骨肉瘤中APE1的表达及其与血管生成的关系

目的探讨APE1在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系.方法采用免疫组化S-P法检测10例正常骨、10例良性骨瘤和60例骨肉瘤组织中APE1、CD34和FⅧ-Rag等蛋白表达,并根据CD34和FⅧ-Rag染色结果计数微血管密度.结果 APE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞的胞核,骨肉瘤中APE1显著高于正常骨(P<0.05),60例骨肉瘤中43例(72%)呈高表达,17例呈低表达,APE1强表达组中的MVD显著高于弱表达组(P<0.01).结论 APE1在骨肉瘤中过度表达与骨肉瘤分化以及微血管密度密切相关,有可能作为骨肉瘤抗血管生成治疗中一个新的靶向分子.     

骨肉瘤中血管内皮生长因子的表达及血管生成的研究

目的：探讨血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达、血管生成与骨肉瘤的关系。为判断骨肉瘤的恶性程度及预后提供新的指标。方法：应用免疫组化技术分别对４６例骨肉瘤标本（经过Ｐｒｉｃｅ分级）进行ＶＥＧＦ和微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）染色,研究ＶＥＧＦ表达、微血管密谋之间及其与骨肉瘤的关系。结果：骨肉瘤标本中Ｐ     

EphB4、EphrinB2蛋白在子宫颈癌组织中的表达及其与血管生成的关系

近年来的研究表明Eph家族尤其是EphB4／EphfinB2在肿瘤发生和血管生成过程中起重要作用。关于EphB4及其配体EphrinB2在子宫颈癌组织中的表达文献目前尚少见报道。我们检测了EphB4及其配体EphrinB2在子宫颈癌组织中的表达，并分析其与微血管密度（MVD）的关系，旨在探讨EphB4及其配体EphrinB2在子宫颈癌发生、发展中的作用及其与血管生成的关系。     

EphB2在脑膜瘤中表达与血管生成关系的研究

目的：研究酷氨酸激酶EphB2在脑膜瘤中如何表达，以及与血管生成的关系，并探讨血管生成的可能发生机制。方法：收集44例脑膜瘤病人手术切除的肿瘤标本和作为对照的14例正常脑膜标本，经4％的福尔马林固定、石蜡包埋。采用免疫组化的方法分析、评价EphB2在不同类型的脑膜瘤中表达情况及血管生成情况，并探讨它们之间的关系。结果：（1）EphB2在44例脑膜瘤标本中的表达情况；“4”级7例，“3．5”级5例，“3”级6例，“2．5”级2例，“2”级8例，“1”级13例，“0”级3例，平均“2．19”级；（2）EphB2在14例正常脑膜中表达情况；“1”级4例，“0”级10例；（3）44例脑膜瘤标本中血管生成情况：“4”级2例，“3．5”级3例，“3”级10例，“2．5”级4例，“2”8例，“1”级10例，“0”级7例，平均“1．88”级。结论：（1）EphB2在多数脑膜瘤细胞质中表达；（2）EphB2在脑膜瘤中表达与血管生成呈正相关，提示EphB2参与脑膜瘤血管生成。     

EphB4受体在胰腺癌组织中表达及与肿瘤血管生成的关系

[目的]探讨EphB4受体在胰腺导管腺癌中的表达及与临床病理及血管生成的关系。[方法]采用免疫组化SP法检测27例胰腺导管腺癌和8例正常胰腺组织中EphB4受体的表达,并根据CD34染色结果计数微血管密度（MVD）。采用RT-PCR检测5例新鲜胰腺癌标本的EphB4受体mRNA。[结果]EphB4受体主要表达于肿瘤细胞的胞质,呈异质性分布,表达率为66.7%（18/27）,正常胰腺组织阴性,两者之间差异有显著性意义（P〈0.01）;低分化导管细胞癌EphB4受体表达、MVD明显高于中高分化导管细胞癌（P〈0.05）;TNM分期为III、Ⅳ期胰腺导管细胞癌EphB4受体表达、MVD明显高于Ⅰ、Ⅱ期胰腺导管细胞癌（P〈0.05）。胰腺导管细胞癌中EphB4受体表达、MVD与肿瘤部位、患者年龄、性别无明显相关性。5例新鲜标本中EphB4受体mRNA均高表达且与MVD成正相关（P〈0.05）。[结论]胰腺癌细胞的EphB4受体表达与肿瘤血管生成及肿瘤侵袭性有关。     

骨肉瘤组织中Ang-2、VEGF的表达及MVD测定

目的:检测骨肉瘤组织中血管生成素-2( Ang-2)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD).方法:采用RT-PCR技术和Western blot法检测69例骨肉瘤患者和12例正常对照骨组织中Ang-2的表达;采用免疫组化法检测69例骨肉瘤组织中VEGF与CD34的表达,计算MVD;分析Ang-2的表达与VEGF、MVD的关系.结果:骨肉瘤组Ang-2 mRNA的表达量、Ang-2蛋白阳性表达率、VEGF蛋白阳性表达率及MVD均高于对照组(t=8.2 53,x2校正 =11.960和11.470,P均＜0.01).高VEGF表达组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低VEGF表达组(P＜0.01);高MVD组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低MVD组(P＜0.01).结论:Ang-2参与了骨肉瘤的血管生成及调控,在骨肉瘤的发生中起着重要的作用.     

骨肉瘤微血管密度与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究骨肉瘤微血管密度（MVD）与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达是否具有相关性。方法 对33例骨肉瘤组织标本应用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞。计数骨肉瘤MVD;用VEGF多克隆抗体检测肿瘤细胞浆中VEGF的表达情况。结果 （1）骨肉瘤MVD与VEGF表达程度呈正相关,VEGF高表达组的MVD平均值明显高于VEGF低表达组;（2）骨肉瘤中VEGF的表达和MVD与骨肉瘤组织病理分级无关。结论 VEGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子。     

EphB4受体及其配体EphrinB2在喉鳞癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在喉癌组织中的表达及与血管生成的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测61例喉癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达及间质微血管密度(MVD)。结果喉癌组织中肿瘤细胞和间质新生血管的EphB4与EphrinB2高度表达,其表达与肿瘤细胞分化程度和临床分期密切相关(P<0.01,P<0.001),但与肿瘤的临床分型和颈淋巴结转移无相关性(P>0.05)。EphB4与EphrinB2蛋白高表达组的平均MVD值明显高于EphB4与EphrinB2低表达组(P<0.001)。结论EphB4与EphrinB2蛋白在喉癌的发生和演进过程中起着重要的作用,并与肿瘤血管密切相关。     

人乳癌组织中血管生成素-2及其受体Tie-2的表达

目的:探讨乳癌组织中血管生成素-2(Ang-2)、血管生成素-2受体Tie-2的表达.方法:应用免疫组化SP法检测28例人乳腺导管内癌、49例浸润性导管癌、25例乳腺纤维腺瘤和51例正常乳腺间质组织中Ang-2及Tie-2、CD34的表达,根据CD34的表达情况计算微血管密度(MVD).结果:正常乳腺间质组织中Ang-2、Tie-2阳性表达率分别为12.0%(6/50)和18.0%(9/50),在乳腺纤维腺瘤组织中的阳性表达率为16.0%(4/25)和20.0%(5/25);而在乳腺导管内癌组织中的阳性表达率分别为53.57%(15/28)和64.28%(18/28),在乳腺浸润性导管癌组织中的表达率分别为93.87%(46/49)和97.96%(48/49),均显著高于正常乳腺间质组织和乳腺纤维腺瘤组织中的表达(P＜0.01).乳癌组织CD34的表达显著高于其在正常乳腺间质组织中的表达.结论:Ang-2及Tie-2的表达与乳癌血管生成关系密切,Ang-2表达与乳癌的浸润有关.     

前列腺癌中血管生成素-2及其受体Tie2的表达及与血管生成的关系

目的:探讨血管生成素-2(Ang-2)及其受体Tie2在前列腺癌组织中的表达规律及其在肿瘤组织发生、发展以及血管生成中的作用.方法:采用免疫组织化学S-P染色法检测39例前列腺癌组织中Ang-2,Tie2及CD34的蛋白表达,根据CDM染色结果计数微血管密度(MVD).结果:Ang-2,Tie2的蛋白表达定位于肿瘤细胞或血管内皮细胞质及胞膜,呈异质性分布;在39例前列腺癌中Ang-2和Tie2阳性表达率均为74%;且均与前列腺癌的分化程度、淋巴结转移密切的关系(P<0.05);Ang-2,Tie2蛋白阳性表达者的MVD分别为(42.1±5.2)和(42.3±5.1),显著高于相应的前列腺癌组织Ang-2和Tie2阴性病例[MVD分别为(33.7±3.3)和(33.2±2.3)](P<0.01).结论:Ang-2,Tie2在前列腺癌发生、演进过程中起着重要作用,并与肿瘤血管生成关系密切.     

EphB4受体及其配体EphrinB2 mRNA在卵巢癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的检测EphB4和EphrinB2mRNA在卵巢癌组织中的表达,探讨其在卵巢癌发生、发展及血管生成过程中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测30例卵巢癌和10例正常卵巢组织中EphB4和EphrinB2mRNA的相对含量,同时利用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（SP）法检测上述组织的微血管密度（MVD）,分析EphB4和EphrinB2mRNA的表达与各种临床病理参数和血管生成的关系。结果①卵巢癌组织中EphB4mRNA、EphrinB2mRNA的表达均高于正常卵巢组。②EphB4、EphrinB2mRNA的表达与卵巢癌临床分期及淋巴结转移有关。③卵巢癌组织中EphB4和EphrinB2mRNA的表达与组织中微血管密度正相关。结论 EphB4和EphrinB2可能在卵巢癌的发生、发展及血管生成中发挥重要作用。     

人脑星形胶质细胞瘤EphB4/ephrinB2表达及与预后的关系

目的了解EphB4受体及ephrinB2配体在人脑星形细胞起源肿瘤组织中的表达规律,并探讨其临床病理学意义.方法收集85例有随访资料的脑胶质瘤标本,免疫组化S-P法检测EphB4和ephrinB2蛋白表达.结果 EphB4及ephrinB2的蛋白表达定位于肿瘤细胞或血管内皮细胞胞质,呈异质性分布;两种蛋白在Ⅲ、Ⅳ级脑星形细胞肿瘤中的表达均明显高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤(P＜0.05);生存资料分析显示:EphB4或ephrinB2阳性组患者的生存率均显著低于相应的阴性及弱阳性组(P＜0.01,P＜0.05).结论 EphB4/ephrinB2与脑星形胶质细胞瘤发生发展密切相关,并可作为判断预后的指标之一.     

EphB4受体及其配体EphrinB2 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的:探讨红细胞生成素诱导的肝细胞受体EphB4及其配体EphrinB2 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测33例子宫内膜癌和10例正常子宫内膜组织中EphB4、EphrinB2 mRNA的表达率及相对含量,并分析二者与子宫内膜癌临床病理特征的关系.结果:(1)EphB4 mRNA在子宫内膜癌组的表达率和相对含量均高于正常子宫内膜组(P<0.05,P<0.05).EphrinB2 mRNA在子宫内膜癌组的表达率和相对含量也均高于正常子宫内膜组(P<0.05,P<0.01).(2)EphB4、EphrinB2mRNA的表达与子宫内膜癌手术病理分期、组织学分级有密切关系(P<0.05).二者表达与子宫内膜癌不同组织学类型,肌层浸润程度以及有无淋巴结转移无关(P0.05).结论:EphB4和EphrinB2的异常表达与子宫内膜癌发生、进展以及恶性程度有关,二者表达趋势呈现一致性,检测EphB4/EphrinB2有助于判断子宫内膜癌预后.     

骨髓间充质干细胞与骨髓瘤细胞共培养时EphB4/ephrinB2表达异常

目的:研究正常骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在与骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226共培养过程中,骨髓瘤细胞对MSC EphB4/ephrinB2表达的影响?方法:应用Transwell培养体系,将正常骨髓MSC分别与骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226细胞共培养7?12 d后分别应用实时定量RT-PCR和细胞免疫化学方法检测骨髓MSC的EphB4/ephrinB2 mRNA和蛋白表达水平?结果:骨髓MSC与U266?RPMI8226共培养后,与对照组MSC相比,生长和形态未见明显改变,应用实时定量RT-PCR方法检测骨髓MSC EphB4/ephrinB2的mRNA水平较对照组均降低,在共培养7 d的时间点上除EphB4在RPMI8226共培养组与对照组差异无统计学意义,其余组间差异均有统计学意义(P < 0.05),在12 d上差异无统计学意义(P > 0.05)?细胞免疫化学结果显示共培养组MSC 胞膜胞浆 EphB4/ephrinB2 表达下降?结论:骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226在与正常骨髓MSC共培养后,诱导骨髓MSC EphB4/ephrinB2表达的下调,可能通过MSC成骨-破骨活动的脱耦合,参与骨髓瘤骨病的发生?     

Eph在颞叶癫痫大鼠齿状回苔藓纤维出芽机制中的作用

目的:探讨匹罗卡品致痫大鼠Eph A5和ephrin A3在海马齿状回的表达变化与苔藓纤维出芽和突触重建的关系.方法:急性诱导癫痫持续状态及慢性颞叶癫痫形成后,采用Neo-Timm银染观察苔藓纤维出芽及突触重建,并用原位杂交方法检测ephrin A3基因的动态变化,用免疫组织化学方法检测Eph A5蛋白的动态变化.结果:在内嗅皮质区(EC)仅有Eph A5的表达,致痫后第7天,Eph A5的表达下调,降至最低点(P＜0.01),此后逐渐回升,但第15天时仍低于对照组(P＜0.05),第30天时回归至对照组水平(P＞0.05).在齿状回(DG),Eph A5及ephrin A3在致痫后第7天明显较对照组降低(P＜0.01),此后逐渐回升,但第15天时仍低于对照组,在第30天和第60天与对照组相比无统计学差异(P＞0.05).结论:内嗅皮质区EphA5和齿状回Eph A5及ephrin A3的表达下调可能是癫痫持续状态(SE)后苔藓纤维出芽至齿状回内分子层的分子学机制之一.     

VEGF诱导人脐静脉内皮细胞体外三维成型和对EphrinB2/EphB4表达的影响

目的观察不同浓度血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对原代培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外"小管样结构"(tubule-like structures,TLS)形成能力、表达EphrinB及其受体EphB4的影响.方法采用酶消化法分离、纯化人脐静脉内皮细胞并经形态学和免疫细胞化学鉴定.以不同浓度(0.1～50 ng/m1)的VEGF体外处理传代HUVECs,观测时相点设为刺激后24、48、72、96 h;采用Matrigel三维培养系统和免疫细胞化学染色方法分别观测VEGF处理后HUVECs体外血管形成能力以及EphrinB2/EphB4表达的变化,并对后者进行定量分析.结果 HUVECs有EphB4表达,但未检测到EphnnB2表达;不同浓度的VEGF刺激HUVECs在各观测时间点未见EphB4表达的显著性差异,亦未诱导出EphrinB2表达.VEGF能够诱导HUVECs在Matrigel形成小管样结构,并呈剂量依赖性.结论 VEGF能以剂量依赖方式诱导HUVECs在Matrigel形成TLS,但不能诱导HUVECs表达EphrinB2或EphB4.     

Endoglin与肿瘤的血管增殖

肿瘤细胞的生长依赖于其微环境,微环境中的血管增殖与肿瘤的进展关系密切。肿瘤诱导血管生成的能力,在一定程度上决定着肿瘤的生物学行为。