燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠保护作用及机制研究

目的:探究燧心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的保护作用及机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、模型组(B组)、燧心胶囊高剂量(10.8 g/kg)组(C组)、燧心胶囊低剂量(2.7 g/kg)组(D组)、卡托普利(5.83 mg/kg)组(E组)。连续给药12周后,测定各组大鼠心输出量,血流动力学监测左室收缩压(LVESP)、左室舒张压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),心肌组织钠钙交换蛋白(NCX)及肌浆网钙泵2a(SERCA2a)蛋白行IHC染色,利用PCR及Western Blot(WB)实验检测心肌组织中NCX和SERCA2a mRNA及蛋白表达量。结果:①与A组比较,B组NCX蛋白表达量增多,SERCA2a蛋白表达量减少;心输出量降低(P0.05);左心室收缩末期内径LVESP及左心室舒张末期内径LVEDP均显著升高(P0.05),±dp/dtmax明显减慢(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量增多(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量减少(P0.05)。②与B组比较,C组、E组NCX蛋白表达量减少,SERCA2a蛋白表达量增多;心输出量增多(P0.05),LVESP及LVEDP均显著降低(P0.05),±dp/dtmax明显升高(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量减少(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量增多(P0.05)。③D组大鼠上述结果与B组大鼠比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌组织具有保护作用,可通过下调NCX的表达、上调SERCA2a的表达,调节CHF大鼠的心室舒缩功能。     

加味人参四逆汤对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的保护机制研究

【目的】 探讨加味人参四逆汤对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的保护作用。【方法】 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培哚普利组、中药组。除假手术组,其他3组大鼠采用冠状动脉左前降支结扎方法建立急性心肌梗死后心力衰竭模型,假手术组完成穿刺但未结扎冠状动脉左前降支。成功造模后,培哚普利组、中药组大鼠分别对应给予培哚普利片混悬液、加味人参四逆汤灌胃,假手术组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,共14 d。给药结束后,记录大鼠心脏频率（HR）、左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室内压最大下降速率（-dp/dtmax）、左心室内压（LVSP）、左心室舒张末期压（LVEDP）、左心室射血分数（LVEF）的变化;酶联免疫吸附分析检测血清中脑利钠肽（BNP）、肌钙蛋白T（cTnT）、血管紧张素Ⅰ（AngⅠ）、醛固酮（ALD）、心房钠尿肽（ANP）和心肌组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织变化和纤维化情况。【结果】 与假手术组比较,模型组大鼠HR、+dp/dtmax、LVSP、LVEF和心肌组织SOD水平明显降低（P < 0.05）,-dp/dtmax、LVEDP,血清BNP、cTnT、AngⅠ、ALD、ANP水平和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1水平明显升高（P < 0.05）,心肌结构排列紊乱,出现炎性浸润和心肌纤维化;与模型组比较,中药组大鼠HR、+dp/dtmax、LVSP、LVEF和心肌组织SOD水平明显升高（P < 0.05）,-dp/dtmax、LVEDP,血清BNP、cTnT、AngⅠ、ALD、ANP水平和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1水平明显降低（P < 0.05）,心肌结构排列紊乱、炎性浸润和心肌纤维化明显减轻。【结论】 加味人参四逆汤可以改善急性心肌梗死后心力衰竭大鼠的心功能,改善血流动力学,抑制神经体液因子分泌,减轻心肌氧化应激、炎性浸润和纤维化。     

温阳法、滋阴法、活血法及复合法对肾阳虚型心力衰竭大鼠心室重构及心功能的影响

目的 比较温阳法、滋阴法、活血法及复合法对肾阳虚型心力衰竭大鼠心室重构(ventricular remodeling, VR)及心功能的影响。方法 采用切除双侧甲状腺组织后持续静脉滴注阿霉素的方法制备心肾阳虚型心力衰竭大鼠模型。随机分为模型组［生理盐水6 mL/(kg·d)灌胃］、温阳组［温阳健心灵浸膏6 mL/(kg·d)灌胃］、活血组［川芎丹参浸膏6 mL/(kg·d)灌胃］、滋阴组［麦冬知母浸膏6 mL/(kg·d)灌胃］及复合组［阴阳双补健心浸膏6 mL/(kg·d)灌胃］,每组10只。另选取10只大鼠作为正常对照组(正常组),自由饮食饮水。各组连续干预4周。观察大鼠左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左心室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure, LVEDP)、左心室内压最大上升和下降速率［maximal rate of left ventricular pressure of development (+dp/dtmax) and maximal rate of left ventricular pressure of decline (-dp/dtmax)］,测量动脉收缩压(systolic blood pressure, SBP)及舒张压(diastolic blood pressure, DBP),计算平均动脉压(mean arterial pressure, MAP),记录心率(heart rate, HR)。称取心脏质量(heart mass, HM)、左心室(包含室间隔)质量(left ventricular mass, LVM) 及右心室质量(right ventricular mass, RVM), 计算心脏质量指数(heart mass index, HMI) 和左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)。采用RT-PCR法测定大鼠心肌基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂 1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1, TIMP-1)mRNA表达。采用双抗体夹心ELISA法测定血清MMP-9、TIMP-1、N末端脑钠肽(N terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP)的含量。结果 与正常组比较,模型组HR、LVEDP、HM、LVM、HMI、RVM、LVMI、NT-proBNP、MMP-9含量及MMP-9 mRNA升高, SBP、DBP、MAP、LVSP、±dp/dtmax、TIMP 1含量及TIMP-1 mRNA降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,温阳组SBP、DBP及±dp/dtmax升高, LVEDP、NT-proBNP、MMP-9降低;活血组HR、LVEDP、HM、LVM、HMI、RVM、LVMI、MMP-9 mRNA、NT-proBNP、MMP-9含量均降低, ±dp/dtmax、TIMP-1 mRNA升高;复合组HR、LVEDP、±dp/dtmax、LVMI、NT-proBNP、MMP-9降低, TIMP-1升高;差异均有统计学意义(P<0.05)。与温阳组比较,滋阴组SBP及+dp/dtmax降低,活血组HR、MMP-9 mRNA降低,复合组HR降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。其余各指标组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 活血法及复合法调节肾阳虚型心力衰竭大鼠MMP-9、TIMP-1表达,有效减轻VR,改善心功能。     

血脂康对糖尿病大鼠心功能不全及肌浆网Ca~（2＋）-ATP酶的影响

目的：研究血脂康对糖尿病大鼠心功能不全及心肌细胞肌浆网Ca2＋-ATP酶（SERCA2a）的影响。方法：8周龄SD雄性大鼠腹腔注射链脲佐菌素造模成功后随机分为3组,血脂康组、糖尿病模型组和正常对照组,共喂养12周。颈动脉插管行血流动力学检查,并测定血总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDL）及低密度脂蛋白（LDL）;提取左心室组织,Western-blotting分析各组大鼠心肌细胞SERCA2a表达。结果：模型组大鼠LDL水平显著高于正常组,HDL水平较正常组降低;血脂康组血脂水平较模型组变化不明显。模型组心室峰压（LVSP）、左心室内压上升最大速率（＋dp/dtmax）和左心室内压下降最大速率（-dp/dtmax）显著低于正常组,左室舒张末压（LVEDP）显著高于正常组（P〈0.05）,血脂康组各指标明显改善,与正常组比较无显著统计学差异。模型组SERCA2a表达显著低于正常组（P〈0.05）,而血脂康组SERCA2a表达明显升高,较正常组无显著差异。结论：血脂康可以改善链脲佐菌素致糖尿病大鼠心功能不全,与其对SERCA2a的改善作用相关。     

黄芪注射液对左室肥厚大鼠心肌钙超载及肌浆网钙泵表达的影响

目的：探讨黄芪对压力过载致左室肥厚大鼠心肌钙含量及肌浆网钙泵(SERCA2a)表达的影响。方法：采用缩窄腹主动脉法制备压力过载性心肌肥厚模型。大鼠随机分为假手术组，模型组，低、中、高剂量黄芪组(5，10，20 g·kg^-1·d^-1)和卡托普利组(0.05 g·kg^-1·d^-1)。造模后第13周开始灌胃给药，连续12周。测定大鼠左室质量指数(left ventricular mass index, LVMI)和心肌钙含量的变化(原子吸收光谱法)，并检测(RT-PCR，Western blot)大鼠左室组织肌浆网钙泵的表达。结果：黄芪呈剂量依赖性抑制模型大鼠左室质量指数的增加(P<0.01，P<0.001)，其中高剂量黄芪作用与卡托普利相似；黄芪能抑制肥厚心肌组织钙超载(P<0.01)；与假手术组相比，心肌肥厚大鼠左心室SERCA2a 基因表达下调(P<0.05)，高剂量黄芪使之表达上调(P<0.05)，而卡托普利对其表达无明显影响。结论：黄芪对大鼠压力过载性心肌肥厚的抑制作用可能与其减轻心肌钙超载及上调心肌SERCA2a基因表达有关。     

滋阴潜阳活血汤对肾性高血压大鼠左室肥厚的影响

目的:探讨滋阴潜阳活血汤对肾性高血压大鼠左室肥厚的影响及作用机制。方法:建立2K1C肾性高血压大鼠模型,随机分为模型组、中药组及假手术对照组。假手术组和模型组:生理盐水80mg.kg-1.d-1,腹腔注射,连续8周;中药组:滋阴潜阳活血汤剂浓缩后40g.kg-1.d-1,连续灌胃给药8周。8周后,分别测定各组大鼠平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力变化最大速率(LV±dp/dtmax)、左心重与体重比值(LVMI=LVM/BW),放射免疫法测定血浆及局部心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),透射电镜观察心肌形态学的变化。结果:①与假手术组相比,模型组大鼠mCAP、LVEDP和LVMI均明显升高(P<0.01),LV+dp/dtmax降低(P<0.05),血浆及心肌AngⅡ显著升高(P<0.01),左室肥厚形成,左室重构发生,心功能下降。②与模型组相比,中药组LV+dp/dtmax和LV-dp/dtmax则明显升高(P<0.01或P<0.05),而mCAP、LVEDP和LVMI则显著降低(P<0.01或P<0.05),血浆及心肌AngⅡ亦显著降低(P<0.01),表明中药组能够降低血压并逆转左室肥厚。③电镜观察:模型组大鼠心室肌丝松散,部分溶解断裂,闰盘增宽;基膜下轻度水肿。与模型组比较,中药组上述病变明显减轻。假手术组未见上述病变。结论:滋阴潜阳活血汤能有效地降低肾性高血压大鼠血压并逆转左室肥厚,其作用机制可能与降低血浆及心肌局部AngⅡ、抑制体内肾素-血管紧张素系统(RAS)代谢有关。     

新风胶囊对AA大鼠心功能和脑钠肽水平的影响

目的：观察新风胶囊对佐剂性关节炎（AA）大鼠心功能、BNP表达的影响。方法：将60只大鼠随机分为正常对照组（NC）、模型对照组（MC）、甲氨喋呤（MTX）组、雷公藤多苷片（TPT）组和新风胶囊（XFC）组,每组12只,分别向（NC组除外）各组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂（Freund＇s complete adjuvant,FCA）造模,造模后第19天给药,NC及MC给予生理盐水,其余3组分别给予MTX、TPT、XFC。观察各组大鼠心功能、BNP表达的变化。结果：①与NC相比,MC的HI、LVSP、＋dP/dtmax、HR均明显升高,-dP/dtmax明显减低;与MC组比较,MTX组LVEDP显著降低（P〈0.05）,-dp/dtmax显著升高（P〈0.05）;TPT组LVSP,LVEDP显著降低（P〈0.05或P〈0.01）而-dp/dtmax显著升高（P〈0.05）;XFC组HI、LVSP和LVEDP显著降低（P〈0.05或P〈0.01）,±dp/dtmax显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;与XFC组比较,MTX组LVSP、LVEDP显著升高（P〈0.05）,＋dp/dtmax显著降低（P〈0.05）,TPT组各指标无明显差异。②与NC相比,MC组BNP含量及BNPmRNA表达显著升高（P〈0.05）;与MC组比较,XFC组BNP含量显著降低（P〈0.05）,XFC组及MTX组BNPmRNA表达显著降低（P〈0.05）;与MTX组及TPT组比较,XFC组BNP含量均显著降低（P〈0.05或P〈0.01）结论：XFC能改善AA大鼠心功能同时调节BNP的表达。     

益气活血方对压力超负荷致大鼠心肌肥厚的影响

目的:观察益气活血方对压力超负荷致心肌肥厚大鼠的血流动力学、形态学及神经内分泌因子影响。方法:采用腹主动脉缩窄法制作压力超负荷致心肌肥厚模型。造模4周后,分为假手术组(S组),模型组(M组),依那普利组(E组)、卡维地洛组(C组)及益气活血方组(SQAB组),观察8周的血流动力学参数、心率(HR)、心输出量(CO)、心脏指数(HMI、LVMI)、血清ANP、BNP含量、形态学等。结果:与S组相比,M组血压及心室内压显著升高,CO下降明显,心脏指数及血清ANP、BNP含量明显上升(P0.05),心肌组织肥厚明显。与M组相比,SQAB组具有降低LVSP、升高±dp/dtmax,减慢HR,增加CO,降低HMI及血清ANP、BNP含量的作用(P0.05),改善心肌肥厚程度。结论:益气活血方具有改善压力超负荷致心肌肥厚大鼠的血流动力学,提高心输出量,减轻心肌肥厚,改善神经内分泌因子的作用。     

不同时间电针“内关”预处理对心肌缺血再灌注大鼠心功能及胰岛素 抵抗的影响及机制研究

摘要：目的：探讨电针“内关”预处理对心肌缺血再灌注大鼠的心功能指标及胰岛素抵抗水平的变化,探讨其保护作用及时间规律。方法：本实验采用SPF级Wistar雄性大鼠60只,体重180-220g,随机数字法分为对照组、模型组、电针预处理0.5h组、电针预处理1h组、电针预处理2h组、电针预处理3h组,每组各10只。对照组开胸后仅暴露心脏不做其它处理;模型组采用左前降支冠状动脉结扎术,缺血20min,再灌注40min,制备心肌缺血再灌注损伤模型;其他电针预处理组分别于造模前 0.5-3h选取大鼠双侧“内关”穴进行电针,造模方法同模型组。观察各组左心室功能指标,采用酶联免疫分析法检测大鼠血浆内β-内啡肽、胰岛素、C肽和抵抗素的含量,并在透射电镜下观察心肌组织的变化。结果：①与对照组比较,模型组以及各电针预处理组的舒张末期压力（end-diastolic pressure,LVEDP）、左室收缩期平均压（left ventricular systolic mean presure,LVSP）、左心室内压最大上升速率（+ dp/dtmax）和左心室内压最大下降速率（- dp/dtmax）存在明显差异（P<0.05）,电针预处理各组与模型组比较,LVEDP显著降低,LVSP、+dp/dtmax 、-dp/dtmax水平有所上升（P<0.05）。②与对照组比较,模型组以及各电针预处理组的β-内啡肽（β-EP）、胰岛素、C肽和抵抗素的含量升高明显（P<0.05）。电针预处理各组与模型组比较,电针干预能显著下调β-EP、胰岛素、C肽和抵抗素的含量（P<0.05）。③上述各项指标中,电针预处理2h组和电针预处理3h组优于电针预处理0.5h组和电针预处理1h组,电针预处理0.5h组和电针预处理1h组相比较各项指标没有显著差异（P＞0.05）,EA3组和EA4组比较各项指标未见明显差异（P＞0.05）。④病理结构方面,模型组较对照组大鼠心肌组织结构破坏显著,电针预处理组与模型组比较其心肌组织结构有所改善。结论：电针预处理能通过调控应激反应及胰岛素抵抗相关因子来降低心肌缺血对心功能的损害,且不同的预处理时间点对心肌组织的保护效应具有差异性。     

自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的实验研究

目的:探讨自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的作用机制。方法:采用结扎左冠状动脉法制备大鼠心梗后慢性心力衰竭动物模型;8周后,给予药物灌胃治疗;经治疗4周后,采用通过颈动脉插管测定大鼠血流动力学状态,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法和Western Bolt法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)mRNA水平及其蛋白表达量。结果:模型组大鼠的心功能显著下降,主要表现在血流动力学参数改变,其中左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01),左室收缩压(LVSP)、左室上升最大速率(+LVdp/dtmax)及左室下降最大速率(-LVdp/dtmax)绝对值均降低(P0.05);心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA水平及其蛋白表达量均明显下降(P0.05)。给予自拟强心汤干预后,能够有效的降低心力衰竭大鼠LVEDP水平(P0.05),升高LVSP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax水平(P0.01);能够升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA及其蛋白表达量的水平(P0.05)。结论:自拟强心汤能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的蛋白表达量,改善钙循环有关。