抗苗勒管激素的研究及应用进展

抗苗勒管激素(AMH)由睾丸支持细胞和卵巢颗粒细胞分泌,属于转化生长因子β超家族成员,通过与靶细胞膜上特异性受体结合,在男性性别分化及女性卵泡生长发育调节中起着重要作用。与其他生物学指标相比,AMH浓度相对稳定,已成为近年来的研究热点。AMH在临床上着广泛应用于小儿隐睾、男性不育症、女性多囊卵巢综合征等疾病的诊断,女性卵巢储备功能的评价以及辅助生殖技术中卵巢反应性的评估等。AMH亦与妇科肿瘤密切相关,作为肿瘤标记物,血清AMH水平的异常升高可用于卵巢颗粒细胞瘤的诊断及复发监测;另外,可在在转录和翻译水平检测到许多女性生殖系统肿瘤细胞抗苗勒管激素受体(AMHR)表达,且AMH对表达AMHR的肿瘤细胞的生长、侵袭和转移有抑制作用,提示AMH信号转导途径有望成为特定妇科肿瘤新的治疗靶点。本文就抗苗勒管激素的研究及其应用进展作一综述。     

抗苗勒管激素在生殖医学相关研究进展

抗苗勒管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)又称为苗勒管抑制物(Müllerian-Inhibiting Substance,MIS),在雄性性腺分化期抑制苗勒管的形成,阻止雌性生殖器官的发育;在女性,卵巢的窦前卵泡和小窦卵泡的颗粒细胞可以分泌AMH。研究发现AMH参与调节卵泡发育,与窦卵泡的数量密切相关,能间接反映卵巢储备功能,并可以作为辅助生殖技术中一项有效的评估指标。     

血清抗苗勒管激素检测与优生优育的研究

不孕症是一组由多种病因导致的生育障碍疾病,是育龄夫妇的生殖健康不良事件.育龄期妇女无避孕性生活12个月而未孕,称为不孕症,分为原发性和继发性两大类.不孕症发病率因国家、民族和地区不同存在差别,我国不孕症发病率约为7％～10％[1].现代女性结婚与生育年龄普遍偏晚,高龄产妇人数越来越多,难孕不孕比重也在增加,随着国家二孩儿政策的出台,越来越多的育龄女性开始关注优生优育.孕前的血尿常规,传染病指标等一般检查项目以及传统的性激素六项检测已不能满足临床需求,大量研究显示血清抗苗勒管激素(antimüllerian hormone,AMH)检测能够预测女性卵巢储备功能,.自从我院开展抗苗勒管激素检测以来,发现抗苗勒管激素在预测女性卵巢储备功能以及评估女性生育能力方面具有显著诊断价值,在优生优育工作中有着重要的意义,现报告如下: 资料与方法     

抗苗勒管激素指标对女性生理病理影响的研究进展

抗苗勒管激素又被称为苗勒管抑制物,对于女性的生理及病理均存在重要影响,是一种具有稳定性的标记物,与其他生物物理、生化标记物相比较,抗苗勒管激素在女性的卵巢功能评估中存在重要影响,可有效测量卵巢早衰,对于绝经时间同样具有预测效果。本文主要综述抗苗勒管激素对女性生理、病理影响,对于深入认识抗苗勒管激素指标对女性生理病理影响具有重要指导意义。     

抗苗勒管激素对卵巢低反应预测价值的研究

目的探讨抗苗勒氏管激素(AMH)在辅助生殖技术(ART)中对控制性超排卵(COH)卵巢低反应的预测价值。方法利用ELISA法对181例首次接受IVF/ICSI-ET治疗的不孕症患者基础血清AMH蛋白水平(bAMH)进行检测。根据患者COH卵巢反应将患者分为2组:卵巢低反应组20例(获卵数≤5个)和卵巢反应良好组161例(获卵数>5个)。比较bAMH与年龄、获卵数、基础FSH等的相关性。结果①181例不孕症患者bAMH水平与获卵数呈显著正相关(r=0.709,P<0.05);②卵巢低反应组(获卵数≤5个)与反应良好组(获卵数>5个)的bAMH水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);③受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,bAMH水平的曲线下面积(AUC)为0.949。当bAMH截断值≤3.65ng/ml时,灵敏度为86.3%,特异度为90.0%。结论 AMH与卵巢反应性有关,可以在辅助生殖技术中作为评价预测COH中卵巢低反应的血清学标记物。     

转化生长因子β信号通路对卵泡刺激素调节卵巢颗粒细胞功能的影响

目的 探讨大鼠卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素(FSH)和转化生长因子β(TGF-β)信号通路之间的相互作用.方法 取21 dSD大鼠卵泡分离的颗粒细胞原代培养,实验分为对照组、FSH处理组和转化生长因子β Ⅱ型受体(TGF-β R Ⅱ)中和组.通过免疫细胞化学和Western blotting定位和检测TGF-β R Ⅱ以及...     

贵州某白酒对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白表达及血清睾酮水平的影响

目的探讨摄入贵州某54°白酒后,不同时程及不同剂量对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白(St AR)表达及血清睾酮水平的变化,以期为科学饮酒提供基础资料。方法正常成年雄性SD大鼠69只,随机分为正常对照组(n=15)及实验组(n=54)。实验组分为低剂量组0.8ml/(kg·d)、中剂量组1.6ml/(kg·d)及高剂量组2.4ml/(kg·d),实验组大鼠每日灌胃2次。分别于第4周末、第8周末、第12周末采血清,取睾丸组织。采用免疫组织化学SABC法、图像分析、Western blotting检测睾丸组织St AR的表达,采用化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果各实验组的血清睾酮水平与正常对照组比较未见明显异常,差异无统计学意义(P0.05)。St AR免疫组织化学阳性产物存在于睾丸间质细胞胞质内;与正常对照组比较,4周、8周、12周各剂量组St AR免疫染色及平均吸光度均有所增强(P0.05);Western blotting检测,4周、8周、12周各剂量组St AR蛋白表达水平增强(P0.05)。结论在本实验设定的剂量和时程内用该白酒灌胃后,大鼠睾丸间质细胞内St AR表达水平有所增强,血清睾酮水平并无明显变化。     

抗苗勒管激素临床应用的新进展

抗苗勒管激素（anti—Mullerian hormone,AMH）是一种二聚体糖蛋白,最初发现AMH是由睾丸支持细胞产生的,其生理功能是抑制雄性苗勒管的发育,参与睾丸的分化和发育。在过去十几年,医学工作者对AMH进行了大量的研究,发现AMH值可以准确地反映卵巢卵泡储备水平,     

抗苗勒氏管激素在卵泡形成中的作用

抗苗勒氏管激素(anti-Mllerian hormone,AMH),又称苗勒管抑制物质(Mllerian inhibitory substance,MIS),是转化生长因子β(transforming growth factorsβ,TGF-β)超家族成员之一,在卵巢生长卵泡的颗粒细胞中表达,调控卵泡生长和发育。具有抑制始基卵泡启动募集,降低窦前卵泡和小窦卵泡对FSH的反应,影响周期募集的作用。本文综述了AMH在生理性和卵巢功能异常疾病的卵泡形成中的可能作用。     

抗苗勒氏管激素对人黄素化颗粒细胞激素分泌的影响

目的：探讨抗苗勒氏管激素（AMH）对人颗粒细胞激素产生分时段的影响。方法：采用人黄素化颗粒细胞原代培养，分组加入不同浓度的AMH，分时段测定细胞培养液中的雌二醇（E2）和孕酮（P）浓度。结果：细胞培养液中E2、P浓度均随培养时间延长而升高，升高幅度渐下降。随着AMH浓度的增加，颗粒细胞的E2和P分泌明显降低， AMH 5μg/L组到20 μg/L组间有剂量依赖性，AMH 50 μg/L组与20 μg/L组比较无显著差别。结论：AMH可以降低体外培养人黄素化颗粒细胞的雌、孕激素分泌，并有一定的剂量依赖性，提示AMH可以影响颗粒细胞的激素合成过程。     

光照应激对SD大鼠胃促性腺激素释放激素受体表达的影响

目的 观察光照应激状态下SD大鼠胃内促性腺激素释放激素受体（GnRHR）的表达变化。 方法 建立SD大鼠光照应激模型(共64只,实验组与对照组各32只),24h持续光照,分别取光照1d、2d、3d、4d、1周、2周、3周、4周和相应对照组大鼠的胃,采用免疫组织化学、Western blotting和实时PCR法检测GnRHR在各时间段大鼠胃黏膜中的定位及蛋白和mRNA的表达变化。 结果 GnRHR阳性细胞广泛分布于大鼠胃底腺壁细胞中,在对照组和实验组中的定位无差异。实验组大鼠的GnRHR蛋白表达水平高于其相应的对照组。持续光照1～4周后,实验组与其对照组相比差异显著（P<0.05）;当持续光照2周时,GnRHR的表达至最高水平,与其对照组相比,差异极显著（P<0.01）。实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平高于对照组,持续光照3～4周后,实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。 结论 光照应激可以影响消化道内GnRHR的表达,提示GnRH通过其受体介导,对消化功能具有潜在的生理调节功能。GnRH除参与消化道正常生理功能外,可能还是一种参与应激反应的激素。     

多囊卵巢综合症患者抗苗勒管激素水平与辅助生殖优胚率之间的关联分析

目的检测多囊卵巢综合症(PCOS)患者抗苗勒管激素(AMH)水平,并针对其与辅助生殖优胚率之间的关联性进行分析,为提高PCOS患者的胚胎移植成功率提供临床依据。方法于2016年4月至2018年2月采用病例抽样的方法选取本院择期行体外受精-胚胎移植的夫妇,并根据女方的PCOS定性结果将其分为PCOS组(病例组)与非PCOS组(对照组);受试者采全血离心后取上清液,用高效液相色谱法(HPLC法)对AMH进行定量分析,并计算优胚率。结果 PCOS病例组的血清AMH水平显著高于对照组,优胚率则显著低于对照组;影响PCOS病例组血清AMH水平及优胚率的相关因素包括女方年龄、激素类药物治疗史、肾上腺相关病史、妇科炎症史、血压水平、血脂水平、血糖水平;以血清AMH水平均值将所有病例划分为高AMH组与低AMH组后,其中高AMH组的AMH水平与优胚率呈负相关(r_P=-0.384,P <0.001),低AMH组的AMH水平与优胚率呈正相关(r_p=0.313,P=0.003)。结论育龄女性血清AMH偏高可被认为是PCOS的独立危险因素,但过高或者过低的血清AMH水平均提示女性内分泌功能存在异常,均不利于优胚率的提高。     

卵泡刺激素在大鼠胰腺中的定位及其与促性腺激素释放激素受体共存关系

目的：研究卵泡刺激素在大鼠胰腺中的分布及其与促性腺激素释放激素受体的共存关系。方法：采用免疫组织化学法和邻片双标记方法。结果：大鼠胰腺外分泌部腺泡内的部分腺细胞和胰岛中的部分内分泌细胞呈现FSH免疫阳性反应,阳性产物分布于胞质,胞核阴性。卵泡刺激素与促性腺激素释放激素受体在大鼠胰岛细胞中有重叠分布。结论：大鼠胰腺外分泌部的腺泡细胞和胰岛的细胞能表达卵泡刺激素。卵泡刺激素和促性腺激素释放激素受体共存于大鼠胰岛细胞中。表达卵泡刺激素的胰岛细胞可能受促性腺激素释放激素调节。     

高血糖对小鼠卵母细胞Ca2+振荡和卵泡颗粒细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体表达的影响

目的 探讨高血糖对小鼠卵母细胞Ca2+振荡和卵泡颗粒细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的影响.方法 出生后20d ICR雌鼠,用链脲酶素建立急性高血糖模型;高血糖模型雌鼠及正常雌鼠注射10IU/只孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)超排卵,注射hCG后0h、2h、6h和10h取生发泡(GV)期卵母细胞,双光子激光扫描共焦显微镜检测GV期卵母细胞的Ca2+振荡;hCG注射后6h、10h取卵丘-卵母细胞复合体(COC),利用免疫荧光、Western blotting检测TRAIL的表达.结果 1.高血糖组卵母细胞Ca2+振荡频率高于正常对照组,于hCG注射后2h、6h差异显著(P<0.05);2.免疫荧光、Western blotting蛋白半定量检测显示,高血糖组颗粒细胞TRAIL表达量高于正常对照组,于hCG注射后6h、10h差异有显著性(P<0.05).结论 高血糖加快小鼠未成熟卵母细胞Ca2+振荡的频率;高血糖促进小鼠卵泡颗粒细胞TRAIL的表达.     

Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响

目的 研究Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响.方法 21d SD雌性大鼠,注射PMSG 20IU,48h后对卵巢颗粒细胞进行原代培养,用TGFβRⅡ抗体及不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,通过免疫细胞化学方法观察TGFβ信号通路中Smad2/Smad3和P-Smad2/P-Smad3(磷酸化Smad2/3)表达的变化.结果 1.Smad2/Smad3主要定位于卵巢颗粒细胞胞质,其活化形式P-Smad2/P-Smad3有少量表达;2.经FSH处理后, Smad2/Smad3向核内转移增多,P-Smad2/P-Smad3的表达增强,并与FSH的作用时间及剂量呈正相关性;3.TGFβRⅡ被抗体完全中和后再用FSH处理,Smad2/Smad3的核阳性率无显著增多, P-Smad2/P-Smad3的表达未见明显增强.结论 1.FSH促进Smad2/Smad3的磷酸化;2.FSH对 Smad2/Smad3的激活作用与TGFβ受体密切相关.     

皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白表达的影响

目的 研究外源皮质酮对部分肝切除(PH)诱导的大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白水平的影响.方法 PH前3d对成年雄性SD大鼠进行双侧肾上腺切除术,皮质酮悬浮于芝麻油中皮下注射去肾上腺鼠,抗酶mRNA及其蛋白水平的测定采用RT-PCR和Western blotting法. 结果 与对照组(n=6,以下相同)相比,去肾上腺组及10mg/kg、20mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平变化不明显,而40mg/kg体重皮质酮处理能显著刺激其转录.在PH后5、7、9h,去肾上腺术鼠抗酶蛋白水平显著低于相应时间点的对照组;皮质酮处理后,蛋白水平在所观察的整个实验过程中均显著上升,且剂量越高,蛋白含量越多,尤其在PH后5h,10、20和40mg/kg体重皮质酮处理组分别比同时间点对照组高43%、79%和93%. 结论 皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶蛋白的合成具有剂量依赖性促进作用.     

卵泡刺激素注入胃腔对大鼠胃泌素分泌的影响

目的研究胃腔内卵泡刺激素(FSH)对大鼠胃泌素分泌的影响,为消化道产生的生殖内分泌激素是否有调节消化的功能提供实验依据。方法胃腔直接注射FSH以模拟外分泌产生的FSH,并以免疫组织化学、酶联免疫分析法(ELISA)检测卵泡刺激素刺激后,胃内胃泌素免疫反应阳性细胞的密度,血清和胃液中胃泌素的含量。结果胃腔内注射FSH后,大鼠胃窦壁内单位面积胃泌素免疫反应阳性细胞密度(16.65±2.63)比对照组(9.60±1.72)显著增加(P<0.01),胃液中胃泌素ELISA检测的A值(0.41±0.037)比对照组(0.28±0.046)显著增加(P<0.01);血液中胃泌素含量的A值(0.86±0.054)比对照组(0.62±0.070)显著增加(P<0.01)。结论外源的FSH对胃泌素的合成和释放均起明显的促进作用。     

FSH和GDF-9对大鼠颗粒细胞蛋白激酶B表达的影响

目的探讨FSH和GDF-9对大鼠颗粒细胞中蛋白激酶B（PBK,又称Akt）的影响。方法应用Western blot法检测体外培养大鼠颗粒细胞中磷酸化Akt和总Akt的表达情况。结果FSH能15min内促进磷酸化Akt在颗粒细胞中的表达,而GDF-9则在4h后可以引起Akt的磷酸化。结论相对于GDF-9,FSH能在短时间内促进P—Akt的表达完成,Akt信号通路可能在FSH和GDF-9促进颗粒细胞生长中起一定的作用。     

被动吸烟下调大鼠卵泡刺激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及其受体的表达

目的 研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响. 方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只).实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠.光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化学染色检测激素受体的改变,酶联免疫吸附试验检测血清中激素的改变情况. 结果 实验组大鼠卵巢髓质血管收缩、减少,间质疏松.卵巢颗粒细胞内线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;粗面内质网脱颗粒样变.血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)水平比对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).实验组大鼠卵巢组织中卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达显著低于对照组(P＜0.01,P＜0.05). 结论 被动吸烟可使大鼠血清中FSH、LH及GnRH水平明显降低,大鼠卵巢中FSHR及LHR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的结构及功能,引起生殖内分泌失调.