部分液体通气治疗家猪急性肺损伤的抗炎效应

目的：探讨部分液体通气治疗肺灌洗诱导的 急性肺损伤家猪模型时，是否具有抗炎作用。方法：16只健康家猪，采 用生理盐水肺内灌洗复制急性肺损伤模型，随机分为部分液体通气组及机械通气组给予不同 治疗，观察其肺脏湿/干比值及肺通透指数，观察其血浆、支气管肺泡灌洗液及肺组织匀浆 中TNF-α、MDA含量及SOD、MPO活性。结果：（1）部分液体通气组家猪 肺脏湿/干比值、肺通透指数及支气管肺泡灌洗液中白细胞计数明显低于机械通气组。（2） 肺组织MDA、MPO含量部分液体通气组明显低于机械通气组，但两组间SOD活性无明显差别。 （3）部分液体通气组支气管肺泡灌洗液及肺组织匀浆中TNF-α含量明显低于机械通气组。 结论：部分液体通气改善动物肺损伤指标，提示以氟碳化合物为呼吸媒 介的部分液体通气对肺灌洗诱导的急性肺损伤家猪具有抗炎效应。     

二甲双胍对小鼠急性肺损伤的保护作用及可能机制研究

目的:探讨二甲双胍对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的机制。方法:体重20～25 g的小鼠15只随机分3组:①对照组(Con):气管内滴注PBS;②LPS模型组(LPS):气管内滴注1 mg/ml LPS 60μl,作用24 h;③二甲双胍治疗组(Met+LPS):于滴注LPS前0.5 h给予二甲双胍(250 mg/kg)腹腔注射,再气管内滴注LPS作用24 h;观察各组小鼠肺组织病理学变化,肺泡灌洗液中细胞总数及中性粒细胞比例变化,测定肺组织匀浆内丙二醛(MDA)含量和SOD活力变化。Western blot方法检测肺组织中SOD1变化。结果:在LPS刺激的小鼠模型中,肺泡灌洗液中细胞总数及中性粒细胞比例明显增高,肺组织内MDA含量显著升高,SOD活力明显降低。而以二甲双胍预处理小鼠可明显抑制LPS诱发的上述变化,同时二甲双胍预处理小鼠肺组织SOD1的表达明显增加。结论:二甲双胍可对LPS诱导的急性肺损伤发挥保护作用,这种保护作用可能与上调SOD1的表达有关。     

黑木耳多糖对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺组织的保护作用

目的:探讨黑木耳多糖对LPS诱导急性肺损伤大鼠肺组织的保护作用及其机制。方法:将健康SD大鼠随机分为对照组、LPS组、地塞米松组以及黑木耳多糖低、中、高浓度组,根据分组,分别给予生理盐水或不同浓度黑木耳多糖预防性灌胃7 d,第8天腹腔注射生理盐水或LPS(8 mg/kg),地塞米松组在给予LPS后腹腔注射地塞米松(3 mg/kg)。造模12 h后于腹主动脉取血,并制肺组织匀浆和肺泡灌洗液。检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺湿/干重比、髓过氧化物酶(MPO)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)等指标,做组织切片HE染色并进行肺损伤评分。结果:应用黑木耳多糖干预后,急性肺损伤大鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白含量明显下降,肺湿/干重比值降低;大鼠肺组织中MPO、NOS活性及MDA含量较LPS组降低,T-AOC含量和T-SOD活性较之升高;肺组织病理改变减轻,肺损伤指数下降。结论:黑木耳多糖具有保护LPS损伤大鼠肺组织的作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

竹节参皂苷IVa通过抗炎和抗氧化减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的：探讨竹节参皂苷IVa(saponin from Panax japonicus IVa, SPJ IVa)对大鼠急性肺损伤的影响,并对其可能的保护机制进行初步的探索。方法：将60只SD大鼠随机均分为4组,每组15只：对照组、模型组、低剂量SPJ IVa组和高剂量SPJ IVa组。以脂多糖（LPS,2 mg/kg）气管内滴注法建立大鼠急性肺损伤模型,低、高剂量SPJ IVa组大鼠在造模后30 min分别腹腔注射15和45 mg/kg SPJ IVa。造模后24 h,收集血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）和肺组织。HE染色法评估肺组织病理形态学变化;称重法测定肺组织湿重/干重值;ELISA法检测血清和BALF中白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平;试剂盒法检测丙二醛（malondialdehyde, MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和谷胱甘肽（glutathion...     

内源性CO在CCK-8减轻脂多糖所致的急性肺损伤中的作用

目的：探讨内源性一氧化碳（CO）在八肽胆囊收缩素（CCK-8）减轻LPS所致急性肺损伤（ALI）中的作用。 方法： 将56只大鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+ZnPP（HO-1特异性阻断剂）组、LPS+Hm（CO供体）组、CCK-8+LPS组、CCK-8+LPS+ZnPP组、CCK-8组7组，每组8只。各组给药后2 h，6 h，12 h行支气管肺泡灌洗、检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞（PMN）数目，并进行肺组织的形态学观察；计算大鼠死亡率；测定肺组织中MDA、CO含量。 结果： 给药2 h和6 h后，各组大鼠死亡率均为0，LPS 注入12 h后大鼠死亡率高于相应对照组，LPS+Hm和CCK-8+LPS组大鼠死亡率均低于LPS组，LPS+ZnPP和CCK-8+LPS+ZnPP组大鼠死亡率分别高于LPS和CCK-8+LPS组；LPS组肺组织均出现损伤变化，同时BALF中PMN数目和肺组织中MDA和CO含量高于相应对照组；LPS+Hm和CCK-8+LPS组肺组织损伤程度、BALF中PMN数目和肺组织中MDA含量低于相应LPS组，但肺组织中CO含量高于相应LPS组；LPS+ZnPP和CCK-8+LPS+ZnPP组肺组织损伤程度、BALF中PMN数目和肺组织中MDA含量分别高于相应LPS和CCK-8+LPS组，而肺组织中CO含量分别低于相应LPS组和CCK-8+LPS组。 结论： CCK-8可通过内源性CO介导的抗氧化、抑制PMN聚集等效应来发挥改善LPS所致的肺损伤作用。     

金纳多对内毒素诱导小鼠急性肺损伤保护作用机制的初步研究

目的：初步探讨银杏叶提取物金纳多（Ginaton）对内毒素（lipopolysaccharide, LPS）诱导小鼠的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)保护作用的可能机制。方法：于小鼠腹腔注射LPS（10 mg/kg）复制ALI动物模型。将小鼠随机分为对照组、LPS组、Ginaton组和Ginaton＋LPS组。观察各组肺组织病理学改变,测量肺湿/干重比,支气管肺泡灌洗液蛋白含量及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性,测量丙二醛（malondialdehyde, MDA）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, iNOS）和髓过氧化物（myeloperoxidase,MPO),免疫组织化学方法检测血红素加氧酶（heme oxygenase HO-1）及iNOS蛋白表达。结果： 金纳多可有效减轻LPS所致肺组织病理学变化,并降低肺湿/干重比和肺泡灌洗液中蛋白含量,降低肺泡灌洗液中LDH活性、肺组织MPO和iNOS活性,同时MDA和NO含量下降。免疫组织化学结果显示,LPS组iNOS表达上升（P＜0.01）,而血红素加氧酶（HO-1）蛋白表达未见明显变化;而预先给予Ginaton可显著提高HO-1的表达,降低iNOS的表达（P＜0.01）。结论：Ginaton可减轻LPS所致急性肺组织损伤,其机制可能与诱导HO-1的表达,下调iNOS的表达和活性有关。     

丹酚酸B减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究丹酚酸B(SAB)能否减轻脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤。方法将48只小鼠随机分为对照组、模型组(气管滴注LPS)、SAB低/中/高剂量干预组、莱菔硫烷阳性对照组,检测肺湿/干重比(W/D)值;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度;HE染色法评价肺组织病理损伤;ELISA检测BALF中TNF-α、 IL-1β和IL-6的含量,检测肺组织MPO、SOD的活性和MDA含量;Western blot检测肺组织中Nrf2、NQO1、HO1、Keap1、NF-κB及p-NF-κB的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织产生病理性变化,W/D值、BALF中蛋白质浓度、炎性细胞因子含量明显升高(P0.05),急性肺损伤模型建立成功。与模型组比较,SAB干预组的各指标值发生显著变化(P0.05);减轻LPS诱导的急性肺损伤小鼠氧化应激,且呈浓度依赖性增强,同时降低Keap1的表达(P0.01);升高Nrf2、NQO1和HO1的表达(P0.01);抑制LPS诱导的NF-κB的表达和NF-κB的磷酸化。结论 SAB可以减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

胆红素对抗脂多糖诱导致大鼠急性肺损伤的实验研究

目的：探讨胆红素对抗急性肺损伤（ALI）的作用及其机制。方法： 用雄性Wistar大鼠（200-250 g） 30只，随机分为生理盐水对照组、脂多糖（LPS）致ALI动物模型组、胆红素干预组。观察病理形态变化并检测肺组织肺系数（LI）；支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）计数、中性粒细胞（PMN）百分比、蛋白质含量（Pr）；肺泡通透指数（LPI）及肺组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平变化。结果： （1）ALI模型组LI，BALF中WBC计数、PMN百分比、Pr及LPI均显著高于生理盐水对照组（均P<0.01）。胆红素干预组LI，BALF中WBC计数和LPI均显著低于AIL模型组（均P<0.01），PMN百分比和Pr明显低于ALI模型组（均P<0.05），且与生理盐水对照组无显著差异（P>0.05）。（2）ALI模型组MDA含量显著多于生理盐水对照组（P<0.01），SOD活性和GSH-Px含量都明显低于生理盐水对照组(P<0.01)。胆红素干预组MDA含量明显低于ALI模型组 (P<0.01)，而SOD活性和GSH-Px含量显著多于ALI模型组（P<0.01，P<0.05)且与生理盐水对照组无显著差异（P>0.05）。结论： 胆红素通过其抗氧化作用对抗大鼠急性肺损伤。     

前列腺素E1对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的拮抗作用

目的: 建立急性肺损伤（ALI）大鼠模型，初步探讨lipo-PGE1对ALI的拮抗作用机制。方法: 将雄性SD健康大鼠45只随机分成3组，A：对照组；B：LPS模型组；C：lipo-PGE1＋LPS治疗组，各组分1、2和4 h 3个时点各5只观察肺组织变化，计数肺泡灌洗液（BALF）细胞数和分类，ELISA法测血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-12、IL-10的浓度。结果: 模型组肺组织肉眼观体积增大，肺表面色泽暗红，可见包膜下点状、片状出血,充血、水肿明显，BALF中白细胞总数及中性粒细胞百分比及血清中IL-1β、TNF-α和IL-10浓度明显高于正常对照组；治疗组临床表现及肉眼观肺组织充血出血情况明显轻于模型组，BALF白细胞总数及中性粒细胞百分比和血清IL-1β、TNF-α浓度显著低于模型组，IL-10浓度明显高于模型组。结论: 前列腺素E1可以通过降低肺血管的通透性，减少中性粒细胞渗出，同时下调炎症因子的表达来拮抗LPS诱导的急性肺损伤。     

秦皮苷减轻LPS诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤

目的研究秦皮苷(fraxin)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤的影响。方法实验分成Control(空白对照)、Model(肺炎模型)、fraxin-A(肺炎模型,8 mg/kg秦皮甙灌胃)、fraxin-B(肺炎模型,16 mg/kg秦皮甙灌胃治疗)、fraxin-C组(肺炎模型,32 mg/kg秦皮甙灌胃)。取肺组织和肺泡灌洗液,检测肺组织湿/干重比例,计数肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目;ELISA法检测肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量;比色法检测肺泡灌洗液中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;可见分光光度法检测肺泡灌洗液中丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量;Western blot法检测肺组织中p-NF-κBp65、核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)p65、Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)、诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、p-IκBα、IκBα蛋白表达。结果与Control组比较,Model组肺组织湿/干重比例升高,肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目增多,肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和MDA、NO含量升高,SOD含量下降,肺组织中NF-κBp65、TLR4、i NOS蛋白水平升高。与Model组比较,fraxin-A、fraxin-B、fraxin-C组肺组织湿/干重比例降低,肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目减少,肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和MDA、NO含量降低,SOD含量升高,肺组织中NF-κBp65、TLR4、iNOS蛋白水平降低。结论秦皮苷减轻LPS诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤,其机制可能与TLR4/NF-κB有关。     

地塞米松对大鼠内毒素急性肺损伤肺泡灌洗液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α含量的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠内毒素（LPS）急性肺损伤（ALI）肺泡灌洗液中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组（内毒素ALI模型组）、地塞米松干预组,每组16只.每组大鼠依据不同的观察时间点（以大鼠气管内滴注LPS的时刻为起始时刻后的1、2、4、8 h 4个时间点）分为4个亚组（n=4）.给予正常对照组气管内滴注0.9%氯化钠溶液 0.3 mL,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;急性肺损伤组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg（溶于0.3 mL 0.9%氯化钠溶液）,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;地塞米松干预组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg,10 min后股静脉注射地塞米松注射液3 mg/kg（溶于1 mL 0.9%氯化钠溶液）.各组于1、2、 4、8 h 4个时间点于心脏抽血检测动脉血氧分压（PaO2）;取肺组织进行肺湿/干质量比值（W/D）测定,并采用苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学变化;用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺泡灌洗液（BALF）中IL-1β和TNF-α的含量.结果 给予气管内滴注LPS后于1、2、4、8 h观察大鼠动脉血PaO2,急性肺损伤组、地塞米松干预组较正常对照组显著降低,两组PaO2均在4 h时达最低点,各时间点动脉血PaO2对比,地塞米松干预组均显著高于急性肺损伤组,差异均有统计学意义（P〈0.05）.在LPS致炎后1、2、4、8 h 4个时间点急性肺损伤组、地塞米松干预组各时间点W/D比值均较正常对照组显著增加,两组间比较地塞米松干预组较急性肺损伤组降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）.病理形态学观察可见急性肺损伤组与地塞米松干预组均出现肺水肿、出血、炎性细胞浸润,而地塞米松干预组肺损伤程度较急性肺损伤组减轻.ELISA试验结果显示急性肺损伤组在气管内滴入LPS 1 h后BALF中IL-1β、TNF-α含量迅速升高,4 h时达峰值,地塞米松干预后IL-1β、TNF-α表达在相同时间点均较模型组显著降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而正常对照组BALF中IL-1β、TNF-α在不同时间点无明显变化.结论 地塞米松可通过抑制内毒素性大鼠ALI肺组织中IL-1β、TNF-α的表达,改善呼吸氧合功能,减轻肺损伤.     

雾化吸入米力农对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的探讨米力农对大鼠烟雾吸入性损伤肺保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠32只,随机分为正常组（Ⅰ组）、生理盐水组（Ⅱ组）、低剂量米力农组（Ⅲ组）、高剂量米力农组（Ⅳ组）,每组8只。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组建立吸入性损伤模型,伤后30min开始分别给予雾化生理盐水、0.4mg/ml米力农、1mg/ml米力农,每次10min,间隔50min,共4次,Ⅰ组不予处理。最后一次雾化治疗结束后30min后,检测4组大鼠血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,以及肺组织匀浆中丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,取左肺组织经做病理HE染色切片光镜观察。结果Ⅲ组以及Ⅳ组的IL-6、TNF-α、MDA、MPO均比Ⅱ组降低,IL-10、SOD活性增高;Ⅳ组相对于Ⅲ组IL-6、MDA、MPO降低,SOD活性增高（P〈0.05）。光镜下Ⅲ组和Ⅳ组较生理盐水组肺组织炎细胞浸润减少,肺水肿减轻。结论吸入性损伤后,早期雾化吸入米力农可以调节炎症/抗炎症以及氧化/抗氧化的平衡,对肺损伤早期起到肺组织保护作用。     

褪黑素对烟雾吸入所致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的通过建立褪黑素干预大鼠烟雾吸入性损伤模型,探讨褪黑素对急性肺损伤的保护作用。方法成年清洁级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、损伤组和褪黑素组。空白组不做任何处理,损伤组于吸入性损伤处理后腹腔注射1%乙醇生理盐水（10ml/kg）,褪黑素组于吸入性损伤处理后腹腔注射褪黑素（10mg/kg,1次/8h）。三组大鼠分别在3h、12h、24h三个时相腹主动脉取血2ml后处死,动脉血离心后检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）含量和白细胞介素10（IL-10）。肺组织匀浆测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）的含量。取右下肺组织作病理切片,光镜下观察肺组织病理情况。结果光镜下见空白组大鼠肺泡腔结构完整,壁光滑;损伤组肺泡壁增厚,肺间质炎症细胞浸润;褪黑素组肺组织较损伤组病理表现有所减轻。褪黑素组各时相点血清TNF-α和IL-6含量高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。损伤组各时相点IL-10含量与空白组相比无统计学差异（P〉0.05）,而褪黑素组IL-10含量与空白组、损伤组相比均升高（P〈0.05）。褪黑素组各时相点肺组织SOD含量均高于损伤组（P〈0.05）,低于空白组（P〈0.05）。褪黑素组各时相肺组织MDA和MPO含量均高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。结论褪黑素可以减轻炎症及氧化应激,对烟雾吸入性损伤所致急性肺损伤发挥一定的保护作用。     

过氧化物酶增殖体激活受体-β在大鼠急性肺损伤中的作用

目的探讨过氧化物酶增殖体激活受体-β（PPARβ-）在急性肺损伤（ALI）发生发展中可能的作用,以期从新的视角揭示ALI/ARDS的发病机理,并为ALI/ARDS的防治提供理论基础。方法采用颈静脉注射脂多糖（LPS）的方法复制大鼠ALI模型,随机分为对照组和LPS组。半定量RT-PCR方法测定肺组织中PPARβ-mRNA的表达水平;免疫组织化学染色法测定肺组织PPARβ-蛋白表达水平;同时测定动脉血气分析、肺组织湿/干（W/D）比值、肺组织MPO活性、光镜观察肺组织病理变化。结果LPS组大鼠PaO2显著降低（P〈0.01）,肺组织W/D比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性以及肺组织的病理积分均显著升高（P〈0.05）。免疫组化显示对照组大鼠肺组织可表达PPARβ-蛋白,主要位于肺泡上皮细胞及肺间质细胞;与对照组相比,LPS组大鼠肺组织PPARβ-蛋白的表达均显著升高（P〈0.05）,分布在肺泡上皮细胞及炎性细胞。RT-PCR结果显示对照组肺组织表达一定量的PPARβ-mRNA,与对照组比较,LPS组大鼠肺组织PPARβ-mRNA的表达量显著升高（P〈0.05）。结论正常大鼠肺泡上皮细胞及间质细胞存在PPARβ-,在ALI形成过程中PPARβ-蛋白和mRNA表达均显著增加,提示PPARβ-可能与ALI的炎症反应相关。     

内毒素对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用

目的：研究急性肺损伤时内毒素主要成分脂多糖（LPS）对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）的损伤作用。方法：18只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、LPS模型组。通过颈外静脉给药4h后处死动物,收集肺泡灌洗液（BALF）测定表面张力、总磷脂含量（TPL）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（AKP）、丙二醛（MDA）及总蛋白（TP）含量;取右肺下叶,行HE染色光镜观察。结果：与对照组相比,LPS可增加表面张力[（23．12±2．8）vs（19．6±2．5）mN·m^-1,P〈0．05],并提高BALF中LDH活性[（8．2±1．9）vs（4．7±1．9）μkat·L^-1,P〈0．05]以及AKP活性[（256±101）vs（102±81）nkat·L^-1,P〈0．01];增加TP含量[（85±31）vs（29±16）g·L^-1,P〈0．01]和MDA含量;降低BALF中TPL含量[（370±57）vs（432±43）μg·kg^-1,P〈0．05]。同时光镜下发现LPS组呈典型间质性肺水肿表现。结论：LPS可以引起AT-Ⅱ的损伤,并抑制其合成、分泌肺表面活性物质。     

嗜酸性粒细胞通过调节巨噬细胞极化减轻脂多糖诱导的急性肺损伤

目的：观察体外嗜酸性粒细胞（Eos）对巨噬细胞极化的影响,以及体内注射嗜酸性粒细胞对脂多糖（LPS） 诱导的急性肺损伤（ALI）的作用及其相关机制。方法：原代培养小鼠巨噬细胞,在嗜酸性粒细胞存在或不存 在的情况下,将细胞暴露于脂多糖和干扰素-γ（IFN-γ）以模拟ALI,采用荧光定量PCR 检测各组巨噬细胞中促 炎及抗炎因子的表达,采用免疫印迹法检测巨噬细胞过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达;将 PPARγ siRNA（si-PPARγ）转染小鼠巨噬细胞,采用免疫印迹法检测巨噬细胞的极化情况;Balb/c 小鼠随机分为 对照组、ALI 组和ALI+Eos 组,ALI 组为通过气管内注射LPS 诱导ALI,ALI+Eos 组给予尾静脉注射嗜酸性粒细 胞,对照组尾静脉注射生理盐水。监测动物7 d 的存活情况。在LPS 注射后3 h 和24 h 处死动物,通过组织学评估 左肺损伤程度,荧光定量PCR 检测右肺促炎和抗炎细胞因子mRNA水平,采用免疫印迹法检测右肺组织PPARγ 蛋白的表达,流式细胞术检测肺泡巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和CD206 的百分比。结果：与嗜酸性 粒细胞共培养后,用LPS+IFN-γ 刺激巨噬细胞,其肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-6 mRNA水平 呈剂量依赖性下降;而IL-10 mRNA 水平和PPARγ 活性呈剂量依赖性增加。巨噬细胞与嗜酸性粒细胞共培养后, 其iNOS 表达增加和重组人精氨酸酶1（Arg1）表达减少,呈剂量依赖性逆转。转染si-PPARγ 抑制了嗜酸性粒细 胞促进巨噬细胞向M2表型分化的作用。静脉注射嗜酸性粒细胞显著提高了ALI 小鼠的存活率,且显著改善小鼠 的肺组织损伤,降低肺组织IL-6 和TNF-α mRNA水平,增加IL-10 mRNA 水平和PPARγ 活性。此外,嗜酸性粒 细胞干预增加了肺泡巨噬细胞CD206 的百分比,而iNOS 的百分比明显降低。结论：嗜酸性粒细胞通过促进巨噬 细胞M2型极化改善LPS 诱导的ALI。     

中性粒细胞胞外诱捕网在新生大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在新生大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用。方法:取出生7 d的SD大鼠30只,按照随机数字表法分成生理盐水对照组、ALI组及ALI+脱氧核糖核酸酶(Dnase)组,每组10只。ALI组用脂多糖(LPS)以20 mg/kg的剂量腹腔注射,ALI+Dnase组则在注射LPS后即腹腔注射Dnase(5 mg/kg)。给药6 h后,水合氯醛麻醉大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),荧光酶标仪检测BALF中游离DNA(cf-DNA)的含量;右肺组织固定于4%多聚甲醛中,HE染色观察各组大鼠肺组织形态结构;左肺组织制备肺组织匀浆,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肺组织匀浆中白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;使用免疫荧光法与Western blot检测各组大鼠肺组织中瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)及髓过氧化物酶(MPO)的生成情况。结果:与对照组相比,ALI组与ALI+Dnase组中cf-DNA、CitH3、MPO、IL-6及TNF-α水平均升高(P<0.05),肺组织中炎性细胞浸润严重;与ALI组相比,ALI+Dnase组新生大鼠肺组织中cf-DNA、Cith3、MPO、IL-6及TNF-α水平降低(P<0.05),ALI+Dnase组炎症浸润程度降低。结论:新生大鼠ALI中,NETs水平为反映肺组织损伤的重要指标,NETs可能为治疗新生儿ALI的新靶点。     

罗哌卡因通过 HMGB1 / NF-κB 通路减轻 LPS 诱导的小鼠急性 肺损伤

目的 探讨罗哌卡因 ( ropivacaine, Rop) 对脂多糖 ( lipopolysaccharide, LPS) 诱导的小鼠急性 肺损伤 (acute lung injury, ALI) 的作用及其机制。 方法 气管内滴注 LPS 诱导肺损伤小鼠模型, 并将小鼠 随机分为 6 组: 对照组、 LPS 组、 罗哌卡因 0. 25、 0. 5、 1 μmol / L 组和右美托咪定 (dexmedetomidine, Dex) 100 μg / kg 组。 Hematoxylin-eosin (H&E) 染色评估肺组织的组织病理学变化; ELISA 法测定肺组织中髓过 氧化物酶 (myeloperoxidase, MPO)、 丙二醛 ( malondialdehyde, MDA)、 超氧化物歧化酶 ( superoxide dismutase, SOD) 和谷胱甘肽过氧化物酶 ( glutathione peroxidase, GSH-Px) 的活性; 检测血清中 IL-6、 IL-1β 和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α) 的表达; Western 印迹检测 HMGB1 / NF-κB 通路相关蛋 白的表达。 结果 与对照组比较, LPS 诱导肺泡外膜增厚、 出血和肺水肿; 肺损伤评分和肺含水量增加; MPO 和 MDA 活性增加, SOD 和 GSH-Px 水平降低; IL-6、 IL-1β 和 TNF-α 水平升高; HMGB1 蛋白和 NF-κB P65 磷酸化水平升高, 有显著性差异 (P< 0. 05)。 与 LPS 组比较, 罗哌卡因 0. 5、 1 μmol / L 组小鼠肺损伤 程度明显减轻; MPO 和 MDA 活性降低, SOD 和 GSH-Px 水平升高; IL-6、 IL-1β 和 TNF-α 水平降低; HMGB1 蛋白和 NF-κB P65 磷酸化水平降低, 有显著性差异 (P< 0. 05)。 结论 罗哌卡因通过抑制 HMGB1 / NF-κB 通路, 有效减弱了 LPS 引起的肺组织损伤。