特应性皮炎患者外周血 PPAR-γ、NF-kB 的表达

目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（ PPAR-γ）及核因子-kappa B （ NF-kB）在特应性皮炎（ AD）患者外周血中的表达水平，探讨其与疾病发病的关系。方法：采用Western blotting 法检测22例AD患者外周血单个核细胞中PPAR-γ、NF-kB的水平，与15例健康志愿者进行比较分析。结果：与正常人对照组相比，PPAR-γ、NF-kB 在 AD 患者外周血中过度表达，差异有统计学意义（ t 值分别为3.45、4.52，P值均＜0.05）。结论：PPAR-γ、NF-kB在AD患者外周血中的表达水平均升高，其表达上调可能与AD发病有关。     

转录因子RORγt和Foxp3在玫瑰糠疹患者外周血单个核细胞中的表达

目的:了解Th17细胞、Treg细胞特异性转录因子RORγt(RORγt mRNA)、Foxp3(Foxp3 mRNA)在急性期玫瑰糠疹(PR)患者外周血单个核细胞中的表达水平,探讨其在玫瑰糠疹急性期发病中的作用。方法:采用荧光实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例玫瑰糠疹急性期患者(PR组)和20例健康体检者(健康对照组)外周血单个核细胞中RORγt和Foxp3mRNA的表达水平。结果:PR组RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达水平均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(t值分别是3.140、2.516,P均0.05);PR组RORγt/Foxp3 mRNA表达水平的比值(2.31±0.90)增大,与健康对照组(0.86±0.40)比较,差异有统计学意义(t=4.445,P0.01)。PR组RORγt mRNA与Foxp3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.811,P0.01);健康对照组RORγt mRNA与Foxp3 mRNA表达水平无相关性(r=-0.253,P0.05)。RORγt mRNA表达水平与玫瑰糠疹严重程度评分(18.33±7.56)呈正相关(r=0.634,P0.05),Foxp3 mRNA表达水平与玫瑰糠疹严重程度评分(18.33±7.56)无相关性(r=0.171,P0.05)。结论:玫瑰糠疹患者外周血RORγt mRNA与Foxp3 mRNA的表达水平均显著增高,且以RORγt mRNA的表达占优。Th17/Treg细胞比例失衡,可能在玫瑰糠疹的发病中起着一定的作用。     

寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体和TNF-α受体mRNA表达的研究

目的 探讨寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA和TNF-α仅受体mRNA的表达及其在银屑病发病机制中的作用.方法 采集50例寻常性银屑病患者外周静脉血,分离单一核细胞后,以RT-PCR法检测其IFN-γ受体mRNA和TNF-α受体mRNA的表达,PASI评分法评估银屑病的严重程度.以24例正常人作对照.结果 50例银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA的表达均值为1.11±0.55,其中37例进行期患者为1.13±0.57,13例静止期患者为1.03±0.52,正常人对照组为0.72±0.17,银屑病患者显著高于正常人对照组(P=0.0034),进行期显著高于正常人对照组(P=0.008),而静止期与正常人对照组差异无统计学意义.正常人对照组和银屑病患者外周血单一核细胞TNF-α受体mRNA的表达水平差异无统计学意义.银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA表达水平与TNF-α受体mRNA表达水平及PASI值均无相关性.结论 IFN-γ受体mRNA在寻常性银屑病患者外周血单一核细胞中异常高表达,但与疾病的活动性无关.     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ及核因子-κB在特应性皮炎患者皮损中的表达及意义

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）及核因子-κB（NF-κB）在特应性皮炎患者皮损中的表达情况,探讨其在特应性皮炎发病中的作用。方法采用免疫组化Westernblotting法检测22例特应性皮炎患者皮损及非皮损,以及12名正常皮肤组织中PPAR-γ、NF-κB的表达。结果特应性皮炎患者皮损组PPAR-γ的阳性表达计数为0.738±0.069,低于正常对照组的0.869±0.048和非皮损组的0.802±0.026（P〈0.05）;特应性皮炎患者皮损组NF-κB的阳性表达计数为0.937±0.039,高于正常对照组的0.735±0.015和非皮损组的0.796±0.068（P〈0.05）;特应性皮炎患者皮损组PPAR-γ和NF-κB表达呈负相关（P〈0.05）。结论特应性皮炎患者皮损组PPAR-γ表达减弱、NF-κB表达增强在发病过程中可能起一定的作用,为特应性皮炎患者的临床治疗提供了新的思路。     

特应性皮炎患者外周血和皮损miR-155的表达及其与Th17细胞相关性研究

【摘要】 目的 探讨特应性皮炎（AD）患者外周血与皮损组织中miR-155、Th17细胞、Th17细胞特异性转录因子RORγt及效应性细胞因子IL-17的表达及其相关性。 方法 用实时荧光定量RT-PCR检测37例AD患者外周血单一核细胞（PBMC）中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平,流式细胞仪检测Th17细胞比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中IL-17的含量;并以33例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。检测5例重度AD患者皮损与皮损周围组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA的表达水平,并以5例正常皮肤组织标本为对照。 结果 AD患者PBMC中miR-155、RORγt及IL-17的mRNA表达水平均明显高于健康对照（分别为5.78 ± 1.78比1.82 ± 0.46,6.08 ± 1.04比1.64 ± 0.52,7.09 ± 1.75比1.71 ± 0.46,均P <0.01）;AD患者PBMC中Th17细胞比例及IL-17血浆含量均明显高于健康对照,分别为（1.78 ± 0.52）%比（0.47 ± 0.15）%,（32.51 ± 6.15） pg/ml比（11.80 ± 2.24） pg/ml,均P < 0.01。AD患者皮损、皮损周围组织及正常皮肤组织中miR-155、RORγt及IL-17 mRNA表达水平间比较,差异均具有统计学意义;皮损 > 皮损周围组织 > 正常皮肤组织,F值分别为41.803、17.040和37.064,均P < 0.01。AD患者PBMC中miR-155 mRNA表达水平与疾病严重程度评分、Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平、IL-17 mRNA表达水平及IL-17血浆含量呈正相关,r值分别为0.405、0.426、0.402、0.410、0.408,均P < 0.05;皮损及皮损周围组织中miR-155 mRNA表达水平与RORγt、IL-17的mRNA表达水平呈正相关,r值分别为0.428和0.435,均P < 0.05。 结论 AD患者miR-155、Th17细胞及其效应性细胞因子高表达可能与AD发病有关。     

NB-UVB治疗前后特应性皮炎患者外周血Th17/Treg细胞及其转录因子的变化

目的观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)对特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)和转录因子RORγt,Foxp3 mRNA水平的影响,探讨NB-UVB治疗AD的作用机制。方法选取52例AD患者,使用NB-UVB照射治疗8周,采用流式细胞术检测光疗前后外周血Th17细胞和Treg细胞百分比,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法,检测光疗前后外周血单一核细胞中转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。采用欧洲AD评分标准(SCORAD)判断疾病严重程度。另选35例健康体检者作为正常对照组。结果治疗前,AD患者外周血Th17细胞百分比、Th17/Treg比值及RORγt mRNA水平高于正常对照组,而Treg百分比及Foxp3 mRNA的表达低于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,Th17百分比、Th17/Treg比值及RORγt mRNA水平明显降低,与治疗前相比差异有统计学意义(P0.01);而Treg百分比及Foxp3 mRNA的水平明显升高,与治疗前相比差异也有统计学意义(P0.01)。经NB-UVB治疗8周后,SCORAD评分明显下降(P0.01)。结论 AD的发生及病情严重程度与外周血Th17细胞、RORγt mRNA水平的高表达及Treg细胞、Foxp3 mRNA水平的低表达有关;NB-UVB可能通过调节患者外周血Th17/Treg细胞失衡及其特异性转录因子表达水平而发挥其治疗作用,这可能是NB-UVB治疗AD的机制之一。NB-UVB治疗AD安全有效。     

狼疮肾炎患者外周血单个核细胞NF-κB的表达及其意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学法检测狼疮肾炎患者(36例)和正常对照组(20例)外周血单个核细胞(PBMCs)内NF-κB的表达.结果:与正常对照组相比,狼疮肾炎患者NF-κB的表达水平明显升高(P<0.01);病情活动期患者NF-κB的表达水平高于病情缓解期患者(P<0.05);治疗后NF-κB的表达明显下降.结论:狼疮肾炎患者外周血单个核细胞NF-κB的表达水平可作为判断SLE病情活动的指标.     

TARC与CCR4在特应性皮炎患者外周血中的表达

目的:检测胸腺和活化调节趋化因子(TARC)与其受体CCR4在特应性皮炎(AD)外周血中的表达.方法:酶联免疫吸附法检测45例AD患者及30名正常人血清TARC水平;流式细胞仪检测外周血单核细胞CCR4的表达.结果:AD患者血清TARC水平为(1169.1±106.5)pg/mL,显著高于对照组(337.3±45.6)pg/mL的水平(P<0.01).CCR4表达水平为(60.1± 2.4)%,较对照组显著升高(P<0.01);TARC和CCR4表达水平均与疾病严重程度呈正相关(均P<0.01).结论:TARC与CCR4在AD的发病机制中可能起一定作用.     

葡萄球菌肠毒素B对特应性皮炎患者外周血单个核细胞分泌IL-17的影响

目的: 评价葡萄球菌肠毒素B(SEB)对特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)患者外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-17的影响.方法: 从11例AD患者和8名对照者的外周血中分离PBMC,用CD28单抗和SEB刺激96 h后,ELISA法检测IL-17水平.放免法检测患者血清总IgE.结果: SEB对AD患者和健康人PBMC产生IL-17均有显著促进作用(P<0.01),SEB的促进作用强于CD28单抗(P<0.05).IL-17水平与血清总IgE无相关性.结论: IL-17可能在AD的发病中起一定作用.     

CKLF1及其拮抗肽C19在不同时期特应性皮炎患者外周血T细胞亚群中的作用

目的探讨趋化素样因子1(CKLF1)及其拮抗肽C19对不同时期特应性皮炎(AD)患者外周血T细胞亚群的作用。方法应用淋巴细胞分离液分离急性期和慢性期AD的外周血单个核细胞(PBMC),运用流式细胞术(FACS)检测CKLF1在其外周血T细胞亚群中的表达,并与正常对照组比较;体外诱导培养AD患者的Th1,Th2细胞亚群,以不同浓度CKLF1和(或)C19刺激上述细胞,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中IFN-γ,IL-4,IL-17水平变化。结果急性期AD患者Th2细胞中CKLF1的表达高于对照组(P0.05),慢性期AD患者Th1细胞中CKLF1的表达高于对照组(P0.05)。AD患者外周血CKLF1在Th17细胞中表达与正常对照组间差异无统计学意义。急性期AD患者体外培养的Th2细胞产生的IL-4水平高于对照组(P0.05),慢性期AD患者体外培养的Th1细胞产生的IFN-γ水平高于对照组(P0.05)。IL-17在急性期和慢性期AD患者体外培养的Th1细胞中的水平与正常对照组相比差异均无统计学意义。急性期AD患者的Th2细胞经CKLF1刺激,产生IL-4水平高于未刺激组(P0.05)。经CKLF1和C19(10ng/m L)共同培养后,IL-4的水平降低。慢性期AD患者的Th1细胞经CKLF1刺激,产生IFN-γ的水平高于未刺激组(P0.05)。经CKLF1和C19(10ng/m L)共同培养后,IFN-γ的水平无显著改变。结论 CKLF1在AD患者发病中可能起着重要的病理性作用,CKLF1的拮抗肽C19可能对急性期AD患者具有潜在治疗作用。     

湿疹及皮炎

20121568特应性皮炎患儿外周血转录因子RORγt与Foxp3的表达/邱盼盼(滨州医学院附院皮肤科),王忠永∥中华皮肤科杂志.-2012,45(4).-252～254采用荧光实时定量PCR检测63例特应性皮炎(AD)患儿及54例正常儿童外周血单核细胞RORγt基因与Foxp3基因的表达情况。结果:AD患儿外周血中RORγt与Foxp3基因的表达水平均显著高于正常对照组(P<0.01);AD患儿重度期RORγtmRNA水平明显高于轻度期与中度期(P<0.01);Foxp3mRNA在轻、中、重组间两两比较,差异均无统计学     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达

寻常性银屑病是一种以皮肤鳞屑性红斑为典型皮损的慢性复发性炎症性皮肤病,多项研究表明,其发病与炎症和角质形成细胞的异常凋亡相关[1],但其具体发病机制尚不清楚.过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferatoractivated receptor,PPAR)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,包括PPAR-α、PPAR-β/δ和PPAR-γ三种表型.Pershadsingh[2]和Venkatraman等[3]报道PPAR-γ激动剂可以治疗银屑病,但其作用尚不清楚.本研究通过检测PPAR-γmRNA在寻常性银屑病患者的皮损、非皮损中的表达变化,探讨PPAR-γ在银屑病发病中的作用.     

白癜风患者外周血白介素17和孤独核受体的表达

目的 探讨Thl7细胞在白癜风免疫发病机制中的作用.方法 采用双抗体夹心ELISA法检测白癜风患者进展期、稳定期和正常人外周血血清中白介素17(IL-17)水平;采用实时荧光定量RT-PCR方法检测外周血单一核细胞中孤独核受体(RORγt)mRNA表达水平,并分析其与疾病活动的相关性.结果 进展期与稳定期白癜风外周血中...     

MiR-146a在寻常型银屑病患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义

目的:检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a的表达情况,并探讨其与寻常型银屑病发病的相关性。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测30例寻常型银屑病患者外周血PBMC中的miR-146a的相对表达量,与30例正常对照组进行比较并对其与寻常型银屑病患者PASI评分行相关性分析。结果:寻常型银屑病患者外周血PBMC中的miR-146a的表达明显高于正常对照组,进行期患者组明显高于静止期患者组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。寻常型银屑病患者外周血PBMC中miR-146a的表达与PASI评分呈正相关性(r=0.62,P<0.05)。结论:寻常型银屑病患者外周血PBMC中miR-146a异常高表达,并与寻常型银屑病的分期相关,提示miR-146a在寻常型银屑病的发病中起重要作用。     

尖锐湿疣Toll样受体TLR3与TLR7水平的检测

目的: 检测Toll样受体TLR3和TLR7在尖锐湿疣(CA)中的水平.方法: 应用实时定量PCR(real time-PCR)法检测了30例CA患者皮损和30例健康人外周血单个核细胞中TLR3和TLR7 mRNA的表达,用流式细胞仪分析了外周血白细胞中TLR3和TLR7的表达.结果: CA患者皮损与外周血单个核细胞中TLR3和TLR7 mRNA表达水平均显著高于健康对照组(均P<0.001),外周血白细胞中TLR3、TLR7的表达率分别为(23.86±2.56)%与(55.15±4.18)%,显著高于健康对照组(均P<0.001).结论: Toll样受体TLR3、TLR7可能参与了机体对人乳头瘤病毒的识别,在CA的发病机制中起重要作用.     

银屑病患者外周血干扰素γ和白介素18的表达

目的 探讨进行期银屑病患者外周血干扰素γ(IFN-γ)和白介素18(IL-18)的表达和相关性,及各型银屑病患者外周血IFN-γ的表达变化。方法 进行期寻常性银屑病20例,红皮病性银屑病19例,脓疱性银屑病10例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IFN-γ表达水平;对进行期寻常性银屑病患者,检测血浆中IL-18表达水平;检测葡萄球菌肠毒素(SEB)刺激下,进行期寻常性银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)上清液中IFN-γ和IL-18的表达水平。结果 进行期寻常性银屑病患者血浆IFN-γ水平为8.91±2.65,红皮病性银屑病为10.19±5.93,脓疱性银屑病为17.96±10.44,各型银屑病患者均高于正常人(5.70±2.82)。进行期寻常性银屑病患者血浆IL-18水平高于正常人。进行期寻常性银屑病患者PBMC在SEB刺激组IFN-γ和IL-18表达水平均高于空白对照组,且IFN-γ与IL-18表达水平呈显著正相关,r=0.55,P<0.05。结论 在银屑病的发病和进展中,检测IFN-γ的表达量,对早期判断银屑病病情进展、转归和治疗效果有指导意义。IL-18表达增高,推测IL-18可能也参与银屑病发病。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B对特应性皮炎患者外周血细胞因子的影响

目的:初步探讨特应性皮炎(AD)患者外周血单个核细胞(PBMC)Th1、Th2的状态及超抗原的致病机制。方法:分别用金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B(SEB)和植物凝血素(PHA)刺激体外培养的AD患者及健康对照组PBMC,双抗体夹心ELISA法检测PBMC产生的白介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ的含量。结果:PHA刺激后,AD患者PBMC产生的IFN-γ明显低于健康对照组(P<0.01),而两组间IL-4水平差异无显著性(P>0.05);SEB刺激后,AD患者PBMC产生的IL-4水平比健康对照组明显增高(P<0.01),IFN-γ水平明显降低(P<0.01)。结论:AD患者PBMC经SEB刺激后,Th2、Th1细胞亚群失衡,表现为Th2细胞亚群呈优势表达。     

斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1/Th2细胞因子研究

目的:研究斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1型细胞因子(如IFN-γ)和Th2型细胞因子(如IL-4、IL-10)水平,探讨其在斑秃发病中所起的作用及与病情活动性的关系。方法:采用ELISA双抗体夹心法检测36例斑秃患者(其中活动期19例、非活动期17例)和20例正常对照者外周血单个核细胞产生IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果:活动期斑秃患者外周血单个核细胞产生IFN-γ水平显著高于正常对照和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者比正常对照者明显增高(P<0.05);活动期患者产生IL-4水平明显低于正常对照组(P<0.05),也低于非活动期患者,但差异无统计学意义(P>0.05),非活动期患者和正常对照组相比明显降低(P<0.05);活动期患者产生IL-10水平显著低于正常对照组和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者与正常对照相比明显降低(P<0.05)。结论:斑秃患者体内可能存在Th1型细胞因子占优势,Th1型细胞因子如IFN-γ在斑秃的免疫发病中起到重要作用,并且与病情活动性有关联。     

尖锐湿疣患者IFN-γ及IL-4细胞因子水平的研究

目的:探讨IFN-γ、IL-4细胞因子水平在尖锐湿疣(CA)发病机制中的作用。方法:采用RT-PCR法检测了CA患者外周血单个核细胞的IFN-γ、IL-4的mRNA表达。结果:CA患者IFN-γmRNA及IL-4mRNA均有所表达,且与健康对照组相比无显著差异(P>0.05);短病程组IFN-γmRNA表达明显增加,与健康对照及长病程组相比均有显著性差异(P<0.05),长病程组IL-4mRNA表达增加,与健康对照及短病程组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论:CA长病程组Th1型细胞因子表达水平下降,Th2型细胞因子呈优势表达。Th1/Th2型细胞因子失衡可能是CA长期不愈的机制之一。     

他克莫司及金黄色葡萄球菌肠毒素B对特应性皮炎外周血Th17细胞的影响

【摘要】 目的 探讨Th17细胞在急性期特应性皮炎（AD）患儿外周血单一核细胞（PBMC）中的表达,他克莫司和金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）对AD患儿外周血Th17细胞的影响。 方法 分离急性期中、重度AD患儿及健康对照儿童PBMC,分别加入佛波酯和离子霉素、他克莫司、金黄色葡萄球菌肠毒素B培养,流式细胞仪检测Th17、Th1、Th2细胞比例,ELISA检测培养上清中IL-17、IFN-γ、IL-4表达,RT-PCR法检测Th17特异性核转录因子RORγt mRNA表达。 结果 佛波酯和离子霉素处理后,AD患儿外周血Th17、Th2细胞比例及相关细胞因子IL-17、IL-4水平明显高于健康对照组（P < 0.01）。Th1细胞比例及IFN-γ水平低于健康对照组（P < 0.01）,ROR γt mRNA高于健康对照组（P < 0.01）。他克莫司处理后,AD组和对照组IL-17、IFN-γ、IL-4及ROR γt mRNA水平均显著降低（P < 0.01）。SEB处理后,AD组 Th17细胞比例,IL-17和 RORγt mRNA水平显著高于对照组（P < 0.01）,Th1细胞比例及IFN-γ水平低于对照组（P < 0.01）,Th2细胞比例及IL-4水平高于对照组（P < 0.01）。 结论 他克莫司对AD患儿和健康对照PBMC分泌IL-17、IFN-γ、IL-4均有明显的抑制作用。SEB增强AD患儿外周血Th17细胞表达。