结肠电刺激对肠易激大鼠模型内脏高敏感性的影响

目的　探讨结肠电刺激对应激诱导产生的内脏高敏感性的影响。　方法　48只大鼠等分为模型组、对照组,模型组由双重应激诱导产生,其内脏高敏感性程度由肌电图及腹部撤退反射的分数来评估,对照组不接受双重应激。建模后在所有大鼠的结肠浆膜层包埋刺激电极,待手术恢复后分别对各组大鼠进行长脉冲电刺激、短串脉冲电刺激、无电刺激,刺激结束后再次对模型组、对照组大鼠的内脏高敏感性程度进行评估。　结果　通过应激诱导,模型组大鼠对结肠扩张压力的敏感性与对照组比较有显著增加（P<0.01）。串短脉冲、长脉冲结肠电刺激相较无电刺激能够显著降低大鼠的内脏高敏感性　（P<0.01）。　结论　串短脉冲、长脉冲结肠电刺激能够显著降低大鼠内脏高敏感性。     

逍遥散对内脏高敏感大鼠血浆及结肠黏膜鸟苷素表达的干预作用

目的:观察逍遥散对内脏高敏感肠易激综合征(IBS)大鼠血浆及结肠黏膜鸟苷素表达的干预作用.方法:70只SD大鼠随机分为正常组20只和实验组50只,实验组采用慢性束缚+夹尾刺激作为复合应激原复制IBS大鼠模型.造模第28天,正常组、实验组各随机抽取10只大鼠处死,检测结肠黏膜病理.实验组再随机分为模型组、匹维溴胺组、逍遥散高、中、低剂量组,各8只.检测各组大鼠血浆、结肠黏膜鸟苷素的表达水平及内脏敏感性变化.结果:模型组大鼠结肠分泌增加,结肠运动增强,内脏敏感性增高,血浆、结肠黏膜鸟苷素表达水平增高,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).逍遥散能提高大鼠腹部收缩反射最小容量阈值(P<0.05),降低血浆、结肠黏膜鸟苷素含量,降低结肠运动(P<0.05,P<0.01).结论:IBS大鼠血浆、结肠黏膜鸟苷素表达与结肠运动功能障碍、内脏敏感性异常有一定的相关性,逍遥散可降低内脏高敏感IBS大鼠结肠分泌与运动,其机制可能与降低血浆、结肠黏膜鸟苷素的表达水平,调节其肠道运动障碍有关.     

机械和化学刺激对大鼠内脏神经敏感性的影响

目的：通过对成年大鼠给予机械和化学伤害性刺激，探讨内脏痛觉过敏产生的机制。方法：对成年SD大鼠分别行结肠气囊扩张和经肛门灌注芥末油给予机械和化学刺激，在结肠气囊产生不同压力的情况下观察大鼠的行为反射、血压及心率的变化。结果：实验组和正常对照组之间存在着明显的差别。结论：机械和化学因素对内脏的刺激可降低传入神经对肠道伤害性刺激反应的阈值，同时也可以对自律神经产生影响，从而影响血压和心率的变化。     

γ-干扰素体外诱导大鼠脾脏树突状细胞IDO表达的实验研究

目的探讨γ干扰素（IFN-γ）诱导大鼠脾脏树突状细胞（Dc）的吲哚胺2,3-双加氧酶（1D0）的表达情况。方法大鼠脾脏分离培养Dc,进行形态特征观察,流式细胞术检测Dc的表型及确定其纯度。分别用不同浓度的IFN-γ诱导作用Dc后,荧光定量RT—PCR测定IDOmRNA的相对表达水平。结果大鼠脾脏分离培养的DC纯度可达80％以上,培养10d的Dc具有典型的树枝状突起,CD80、CD86的阳性表达分别达75％、90％以上。IDOmRNA的表达水平随IFN-γ的浓度的增大逐渐增加。结论IFN-γ在体外能诱导大鼠脾脏Dc的IDO表达。     

腺苷A3受体激动剂对新生期母婴分离肠易激综合征大鼠内脏高敏感的作用

目的研究腺苷A3受体在新生期母婴分离肠易激综合征(IBS)大鼠模型内脏高敏感中的作用。方法采用新生期Sprague-Dawley雄性大鼠和母婴分离方法建立内脏高敏感模型,分别用腺苷A3受体激动剂2-Cl-IB-MECA及DMSO溶剂作用后,用行为学观察和腹部回缩反射评分来检测内脏痛反应,用免疫组化方法检测腰骶段脊髓背角神经元c-fos蛋白的表达数量和远端结肠中5-羟色胺阳性细胞数目,用ELISA方法检测远端结肠中5-羟色胺的含量。结肠行常规组织学检测。结果与DMSO组比较,2-Cl-IB-MECA组大鼠在40、60和80 mmHg结直肠压力扩张下的AWR评分显著减低(P<0.05),脊髓背角c-fos蛋白免疫反应阳性神经元数目显著减少(P<0.05),结肠黏膜5-羟色胺阳性细胞数目和5-羟色胺含量均显著减少(P<0.05)。两组大鼠在结直肠压力扩张前后,结肠均未见组织损伤或炎症。结论腺苷A3受体激活可能通过减少结肠5-羟色胺的作用未减轻IBS大鼠模型的内脏高敏感,腺苷A3受体可能是治疗IBS内脏高敏感的新靶点。     

心理应激联合腹腔注射卵清蛋白致大鼠内脏高敏感的实验研究

目的：探讨建立腹泻型肠易激综合征（D-IBS）内脏高敏感模型的方法。方法：采用心理应激联合腹腔注射卵清蛋白法诱导IBS大鼠模型,检测其肠道运动（结肠排便时间、排便颗粒）、内脏感觉（腹壁收缩反射、腹壁肌电活动）及结肠黏膜组织学改变。结果：与正常对照组比较,心理应激联合腹腔注射卵清蛋白法可诱导大鼠肠道动力紊乱,内脏敏感性增高（P〈0.05,P〈0.01）,组织学检查无明显炎症性表现。结论：心理应激联合腹腔注射卵清蛋白法建立IBS模型,符合其动力、感觉及组织学特征,可用于IBS的实验研究。     

Nesfatin-1致肠易激综合征内脏高敏感发生机制的研究

肠易激综合征(IBS)是一种慢性肠道功能障碍性疾病,由于病因和发病机制尚未明确,临床治疗效果仍欠佳。Nesfatin-1是一种来源于核组蛋白2的新型脑肠肽,可与多种调节蛋白相互作用,参与机体能量代谢、糖脂平衡、胃肠运动、摄食调节等许多生理和病理过程。内脏高敏感是IBS重要的生物学特征和发病机制之一,Nesfatin-1可通过多种途径在IBS内脏高敏感的病理生理过程中发挥重要作用,因此,Nesfatin-1有望成为治疗IBS内脏高敏感的一个新型靶点,为IBS的临床治疗提供新思路和策略。     

肥大细胞在大鼠肠易激综合征内脏高敏感形成中的作用

目的构建肠易激综合征动物模型,探讨肥大细胞在肠易激综合征动物模型内脏高敏感形成中的作用。方法36只雄性SD大鼠,随机分成对照组、实验组1、实验组2。实验组大鼠腹腔内注射免疫诱导剂,对照组大鼠腹腔注射生理盐水;2周后3组动物分别行气囊直肠扩张,腹部撤离反射（Abdominal withdrawal reflex,AWR）评分;在直肠球囊扩张前实验组2予以腹腔注射肥大细胞膜稳定剂;断颈法快速处死后取回盲部及结肠标本,行肥大细胞甲苯氨兰改良染色,分析3组大鼠肠道粘膜肥大细胞定量数据。结果3组SD大鼠直肠气囊扩张AWR评分结果显示,在注入扩展气体3ml及5ml时,AWR评分实验组1（2.50±0.52、3.91±0.28）、实验组2（2.33±0.49、3.33±0.49）均显著高于对照组1.25±0.45、2.33±0.49（P〈0.01、P〈0.01）;5 ml时实验组1和实验组2AWR分值存在差异（P〈0.05）;3组SD大鼠肠道粘膜HE染色未见明显异常,肥大细胞染色显示,对照组回盲部及结肠在粘膜固有层和粘膜下层肥大细胞数（2.83±0.38、1.58±0.51）明显少于实验组1（6.66±0.65、4.17±0.72）及实验组2（6.58±0.99、4.00±0.72）,两实验组均显著高于对照组（P〈0.01、P〈0.01）。结论肥大细胞参与了IBS动物模型内脏高敏感性的形成。     

环孢素对心脏移植大鼠急性排斥反应及血清IDO活性的影响

目的 探讨不同剂量的强效免疫抑制剂环孢素（CsA）对同种异基因心脏移植大鼠急性排斥反应程度和血清吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）活性的影响.方法 分别以SD和Wistar大鼠为供、受体,建立同种异基因大鼠颈部异位心脏移植模型.18只受体大鼠随机分为对照组、低剂量CsA组（CsA 2 mg·kg-1·d-1）和高剂量CsA组（CsA 15 mg·kg-1·d-1）,每组6只.术后第7天,所有受体大鼠经腹主动脉采集血样后处死,取移植心脏制备组织学检查标本.ELISA法检测血清白介素2（IL-2）和γ干扰素（IFN-γ）水平;高压液相色谱法检测血清犬尿氨酸和色氨酸浓度,计算两者比值并以此估算IDO活性.移植心脏标本常规HE染色,采用Stanford标准进行急性排斥反应程度分级.结果 三组血清IL-2和IFN-γ水平以及IDO活性比较显示,对照组＞低剂量CsA组＞高剂量CsA组,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.三组移植心脏急性排斥反应程度分级结果显示,对照组＞低剂量CsA组＞高剂量CsA组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 CsA可明显减轻同种异基因大鼠移植心脏急性排斥反应程度并降低血清IDO活性,两者变化趋势一致且与CsA的使用剂量有关.提示血清IDO活性监测有可能成为一种无创性移植器官急性排斥反应及其程度的预测和评估方法.     

运动锻炼对雌激素缺乏所致小鼠抑郁样行为的作用及炎症机制

目的 阐明运动锻炼对雌激素缺乏所致小鼠抑郁样行为的影响及其炎症机制,并为运动锻炼治疗更年期抑郁症提供理论依据.方法 将60只雌性小鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术+运动组(Sham+ Ex组)、去卵巢组(Ovx组)、去卵巢+运动组(Ovx+Ex组).建立假手术和去卵巢模型,术后1周,运动组进行为期5周的跑台锻炼.运用糖水实验、旷场实验和悬尾实验来观察各组小鼠的行为学改变情况.提取各组小鼠海马组织,用ELISA试剂盒检测5羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)及炎性细胞因子的水平.结果 与Sham组比较,Ovx组小鼠发生了抑郁样行为改变,包括兴趣缺失、探究性行为减少、绝望情绪增加;运动锻炼可以改善Ovx小鼠抑郁样行为.与Sham组比较,Ovx组小鼠海马中5-HT含量降低(P＜0.0l),IDO含量升高(P＜0.05);给予Ovx小鼠运动锻炼能够逆转上述改变.与Sham组相比,Ovx组小鼠海马中促炎细胞因子IL-1β(P＜0.05)、IL-6 (P＜0.01)和IFN-γ(P＜o.01)含量增加,抑炎细胞因子IL-4 (P＜0.01)、IL-10 (P＜0.05)含量降低;给予Ovx小鼠运动锻炼能够逆转IL-lβ、IFN-γ和IL-4表达的改变.结论 运动锻炼可能通过减轻海马炎症反应来改善雌激素缺乏所致抑郁样行为.     

5-羟色胺系统在肠易激综合征内脏感觉过敏机制中的作用研究

目的:研究检测5-羟色胺(5-HT)系统在脑-肠轴上的表达,探索肠易激综合征内脏感觉过敏的神经机制。方法:将新生期SD雄性大鼠随机分为两组,母婴分离组(实验组),在出生后第2～21天,每天将新生大鼠与哺乳期母鼠分离3 h;对照组在出生后第2～21天,不给予任何处理。成年后(出生后60 d)进行结直肠球囊扩张(Colorectal distcnsion,CRD),用免疫组化方法检测脊髓背角、脑干中缝背核5-HT神经元的表达和分布。结果:母婴分离组CRD后中缝背核5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(40.67±4.73)个,脊髓背角5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(20.67±2.08)个,均较对照组显著增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新生期母婴分离引起大鼠5-HT系统在中枢改变,提示早期生活事件所致5-HT系统的异常可能在肠易激综合征内脏感觉过敏发生机制中起重要作用。     

丁酸钠下调IRAK1改善肠易激综合征内脏高敏感

目的 探究丁酸钠改善肠易激综合征(IBS)内脏高敏感性机制。 方法 纳入27例腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者及22例对照共49例参与者,免疫组化检测肠上皮IRAK1蛋白表达量,Spearman秩和检验分析IRAK1蛋白表达与腹痛程度和频率评分相关性。2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠建立IBS疾病动物模型,丁酸钠灌肠干预,结肠扩张实验观察内脏敏感性变化,ELISA检测结肠IRAK1蛋白表达水平,Spearman秩和检验分析动物结肠IRAK1表达与内脏疼痛阈值相关性。以IL-33、丁酸钠干预HT-29细胞,Western blotting观察IRAK1蛋白表达变化。 结果 IBS-D患者结肠上皮IRAK1蛋白表达高于对照组,结肠上皮IRAK1表达水平与腹痛程度评分呈正相关(r=0.676, P<0.001),与腹痛频率评分呈正相关(r=0.725, P<0.001)。丁酸钠干预可降低IBS动物结肠IRAK1蛋白表达、提高内脏疼痛阈值,动物结肠IRAK1蛋白表达与内脏疼痛阈值呈负相关(r=-0.655,P<0.001)。IL-33可使细胞IRAK1蛋白表达上调,丁酸钠预处理可减弱此效应。 结论 丁酸钠可能通过下调IRAK1蛋白表达水平改善IBS内脏高敏感性。     

鞘内注射促肾上腺皮质激素释放因子对肠易激综合征模型大鼠内脏高敏感性的影响

目的 研究鞘内注射促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)对肠易激综合征模型大鼠内脏高敏感性的影响.方法 将30只大鼠随机分成3组,每组各10只,应用化学刺激方法建立肠易激综合征大鼠模型后,分别给予鞘内注射CRF或预先腹腔注射CRF-1受体拮抗剂CP-154526后再鞘内注射CRF,对照组则注射生理盐水;实验后所有大鼠给予直肠内球囊扩张,检测球囊扩张引起腹部收缩反射的最小容量阈值及球囊不同容量扩张时腹部收缩反射的次数,以评价鞘内注射CRF对肠道敏感性的影响.应用免疫组织化学染色及计算机图像分析系统半定量分析脊髓后角即刻早基因(c-fos)表达.结果 直肠内球囊扩张时,鞘内注射CRF组引起腹部收缩的最小容量阈值为(0.62±0.10)ml,高于其他2组[分别为(0.52±0.09)ml、(0.56±0.08)ml;F=3.25;P＜0.05].直肠球囊扩张体积1.0 ml时鞘内注射CRF组腹部收缩反射次数为(9.10±1.97)次,明显低于其他2组[分别为(14.4±1.71)次、(15.6±2.32)次;F=29.4;P＜0.01];体积1.5 ml、2.0 ml高容量扩张时3组间差异无显著性(P＞0.05).鞘内注射CRF组腰骶段脊髓后角c-fos阳性神经元细胞相对切面面积及OD值均明显低于其他2组(P＜0.01).结论 鞘内注射CRF能够降低肠易激综合征模型大鼠内脏高敏感性,并减少其腰骶段脊髓后角c-fos的表达.     

乙酸联合束缚应激对大鼠内脏敏感性及肠道肥大细胞状态的影响

目的：探讨腹泻型肠易激综合征动物模型的建立方法及模型评估。方法将30只成年SD大鼠随机分为乙酸刺激加束缚应激组（n＝10只）,束缚应激组（n＝10只）,和正常对照组（n＝10只）。采用乙酸刺激加束缚应激方法建立IBS动物模型,进行大便情况评估和直肠敏感性测试,盐酸甲苯胺蓝染色观察肠道肥大细胞数量及脱颗粒现象。结果在实验第7天,模型组大鼠粪便点数较正常组增多,差异有统计学意义（P＜0.05）;乙酸联合束缚应激组稀便数较其余两组增多,差异有统计学意义（P＜0.05）。乙酸联合束缚应激组大鼠直肠敏感性较其余两组增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。乙酸联合束缚应激组大鼠肠道肥大细胞的数量较正常组增多,差异有统计学意义（P＜0.05）,乙酸联合束缚应激组大鼠肠道肥大细胞可见脱颗粒现象。组织学分析显示各组大鼠均无明显的炎症性表现。结论乙酸联合束缚应激可增加大鼠内脏敏感性,并且使大鼠肠道肥大细胞数量增多,细胞脱颗粒现象增强。该综合造模方法能够较好的模拟人类IBS的发病形式,为我们进一步研究IBS的发生发展机制提供了理想的动物模型基础。     

肠易激综合征患者抑郁及焦虑症状分析

目的本研究通过比较肠易激综合征患者与健康人以及男、女IBS患者之间在焦虑、抑郁等方面的差异,探讨精神心理因素在IBS发病中的作用以及性别差异。方法采用焦虑自评量表,抑郁自评量表对119例IBS患者及100例健康人进行评分。结果IBS患者焦虑、抑郁评分显著高于对照组(46.32±15.09vs38.23±12.4,P<0.01;39.57±12.03vs35.08±11.27,P<0.05),伴焦虑抑郁者的消化道症状积分较非焦虑抑郁状态者显著增高(12.11±2.76vs7.54±2.02,P<0.01),IBS患者消化道症状积分与SAS、SDS标准分呈正相关(r=0.529,r=0.466,P<0.05)。女性和男性IBS患者焦虑、抑郁评分有显著性差异(53.48±14.39vs43.27±10.34;45.26±13.21vs34.48±7.80,P<0.05)。结论焦虑、抑郁在lBS患者中比健康人更多见,在IBS发病中起重要作用;男性和女性IBS患者在精神心理因素方面具有显著性差异。     

肠易激综合征患者抑郁及焦虑症状分析

目的本研究通过比较肠易激综合征患者与健康人以及男、女IBS患者之间在焦虑、抑郁等方面的差异，探讨精神心理因素在IBS发病中的作用以及性别差异。方法采用焦虑自评量表，抑郁自评量表对119例IBS患者及100例健康人进行评分。结果IBS患者焦虑、抑郁评分显著高于对照组（46.32±15.09 VS 38.23±12.4，P〈0.01；39.57±12.03 VS 35.08±11.27,P〈0.05），伴焦虑抑郁者的消化道症状积分较非焦虑抑郁状态者显著增高（12.11±2.76 VS 7.54±2.02，P〈0.01），IBS患者消化道症状积分与SAS、SDS标准分呈正相关（r=O.529，r=0.466，P〈0.05）。女性和男性IBS患者焦虑、抑郁评分有显著性差异（53.48±14.39 VS 43.27±10.34；45.26±13.21 VS 34.48±7.80，P〈0.05）。结论焦虑、抑郁在1BS患者中比健康人更多见，在IBS发病中起重要作用；男性和女性IBS患者在精神心理因素方面具有显著性差异。     

针刺上巨虚穴对慢性内脏痛敏肠易激综合征模型大鼠血清胃肠激素的影响

目的 观察针刺上巨虚穴对慢性内脏痛敏肠易激综合征(IBS)模型大鼠胃动素(MTL)、生长抑素(SS)的影响.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,其中模型组和电针组大鼠采用直肠球囊扩张刺激法持续刺激15 d制备慢性内脏痛敏IBS模型.电针组隔日1次针刺双侧上巨虚穴10 d,采用放射免疫分析法检测各组...     

功能性磁共振成像技术在消化道内脏感知研究中的应用

随着对胃肠道疾病的深入研究,人类对内脏感觉在胃肠道疾病发病中所起到的作用有了越来越多的认识.内脏感觉过敏(或称内脏高敏感)被认为是某些消化道疾病(如功能性胃肠疾病及胃食管反流病等)的重要发病机制之一.内脏感觉过敏可能由外周及/或中枢神经通路异常导致.在研究内脏敏感性的中枢途径,即脑功能状态时,通常采用间接方法.其中包括:(1)生理学方法,常见的有脑诱发电位(cerebral evoked potential,CEP)、脑磁图(magnetoencephalography,MEG)以及脑电图(electroencephalogram,EEG);(2)影像学方法,常见的有正电子发射断层扫描(positron emission tomography,PET)和功能性磁共振成像技术(functional magnetic resonance imaging,fMRI)[1,2].CEP,MEG及EEG可直接反映神经活动,具有较高的时间分辨率,但无法形成直观图像,空间定位能力差[3],因而应用相对受限.PET通过示踪剂成像,具有一定的侵入性和放射性[4].fMRI则是将神经活动和高分辨率磁共振成像技术结合形成脑功能图像,是目前人们所掌握的唯一无侵入性﹑无创伤、可精确定位的人脑高级功能研究手段.从上世纪90年代开发以来,目前已经广泛应用于神经、心理、视觉、认知等领域的研究,对内脏感觉的研究也正在起步.     

杏仁核在精神应激诱发IBS内脏高敏感形成中的研究进展

内脏高敏感（visceral hypersensitivity）是肠易激综合征（irritable bowel syndrome, IBS）等功能性胃肠病的核心发病机制。长期精神应激可诱发内脏高敏感并加重IBS患者腹痛等症状,杏仁核（amygdala）则是参与精神应激反应的重要核团。研究发现机械刺激（如结直肠扩张）可导致IBS患者的杏仁核被持续激活。现概述杏仁核在精神应激诱发IBS内脏高敏感形成中的神经影像学、神经内分泌机制以及相关神经环路的研究进展,并对以杏仁核为靶点在治疗IBS等疾病中可能的研究方向作一简单探讨。     

补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对肠易激综合征内脏高敏感大鼠的治疗作用

目的：：比较补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对肠易激综合征( IBS)内脏高敏感大鼠的治疗作用。方法：新生SD大鼠48只,随机分为6组,各8只。除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法复制内脏高敏感大鼠模型,于造模第6周起,给药组分别给予补骨脂-肉豆蔻醇水双提物、醇提物、水提物和匹维溴铵灌胃,1次/天,连续2周。观察各组大鼠结肠组织病理学变化及大鼠内脏高敏感性相关指标,并采用免疫荧光检测大鼠结肠促肾上腺皮质激素释放因子( CRF)和CRF1型受体蛋白表达。结果：补骨脂-肉豆蔻醇水双提物、醇提物、水提物均能够升高内脏高敏感性大鼠腹部回缩反射阈值( P<0.05~P<0.01),降低结肠CRF、CRF1型受体表达。结论：补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对内脏高敏感性大鼠均有一定的治疗作用,以补骨脂-肉豆蔻醇提物疗效最佳。