RP-HPLC法测定冠脉宁片中血竭素的含量

目的建立冠脉宁片中血竭素的含量测定方法。方法采用反相高效液相法(RP-HPLC),分析柱:Agilent Eclipse XDB-C18(150mm×46mm,5μm),以乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钠(55∶45)为流动相,流速控制在1.0 ml·min-1,检测波长为440nm。结果在9~144μg·ml-1范围内,血竭素与峰面积有良好的线性关系(r=0.999 7)。加样回收率为99.3%,RSD=1.57%。结论所建立的方法简便,准确,快速,可用于冠脉宁片中血竭药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定克痹骨泰胶囊中血竭素高氯酸盐的含量

目的：建立反相高效液相色谱法测定克痹骨泰胶囊中血竭素高氯酸盐含量的方法。方法：采用Diarnonsil（钻石）C180DS2（250mm×4．6mm5μm）色谱柱,乙腈-0．05％NaH2p水溶液（45：55）为流动相,流速为lmL．min-I,检测波长为270nm。按外标法进行检测。结果：血竭素高氯酸盐在浓度为0．005μg·ml^-1～0．056μg·ml^-1范围内线性关系良好,r=0．9999,样品加样平均回收率为99．82％（n=6）,RSD为0．60％。结论：该方法简便,准确、重复性好、专属性强,可作为克痹骨泰胶囊的含量测定有效方法。     

HPLC法测定香莲祛痛霜中血竭素含量

目的: 采用高效液相色谱 ( HPLC) 法建立香莲祛痛霜血竭素含量的测定方法。方法: 按照 HPLC 法 ( 中国药典 2015 年版四部通则) 测定。色谱条件与系统适用性试验色谱条件。色谱柱: Agilent C₁₈( 250 mm × 4. 6 mm,5 μm) ;流动相: 乙腈 - 0. 05 mol/L 磷酸二氢钠溶液 ( 45∶ 55) ; 检测波长: 440 nm; 流速: 1 m L/min; 柱温: 40 ℃ ; 进样体积:10 μL。结果: 血竭素对照品溶液,以浓度对峰面积进行回归,在 5. 817 ～ 58. 17 μg / m L 之间呈线形关系,平均峰面积675. 2,RSD 为 0. 35% ; 香莲祛痛霜平均峰面积 314. 7,RSD 为 1. 36 % ; 稳定性试验血竭素高氯酸盐对照品溶液均峰面积674. 6,RSD 为 0. 25% ,样品中血竭素高氯酸盐平均峰面积 362. 2,RSD 为 2. 32% ; 血竭素高氯酸盐的平均回收率为97. 8% ,RSD ( n = 9) 为 2. 29% ; 三组不同批次的样品 1 g...     

反相高效液相色谱法测定活血壮筋胶囊中血竭素的含量

目的:建立测定活血壮筋胶囊中血竭素高氯酸盐含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱条件:Shim-pack VP-ODS C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(43∶57),流速为1.0m L·min-1,检测波长为440nm。结果:血竭素高氯酸盐进样量在0.08064~0.40320μg·m L-1范围内,与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999,n=5);平均回收率为98.64%,RSD=1.64%(n=6)。结论:本方法操作简便、快速、准确,可作为血竭素高氯酸盐的定量分析方法。     

HPLC法测定心舒宁片中奇壬醇的含量

目的建立心舒宁片中奇壬醇的含量检测方法。方法采用高效液相色谱法对心舒宁片中奇壬醇的含量进行检测,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为215nm。结果奇壬醇在0.2008~4.0160μg·m L-1范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率97.36%,R SD=3.03%(n=6)。结论该法操作简便,准确可靠,可作为心舒宁片中奇壬醇的含量测定方法。     

HPLC法测定消肿解毒丸中血竭素的含量

目的:建立测定消肿解毒丸中血竭素的含量测定方法。方法:高效液相色谱法采用Phenomenex Kro-masil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(50∶50),流速:1.0mL/min,检测波长440nm,柱温40℃。结果:血竭素线性范围0.0305~0.2440μg,r=0.9999,平均回收率为101.00%,RSD为2.53%(n=6)。结论:本法分离好,快速、简便,可作为该产品的质量控制方法。     

血竭中5-羟基-7-甲氧基黄烷的含量测定

目的:建立血竭药材中有效成分5-羟基-7-甲氧基黄烷的HPLC含量测定方法。方法:Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水(60∶40),检测波长210 nm,柱温30℃,流速1 mL.min-1。结果:5-羟基-7-甲氧基黄烷在0.01~0.10μg呈良好线性关系,r=0.999 9。平均回收率100.1%(n=6)。结论:该方法简便快速、结果准确,可用于检测血竭药材中有效成分5-羟基-7-甲氧基黄烷的含量。     

不同部位黄藤果实中血竭素的含量比较研究

目的建立高效液相色谱测定黄藤果实中血竭素含量的方法,比较分析不同部位黄藤果实中血竭素的含量。方法HPLC法测定黄藤果实中血竭素的含量(Waters Atlantis d C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为440nm。结果血竭素高氯酸盐在0.009~0.090mg·ml-1范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.20%,RSD=1.93%;5个不同产地黄藤果实中的血竭素含量为0.186~0.796 mg·g-1,果皮中血竭素含量在0.861~3.811mg/g,果肉未检出血竭素。结论黄藤果实中所含血竭素主要来自果皮部位,开发应用前景广阔。     

HPLC定量分析千斤拔药材中染料木苷和染料木素的含量

目的:建立千斤拔药材的质量控制方法。方法:采用高效液相色谱法测定其中的染料木苷和染料木素的含量;色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,流速为1 m L·min-1,检测波长为260 nm。结果:染料木苷和染料木素分别在质量浓度17.483~279.720μg·m L-1和4.088~65.406μg·m L-1与峰面积线性关系良好。平均回收率,染料木苷为104.27%,RSD为2.61%(n=9);染料木素为97.16%,RSD为5.54%(n=9)。不同产地千斤拔药材中染料木苷和染料木素的含量有明显差异。结论:建立的含量测定方法操作简便、分离效果好、准确,能满足千斤拔药材中染料木苷和染料木素含量的准确测定,为千斤拔药材的质量评价以及合理开发利用提供了科学依据。     

HPLC测定消炎止咳片中吗啡的含量

目的:建立消炎止咳片中吗啡的HPLC测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Sinochrom-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0..1 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-甲酸(7.5∶92.5∶0.1),流速0.7 mL· min-1,检测波长284 nm.结果:吗啡在42.40 ～ 424.0 mg· L-1线性关系良好(r =0.999 9),平均加样回收率为100.25％,RSD 1.67％.结论:采用HPLC测定吗啡,方法简单、灵敏、准确,可用于消炎止咳片中吗啡的含量测定.     

冠脉宁片中樟脑的限量检查及冰片的含量测定研究

 目的 建立冠脉宁片中冰片的质量控制方法。方法 采用气相色谱法分别对龙脑、异龙脑进行含量测定,并对樟脑进行检查。FID检测器;色谱柱为HP-INNOWAX聚乙二醇毛细管柱(30 m×0.25 mm, 0.25 μm);初始温度120 ℃,以每分钟20 ℃升至180 ℃,保持7 min。结果 龙脑、异龙脑和樟脑分别在3.980 μg·mL^-1~1.990 mg·mL^-1, 4.012 μg·mL^-1~2.051 mg·mL^-1, 4.170 μg·mL^-1~0.208 5 mg·mL^-1内呈良好的线性关系。平均回收率分别为100.10%(n=6,RSD=1.6%);98.21%(n=6,RSD=1.8%);101.00%(n=6,RSD=1.2%)。结论 所建立的方法简便,准确,快速,可用于冠脉宁片中冰片的质量控制。     

血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞结缔组织生长因子的表达

目的:研究血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMC)中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达,探讨其防治糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾纤维化的机制.方法:将培养的HMC分为低糖组(LG组,5.5 mmol·L~(-1)D-葡萄糖)、高糖组(HG组,25 mmol·L~(-1) D-葡萄糖),每组均设血竭素高氯酸盐浓度7.5 μmol·L~(-1)对照,作用24,48 h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CTGF mRNA和蛋白水平的表达.结果:与高糖组比较,低糖组中CTGF mRNA和蛋白表达均显著性减少(P＜0.01),高糖组加血竭素高氯酸盐干预后,CTGF mRNA和蛋白表达显著性减少(P＜0.01).结论:血竭素高氯酸盐可以抑制CTGF的表达,这可能是其防治DN肾纤维化的部分机制.     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中16种胆汁酸及在甘草减毒研究中的应用

目的建立测定大鼠血浆中16种胆汁酸浓度的LC-MS/MS法。方法鼠血浆样品经过甲醇沉淀蛋白后,上清液挥干,流动相复溶后,用XtimateTMC18柱分离,以甲醇-醋酸铵及甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.25 m L·min-1,进样5μL分析。结果 16种胆汁酸在0.005 6~3.800 0μmol·L-1内,线性关系良好,定量下限浓度为0.005 6μmol·L-1,低、中、高浓度的萃取回收率在70.3%~107.2%之间,日内、日间RSD均小于12.9%。结论该方法准确可靠,灵敏度高,处理简便,适用于血浆中胆汁酸浓度的测定,为临床血浆样品中胆汁酸含量测定提供参考。     

超高效液相色谱法同时测定知母中芒果苷等6种成分的含量

 目的 建立同时测定知母中新芒果苷,芒果苷,知母皂苷BⅡ,2,6,4′-三羟基-4-甲氧基苯甲酮,构树宁B,顺-扁柏树脂酚的UPLC方法。方法 采用ACQUITY UPLC, HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8 μm),流动相为乙腈-0.03%的磷酸水溶液梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,检测波长采用210和192 nm。结果 新芒果苷,芒果苷,知母皂苷BⅡ,2,6,4′-三羟基-4-甲氧基苯甲酮,构树宁B,顺-扁柏树脂酚的质量浓度与峰面积分别在15.00～299.6 μg·mL^-1, 8.80～175.6 μg·mL^-1, 40.00～800.0 μg·mL^-1,2.300～45.60 μg·mL^-1, 0.420～8.50 μg·mL^-1, 0.400～9.00 μg·mL^-1内呈良好的线性关系。平均加样回收率（n=9）均在97.7%~100.6%之间,RSD均小于1.2%。结论 该方法快速、准确、简便,可作为同时测定知母中新芒果苷,芒果苷,知母皂苷BⅡ,2,6,4′-三羟基-4-甲氧基苯甲酮,构树宁B,顺-扁柏树脂酚的方法。     

高效液相色谱串联质谱法测定唾液中氨磷汀浓度

 目的 建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)直接检测唾液中氨磷汀(amifostine,AMI)的方法。方法 收集6位健康成年志愿者唾液为基质,石杉碱甲（huperzine-A,HupA）为内标,采用蛋白沉淀法,用高效液相色谱串联质谱测定唾液中的氨磷汀。色谱柱为ZIC-HILIC亲水色谱分析柱（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）,质谱分析采用多反应监测扫描模式（MRM）,离子源为电喷雾离子源（ESI）。结果 氨磷汀在唾液中检测到的线性范围为0.938～30 mg·L^-1 ,线性关系良好,典型代表方程为：y=0.072x-0.005 26 (r=0.999 1) (n=6),定量下限为0.938 mg·L^-1(S/N>10)。唾液样品的低、中、高3个质控浓度（1.0、5.0和25 mg·L^-1）批内、批间精密度(RSD)均小于15%,其方法回收率均大于85%。结论 本实验所建立的氨磷汀检测方法直接、快捷、简便、灵敏度高及定性好,适用于唾液中氨磷汀的测定及科学研究。     

高效液相色谱-电喷雾源-质谱联用法测定紫杉醇热敏脂质体及其大鼠体内药动学研究

 目的 建立测定大鼠血浆中紫杉醇的高效液相色谱-电喷雾源-质谱联用（LC-MS/MS）方法,并进行大鼠体内药动学研究。方法 血浆经NaHCO₃溶液（pH 8.0）碱化后,用叔丁基甲醚提取。液相分离采用Zorbax SB C₁₈（2.1 mm×50 mm,3.5 μm）分析柱,柱温25 ℃,以甲醇-水（含0.5 mmol·L^-1乙酸铵）（70∶30,V/V）为流动相,流速为0.3 mL·min^-1,进样量5 μL;采用四级杆质谱检测器,电喷雾源（ESI）,正离子方式检测,在选择离子监测（SIM）模式下检测离子对m/z 876.3→308.1（紫杉醇）和m/z 830.2→549.2（多西他赛）。两组SD大鼠分别尾静脉推注7 mg·kg^-1紫杉醇热敏脂质体与紫杉醇注射液,采集血样后采用高效液相色谱-电喷雾源-质谱联用法测定血药浓度,计算主要药物动力学参数。结果 血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品的分析时间为3.5 min;紫杉醇在2~1 000 ng·mL^-1内呈良好的线性关系（r>0.998 5）,定量限为2 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD均小于15%。紫杉醇热敏脂质体的t_1/2β、MRT、AUC和CL与紫杉醇注射液均具有显著性差异。结论 本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于紫杉醇的药动学研究。与紫杉醇注射液相比,紫杉醇热敏脂质体能控制药物的释放,在一定程度上减轻了急性毒性,提高机体耐受性。     

小檗碱增强K562/DOX细胞对多柔比星敏感性的研究

 目的 探讨小檗碱增强耐药K562/DOX细胞对化疗药多柔比星的敏感性的作用。方法 四甲基偶氮唑蓝法检测小檗碱的细胞毒性及其对多柔比星抗肿瘤活性的增强作用;高内涵活细胞成像系统检测无毒剂量小檗碱作用后,多柔比星在K562/DOX细胞内的蓄积量;PI/Hoechst33342双染法检测小檗碱对多柔比星诱导的K562/DOX细胞凋亡的影响;罗丹明123蓄积实验检测小檗碱对P-糖蛋白外排功能的影响。结果 1 μmol·L^-1为小檗碱的无毒剂量,在此无毒剂量下,小檗碱使多柔比星对K562/DOX细胞的IC₅₀降低了1.5倍;1 μmol·L^-1小檗碱可使多柔比星在K562/DOX细胞内的蓄积量增加,增强多柔比星诱导的K562/DOX细胞凋亡, 增加K562/DOX细胞内罗丹明123的蓄积量,从而抑制P-糖蛋白的外排功能。结论 小檗碱可通过抑制K562/DOX细胞膜上P-糖蛋白的外排功能,增加K562/DOX细胞内多柔比星浓度,促进多柔比星对耐药细胞的诱导凋亡作用,逆转K562/DOX细胞的多药耐药性。     

刺囊酸预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

 目的 研究刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法 用终浓度分别为0.5, 5和50 μmol·L^-1的刺囊酸预处理原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞1 h, 予以缺氧3 h后, 再复氧2 h后,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、丙二醛含量及热休克蛋白70表达等指标,观察其对缺氧/复氧损伤的延迟保护作用,并探讨一氧化氮合成酶抑制剂0.1 mmol·L^-1的N-硝基-L-精氨酸甲酯、促分裂原活化蛋白激酶抑制剂50 μmol·L^-1的PD98059和1 μmol·L^-1K⁺-ATP通道阻断剂格列苯脲对其保护作用的影响。结果 与缺氧/复氧组比较,不同剂量的刺囊酸预处理组能显著提高细胞存活率,降低乳酸脱氢酶活性,呈剂量依赖性,且显著能增加超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低丙二醛含量,增加热休克蛋白70表达,能对抗缺氧/复氧损伤;而N-硝基-L-精氨酸甲酯和PD98059能部分取消刺囊酸预处理的上述保护作用。结论 刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤有显著抗氧化作用,且其保护作用机制可能与一氧化氮生成、促分裂原活化蛋白激酶活化及增加热休克蛋白70表达有关。     

反相高效液相色谱法测定兰索拉唑肠溶胶囊中3种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量

 目的 建立兰索拉唑肠溶胶囊中邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯及邻苯二甲酸二丁酯的检定方法。方法 基于RP-HPLC/UV,采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）进行分离,甲醇-水（75∶25）为流动相进行等度洗脱,检测波长230 nm。结果 测定4批兰索拉唑肠溶胶囊中邻苯二甲酸酯的含量。其中在1.4~14 μg·mL^-1内,邻苯二甲酸二甲酯线性方程为Y=48.848ρ-2.811 2（r=0.999 9）;在1.36~20.4 μg·mL^-1内,DEP的线性方程为Y=67.619ρ-30.754（r= 0.999 0）;在1.5~15.5 μg·mL^-1内,邻苯二甲酸二丁酯的线性方程为Y=36.759ρ-4.8507（r=0.999 9）。邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯和邻苯二甲酸二丁酯加样回收率分别为91.3%、96.1%和94.7%,其RSD分别为2.9%、4.4%和4.7%。结论 本方法操作简单,灵敏度高,具有较强的抗干扰能力,可准确测定兰索拉唑肠溶胶囊中邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯和邻苯二甲酸二丁酯的含量。     

葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒作用评价

目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作用48 h后,葫芦素B以剂量依赖方式抑制SK-N-SH细胞的生长,0.143和0.716μmol.L-1葫芦素B固体脂质纳米粒对SK-N-SH细胞的抑制率分别为(34.9±4.6)%和(53.6±6.3)%,与对应浓度的葫芦B原料组的(13.2±2.3)%和(43.4±5.5)%相比较有显著性差异(P<0.05)。葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的IC50为0.508μmol.L-1,而葫芦素B原料为12.6μmol.L-1。细胞形态观察结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)组相比较,葫芦素B原料及葫芦素B固体脂质纳米粒组的细胞密度下降,细胞体积缩小,大多数细胞形状发生改变。流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B原料可将SK-N-SH细胞抑制在S期和G2/M期,而葫芦素B固体脂质纳米粒可把SK-N-SH抑制在G2/M期。结论葫芦素B固体脂质纳米粒与葫芦素B原料药既能抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性,且前者毒性更强。