抗纤维蛋白—抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓？…

研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法 通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法检测该ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用＾１３１Ｉ血浆－血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。     

兔抗人纤维蛋白抗体的制备

兔抗人纤维蛋白抗体的制备首都医科大学病理解剖学教研室李良董小黎生化教研室王泽生于培兰首都医科大学附属北京红十字朝阳医院内科容凯纤维蛋白是在血液凝固过程中，由纤维蛋白原经一系列酶催化的化学链锁反应转化而来，因此在防治血栓性疾病时，研究纤维蛋白的形成及其...     

抗吗啡单克隆抗体对吗啡效应的抑制作用

目的考察自制的抗吗啡单克隆抗体对吗啡效应可能的抑制作用。方法小鼠热板法考察抗吗啡单抗对吗啡镇痛效应的作用，以痛阈延长时间及延长率为观察指标；小鼠纳曲酮催促戒断实验考察单抗对吗啡躯体依赖性的作用，以跳跃次数及体重减轻为指标，并以RIA法测定小鼠外周血及脑组织中的吗啡浓度；大鼠条件性位置偏爱实验考察单抗对吗啡精神依赖性的作用，以实验动物在伴药盒中的停留时间为指标。结果抗吗啡单抗可以显著性地缩短吗啡致病阈延长时间、降低延长率；减轻吗啡致跳跃反应及体重减轻等催促戒断症状，降低外周血及脑组织中的吗啡浓度；缩短大鼠在伴药盒中的停留时间。结论抗吗啡单抗对吗啡效应具有抑制作用。     

抗人交联纤维蛋白碎片D—二聚体McAb的制备及其鉴定

以纯化的纤维蛋白碎片D-二聚体为抗原,得到4株分泌抗D-二聚体McAb的杂交瘤细胞,分别命名为HID1、HID2、HID3和HID4,其中HID1、HID2及HID3能识别同一或相邻抗原决定簇,与纤维蛋白原及其碎片X、Y、D、E和血浆等无交叉反应;HID4则识别另一抗原决定簇,且与纤维蛋白原碎片X、Y、D等有交叉反应。本组McAb的成功制备,将为临床血栓性疾病的诊断和治疗监测提供新手段。     

人胰岛提取物与大鼠β肿瘤细胞具有共同抗原决定簇

鉴定抗大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体所结合的胰岛特异性抗原。采用匀浆后超速离心的方法提取动物胰腺及胰岛细胞膜蛋白。经SDS-PAGE、电转移后，分别与大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体1A2(第一抗体)和羊抗鼠(第二抗体)反应。用放射自显影、Dot blot、western blot方法显示结果。除单抗1C7以外的其他6株抗大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体能与正常大鼠胰腺提取物不同成分结合。其中单抗1A2能与大鼠、狗、猪、猴、人的胰腺提取物及人、猪胰岛提取物不同分子量的抗原结合。大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞与正常大鼠胰腺有共同的抗原决定簇。单抗1A2所结合抗原在不同动物胰腺，尤其是在人和猪胰岛上具有共同抗原决定簇。为1型糖尿病自身免疫发病机制及临床前早期诊断带来了新的希望。     

Fg与Hs-CRP在大鼠模型2型糖尿病牙周炎相关作用研究

目的检测和分析大鼠2型糖尿病伴牙周炎血液中纤维蛋白原与超敏C反应蛋白水平的变化,探讨2型糖尿病牙周炎与它们之间的关系。方法 40只成年SD雄性大鼠随机分为4组,正常对照组（N）10只,牙周炎组（P）为10只,链脲佐菌素致糖尿病组（D）与糖尿病牙周炎组（DP）各10只,各组接受相应的建模处理。通过观察纤维蛋白原与超敏C反应蛋白在糖尿病与牙周炎的数值变化,来确定它们的相关性。结果 P、D、DP组2型糖尿病大鼠纤维蛋白蛋白与超敏C反应水平明显高于正常对照组（P〈0.05）。结论纤维蛋白原与超敏C反应蛋白与两疾病的发展密切相关。     

人纤维介素在急性排斥反应时移植肾组织中的表达及意义

目的探讨急性排斥反应时移植肾组织中人纤维介素[human子fibrinogen-like protein2(hfgl2)／fibroleukin]的表达及其意义。方法应用免疫组化法检测31例急性排斥移植肾穿刺活检标本中hfgl2的表达情况,确定阳性表达细胞的细胞类型。做抗纤维蛋白染色、微血栓染色,观察急性排斥反应时纤维蛋白沉积及微血栓分布情况,同时做抗hfgl2和抗纤维蛋白双染色,观察hfgl2的局部促凝作用与纤维素沉积的关系。结果29例急性排斥标本中可见hfgl2表达,主要在肾小管上皮细胞、间质浸润细胞和部分黏附、浸润于血管内皮及肾小管上皮细胞间的炎性细胞。间质中部分hfgl2阳性表达细胞的临近区域及部分hfgl2阳性肾小管的管腔内可见纤维蛋白沉积。结论hfgl2在人同种肾移植急性排斥反应中异常表达,局部激活了血管内、外的凝血酶,导致纤维蛋白的沉积和微循环障碍,从而进一步加重了急性排斥反应时的组织病理损害。hfgl2有可能成为干预急性排斥反应进程的新靶点。     

肾上腺器官内淋巴管比较解剖学研究

采用墨汁硝酸银水溶液局部动脉灌注方法，对人胎儿和犬，大鼠，牛，家兔肾上腺器官内淋巴管的分布进行了比较解剖学研究。观察结果表明，（１）人胎儿和牛，犬肾上腺器官内淋巴管的分布相同。在肾上腺被膜内和腺体内的中央静脉周围，存在淋巴管毛细淋巴管；家兔和大鼠肾上腺器官内淋巴管较少，仅在肾上腺的被人观察到淋巴管和毛细淋巴管。     

人胰岛提取物与大鼠β肿瘤细胞具有共同抗原决定簇

鉴定抗大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体所结合的胰岛特异性抗原。采用匀浆后超速离心的方法提取动物胰腺及胰岛细胞膜蛋白。经SDS-PAGE、电转移后,分别与大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体1A2(第一抗体)和羊抗鼠(第二抗体)反应。用放射自显影、Dot blot、western blot方法显示结果。除单抗1C7以外的其他6株抗大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞膜单克隆抗体能与正常大鼠胰腺提取物不同成分结合。其中单抗1A2能与大鼠、狗、猪、猴、人的胰腺提取物及人、猪胰岛提取物不同分子量的抗原结合。大鼠β肿瘤细胞系Rin5F细胞与正常大鼠胰腺有共同的抗原决定簇。单抗1A2所结合抗原在不同动物胰腺,尤其是在人和猪胰岛上具有共同抗原决定簇。为1型糖尿病自身免疫发病机制及临床前早期诊断带来了新的希望。     

抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓效果的研究

目的研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞（变异株）与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗（ｂｓＭｃＡｂｓ）杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法检测该ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用１３１Ｉ血浆－血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。用兔血栓模型测定体内溶栓效力。结果获得８株分泌抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单抗的杂交－杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶均有很强的结合力。体外溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ可使尿激酶的溶栓效力增强１５．５％。体内溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ的溶栓效力为尿激酶的１．６～２．１倍。结论单抗导向溶栓剂具有高度特异性和局部溶栓效力强等优点，值得进一步研究。     

软骨细胞纤维蛋白胶混合物修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的：研究关节软骨细胞与纤维蛋白胶的混合物修复关节软骨全层缺损的效果。方法：（１）用自制消化瓶消化分离原代兔关节软骨细胞并培养;（２）通过硫酸铵沉淀法从兔血液中提取纤维蛋白原并制备纤维蛋白胶;（３）分别用自体或异体关节软骨细胞和纤维蛋白胶的混合物修复兔股骨滑车关节软骨全层缺损。术后１、２、３个月从大体观察,组织学等方面了解关节软骨缺损的修复情况。结果：自体软骨细胞组在术后３个月时修复组织已非常类似     

气管上皮嗜银细胞和5-羟色胺免疫反应细胞的定位

用银染色及免疫组织化学ＰＡＰ法，对狗、家兔、豚鼠、大鼠、小鼠气管粘膜上皮内嗜银细胞和５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫反应（ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｏｎ）细胞的分布及形态进行观察。结果显示：５种动物气管上皮中均可见散在的嗜银细胞，家兔气管内嗜银细胞密度较大，而狗、大鼠的较少。５－ＨＴ－ＩＲ细胞仅见家兔、豚鼠、小鼠的气管粘膜上皮。气管中的内分泌细胞可分为开放型和闭合型，并可见旁突伸至邻近细胞。相邻切片观察未     

富血小板纤维蛋白凝胶和膜显微与超微结构研究

目的观察富血小板纤维蛋白（PRF）的细胞组成和三维结构并讨PRF凝胶和膜的不同。方法 5名志愿者每人采肘静脉全血两份,随机放入A组（PRF凝胶）和B组（PRF膜）,分别进行光镜和扫描电镜（SEM）观察。结果 PRF凝胶中纤维蛋白聚集形成疏松的立体网络结构,有大量的血小板和白细胞分布并呈特定的三维分布,而PRF膜中纤维蛋白立体网络结构坚实致密,以致区分其中的细胞成分有一定的困难。结论 PRF凝胶和膜除了纤维蛋白浓密不同外均聚集了全血中大量的血小板和白细胞,因此,只要遵循主要的生产规则就可以得到一个自体纤维素生物材料。     

纤维蛋白调节大鼠脑内皮细胞基质金属蛋白酶9的实验研究

目的 观察纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养对(matrix metalloproteinases9,MMP9)蛋白及转录水平表达的动态变化.方法 大鼠脑血管内皮细胞分离后培养,融合良好后.与不同溶度的纤维蛋白共培养,应用酶联免疫方法(ELISA)定量检测MMP9抗原浓度和Real-time PCR半定量检测MMP9 mKNA.结果 纤维蛋白可以特异性诱导大鼠脑血管内皮细胞表达MMP9;不同浓度的纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h,1.0 mg/mL上清液组的MMP9抗原浓度显著增高(P<0.001);1.0 mg/mL纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞分别培养0、2、4、8、24和48 h,MMP9浓度在共培养2 h已经升高,8 h时显著升高,在24 h仍然保持在显著升高表达水平(P<0.005),48 h有所下降;不同浓度的胶原蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h引起MMP9抗原浓度轻度增高,但是在高浓度组明显低于对应浓度的纤维蛋白组引起的MMP9抗原浓度增高(P<0.05);纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养,转录水平检测提示,MMP9 mRNA的上调呈现出剂量和时间依赖性模式.结论 纤维蛋白是大鼠脑血管内皮细胞特异性激活剂,可以特异性的上调MMP9表达,在转录水平和蛋白水平均呈现为剂量和时间依赖性模式.     

成人和3种成体哺乳动物血管组织动力学研究

目的:观察正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁组织结构及其演化关系,探讨血管的组织动力学过程.方法:5例成人尸检大动脉和中动脉标本、5只家犬主动脉和股动脉标本、12只大鼠大动脉至髂动脉标本、3只家兔大动脉标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成人与成体犬、大鼠、家兔大中血管壁一般包括内膜、中膜、外膜和鞘膜4层.血管内膜内皮表面可见成血-血管干细胞归巢和内化与血液沉积物及其表面内皮化;内膜与中膜之间可见内膜细胞与膜平滑肌细胞演化序列;中膜与外膜之间可见平滑肌退变序列;外膜外有神经源的鞘膜.植物神经末端可演化形成滋养血管.结论:正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁主要由归巢和沉积方式来源于成血-血管干细胞形成的内膜细胞演化而成,内膜细胞演化形成中膜平滑肌,平滑肌退化而成外膜.     

甲基苯丙胺与HIV-Tat蛋白协同致大鼠纹状体NMDA受体NR2B亚基和iNOS的表达

目的 观察甲基苯丙胺 (MA) 与HIV-Tat蛋白协同作用致大鼠相关脑区N-甲基-D-天冬氨酸 (NMDA) 受体NR2B亚基和诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS) 的表达变化, 探讨MA与HIV-Tat协同作用对神经系统的影响.方法 50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组:MA组 (10 mg/kg MA, 每日2次腹腔注射, 连续4 d) 、HIV-Tat组 (10μg HIV-Tat注入大鼠脑纹状体) 和MA+HIV-Tat组 (按MA组注射MA 4 d后按HIV-Tat组注入HIV-Tat) ;对照组:生理盐水腹腔注射或纹状体内注射.各组大鼠分别于注射结束后48 h和7 d处死, 麻醉后用多聚甲醛灌注, 取出脑组织并固定, 石蜡包埋, 作冠状切面, 用免疫组化和蛋白免疫印迹法对中毒大鼠纹状体中NMDA受体NR2B亚基和iNOS的表达进行观察, 并进行图像分析, 测量其平均光密度值, 与对照组比较并进行统计学分析.结果 各实验组与对照组比较, 纹状体内NMDA受体NR2B亚基和iNOS的表达均有不同程度增高, 差异具有统计学意义 (P<0.05) ;其中MA+HIV-Tat组与MA组、HIV-Tat组比较, NMDA受体NR2B亚基和iNOS的表达显著增高 (P<0.05) .结论 MA与HIV-Tat蛋白的共同作用能够显著增加NMDA受体NR2B亚基和iNOS的表达, 揭示NMDA受体NR2B亚基和iNOS参与了MA与HIV-Tat蛋白的协同神经毒性机制.     

我国实验动物饲料营养状况的研究--一般营养成分

本研究是针对我国目前实验动物饲料生产的现状进行了一次调查分析,并对其营养状况进行了评估：根据在全国范围内采集大小鼠饲料样品24个、家兔饲料样品9个、犬饲料样品、猕猴饲料样品各2个,对其进行水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维的分析。其结果表明：五项指标均达到国家标准的大小鼠饲料为20.8％,其中北京为25％(1／4),东北地区为0(0／1)、华北地区为0(0,3)、华中地区为0(0／2)、华东地区为33．3％(2／6)、华南地区为20％(1/5)、西南地区为33.3％(1/3);五项指标均达到国家标准的家兔饲料为22．2％、犬和猕猴懦料均未达标。     

人与实验动物肾皮质结构及肾小体定量的比较

用人和几种常用实验动物的肾皮质在镜下进行观察,并对肾小体进行形态定量学分析比较。结果,以豚鼠肾脏皮质结构较清晰,近、远端小管曲部区别明显。狗的肾小体定量分析各参数(Vv、Sv、Nv)虽与人接近,但肾小囊囊腔较狭小,近.远端小管曲部不易区分。小白鼠、大白鼠各定量参数与人的差异较大。可为不同目的的应用提供参考。     

牛脑和人脑神经元特异性烯醇酶的制备及免疫组织化学的应用

从牛脑和人脑内分别提取神经元特异性烯醇酶(Neuron-specific enolase,简称NSE,又称γγ烯醇酶),并制备了兔抗牛NSE抗血清(抗NSE_b)和兔抗人NSE抗血清(抗NSE_h)。用猫、狗的脊髓和大脑运动皮质切片,进行免疫组织化学-PAP法染色,其中神经元均呈阳性反应,神经胶质均阴性,并与美国的兔抗人NSE抗血清(抗NSE_H)进行染色对比。     

纤维蛋白胶羊膜棒在去势雄兔干眼症的应用研究

目的研究纤维蛋白胶羊膜棒对去势雄兔干眼症的预防和治疗作用。方法选取雄性新西兰大白兔60 只（60 眼,均为右眼）,行双侧睾丸切除术后随机分为A、B、C、D、E 及F 6 组（各组10 眼）。A 组手术后不进行任何处理观察6 周;B 组手术当日将纤维蛋白胶羊膜棒植入泪道5 s 后取出观察6 周;C 组手术当日植入纤维蛋白胶羊膜棒6 周;D组造模（手术2 个月后形成干眼模型）后不进行任何处理观察6 周;E 组造模当日将纤维蛋白胶羊膜棒植入泪道5 s后取出观察6 周;F 组造模当日植入纤维蛋白胶羊膜棒6 周。分别于植入前和植入后2、4 及6 周行Schirmer I 试验（SIT）、角膜荧光素染色（FL）、角膜共聚焦显微镜扫描和泪道黏膜K16 的Western blot检查。结果C 组在植入2、4 及6 周后SIT 较植入之前好转,差异有统计学意义（P <0.05）;C 组与A、B 组间的SIT 在各时间比较,差异有统计学意义（P <0.05）;在植入2 周后,C 组FL 指标评分较植入之前无明显变化,差异无统计学意义（P >0.05）;在植入4 和6 周后C 组与A、B 组FL 指标评分较植入之前轻度好转,差异有统计学意义（P <0.05）。在植入2、4 及6 周后,F 组SIT 较植入前好转,差异有统计学意义（P <0.05）,F 组FL指标评分较植入之前好转,差异有统计学意义（P <0.05）;植入后C、F 组上皮基底细胞和炎症细胞均减少,差异有统计学意义（P <0.05）。免疫荧光染色及Western blot结果显示C、F组泪道黏膜K16 阴性表达。结论纤维蛋白胶羊膜棒能够有效地预防和治疗去势雄兔干眼症,延缓干眼症的进展。