p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及肿瘤坏死因子在鼻息肉组织中的表达与意义

目的探讨p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及TNF-α在鼻息肉发病机制中的介导与调控作用。方法35例鼻息肉标本及15例下鼻甲组织标本，常规HE染色鉴别嗜酸性粒细胞浸润情况，免疫组织化学S-P法检测p38MAPK、P-p38MAPK、TNF-α的活性表达程度，并进行图像分析。结果鼻息肉组中p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α的表达活性均明显高于下鼻甲组（P〈0．05），而且p38MAPK及TNF－α表达干胞浆中，P-p38MAPK主要表达干胞核；p38MAPK、P-p38MAPK及p38MAPK及TNF-α蛋白的表达具有相关性。在对照标本，没有或仅少量表达p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α。结论在鼻息肉的发病机制中，p38MAPK信号传导通路处于激活状态，并且可能通过TNF-α蛋白表达活性的增强而加剧黏膜炎症反应，促进鼻息肉的发生与发展。     

p38MAPK在慢性鼻炎大鼠嗅黏膜中的表达及意义

目的研究慢性鼻炎大鼠嗅黏膜p38信号蛋白的表达,探讨慢性鼻炎嗅觉疾病的发病机制,为临床治疗慢性鼻炎鼻窦炎性嗅觉疾病提供理论依据。方法采用免疫组化S-P法测定20例慢性鼻炎大鼠嗅黏膜（慢性鼻炎组）和20例正常对照组大鼠嗅黏膜中p38信号蛋白的表达。结果慢性鼻炎组大鼠嗅黏膜上皮层和固有层嗅腺中p38丝裂原素活化蛋白激酶（p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK）的表达均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。慢性鼻炎组大鼠嗅黏膜上皮层和固有层嗅腺中磷酸化的p38丝裂原素活化蛋白激酶（Phospho-p38mitogen-activated protein kinase,Phospho-p38MAPK）的表达均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 p38信号传导通路在慢性鼻炎大鼠嗅黏膜疾病的发生发展中具有重要的调控作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制剂在慢性间歇性缺氧大鼠软腭重构作用的研究

目的 探讨p38MAPK抑制剂SB203580对慢性间歇性缺氧大鼠软腭重构的保护作用。方法 总数60只雌性SD大鼠,被随机分为3组：对照组、缺氧组和缺氧+SB203580干预组。缺氧组和缺氧+SB203580干预组大鼠在自动控制间歇性缺氧试验箱饲养,均饲养35 d后,取大鼠软腭组织HE染色,免疫组化方法测定p38MAPK的表达,Western blot检测软腭组织p38MAPK和p-p38MAPK的表达。结果 缺氧组软腭组织厚度增加最明显,缺氧+SB203580干预组软腭组织厚度增加程度减轻;缺氧组软腭组织中p38MAPK表达增高最明显,缺氧+SB203580干预组p-p38MAPK减低明显。结论　p38抑制剂SB203580通过减轻软腭组织中p-p38的表达,从而减轻慢性间歇性缺氧大 鼠软腭的损伤。     

p38丝裂原激活蛋白激酶通路对变应性鼻炎中黏蛋白5AC的信号转导机制初探

目的:探讨组胺诱导的离体鼻黏膜组织中,p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路及环氧合酶-2(COX-2)对黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响,以期阐明变应性鼻炎(AR)中黏液过度分泌的病理学机制。方法:应用Western blot技术检测不同浓度梯度的组胺诱导及p38MAPK特异性抑制剂SB203580或COX-2特异性抑制剂NS-398干预前后,体外培养的鼻黏膜组织中p38MAPK、COX-2和MUC5AC的蛋白质表达变化规律。结果:p38MAPK、COX-2和MUC5AC在体外培养的健康鼻黏膜组织中呈微弱表达。组胺呈浓度依赖性诱导鼻黏膜组织中p38MAPK、COX-2和MUC5AC蛋白质表达增加;以不同浓度梯度的NS-398阻断COX-2后,观察到NS-398呈浓度依赖性减弱组胺对MUC5AC蛋白质表达的诱导,对p38MAPK表达无明显影响。以不同浓度梯度的SB203580阻断p38MAPK后,观察到SB203580呈浓度依赖性减弱组胺对COX-2和MUC5AC蛋白质表达的诱导。培养液中单独加入SB203580或NS-398对MUC5AC的蛋白质表达无明显影响。结论:组胺通过诱导p38MA...     

细菌脂多糖诱导离体鼻黏膜上皮细胞致炎后p38MAPK的活性变化及意义

目的：探讨细菌脂多糖(LPS)诱导离体鼻黏膜上皮细胞致炎后p38MAPK的活性变化及意义。方法：采用无血清原代培养法行正常鼻黏膜上皮细胞分离和培养,采用不同时间、不同浓度的LPS诱导培养的鼻黏膜上皮细胞致炎,应用Western Immunoblotting法检测p38MAPK的活性变化及p38MAPK特异性抑制剂SB203580对其活性的抑制作用。结果：LPS(1mg／L)刺激后5～30min内和LPS浓度为0．01～1．00mg／L时,p38MAPK的活性增强;SB203580浓度为1．0～5．0μmol／L时,对p38MAPK活性的抑制作用最强。在LPS刺激之前20min SB203580可抑制p38MAPK活性;在LPS刺激后SB203580对p38MAPK活性的抑制作用甚微或无。结论：LPS刺激鼻黏膜上皮细胞致炎在30min内和浓度在1mg／L内是以时间和浓度“正依赖”方式导致p38MAPK的活化增强;特异性抑制剂SB203580对p38MAPK活性的抑制作用则是浓度在5μmol／L内以“正依赖”方式增强,且这种抑制作用仅在LPS刺激之前才发挥效应。     

甘肃省4314例学龄前在园儿童听力筛查结果分析

目的了解甘肃省学龄前儿童听力状况,为儿童听力保健提供依据。方法采用随机、容量比例概率抽样法抽取甘肃省13县区4 314例3～7岁在园儿童,用畸变产物耳声发射行听力初筛、自动听性脑干反应复筛,未通过者用听性脑干反应、耳声发射、声导抗、行为测听等进行听力学诊断。结果 4 314例中,最终诊断听力损失38例,现患率0.88%(38/4 314),其中双耳10例,现患率0.23%(10/4 314),其中轻度听力损失2例,中度7例,重度1例;单耳28例(左耳13例,右耳15例),现患率0.65%(28/4 314)。38例听力损失的可能原因为:中耳炎19例(19/38,50.0%);外耳道闭锁或畸形3例(7.89%,3/38),耳毒性药物使用史2例(5.26%,2/38),头部外伤史2例(5.26%,2/38),母孕期因素1例(2.63%,1/38),鼓膜穿孔1例(2.63%,1/38),无明确原因10例(26.32%,10/38)。结论甘肃省学龄前儿童中耳炎及由此所致的轻、中度听力损失比例较高,积极预防和治疗中耳炎是减少听力损失的有效措施。     

p38在慢性鼻-鼻窦炎和鼻息肉中的表达及意义

目的探讨p38在慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉以及正常下鼻甲黏膜组织中的表达及对免疫学细胞因子的影响。方法分别采用Western blot法、ELASE法检测p38、IL-4和IFN-γ在20例慢性鼻-鼻窦炎组织（实验组1）、20例鼻息肉组织（实验组2）和15例正常下鼻甲黏膜中的表达（对照组）,比较它们在不同组织中表达的差异;分析p38与IL-4、IFN-γ的相关性。结果①p38在两实验组间的表达差异无统计学意义（P>0.05）,但均高于对照组（P<0.05）;②IL-4只在鼻息肉组表达高于对照组（P<0.05）;③IFN-γ在实验组的表达均高于对照组（P<0.05）,且以慢性鼻窦炎组更显著（P<0.05）;④在慢性鼻-鼻窦炎组,p38与IFN-γ呈正相关,而在鼻息肉组p38与IL-4呈正相关。结论①IL-4、IFN-γ在慢性鼻-鼻窦炎组与鼻息肉组表达优势不同;②p38 MAPK高表达可能会促进T细胞向Th1、Th2两方面分化;③慢性鼻-鼻窦炎、鼻息肉的炎症反应过程不尽相同。     

白细胞介素-17A对鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的刺激作用及分子机制

目的观察重组人白细胞介素17A(interleukin-1 7 A,I L-1 7 A)刺激离体培养的人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNECs)后黏蛋白MUC5AC mRNA的表达变化,并检测相关的信号通路。方法离体培养的HNECs经过IL-17A诱导0～6 h后,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chainreaction,Q-PCR)技术检测MUC5AC mRNA的表达变化;通过Western blot技术检测有无特异性阻断剂作用时p38信号通路的活化情况及相应MUC5AC mRNA的表达情况。结果 IL-17A在1 ng/ml即能诱导HNECs中MUC5AC的mRNA水平上调,并在浓度为100 ng/ml时达到峰值(F=48.60,P<0.01);p38信号通路在IL-17A诱导后开始活化,并在第30分钟达到最大程度,之后信号递减并趋于正常;采用p38特异性阻断剂SB203580抑制p38信号通路后,MUC5AC mRNA的上调得到抑制(F=223.8,P<0.01)。结论 IL-17A能通过p38信号通路诱导HNECs表达MUC5AC mRNA的过程,阻断p38信号通路可能作为干预由IL-17A诱导导致的气道黏液高分泌状态的一个关键靶点。     

颈动脉体瘤家系琥珀酸脱氢酶D亚单位基因截短体R38X质粒构建和体外功能验证

目的　构建并验证琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase,SDH）亚单位SDHD基因截短体R38X的质粒。方法　分析家族型颈动脉体瘤家系基因,进行SDHD 基因外显子俘获“二代”测序分析。体外构建SDHD基因截短体并研究在293T细胞中的表达水平。结果　SDHD基因在家族性颈动脉体瘤中存在R38X突变,截短体在293T细胞中能良好表达,可抑制全长SDHD的转录。结论　SDHD基因突变截短体R38X能抑制表达,具体机制还需深入研究。     

P38MAPK调控AQP2参与内淋巴积水的形成北大核心CSCD

目的探讨P38MAPK是否通过调控AQP2参与内淋巴积水的形成。方法筛选合格豚鼠30只,随机分为三组:空白对照组(6只):腹腔注射生理盐水;积水组(12只):腹腔注射醋酸去氨加压素;抑制剂组(12只):腹腔注射醋酸去氨加压素15min后,腹腔注射SB203580。所有组别豚鼠连续给药10天,在停止给药7天后行ABR和DPOAE检测,并在检测后同时取材,HE染色观察各组豚鼠内淋巴积水程度,免疫组化和qRT-PCR分别检测PP38MAPK、AQP2蛋白和mRNA在各组豚鼠耳蜗表达情况。结果1、行为学观察及听力检测:各组无明显差异。2、形态学观察:空白对照组积水率为0%;积水组积水率为75%;抑制剂组积水率为33%。3、免疫组化:P-P38MAPK:在各组豚鼠耳蜗中均有表达,积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。AQP2:在各组豚鼠耳蜗中均有表达,除螺旋神经节外,积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。4、荧光定量PCR检测结果:P38MAPK、AQP2:积水组>抑制剂组>空白对照组(P<0.01)。结论P38MAPK通过调控AQP2参与内淋巴积水的形成;P38MAPK抑制剂可减轻内淋巴积水程度。     

平行隧道式小切口非乳化联合小梁切除治疗白内障合并青光眼

目前,隧道式小切口非乳化白内障摘除联合小梁切除及后房型IOL植入术治疗白内障合并青光眼已在临床上普遍应用[1,2].我们用此手术方法治疗白内障合并青光眼38例、38眼,术后恢复了有用视力,有效降低了眼压,疗效满意.现报告如下. 1 资料与方法 1.1 临床资料 1999年2月至2001年5月我院为白内障合并青光眼38例、38眼行联合手术,随访4～24个月.男20例、20眼,女18例、18眼,37～71岁,平均61岁.白内障合并原发性闭角型青光眼17例、17眼,白内障继发青光眼15例、15眼,白内障合并开角型青光眼4眼,外伤性白内障青光眼2眼,术前视力为光感至0.3;眼压为28～60mmHg,平均33.18±4.63 mmHg,患者均为一期植入后房型IOL,晶体为Stroze公司产的一体式晶体.     

胆脂瘤囊内碎屑组织萃取物对HaCaT细胞p38 MAPK信号通路表达的影响及意义

目的通过建立胆脂瘤上皮细胞生物体外研究模型,探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号通路在中耳胆脂瘤病理机制中的作用。方法用胆脂瘤囊内碎屑组织萃取液干预人永生化角质细胞株(HaCaT)细胞,建立生物体外胆脂瘤上皮细胞增殖模型,分别采用免疫组化法和RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)技术检测磷酸化p38MAPK及p38MAPK在HaCaT细胞中的表达水平,用MTT比色法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,噻唑蓝比色法)检测p38MAPK特异性抑制剂SB203580对HaCaT细胞增殖的影响。结果不同浓度胆脂瘤碎屑萃取液干预HaCaT细胞后MTT检测的OD(optical density,光密度)值呈浓度依赖性增高。免疫组化结果显示,胆脂瘤碎屑萃取液干预后30min时HaCaT细胞核阳性染色,对照组呈阴性。RT-PCR结果示胆脂瘤碎屑萃取液干预后对照组及实验组间的差异有统计学意义(P=0.000)。不同剂量的SB203580对胆脂瘤囊内碎屑组织萃取液HaCaT细胞增殖的影响(MTT检测的OD值):对照组、2.5μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组和20μmol/L组分别为0.535±0.008、0.527±0.012、0.504±0.017、0.476±0.012和0.470±0.013;对照组与5μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组差异有统计学意义(P<0.05),而与2.5μmol/L组间差异无统计学意义,10μmol/L组与20μmol/L组间无统计学差异。结论在胆脂瘤病理过程中,p38MAPK信号通路受多种刺激因子激活和表达,并可能在调节胆脂瘤上皮细胞的增殖过程中发挥重要作用。     

人乳头瘤病毒型别与儿童复发性呼吸道乳头状瘤临床病程的相关性

目的　研究人乳头瘤状病毒（human papilloma virus,HPV）型别对儿童复发性呼吸道乳头瘤（juvenile onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP）临床病程的影响。方法　收集38例JORRP患儿新鲜瘤体标本,采用流式荧光杂交法检测HPV型别。将患儿分为HPV6阳性组和HPV11阳性组。量化评分其201例手术,对发病年龄、并发症、临床症状、手术次数、乳头瘤侵袭范围程度等方面进行统计学分析。结果　55.2%（21/38）JORRP患儿感染HPV6,36.8%（14/38）感染HPV11,7.9%（3/38）HPV6/11均阴性。两组患儿在发病年龄、术前临床症状评分、乳头瘤解剖亚区数、Derkay、Dikkers评分方面均有统计学差异。结论　感染HPV11发病年龄更小,侵犯范围更广病灶性状更严重,临床症状更严重,致JORRP临床病程更严重。     

耳鸣的辨证分型及针灸治疗

本文将耳鸣患者38例，通过辨证分型，分为风热侵袭，肝火上扰，痰火郁结，肾精亏损及脾肾虚弱等型，各型取不同穴位针刺治疗，疗程2～38天，总有效率为92．1％，无不良反应出现。     

突聋伴眩晕患者的前庭功能分析北大核心CSCD

目的探讨突发性聋伴眩晕患者前庭功能特点。方法对38例突发性聋伴眩晕患者(伴眩晕组,9~80岁)、36例突发性聋不伴眩晕患者(不伴眩晕组,15~69岁)和年龄相匹配的20例健康志愿者(正常对照组,20~76岁)分别进行纯音听阈、视频头脉冲试验和前庭诱发肌源性电位测试,比较三组结果。结果伴眩晕组、不伴眩晕组、正常对照组患者的前庭功能异常率分别为:92.11%(35/38)、44.44%(16/36)、35%(7/20),伴眩晕组异常率显著高于不伴眩晕组和正常对照组(均为P<0.001)。伴眩晕组患者的水平半规管、上半规管、后半规管、球囊、椭圆囊功能的异常率分别为34.21%(13/38)、23.68%(9/38)、55.26%(21/38)、65.79%(25/38)、60.53%(23/38);不伴眩晕组分别为19.44%(7/36)、13.89%(5/36)、25.00%(9/36)、27.78%(10/36)、22.22%(8/36),其中伴眩晕组的后半规管、球囊、椭圆囊功能的异常率明显高于不伴眩晕组(P=0.008、P=0.001、P=0.001);伴眩晕组三个半规管中后半规管功能异常率最高(55.26%),球囊和椭圆囊功能的异常率差异无统计学意义(P=0.634)。结论突聋伴眩晕患者较突聋不伴眩晕患者前庭功能损伤更严重,且以后半规管功能障碍多见。     

p38丝裂原活化蛋白激酶和核因子κB在鼻黏膜炎症上皮细胞的表达意义

目的　探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase,MAPK）和核因子κB（nuclear factorkappa B,NF-κB）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致炎鼻黏膜上皮细胞中的表达意义。方法　采用蛋白印迹法检测LPS加入培养的鼻黏膜上皮细胞后活化的p38MAPK（磷酸化p38MAPK）表达的变化,及加入p38MAPK特异性阻断剂SB203580对其活性的抑制作用;应用凝胶电泳迁移率分析法检测SB203580对NF-κB DNA结合活性的抑制作用。结果　随着LPS浓度的增加（0.01 mg/L,0.1mg/L）,鼻黏膜上皮细胞中磷酸化p38MAPK的表达升高（0.2±0.059,0.243±0.059）,但无统计学差异（t =0.908,P =0.424;t =0.116,P =0.99）;当LPS的刺激浓度为l mg/L时表达最高（0.851±0.108）（t =9.484,P <0.01）;浓度为10 mg/L时不再继续升高（0.83±0.122）（t =7.916,P <0.01）。在加入LPS之前30 min加入SB203580可抑制p38MAPK活性（0.248±0.055）（t =8.741,P <0.01）。LPS刺激鼻黏膜上皮细胞后NF-κB的DNA结合活性升高（2.116±0.037）,可被SB203580部分抑制（1.323±0.038）（t =10.662,P <0.01）。结论　p38MAPK在LPS致炎的鼻黏膜上皮细胞中被激活,且可能部分调控NF-κB转录因子的活性。     

标准化屋尘螨疫苗特异性免疫治疗常年性变应性鼻炎的疗效观察

目的:了解标准化屋尘螨疫苗特异性免疫治疗常年性变应性鼻炎的疗效。方法:对38例变应性鼻炎患者用标准化屋尘螨疫苗特异性免疫治疗3年或3年以上,免疫前后进行症状和体征评分。结果:38例中,显效21例,有效7例,无效10例,总有效率达73.68%。结论:标准化屋尘螨疫苗特异性免疫治疗变应性鼻炎疗效明显。     

鼠神经生长因子联合鼓室内注射地塞米松治疗突发性耳聋的临床应用

目的探讨常规用药联合鼠神经生长因子及鼓室内注射地塞米松治疗突发性耳聋的临床疗效。方法 80例突聋患者随机分为实验组和对照组。对照组38例(40耳)常规治疗方案(扩张血管、溶栓、改善微循环、高压氧),实验组42例(45耳)在常规治疗基础上应用鼠神经生长因子肌肉注射联合鼓室内注射地塞米松。结果实验组38耳有效,7耳无效,总有效率84.4%(38/45);对照组25耳有效,15耳无效,总有效率62.5%(25/40),实验组疗效显著高于对照组(P<0.05);结论鼠神经生长因子肌肉注射联合鼓室内注射地塞米松对治疗突发性耳聋优于常规治疗。     

布地奈德混悬液雾化吸入治疗咽炎合并声带水肿的临床效果

目的 分析咽炎合并声带水肿患者接受布地奈德混悬液雾化吸入治疗的临床效果.方法 将2019年3月～2020年5月作为研究时间段,将随机数字表法作为分组依据,病例选取此时间段内我院接诊的76例咽炎合并声带水肿患者,均分为对照组(行地塞米松雾化吸入,纳入38例)、研究组(行布地奈德混悬液雾化吸入,纳入38例),对组间疾病疗效...