高压氧通过激活CREB/BDNF信号通路减轻阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤

目的:探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对阿尔茨海默病APP/PS1转基因(trangenic,TG)小鼠海马神经元突触损伤的影响及其作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1 TG小鼠随机分为TG组、HBO组及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)抑制剂H89组,每组10只;另取10只同龄雄性野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠作为阴性对照组(WT组)。HBO和H89组小鼠进行高压氧治疗6个疗程;WT组及TG组小鼠不给予治疗。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼氏染色检测各组小鼠海马神经元中尼氏体表达;real-time PCR检测小鼠海马区CREB及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA的表达;Western blot检测小鼠海马区突触素(synapsin,SYN)、突触后致密区蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)、生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP43)、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)及BDNF的蛋白水平。结果:与WT组相比,TG组小鼠学习记忆能力降低,筑巢分数显著降低,海马区尼氏体数量显著减少,CREB及BDNF mRNA相对表达显著减少,SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著降低(P0. 05)。与TG组相比,HBO组小鼠学习与记忆能力改善,小鼠筑巢分数显著增加,海马区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,CREB及BDNF mRNA相对表达显著增加,SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著升高(P0. 05)。与HBO组相比,H89组小鼠学习记忆能力及筑巢分数显著降低,海马区尼氏体数量减少,CREB及BDNF mRNA相对表达显著减少(P0. 05),SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著降低(P0. 05)。结论:HBO能改善APP/PS1 TG小鼠的学习记忆能力,其机制可能与激活CREB/BDNF信号通路,减轻小鼠海马神经元突触损伤有关。     

艾司西酞普兰对APP/PS1小鼠海马神经元突触功能及对BDNF-TrkB-CREB信号通路的影响

目的探讨艾司西酞普兰对APP/PS-1小鼠海马神经元突触功能及与BDNF-TrkB-CREB信号通路的关系。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组及艾司西酞普兰组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组。给予10 mg/kg艾司西酞普兰灌胃治疗,连续8周,每天一次;对照组及模型组给予等体积生理盐水。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼式染色检测各组小鼠海马DG区尼氏体变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT);Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、BDNF、TrkB、p-TrkB、CREB及p-CREB蛋白表达。结果艾司西酞普兰组改善APP/PS-1小鼠认知功能,小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长,小鼠海马DG区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,下调AChE,上调ChAT表达,且能增加SYN、PSD95及GAP43蛋白表达;此外,艾司西酞普兰还能显著增加小鼠海马区BDNF、p-TrkB及p-CREB蛋白表达,与模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论艾司西酞普兰改善小鼠海马神经元突触功能,提高APP/PS-1小鼠的学习记忆能力,可能与调控BDNF-TrkBCREB信号通路相关蛋白表达有关。     

β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法取C57小鼠6只及APP/PS-1转基因小鼠12只,C57小鼠为对照组(Control)、APP/PS-1小鼠12只随机分为模型组(APP/PS-1)和实验组(APP/PS-1+20HE),实验组APP/PS-1转基因小鼠按14.4mg/kg的剂量灌胃β-蜕皮甾酮,每日一次,对照组及模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,连续灌胃8周,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,尼氏染色观察各组小鼠海马组织病理学变化,免疫组化法观察海马Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果模型组小鼠与对照组小鼠相比,认知能力明显下降(P<0.01),海马Bcl-2和Bax蛋白表达均增加。实验组与模型组相比,学习记忆能力明显改善(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达增加,Bax蛋白的表达减少。结论β-蜕皮甾酮能够改善转基因小鼠的学习记忆能力,可能与促进海马Bcl-2蛋白表达和抑制Bax蛋白表达有关。     

电针对AD模型幼鼠学习记忆功能和海马突触可塑性的影响

目的：研究电针刺激“百会”“风府”和双侧“肾俞”对阿尔茨海默病（AD）模型幼鼠海马区突触可塑性的影响。方法：24只6周龄雄性APP/PS1转基因小鼠作为AD幼鼠模型,随机分为电针穴位组和AD模型组,每组12只;12只同月龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组。电针刺激“百会”“风府”和双侧“肾俞”穴位,每天1次,每次20 min,每周休息1 d,连续干预16周。Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆功能;Golgi染色检测海马CA1区树突棘数量;透射电镜观察海马CA1区神经元突触结构;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测海马脑源性神经营养因子（BDNF）、突触小泡蛋白（SYN）和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）的mRNA和蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较,AD模型组小鼠学习记忆功能明显下降;海马神经元树突棘部分丢失,数目减少（P<0.05）;海马区突触数量减少,结构模糊不清;海马BDNF、SYN和NR2B的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.01或P<0.05）。与AD模型组比较,电针穴位组小鼠学习记忆功能明显增强;海马神经元树...     

BDNF在APP/PS1转基因小鼠皮层和海马内的表达及其对学习记忆能力的影响

目的:探究脑源性神经生长因子(BDNF)在野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠大脑内的表达变化及其对学习记忆能力的影响。方法:选择野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,刚果红染色标记Aβ斑,TUNEL法检测细胞凋亡,采用免疫荧光和Western blot方法检测BDNF在野生型和APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马内的表达,Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。结果:APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区都形成Aβ斑,且12月龄小鼠Aβ斑的数量多于6月龄(P0.05)。12月龄APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区神经元凋亡的数量多于野生型小鼠(P0.01)。野生型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量高于APP/PS1双转基因小鼠(P0.01)。水迷宫检测显示,APP/PS1双转基因小鼠的逃逸潜伏期长于野生型小鼠,而60 s内穿越平台所位象限的次数少于野生型小鼠,且游泳轨迹杂乱无章。结论:APP/PS1双转基因型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量低于野生型小鼠,并伴随着神经元凋亡的增加,且空间学习记忆能力降低。这些结果提示APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的降低可能与BDNF表达减少导致神经元凋亡增加有关,这也许是阿尔茨海默病的病理机制之一。     

miR-142通过FMRP介导上调APP/PS1小鼠海马神经元PSD95和Synapsin I表达改善学习记忆能力

目的 探讨miR-142通过FMRP介导调控APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达及对学习记忆能力的影响。方法 将10月龄APP/PS1小鼠随机分成AD组、sh-miR-NC组、sh-miR组,同月龄的C57BL/6小鼠作为Control组,利用Morris水迷宫行为学实验检测小鼠的学习记忆能力,用Western blot和免疫荧光方法检测FMRP、PSD95和Synapsin I在各组小鼠海马神经元中的表达情况。结果 APP/PS1小鼠学习记忆能力明显下降;沉默miR-142明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,使APP/PS1小鼠海马神经元低表达的FMRP、PSD95和Synapisin I等蛋白逆转上调。结论 miR-142通过结合FMRP上调APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达水平,改善学习记忆能力。     

CCK-8及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠额叶皮质及海马CREB与pCREB表达的影响

 目的：观察八肽胆囊收缩素（CCK-8）及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠额叶皮质和海马cAMP反应元件结合蛋白（CREB）表达及其磷酸化（pCREB）的影响,初步探讨CCK-8调节吗啡戒断大鼠的受体后机制。方法：建立大鼠吗啡慢性依赖及纳络酮催促戒断模型,并给予CCK-8、CCK1受体拮抗剂L-364718和CCK2受体拮抗剂LY-288513慢性干预,应用Western blotting和免疫组织化学技术观察额叶皮质和海马CREB与pCREB 表达的变化。结果：（1） 正常组大鼠额叶皮质神经元胞浆、胞核均表达CREB蛋白,pCREB蛋白则仅在胞核中高表达;海马CA1区锥体细胞层神经元中,CREB蛋白在胞浆中高表达,胞核低表达,pCREB蛋白则仅在胞核中表达。（2） 慢性吗啡作用后CREB无明显变化,pCREB增加;急性纳洛酮催促戒断后CREB仍无明显变化,pCREB进一步升高。（3） 与戒断组相比,CCK-8、L-364718和LY-288513慢性干预对吗啡依赖戒断大鼠额叶皮质CREB蛋白表达无明显影响,pCREB蛋白表达均明显降低;L-364718和LY-288513慢性干预后,海马CREB与pCREB表达均明显降低,而CCK-8慢性干预对CREB蛋白表达无明显影响,仅pCREB蛋白表达明显降低。结论：CCK-8及其受体拮抗剂可能通过调节核转录因子CREB减轻吗啡戒断症状,并具有脑区特异性。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对APP/PS1双转基因小鼠神经元突触可塑性和神经细胞黏附分子表达的影响

目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG) 对淀粉样前体蛋白（APP）/早老素1(PS1)双转基因小鼠空间学习记忆能力、海马 CA1 区突触超微结构和神经细胞黏附分子表达的影响。方法 选用 8 周龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、EGCG组、盐酸多奈哌齐组,另以同窝阴性小鼠设立正常组,每组 12 只。连续灌胃给药 6 个月后进行相关指标检测。采用 Morris 水迷宫实验观测APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆能力;透射电子显微镜观察小鼠海马CA1区突触超微结构; 分别采用免疫荧光法及免疫印迹法检测APP/PS1转基因小鼠海马CA1区神经细胞黏附分子（NCAM）和唾液酸转移酶（ST8Sia Ⅱ）的蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组逃避潜伏期延长;与模型组比较,EGCG组、盐酸多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期下降 (P＜0.05)。电子显微镜结果显示,与模型组比较,EGCG组和盐酸多奈哌齐组突触界面曲率变化不明显;突触间隙宽度变窄,突触后致密物厚度增加（P＜0.05）。免疫荧光结果显示,海马CA1区NCAM、ST8Sia Ⅱ蛋白表达在神经元的胞体内,EGCG组和盐酸多奈哌齐组NCAM、ST8Sia Ⅱ蛋白表达明显增加 (P＜0.05),免疫印迹实验发现其含量亦呈高表达水平(P＜0.05)。结论 EGCG对 APP/PS1 转基因小鼠的空间学习记忆功能具有改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构,提高小鼠海马神经黏附分子表达有关。     

黄连解毒汤抑制APP/PS1小鼠内质网应激改善海马神经元损伤

目的 探讨黄连解毒汤抑制APP/PS1小鼠内质网应激改善海马神经元损伤的作用机制。方法32只6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组、黄连解毒汤低、中及高组,每组8只。Morris水迷宫检测各组小鼠认知功能;原位末端转移酶标记（TUNEL）染色检测各组小鼠海马区神经元凋亡情况;免疫荧光染色检测小鼠海马区成熟神经元标记物NeuN表达情况;免疫组织化学染色检测小鼠海马区内质网应激标志分子GRP78、CHOP及Caspase-12蛋白表达;Western blot检测小鼠海马区XBP1、IRE1蛋白表达。结果 与模型组相比,黄连解毒汤能明显缩短APP/PS1小鼠逃避潜伏期,增加小鼠穿越平台次数与目标象限停留时间;明显减少小鼠海马区神经元凋亡;明显增加小鼠海马区成熟神经元标记物NeuN表达;降低小鼠海马区GRP78、CHOP及Caspase-12蛋白表达;并且黄连解毒汤能够显著抑制小鼠海马区XBP1、IRE1蛋白表达。结论 黄连解毒汤能够改善APP/PS1小鼠海马神经元损伤,其作用机制可能与调控IRE1-XBP1信号通路抑制内质网应激有关。     

外源性NGF对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的观察外源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element bling protein,CREB)蛋白的调节作用。方法实验分为野生组(雄性5月龄C57BL/6小鼠6只,鼻腔给予生理盐水),AD组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只)和AD+NGF组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只,鼻腔给予小鼠NGF治疗14w),应用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力变化,应用Western blot检测小鼠脑内CREB蛋白、p-CREB蛋白的表达。结果 AD+NGF组小鼠的潜伏期和找到平台前所经过的总路程均显著低于AD组小鼠,经过目标平台位置的次数明显高于AD组小鼠,游泳总路程和平均游泳速度均明显低于AD组小鼠。外源性NGF上调APP/PS1转基因小鼠脑内CREB蛋白和p-CREB蛋白的表达。结论外源性NGF改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力可能与上调CREB和p-CREB蛋白的表达相关。     

虾青素预处理通过调控Sirt1/miR-134信号通路改善脑缺血再灌注大鼠认知功能

目的:探究虾青素(ATX)预处理是否通过调控沉默信息调节因子1(Sirt1)/微小RNA-134(miR-134)信号通路影响脑缺血再灌注(CI/R)大鼠认知功能。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(CI/R组)、ATX低剂量(50 mg/kg)组(ATX-L组)、ATX高剂量(100 mg/kg)组(ATX-H组)和ATX(100 mg/kg)+Sirt1抑制剂EX527(10 mg/kg)组(ATX+EX527组),每组12只。分组完成后给予相应的药物进行预处理,每天1次,连续3 d。末次给药1 h后,建立CI/R大鼠模型。再灌注24 h后对大鼠进行神经功能缺损评分,并采用Morris水迷宫实验检测大鼠的认知功能;HE染色观察海马神经元损伤;TUNEL染色检测海马神经元凋亡;免疫组化法检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)的表达;RT-qPCR检测海马组织miR-134水平及Sirt1、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和BDNF mRNA表达;Western blot检测海马组织Sirt1、CREB和BDNF蛋白表达。结果:与sham组相比,CI/R组大鼠神经功能缺损评分、海马神经元凋亡率、miR-134水平和逃避潜伏期均增加,空间探索实验中在目标象限停留时间和穿越平台次数、Sirt1和BDNF的mRNA和蛋白表达、CREB的mRNA表达及p-CREB/CREB比值降低(P0.05),海马神经元数量减少;与CI/R组相比,ATX-L组和ATX-H组大鼠神经功能缺损评分、海马神经元凋亡率、miR-134水平和逃避潜伏期均降低(P0.05),在目标象限停留时间和穿越平台次数、Sirt1和BDNF的mRNA和蛋白表达、CREB的mRNA表达及p-CREB/CREB比值升高(P0.05),海马神经元数量增加;在ATX干预的基础上使用EX527可明显上调miR-134的表达,减弱ATX对CI/R后大鼠认知功能的改善作用和对CREB/BDNF信号通路的激活作用。结论:ATX预处理可能通过调控Sirt1/miR-134信号通路,激活CREB/BDNF信号通路,进而改善CI/R后大鼠的认知功能。     

促红细胞生成素上调海马pCREB表达和改善脑缺血小鼠认知功能

目的: 探讨促红细胞生成素(EPO)对小鼠脑缺血所致的认知功能障碍和海马神经元损伤的保护作用及机制。方法: C57BL/6绿色荧光蛋白转基因小鼠随机分为假手术(sham)组、脑缺血/再灌注(I/R)组和EPO治疗组;采用双侧颈总动脉阻断(2-VO)方法复制小鼠全脑缺血模型,跳台实验测试小鼠学习记忆能力,Nissl染色检测海马神经元存活情况,Western blotting检测磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达水平,激光共聚焦显微镜和Neurolucida软件分析检测海马CA1区神经元形态及树突棘的变化。结果: 脑缺血导致小鼠学习记忆能力下降,海马CA1区神经元迟发性死亡和树突棘丢失;EPO治疗能显著提高脑缺血小鼠的学习记忆能力,减少脑缺血所致的海马CA1区神经元死亡和树突棘的丢失,显著上调海马CA1区神经元pCREB蛋白的表达。结论: EPO可能通过上调pCREB的表达来保护神经元损伤、防止神经元树突棘的丢失,进而改善脑缺血小鼠的认知功能。     

神经节苷脂对APP/PS1双转基因AD小鼠海马CREB表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂(GM1)对AD小鼠学习记忆能力及海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element binding protein,CREB)表达的影响。方法 PP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马CREB的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(0.05);相比于AD模型组小鼠,GM1组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,GM1组小鼠和对照组小鼠海马CREB蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于AD模型组(0.05)。结论 GM1改善AD小鼠学习和记忆功能可能与上调AD小鼠海马区CREB的表达相关。     

EGFP示踪NSCs海马移植对APP/PS1转基因鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响

目的观察神经干细胞(NSCs)移植对APP/PS1双转基因小鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响,并探讨其可能机制。方法体外分离培养EGFP转基因小鼠胎脑来源NSCs,24只12月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分入实验组(Tg-NSCs组)和AD对照组(Tg-AD组),每组12只,12只同月龄雄性野生型小鼠作为正常对照组(WT组),Tg-NSCs组进行EGFP示踪NSCs移植,其余两组进行等量磷酸盐缓冲液注射,移植部位为双侧海马区。移植4周后采用Morris水迷宫检测三组小鼠学习记忆功能,免疫荧光组化法和Western blot检测基底前脑胆碱能神经元的变化情况;Q-PCR检测海马神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA水平的变化。结果①体外悬浮培养的神经球表达EGFP阳性,免疫荧光检测显示神经干细胞特异性标志物Nestin阳性。移植4周后,可见EGFP阳性NSCs在海马注射移植部位存活并向胼胝体,海马深部和齿状回迁移,基底前脑未见EGFP阳性细胞。②与Tg-AD组相比,Tg-NSCs组基底前脑ChAT神经元及蛋白水平均增加(P<0.05),但ChAT蛋白表达低于WT组水平(P<0.05)。③Tg-NSCs组海马区神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA表达增加,高于Tg-AD组(P<0.05),且与WT组相比差异无统计学意义(P>0.05)。④水迷宫结果显示Tg-NSCs组学习记忆功能改善优于Tg-AD组(P<0.05),但仍低于WT组水平(P<0.05)。结论 NSCs海马移植并不能对该转基因鼠基底前脑胆碱能神经元丢失产生直接的替代与补充,可能通过分泌神经营养因子对基底前脑胆碱能神经元起到保护作用,从而促进其认知功能的恢复。     

Forskolin调节DHA对APP/PS1转基因小鼠突触可塑性和认知功能的增强作用

目的研究Forskolin调节DHA对APP/PS1转基因小鼠突触可塑性和认知功能的影响。方法对7月龄APP/PS1小鼠给予DHA及DHA和forskolin联合进行治疗。30d后,通过行为学试验检测其认知功能;通过组织病理学试验检测脑内细胞密度及脑突触形成能力和突触标记物Synaptophysin的表达以及通过Western blotting检测脑内pCREB1蛋白含量。结果 8月龄APP/PS1小鼠海马区面积、细胞密度、Synaptophysin和脑内pCREB1蛋白均明显降低,行为学上出现了明显的认知功能障碍。单独给予DHA以及DHA和forskolin联合给药治疗后,APP/PS1小鼠海马区面积、细胞密度、Synaptophysin和脑内pCREB1蛋白均增加,认知功能障碍得到改善,并且联合给药组的效果更为显著,但是均未恢复至生理水平。结论 DHA和forskolin联合治疗后,forskolin增强DHA对APP/PS1转基因小鼠突触病理和认知障碍的治疗作用。     

跑步对早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠海马CA1区和齿状回神经元数量的影响

目的:应用体视学方法定量研究跑步对早期APP/PS1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马CA1和齿状回区域内神经元的影响。方法:将6月龄雄性APP/PS1转基因AD小鼠,随机分为跑步组和未跑步对照组。用Morris水迷宫检测2组小鼠的空间学习记忆能力,然后用体视学方法定量研究海马CA1和齿状回区域的体积和神经元的数量。结果:与对照组相比,跑步组AD小鼠Morris水迷宫的逃避潜伏期明显缩短,平台所在象限时间百分比和穿越平台次数均显著增加。体视学研究显示,跑步组AD小鼠海马CA1和齿状回的体积分别比对照组显著增大42.8%和27.3%,并且跑步组AD小鼠海马CA1和齿状回区域内的神经元数量分别比对照组显著增加61.8%和62.2%。结论:跑步能延缓早期AD小鼠空间学习记忆能力的下降;并且可降低AD小鼠海马CA1和齿状回区域内神经元的死亡。     

葛根素对围绝经期抑郁症模型小鼠的神经保护作用及机制研究

目的:探讨葛根素对围绝经期抑郁症模型小鼠行为影响及神经生物学机制。方法:清洁级昆明小鼠饲养1周以适应环境。旷场实验(OFT)筛选后,随机分为假手术组、围绝经期抑郁症模型组、氟西汀组(FLU,3mg/kg)、雌激素组(E,0.15 mg/kg)和葛根素组(92 mg/kg),每组10只。采用小鼠双侧卵巢切除(OVX)联合慢性不可预知性温和应激(CUMS)法建立围绝经期抑郁症动物模型。各给药组于每日应激前1 h灌胃给药,其余各组给予等体积生理盐水,共计21 d。观察小鼠动情周期变化,测定行为学变化,观察海马组织形态学改变,测定脑组织单胺类递质含量,测定海马组织c AMP反应元件结合蛋白(CREB)-脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路主要蛋白表达。结果:与假手术组比较,各OVX组小鼠连续7 d内连续监测未见动情周期变化,证明去势成功;围绝经期抑郁症模型组小鼠呈现抑郁样行为,表现为自发活动及探索行为减少、行为绝望时间增加、体质量增长缓慢(P0.01或P0.05),海马神经元损伤、萎缩、数量减少、尼氏体减少及早期凋亡变化,脑组织五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)及多巴胺(DA)含量减少(P0.01);海马组织CREB-1、磷酸化c AMP反应元件结合蛋白(p-CREB-1)、BDNF及酪氨酸蛋白激酶B(Trk B)蛋白表达减少(P0.01)。与围绝经期抑郁症模型组比较,给予葛根素(Pue)治疗后,可改善围绝经期抑郁症模型小鼠抑郁样行为,表现为增加自发活动及探索行为、减少行为绝望时间、体质量增加迅速(P0.01或P0.05);减轻海马组织神经元损伤及凋亡细胞,增加脑组织5-HT、NE及DA含量(P0.01),增加海马组织CREB-1、p-CREB、BDNF及Trk B蛋白表达(P0.01),差异具有统计学意义。结论:采用小鼠双侧OVX联合CUMS可成功制备围绝经期抑郁症动物模型。葛根素具有神经保护及抗围绝经期抑郁症作用,其机制主要通过减轻海马神经元损伤、抑制神经元早期凋亡、增加脑组织单胺类递质含量及上调脑组织CREB-BDNF信号通路主要蛋白表达而发挥的。     

益气活血方对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响

目的：探讨益气活血方(YQHXD)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠学习记忆功能,海马区突触超微结构及脑源性神经营养因子(BDNF)、突触小泡蛋白(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)蛋白的影响。方法：采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组(I/R组)及YQHXD低、中、高剂量组,并设置假手术(sham)组作为对照,每组12只。YQHXD低、中、高剂量组分别按照4.2、8.4和16.8 g·kg^-1·d^-1的剂量灌胃,sham组和I/R组给予等体积生理盐水,于用药14 d后采用Longa评分法观察各组大鼠神经功能缺损情况,Morris水迷宫实验评估各组大鼠学习与记忆功能,苏木素-伊红(HE)染色观察缺血侧海马CA1区及齿状回(DG)病理变化,透射电镜观察海马区突触数量、突触后致密物(PSD)厚度和结构变化,Western blot检测海马组织BDNF、SYN和PSD95蛋白表达水平。结果：与sham组比较,I/R组大鼠神经功能缺损评分显著增高(P<0.01),水迷宫逃避潜伏期显著延长...     

脑源性神经营养因子对大鼠惊厥性脑损伤的作用及调控因素

目的观察外源性脑源性神经营养因子（BDNF）、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（pCREB）在活体内对海马BDNF表达的影响及其与神经元凋亡间的关系。方法80只Wistar大鼠,选取40只作为持续惊厥状态（SC）组,制作Wistar鼠SC模型,进一步分为SC-对照亚组（脑室内不注射）、SC-NS亚组（脑室内注射生理盐水）、SC-BDNF亚组（脑室内注射BDNF）和SC-抗pCREB抗体亚组（脑室内注射抗pCREB抗体）,每组各10只大鼠。余下40只大鼠作为对照（NC）组,不制备SC模型,进一步分组和处理方法同SC组。采用ELISA检测海马BDNF含量（pg·μg^-1）,Annexin-V检测海马细胞凋亡。结果①NC-BDNF亚组,注射侧海马BDNF含量为17.24±2.23,明显高于NC-对照亚组5.91±1.63;与NC-对照亚组相比,SC-对照亚组BDNF含量增高,达13.37±5.61。与SC-NS亚组相比,SC-BDNF亚组海马BDNF含量达55.40±4.11,呈显著性增高（P〈0.01）,同时,该侧海马细胞凋亡发生率从（8.36±0.61）%降低至（4.10±1.00）%（P〈0.01）。②NC-抗pCREB抗体亚组注射侧海马BDNF含量为5.94±0.60,与NC-对照亚组差异无统计学意义。与SC-NS亚组（15.77±2.99）相比,SC-抗pCREB抗体亚组注射侧海马BDNF含量急剧下降,为5.53±1.11,并伴有该侧海马细胞凋亡发生率的增加,由（8.36±0.61）%增至（9.37±2.50）%。③脑室内注射将诱导注射侧海马神经细胞凋亡,而对注射对侧海马影响不大。结论①脑室内注射外源性BDNF可影响同侧海马内源性BDNF表达,并对神经元凋亡有一定抑制作用。②选择性阻断CREB的磷酸化,可能通过抑制BDNF的表达,导致神经细胞凋亡。     

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D-半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 用D-半乳糖制备脑老化模型，皮下注射APPl7肽治疗D-半乳糖脑老化小鼠，3个月后取脑组织做Bcl-2、Bax、cREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。结果 D-半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染，而正常小鼠及APPl7肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少，染色淡；D-半乳糖小鼠海马内Bcl-2、CREB、AKt阳性细胞数日少，染色淡；而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。结论 促进凋亡的Bax、AIF在D-半乳糖小鼠海马表达增加；抑制凋亡的Bcl-2、CREB、AKt在D-半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D-半乳糖脑病小鼠脑内Bcl-2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达，使之接近正常。