高压氧通过激活CREB/BDNF信号通路减轻阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤

目的:探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对阿尔茨海默病APP/PS1转基因(trangenic,TG)小鼠海马神经元突触损伤的影响及其作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1 TG小鼠随机分为TG组、HBO组及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)抑制剂H89组,每组10只;另取10只同龄雄性野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠作为阴性对照组(WT组)。HBO和H89组小鼠进行高压氧治疗6个疗程;WT组及TG组小鼠不给予治疗。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼氏染色检测各组小鼠海马神经元中尼氏体表达;real-time PCR检测小鼠海马区CREB及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA的表达;Western blot检测小鼠海马区突触素(synapsin,SYN)、突触后致密区蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)...     

电针干预阿尔茨海默病模型小鼠海马神经元和少突胶质细胞的增殖分化

背景：电针对阿尔茨海默病模型小鼠海马少突胶质细胞增殖分化的影响尚不清楚,而与少突胶质细胞有关的脱髓鞘反应却是阿尔茨海默病的常见病理反应。目的：探讨电针刺激阿尔茨海默病模型小鼠“百会”“风府”和双侧“肾俞”对内源性神经干细胞向神经元和少突胶质细胞增殖分化的影响及机制。方法：将6周龄清洁级APP/PS1转基因雄性阿尔茨海默病模型小鼠40只随机分为电针穴位组(n=20)和阿尔茨海默病模型组(n=20),另以同鼠龄的健康C57BL/6J雄性小鼠作为正常对照组(n=20)。电针穴位组小鼠电针“百会”“风府”和双侧“肾俞”穴位16周后(每天20 min,每周6 d),水迷宫检测其学习记忆功能;免疫组化染色检测海马齿状回β-淀粉样蛋白老年斑表达;免疫荧光双标检测海马齿状回Brd U/Neu N和Brd U/GALC的表达;免疫印迹检测海马神经元特异性蛋白Nestin和少突胶质细胞特异性蛋白GALC的表达水平;实时荧光定量PCR和免疫印迹检测海马Notch1和Hes1的m RNA及蛋白水平。结果与结论：(1)相对于正常对照组,模型组小鼠学习记忆能力明显下降;海马齿状回β-淀粉样蛋白老年斑明显增多(P&...     

艾司西酞普兰对APP/PS1小鼠海马神经元突触功能及对BDNF-TrkB-CREB信号通路的影响

目的探讨艾司西酞普兰对APP/PS-1小鼠海马神经元突触功能及与BDNF-TrkB-CREB信号通路的关系。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组及艾司西酞普兰组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组。给予10 mg/kg艾司西酞普兰灌胃治疗,连续8周,每天一次;对照组及模型组给予等体积生理盐水。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼式染色检测各组小鼠海马DG区尼氏体变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT);Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、BDNF、TrkB、p-TrkB、CREB及p-CREB蛋白表达。结果艾司西酞普兰组改善APP/PS-1小鼠认知功能,小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长,小鼠海马DG区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,下调AChE,上调ChAT表达,且能增加SYN、PSD95及GAP43蛋白表达;此外,艾司西酞普兰还能显著增加小鼠海马区BDNF、p-TrkB及p-CREB蛋白表达,与模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论艾司西酞普兰改善小鼠海马神经元突触功能,提高APP/PS-1小鼠的学习记忆能力,可能与调控BDNF-TrkBCREB信号通路相关蛋白表达有关。     

醒脑静调节CREB/PGC-1α信号通路对创伤性脑损伤大鼠神经炎症的影响

目的 分析醒脑静调节cAMP反应元件结合蛋白(CREB)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1-α(PGC-1α)通路对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经炎症的影响。方法 将75只SD大鼠分为对照组、模型组、醒脑静低剂量组(0.52mL/100g)、醒脑静高剂量组(1.04mL/100g)、醒脑静高剂量组+666-15(CREB抑制剂)组(10mg/kg),每组15只,除对照组外均构建创伤性脑损伤模型,计算大鼠神经损伤严重程度评分(NSS),干湿比重法测定大鼠脑含水量,TUNEL法测定大鼠神经细胞凋亡情况,ELISA法测定大鼠脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)水平,Western blot法测定大鼠CREB/PGC-1α通路蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠NSS评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平、p-CREB/CREB、PGC-1α蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,醒脑静低剂量组、醒脑静高剂量组大鼠NSS评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6...     

“三通针法”电针调控Rho/ROCK(Rho kinase)及MEK/ERK信号通路对脊髓损伤大鼠胞浆型磷脂酶A2的影响

背景:胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)是治疗脊髓损伤的新型策略和靶标,其受RhoA/Rho kinase及MEK/ERK信号通路的调控。而电针可通过调控RhoA/Rho kinase和MEK/ERK信号通路治疗脊髓损伤。目的:探讨电针调控Rho/ROCK(Rho kinase)及MEK/ERK信号通路对脊髓损伤后cPLA2的影响。方法:90只雌性SD大鼠,随机取72只制备脊髓损伤模型,BBB评分后随机分为脊髓损伤组、电针治疗组、U0126治疗组(ERK阻断剂)和Y27632治疗组(ROCK阻断剂),另18只设为假手术组(只进行椎板咬除,但不进行脊髓撞击)。电针治疗组大鼠取大椎、腰阳关以及双侧次髎、足三里进行电针治疗,每天1次,每次20 min,共14次;U0126治疗组和Y27632治疗组分别予以U0126和Y27362隔天1次硬膜下腔注射。治疗结束经BBB评分后处死大鼠,收集脊髓组织,ELISA检测脊髓组织前列腺素E2、血小板活化因子的水平;TUNEL法检测脊髓神经细胞凋亡率;Western blot检测脊髓RhoA、ROCKⅡ、M...     

电针丰隆穴对高脂血症的疗效及对巨噬细胞ABCA1/JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:探究电针丰隆穴(ST40)对高脂血症患者的降脂疗效及对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法:将105例临床辨证为痰浊阻遏证的高脂血症患者随机分为电针组、药物组与对照组,其中电针组予以电针针刺丰隆穴治疗(n=35);药物组予以口服血脂康治疗(n=35);对照组不予以特殊处理(n=35)。观察治疗前及治疗后3个月和6个月3组患者血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平变化;取各组患者血清与人THP-1细胞源性巨噬细胞共培养,采用RT-qPCR及Western blot检测各组巨噬细胞ABCA1、JAK2和STAT3的mRNA和蛋白表达。结果:治疗结束后,电针组总有效率为85.7%,药物组总有效率为88.6%,两者改善血脂的总有效率无显著差异(P>0.05);电针组与药物组的TC、TG和LDL-C下降水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3个月和6个月,药物组TC、TG和LDL-C水平较治疗后升高(P...     

电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制研究

目的 探讨电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制.方法 70只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=30)、治疗组(n=20)与中和组(n=10),采用氯化锂联合戊四氮致构建癫痫大鼠模型,观察癫痫大鼠认知功能、癫痫发作频次、持续时间;TUNEL方法检测癫痫大鼠海马区凋亡程度...     

水飞蓟宾对阿尔茨海默病模型小鼠炎症反应及 NF-κ B/NLRP3/Caspase-1通路的影响

目的 探讨水飞蓟宾对APP/PS1转基因小鼠神经炎症及对NF-κ B/NLRP3/Caspase-1信号通路的影响.方法 将7月龄APP/PS1小鼠40只,随机分为模型组(model)、水飞蓟宾低剂量组(100 mg/kg)、水飞蓟宾高剂量组(200 mg/kg)及盐酸多奈哌齐组(10 mg/kg),每组10只;另取同...     

舒芬太尼调节cAMP/PKA/CREB通路减轻HIBD新生大鼠神经元损伤

目的 探讨舒芬太尼通过调节环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白（CREB信号通路减轻缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠神经元损伤的机制。方法 采用Rice-Vannucci法构建HIBD新生大鼠模型,随机分为：模型组、舒芬太尼低剂量组、舒芬太尼高剂量组、SQ22536组、舒芬太尼高剂量+SQ22536组,每组10只,另取10只新生大鼠设为假手术组,以舒芬太尼和SQ22536分组干预后,以避暗实验检测大鼠认知功能;以伊文思蓝实验检测大鼠血脑屏障功能;以H-E染色检测各组大鼠脑皮质与海马神经元病理形态;以尼氏染色检测各组大鼠脑皮质与海马神经元数量;以试剂盒检测各组大鼠血清炎性因子前列腺素2(PGE2)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、抗氧化因子总抗氧化能力（TAC）、超氧化物歧化酶（SOD）水平及脑组织cAMP水平;以免疫印迹法检测各组大鼠脑组织cAMP/PKA/CREB通路相关表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑皮质与海马神经元均病理损伤严重,步入潜伏期、脑皮质与海马神经元数量、血清TAC与SOD水平、脑组织cAMP水平及p-PKA/PKA、p-C...     

积雪草酸调节cAMP/CREB/BDNF信号通路对七氟醚诱导的新生大鼠神经毒性的影响

目的 探究积雪草酸（AA）调节环磷酸腺苷（cAMP）/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）/脑源性神经营养因子（BDNF）信号通路对七氟醚诱导的新生大鼠神经毒性的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组（Control组）、模型组（Model组）、AA低剂量组（AA-L组,10 mg/kg）、AA高剂量组（AA-H组,20 mg/kg）和AA高剂量+cAMP抑制剂SQ22536组（AA-H+SQ22536组,AA 20 mg/kg+2.22 mg/kg SQ22536）。Y迷宫实验、Morris水迷宫实验检测大鼠的空间认知能力。酶联免疫吸附实验法（ELISA）测定大鼠血清和海马组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）和丙二醛（MDA）的水平和海马组织中cAMP含量。TUNEL法检测大鼠海马组织神经细胞凋亡。实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测大鼠海马组织中CREB、BDNFmRNA的表达;Westernblot检测大鼠海马组织中p-CREB、BDNF蛋白的表达。结果 与Control组相比,Model组大鼠海马组织神经细胞凋亡率、第4、5天的逃逸潜伏期...     

P13-K／Akt信号通路对阿尔茨海默病神经元凋亡的调节作用

磷脂酰肌醇3-激酶（P13-K／Akt）途径是细胞内重要的促细胞存活通路之一，P13-K被细胞外信号活化后，激活下游蛋白激酶Akt。在阿尔茨海默病（AD）的发病过程中，凋亡相关基因Bad、GSK-3、转录因子家族、caspases家族等参与了神经元的凋亡，导致神经元的大量丢失。而活化的Akt通过磷酸化Bad、GSK-3、转录因子家族、IB、caspases等使促凋亡基因失活，从而起到抑制神经元凋亡及促进神经元存活的作用，进而减少AD神经元的大量丢失，改善AD的病理变化。     

大蒜素对过敏性哮喘小鼠气道炎症及cAMP/PKA/CREB通路的影响

目的 探究大蒜素对过敏性气道炎症的治疗作用及对cAMP/PKA/CREB通路的影响。方法 40只SPF级雄性BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型组、大蒜素组、地塞米松组,每组10只。模型组与给药组利用卵白蛋白（OVA）致敏联合雾化激发的方法建立过敏性哮喘模型。检测炎症细胞数量变化;HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变及气道重塑情况;ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、TNF-α及IgE水平变化;免疫荧光方法观察肺组织cAMP蛋白表达变化;Western blot检测肺组织PKA、CREB、p-CREB蛋白表达变化。结果 大蒜素能够改善肺组织炎症病理损伤,调节气道重塑;降低BALF中炎性细胞数量、降低IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α表达、降低IgE含量,上调IFN-γ表达;上调肺组织cAMP、PKA、CREB、p-CREB蛋白的表达。结论 大蒜素可能通过调控cAMP/PKA/CREB信号通路抑制过敏性哮喘小鼠气道炎症反应。     

虾青素调控氧自由基/JNK信号通路介导脊髓损伤小鼠神经凋亡的研究

目的 探讨虾青素(Astaxanthin,AST)调控氧自由基/JNK信号通路对脊髓损伤处神经细胞的保护作用.方法 采用高空坠物法的方法制备脊髓损伤小鼠模型.将造模成功的小鼠随机分为SCI组与虾青素组(灌胃给予25 mg/kg的AST),另取正常C57BL/6小鼠作为假手术组.评价各组小鼠后肢功能;检测各组小鼠脊髓含水...     

鹿茸多肽对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响

目的 探讨鹿茸多肽(VAP)对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响.方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和鹿茸多肽组,每组20只,另以同窝同性别阴性小鼠20只设立为对照组.鹿茸多肽组小鼠鹿茸多肽100 mg/kg灌胃给药,每天1次,连续28 d.治疗后水迷宫实验检测并记录小鼠逃避潜伏期和穿越平...     

急性脑缺血通过激活EphB2/ephrin-B1/NMDA受体信号通路促进小鼠海马神经发生

目的:观察急性脑缺血对小鼠海马神经发生的影响,并探讨该过程是否涉及EphB2/ephrin-B1/NMDA受体信号通路的激活。方法:52只C57BL/6小鼠随机分为2组,即假手术组和急性脑缺血模型组,每组26只,其中每组用于Morris水迷宫实验6只,HE染色4只,BrdU免疫荧光染色4只,双皮质素(DCX)免疫荧光染色4只,RT-qPCR实验4只,Western blot实验4只。采用双侧颈总动脉夹闭法建立小鼠脑缺血模型。HE染色观察小鼠海马CA1区病理改变;Morris水迷宫实验检测小鼠学习与记忆等认知功能的改变;免疫荧光染色观察小鼠海马区BrdU阳性细胞和DCX蛋白表达以评估神经发生情况;RT-qPCR及Western blot检测小鼠海马EphB2、ephrin-B1、reelin、微管相关蛋白2(MAP-2)及NMDA受体亚基NR2A和NR2B的mRNA及蛋白表达。结果:脑缺血小鼠海马CA1区神经元损伤显著(P<0.01),学习记忆功能显著下降(P<0.01),提示脑缺血模型成功建立;海马区BrdU阳性细胞和DCX蛋白表达显著增加(P<0.01),表明脑缺血...     

白屈菜红碱对肝纤维化小鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:探讨白屈菜红碱对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化损伤小鼠的保护作用及对转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路的影响。方法:50只C57BL/6N小鼠随机分成正常对照组、模型组及白屈菜红碱低剂量(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))3个剂量组,每组10只。采用腹腔注射CCl_4和橄榄油混合液8周诱导小鼠肝纤维化模型,白屈菜红碱组于第5周开始灌胃给药。第14周后处死小鼠,观察白屈菜红碱各剂量组干预后小鼠的肝指数,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性品红染色法观察小鼠肝组织的病理改变及肝纤维化的程度;采用分光光度计和酶标仪测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)和肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;RT-q PCR检测TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA表达;Western blot检测TGF-β1、Smad4和Smad7的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组肝纤维化的病理改变明显,肝指数、AST、ALT、HA和Hyp均显著升高(P0.05);TGF-β1、Smad3和Smad4的mRNA表达显著上调,Smad7的mRNA表达显著下调(P0.05);TGF-β1和Smad4的蛋白表达显著上调,Smad7的蛋白表达显著下调(P0.05);与模型组比较,白屈菜红碱不同剂量给药组均抑制上述指标的改变(P0.05)。结论:白屈菜红碱能够抑制CCl_4诱导的小鼠肝纤维化,其机制可能与TGF-β/Smads信号通路有关。     

灵菌红素对小鼠肺纤维化及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的观察灵菌红素对小鼠肺纤维化的改善作用,探讨Wnt/β-catenin信号通路的调控机制。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control group)、博来霉素组(Bleomycin group)和灵菌红素组(Peptide group),每组15只。除对照组外,其余各组小鼠气管内分别一次性注入100μL博莱霉素溶液(5mg/kg)以制备小鼠肺纤维化模型;造模完成后,治疗组分别腹腔注射300μg/kg灵菌红素或300 mg/kg吡非尼酮,连续28天。HE及Masson染色观察肺组织病理变化;测定肺组织羟脯氨酸含量;Western Blot检测肺组织中TGF-β1、α-SMA、Colla I、CollaⅢ及GSK-3β、p-GSK-3β、α-catenin蛋白的表达。结果灵菌红素明显改善小鼠肺组织病理损伤,降低肺组织中羟脯氨酸含量,下调TGF-β1、α-SMA、Colla I、CollaⅢ、p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达水平,上调GSK-3蛋白表达水平。结论灵菌红素改善小鼠肺纤维化,与抑制Wnt/β-catenin信号通路活性相关。     

外源性硫化氢对APP/PS1小鼠tau蛋白磷酸化及对PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的影响

目的探讨外源性硫化氢(H2S)对APP/PS1转基因小鼠海马区tau蛋白磷酸化及对PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的影响。方法将7月龄APP/PS1小鼠20只,随机分为模型组及硫氢化钠(NaHS)组,每组10只;另取同龄C57BL/6小鼠作为对照组,连续腹腔注射NaHS共6周,每天1次。HE染色检测脑组织病理学改变;TUNEL检测小鼠海马区神经细胞凋亡情况;Morris水迷宫检测各组小鼠的学习与记忆能力;免疫组化检测各组小鼠海马区tau、p-tau(Ser-202)、p-tau(Thr-231)及p-tau(Ser-396)蛋白表达情况;Western blot检测PI3K、Akt、GSK-3β、p-Akt及p-GSK-3β蛋白的表达。结果与模型组相比,NaHS组小鼠脑组织病理损伤明显改善;小鼠海马区神经细胞凋亡数量明显降低;小鼠逃避潜伏期明显缩短,单位时间内目标象限停留时间延长,穿台次数增加;p-tau(Ser-202)、p-tau(Thr-231)及p-tau(Ser-396)蛋白表达明显降低;同时,PI3K、p-Akt蛋白水平增加,而p-GSK-3β蛋白水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 NaHS可减少神经细胞凋亡,抑制tau蛋白磷酸化,改善学习记忆能力,其机制可能与调控PI3K/Akt/GSK-3β信号通路活性有关。     

慢性吗啡成瘾小鼠海马中RACK1对CREB表达水平的影响

目的：研究shRAKC1对慢性成瘾小鼠脑组织CREB mRNA、蛋白的表达变化。方法：通过条件性位置偏爱（CPP）实验分析shRAKC1对慢性吗啡成瘾小鼠的作用;通过RT-PCR检测RACK1和CREB的mRNA在成瘾小鼠海马中的表达水平,并采用免疫组化观察RACK1和CREB蛋白的表达情况。结果：慢性成瘾组与生盐水组相比,前者海马区RACK1和CREBmRNA表达升高（p〈0．05）,且吗啡诱导的CPP效应增强（p〈0．05）,而shRAKC1组与空质粒组相比,前者由吗啡诱导的CPP诱导效应减弱（p〈0．05）,同时其海马区RACK1和CREBmRNA表达下降（p〈0．05）。结论：干扰慢性吗啡成瘾小鼠RACK1表达,可以使CREB表达水平下调,并有抑锏吗啡成瘾效应的作用。