerosis plaques in mice

目的 观察血清淀粉样P蛋白(serum amyloid P component,SAP)缺失对小鼠动脉粥样硬化形成的影响.方法 构建载脂蛋白E( Apolipoprotein E)和SAP双基因敲除小鼠(ApoE-/-;SAP-/-)作为实验组,ApoE-/-小鼠作为对照组.2组小鼠各12只,组内雄雌小鼠各半.在小鼠第8周龄时,体质量约20 g,此时开始同时给予2组小鼠高脂饮食,于第16周龄时获取小鼠全血分离得到血清进行血脂分析,处死小鼠后获取其心脏,胸腹主动脉进行油红O染色并进行病理统计.结果 双基因敲除小鼠组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显高于对照小鼠(P＜0.01),低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的比值和动脉粥样硬化指数(AI)小于对照组小鼠且差异显著(P＜0.01),而总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度无显著性差异(P＞0.05);主动脉根部切片和胸腹主动脉的油红O染色结果表明SAP缺失明显减轻了小鼠动脉粥样硬化斑块面积(P＜0.01).结论 AP缺失可能通过上调HDL从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成.     

慢性铁超载对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的影响

目的:观察慢性铁超载对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的影响.方法:24只ApoE基因敲除小鼠随机分为ApoE基因敲除组(腹腔注射0.1 mL生理盐水,连续4周)和铁荆组(腹腔注射10 mg右旋糖苷铁,连续4周),检测血清铁、总铁结合力、肝匀浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,铁染色观察肝脏、心脏铁沉积改变,分析主动脉窦粥样硬化斑块面积.结果:铁荆组血清铁浓度升高377.86%,转铁饱和度升高121.98%,肝脏铁浓度升高2 548.15%,与ApoE基因敲除组比较差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,ApoE基因敲除组肝脏中MDA含量升高了32.51%,SOD活性下降了17.2%,差异均有统计学意义(P＜0.05).与ApoE基因敲除组比较,铁荆组肝脏MDA含量升高了411.15%,SOD活性下降了46.84%,差异均有统计学意义(P＜0.01).与ApoE基因敲除组比较,铁剂组小鼠肝脏、心脏可见明显铁沉积,主动脉窦动脉粥样斑块面积明显增大.结论:铁超载可促进ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的形成,其机制可能与增强机体氧化应激、促进脂质过氧化有关.     

肝Xβ亚型受体(LXRβ)选择性激动剂治疗阿尔茨海默病的研究

【立论依据】 现今主流学说认为阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)的发病主要为β淀粉样蛋白的沉积,即Aβ假说;但如何利用药物进行干预,一直未有重大突破。研究显示:激活LXR可上调ABCA1和ApoE的表达,促进脂类流出和膜内外脂类的重新分配,降低胆固醇浓度,进而减少Aβ的分泌并促进其清除。LXR有α和β两种亚型。现有的LXR激动剂均同时激动LXR α和β受体,而LXRα的激活是造成该药副作用的主要原因。故本课题拟研究一种新合成的化合物——LXRβ亚型激动剂(以下简称C19)对AD的治疗效果,探究其选择性激活LXRβ亚型后,调节胆固醇代谢进而影响AD发病进程的治疗新思路。 【实验内容】 离体实验:建立AD细胞模型和血脑屏障模型,均分别行DMSO(溶剂组)、T0901317(阳性对照组)、C19(实验组)处理,检测ABCA1、ApoE、Aβ含量及外排胆固醇能力,探究C19对脂质转运及Aβ产生和清除的影响。在体实验:随机分组的AD小鼠行C19(AD实验组)、T0901317(AD阳性对照组)、DMSO (AD溶剂组)处理,并设立AD空白对照组(未处理)和C57空白对照组(未处理),3个月后取大脑额顶皮质、海马、脑脊液、血液、肝肾等组织器官,检测ABCA1、ApoE、Aβ等蛋白表达量以及胆固醇如24OHC含量、肝肾毒性等指标,拟验证C19可通过胆固醇代谢途径对Aβ生成和清除产生影响,减少Aβ的生成,实现对AD的治疗作用。 【材料】 APP-PS1转基因AD小鼠、星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞、转染CHOAPPsw细胞 【可行性】 已对部分APP/PS1转基因小鼠腹腔注射C19 3个月,取脑,冰冻切片,免疫组化染色观察老年斑变化,发现C19可明显减少海马皮质的Aβ含量,改善大脑皮质萎缩状况;对肝肾功能、血脂等指标的检测显示,AD实验组和AD空白对照组、AD溶剂组之间胆固醇代谢相关指标有明显差异;肝肾组织切片HE染色显示C19暂无明显毒副作用。 【创新性】 首次合成靶向LXRβ亚型的AD治疗药物,不受α亚型的毒副作用影响;首次研究特异性激活LXRβ亚型后,对胆固醇代谢、Aβ沉积和AD病情的影响机制;首次研究转基因AD小鼠脑脊液中24OHC浓度及C19对其在中枢和外周的浓度变化的影响。     

黄芩苷对ApoE基因敲除小鼠早期动脉粥样斑块中MMP-9表达的影响

目的:探讨黄芩苷对ApoE基因敲除小鼠早期动脉粥样斑块中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只8周龄ApoE-/-小鼠均给予高脂饲料喂养8周后随机分为对照组、苷低剂量和高剂量组,每组8只。灌胃8周后处死,酶法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度;用ELISA测血清中MMP-9的表达水平;通过RT-PCR和Western blot检测小鼠主动脉斑块组织中MMP-9的表达情况。结果:与对照组相比,干预组小鼠血清中TC水平降低(P<0.05),血清中LDL-C水平明显降低(P<0.01),高剂量组较低剂量组降低的明显(P<0.05);各组小鼠血清中HDL-C及TG含量虽有变化但无统计学意义。黄芩苷干预组血清MMP-9较对照组表达水平低,高剂量组降低更显著(P<0.05);同时,黄芩苷干预组主动脉斑块中MMP-9mRNA及蛋白水平较对照组降低明显(P<0.01),高剂量组降低尤为显著(P<0.05)。结论:黄芩苷可以降低ApoE-/-小鼠血清中血脂和MMP-9水平,并可降低动脉粥样硬化斑块中MMP-9表达,提示黄芩苷具有稳定动脉粥样硬化斑块作用。     

苦参胶囊对高脂饮食诱导的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的干预效果研究

目的:观察苦参胶囊对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化的干预作用。方法:高脂饲料喂养30只ApoE~(-/-)小鼠10周建立动脉粥样硬化小鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组及药物高、中、低剂量组,每组6只,药物组分别灌胃苦参胶囊1.287 g/(kg·d~(-1))、0.643 5 g/(kg·d~(-1))、0.321 75 g/(kg·d~(-1)),阳性对照组给予阿托伐他汀钙1.3 mg/(kg·d~(-1))灌胃,模型组以等量生理盐水灌胃,连续给药6周。另设ApoE~(-/-)小鼠和C57各6只为对照组,普通饲料喂养,记录体质量变化,实验结束后处死,取血清、主动脉和心脏样本,观察各组主动脉病理变化、主动脉窦脂质沉积,检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平。结果:与ApoE~(-/-)对照组比,模型组体重增长迅速,TG、TC、LDL-C水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.05),主动脉壁可见大量泡沫细胞形成,主动脉窦脂质沉积明显(P0.01);与模型组比,苦参胶囊高、低剂量组TG、TC明显降低(P0.01),HDL-C水平显著升高(P0.05),主动脉壁泡沫细胞形成明显减少,主动脉窦脂质沉积明显减少(P0.01)。结论:苦参胶囊对动脉粥样硬化具有较好的治疗作用。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …