卵巢肿瘤中谷胱甘肽S转移酶的及其生物学意义

谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴｓ）是一组与人体解毒功能有关的同功酶系，目前对其亚型ＧＳＴ－π的研究最为广泛。体外试验显示ＧＳＴｓ与顺铂、烷化剂和阿霉素的耐药性相关。应用免疫组化法和生化法分析人体卵巢肿瘤，发现卵巢恶性肿瘤中ＧＳＴ－π的表达水平明显高于良性肿瘤，化疗药物可诱导卵巢癌细胞中ＧＳＴ－π表达水平升高。卵巢恶性肿瘤的ＧＳＴ－π表达与临床分期、残余瘤、组织学类型和分化程度均无关，而与耐药性和预后的关     

卵巢癌谷胱甘肽转移酶-π的表达及与预后的关系

目的观察卵巢恶性肿瘤组织中谷胱甘肽转移酶-π的表达及与临床病理及预后的关系。方法采用免疫组化技术(S-P法)对30例卵巢恶性肿瘤组织中的谷胱甘肽转移酶(GST-π)的表达进行检测，分析其与病理类型、组织学分级、临床及预后的关系。结果(1)30例卵巢恶性肿瘤组织中谷胱甘肽转移酶的阳性表达率为强阳性6例，阳性5例弱阳性9例，阴性为10例，GST-π在卵巢癌中表达阳性率在病理分期G1、G2、G3分别为10％、16．7％、40％，GST-π的阳性表达率与临床分期及细胞分化程度有关。结论本研究结果表明测定卵巢恶性肿瘤组织中的谷胱甘肽转移酶，其结果对选择化疗用药具有指导意义，并可作为一个临床预后的参考指标。     

卵巢癌中耐药标志的表达及临床意义

目的 研究P-糖蛋白(p-gp)和谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)与肺耐药相关蛋白(LRP)在卵巢上皮性癌中的表达及其对化疗疗效的影响.方法 选择中国医科大学附属第一医院1998年1月至2004年5月存档蜡块,应用免疫组化方法对70例卵巢上皮性癌进行p-gp、GST-π、LRP检测.结果 (1)p-gp、GST-π、LRP卵巢上皮性癌中的阳性表达分别为31.4%(22/70)、65.7%(46/70)、58.6(41/70),与其在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤中的表达差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)p-gp、GST-π、LRP的表达与临床分期、组织学类型均无相关性.(3)对首次术后有残余病变的42例患者进行化疗评价,p-gp阳性组与阴性组对化疗的有效率为40%及66.7%,二组比较差异无统计学意义(P＞0.05);GST-π阳性组与阴性组对化疗的有效率为42.3%及81.3%,差异有统计学意义(P＜0.05);LRP阳性组与阴性组对化疗的反应率为40%及82.4%,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)p-gp、GST-π、LRP存在共表达.结论 GST-π、LRP阳性表达者化疗疗效差,检测GST-π、LRP对前瞻性预测化疗耐药有一定价值.     

耐药相关基因GST-Л、LRP在卵巢上皮性恶性肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:观察卵巢上皮性恶性肿瘤组织中GST-Л、LRP的表达与临床和病理因素的关系。方法:采用免疫组化S P法对30例卵巢上皮性恶性肿瘤组织中的GST-Л和LRP的表达进行检测,分析其表达与病理类型、组织学分级、化疗疗效与预后的关系。结果:①30例卵巢上皮性恶性肿瘤组织中GST Л、LRP的阳性表达率分别为6 6 .6 %、73.3%。②LRP、GST Л在临床Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率分别为99.0 %、76 .5 %,均显著高于Ⅰ～Ⅱ的阳性表达率4 6 .2 %,1 6 .7%。③LRP与GST- Л在G3中的表达率均大于G1～G2 ,但相比差异无显著性;④LRP与GST- Л有共表达现象,两者均强阳性者其化疗效果及预后较差。结论:LRP与GST Л在卵巢上皮性恶性肿瘤中有较恒定的表达,且与临床分期有关,检测两者的表达可预测化疗近期疗效,指导临床化疗方案的选择。     

卵巢恶性肿瘤中GST—π表达与肿瘤内在性耐药及患者预后关系…

目的：探讨谷胱甘肽Ｓ－转移酶π型（ＧＳＴ－π）在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其与肿瘤内在性耐药和患者预后的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测４５份卵巢恶性肿瘤组织和１０份正常卵巢组织中ＧＳＴ－π的表达，结合肿瘤细胞体外药物敏感试验结果和患者２ａ随访结果。结果：１．４５份卵巢恶性肿瘤组织ＧＳＴ－π阳性表达率为１００％，１０份正常卵巢组织仅２份呈弱阳性。２．１８份卵巢恶性肿瘤组织ＧＳＴ－π阳性率表达率为     

卵巢恶性肿瘤组织谷胱甘肽S转移酶的表达及其与化疗耐药的关系

目的检测卵巢肿瘤组织中谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ－π）的表达,并探讨其与化疗耐药的关系。方法采用免疫组化ＳＰ法对５３例卵巢恶性肿瘤、２０例卵巢良性肿瘤和１７例正常卵巢组织进行ＧＳＴ－π检测,并对相关的临床病理因素进行分析。结果（１）卵巢恶性肿瘤组织中ＧＳＴ－π表达阳性率为６０．４％,卵巢良性肿瘤组织中ＧＳＴ－π表达阳性率仅为１０．０％,而正常卵巢组织中则无一例ＧＳＴ－π表达阳性;（２）不同病理类型、临床分期和术后残留灶大小的恶性肿瘤组织中ＧＳＴ－π表达阳性率相比较,差异无显著性;（３）恶性肿瘤中,初治和复发的ＧＳＴ－π表达阳性率分别为４７．２％和８８．２％;（４）ＧＳＴ－π表达阳性的患者对化疗的有效率低于ＧＳＴ－π表达阴性的患者,前者为３７．５％（１２／３２）,而后者为７６．２％（１６／２１）;（５）ＧＳＴ－π表达阳性的患者治疗后１年及３年生存率低于ＧＳＴ－π表达阴性者。结论卵巢恶性肿瘤组织中ＧＳＴ－π表达与其化疗耐药有关。ＧＳＴ－π表达的检测对临床判断化疗敏感性和预后有一定的参考价值。     

人卵巢癌中谷胱甘肽硫转移酶的过度表达作为化疗耐药的一个指标

抗肿瘤化疗的成功与否,在很大程度上受到肿瘤抗药性的制约。谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)是一组多功能酶,催化谷胱甘肽与各种电离化合物包括细胞毒性药物结合。在人类,主要有三类结构和功能不同的GSTs。有研究表明,谷胱甘肽硫转移酶π(GST-π)是耐药细胞系中主要的同工酶。作者用免     

卵巢恶性肿瘤中GST-π表达与肿瘤内在性耐药及患者预后关系的研究

目的：探讨谷胱甘肽Ｓ－转移酶π型（ＧＳＴ－π）在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其与肿瘤内在性耐药和患者预后的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测４５份卵巢恶性肿瘤组织和１０份正常卵巢组织中ＧＳＴ－π的表达，结合肿瘤细胞体外药物敏感试验结果和患者２ａ随访结果。结果：１．４５份卵巢恶性肿瘤组织ＧＳＴ－π阳性表达率为１００％，１０份正常卵巢组织仅２份呈弱阳性。２．１８份卵巢恶性肿瘤组织ＧＳＴ－π染色程度（＋）、（）、（）三组之间阿霉素对肿瘤细胞的抑制率有统计学差异（Ｐ＜０．０５），其中（）组抑制率明显低于（＋）组（Ｐ＜０．０５）。其余５种药物对肿瘤细胞抑制率差异无显著性（均Ｐ＞０．０５）。３．２８例Ⅲ期卵巢上皮性癌患者２ａ存活率为３９．３％，存活时间≥２ａ和＜２ａ两组ＧＳＴ－π表达差异有显著性（Ｐ＜０．０１），前者染色程度明显弱于后者。结论：ＧＳＴ－π表达在卵巢恶性肿瘤对阿霉素内在性耐药中起重要作用，而与顺铂、卡铂、５－ＦＵ、更生霉素、长春新碱内在性耐药无关。ＧＳＴ－π表达高提示卵巢癌患者预后差，可供临床评价患者预后时参考。     

65例早期宫颈癌耐药基因产物与临床预后关系的初步探讨

目的:探讨耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-s-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)在宫颈癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学方法检测65例宫颈癌中P-gp、TopoⅡ、GST-π、TS的表达,并分析其与临床预后之间的关系.结果:P-gp的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),与UICC分期、局部复发无关(P>0.05);TopoⅡ的表达与淋巴结转移、局部复发有关(P<0.05),与肿瘤分化程度、UICC分期无关(P>0.05);GST-π的表达与各个指标之间均有关(P<0.05);TS与淋巴结转移、UICC分期有关(P<0.05),与局部复发、肿瘤分化无关(P>0.05)。经多因素Cox比例风险模型分析显示:局部复发、淋巴结转移及TopoⅡ、GST-π的表达与宫颈癌患者术后生存率有关(P<0.05)。结论:联合检测宫颈癌中P-gp TopoⅡ、GST-π、TS对判断宫颈癌的预后十分必要;局部复发、淋巴结转移及TopoⅡ、GST-π的表达可作为宫颈癌患者独立的预后因素。     

绒癌耐药细胞系的建立及获得性耐药机制的研究

目的采用目前治疗绒癌最常用的药物诱导建立绒癌的耐药细胞系,比较不同药物引起耐药机制的差异.方法采用浓度梯度递增法和间歇诱导法,分别用5-FU,MTX,VP-16诱导绒癌细胞系JEG-3,建立相应耐药细胞系,采用MTT法测定耐药细胞系对5-FU、MTX、KSM、VP-16和Taxol的耐药指数,用RT-PCR测定亲本细胞及各耐药细胞系耐药相关基因如肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、二氢叶酸还原酶(DHFR)和多药耐药基因(MDR-1)的mRNA表达,比较各种细胞生长曲线,细胞群体倍增时间.结果JEG-3细胞系在诱导耐药细胞前即有LRP、MRP、GST-π、DHFR的共表达,诱导耐药后上述各基因的表达无明显变化.诱导耐药前JEG-3细胞无MDR1的表达,用VP-16、5-FU间歇诱导的方法诱导形成的耐药细胞系有MDR-1表达,且耐药指数增加.结论JEG-3耐药细胞系耐药性的产生与MRP、LRP、GST-π、DHFR表达的关系不密切,而与MDR1的表达有关.     

卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平及其受体Edg-4表达的研究

目的探讨卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)水平及其受体Edg-4在卵巢肿瘤组织中的表达情况。方法2002-01-2004-01扬州大学临床医学院测定57例卵巢恶性肿瘤患者、66例卵巢良性肿瘤患者及37例健康对照者血浆LPA水平和血清CA125水平,比较两者在诊断卵巢恶性肿瘤中的敏感性和特异性。并用RT-PCR方法检测其中18例卵巢恶性肿瘤患者及24例卵巢良性肿瘤患者肿瘤组织Edg-4mRNA的表达情况。结果卵巢恶性肿瘤患者、卵巢良性肿瘤患者及健康对照者血浆LPA水平分别为(5.63±2.35)μmol/L、(2.80±1.13)μmol/L、(2.51±1.08)μmol/L,前者血浆LPA水平与后两者相比,差异有统计学意义(P<0.01);后两者之间血浆LPA水平差异无统计学意义(P>0.05)。LPA和CA125在诊断卵巢恶性肿瘤的敏感性和特异性方面差异无统计学意义(P>0.05)。18例卵巢恶性肿瘤患者肿瘤组织中有16例Edg-4mRNA表达阳性,24例卵巢良性肿瘤患者肿瘤组织中有11例Edg-4mRNA表达阳性,两者在Edg-4mRNA表达方面差异有统计学意义(P<0.01)。结论卵巢恶性肿瘤患者血浆LPA水平明显高于良性肿瘤患者和健康对照者;大多数卵巢恶性肿瘤患者表达Edg-4受体,部分卵巢良性肿瘤患者表达Edg-4受体,血浆LPA及其受体Edg-4可能成为治疗卵巢恶性肿瘤的新靶点。     

金属硫蛋白在妇科恶性肿瘤中的研究进展

金属硫蛋白(MT)不仅在维持机体内金属离子稳态和重金属解毒等方面发挥着重要的作用,同时也与肿瘤的发生发展密切相关。子宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢上皮性癌是严重威胁女性生命健康的生殖系统三大恶性肿瘤。研究表明,MT在妇科恶性肿瘤中多呈高表达,且其表达水平与肿瘤的恶性程度及耐药性密切相关。因此,深入研究MT在肿瘤发生发展中的分子机制,对妇科恶性肿瘤的早期诊断、预后评估及靶向治疗等方面均具有重要的指导意义。     

宫颈鳞状细胞癌ATP-TCA法体外药敏试验与耐药相关蛋白表达的关系

目的:探讨代表不同耐药机制的P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)在原发宫颈鳞癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系;分析三磷酸腺苷生物荧光法体外药敏试验(ATP-TCA)结果与耐药蛋白表达的关系。方法:收集32例宫颈鳞癌患者的新鲜癌组织制成单细胞悬液,采用ATP-TCA法成功检测上述细胞对11种化疗药物(共16种组合)的体外敏感性;采用EnVision二步法免疫组化检测32例宫颈鳞癌组织中P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS蛋白的表达,并分析其与临床分期、肿瘤分化程度的关系。结果:耐药蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS在宫颈鳞癌组织中的表达与临床分期、肿瘤分化程度无相关性;耐药蛋白P-gp表达与体外PTX+CBP耐药正相关(P=0.040);耐药蛋白TS表达与体外5-FU、5-FU+MMC、5-FU+DDP耐药正相关(P=0.015,0.012,0.006);TopoⅡ,GST-π蛋白表达与宫颈鳞癌体外耐药均无相关性。结论:体外药敏试验联合免疫组化检测,有可能用于宫颈鳞癌化疗前药敏预测。     

6种常见耐药标志物在氟尿苷耐药绒癌细胞系构建过程中的动态表达

目的:通过检测对氟尿苷(FUDR)耐药的绒癌细胞系构建过程中肺耐药相关蛋白(LRP)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、survivin、谷胱甘肽 S-转移酶-π(GST-π)、多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)6种常见耐药标志物的动态表达,探讨其耐药机制并进行耐药标志物的初步筛选.方法:用化学发光法和荧光定量PCR技术,分别检测不同浓度FUDR诱导的JEG-3细胞中β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的分泌量和上述6种常见耐药标志物在耐药细胞构建过程中的动态表达.结果:不同基因在药物诱导过程中的变化趋势不尽相同.只有LRP基因的表达随着诱导药物浓度和肿瘤细胞耐药性的增加而逐渐上调.结论:耐药的产生是分阶段的,不同阶段有不同的因素参与.就目前的研究结果而言,只有LRP的表达变化与FUDR诱导浓度和耐药性有明显正相关,提示其可以作为绒癌对FUDR耐药的候选预测指标.     

丹参酮Ⅱa对人绒毛膜癌甲氨蝶呤耐药细胞株JAR/MTX作用的体外研究

目的探讨丹参酮Ⅱa对人绒毛膜癌甲氨蝶呤耐药细胞系（JAR/MTX）的杀伤与逆转耐药效应及与甲氨蝶呤（MTX）的协同增效作用。方法根据对JAR/MTX的不同处理分为空白组、DMSO溶媒组、MTX组和丹参酮Ⅱa组。采用HE染色进行显微镜下各组细胞形态学观察;电化学发光法测定药物作用前后各组细胞β-人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）水平;免疫组化染色法测定各组细胞热休克蛋白27（HSP27）及谷胱甘肽转移酶（GST-π）表达;MTT法检测丹参酮Ⅱa作用前后半数抑制浓度并计算其逆转耐药倍数。结果丹参酮Ⅱa组药物作用24h可见细胞核肿胀,核膜皱缩及消失,核分裂象减少及坏死,而MTX组细胞坏死不明显。GST-π主要在细胞质中表达,HSP主要在细胞核中表达。丹参酮Ⅱa组药物作用24h后HSP27的表达率为20.20%、GST-π的表达率为16.30%,与空白组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;丹参酮Ⅱa组药物作用24h后β-hCG为（23.04±11.32）U/L,与空白组[（358.80±19.00）U/L]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;丹参酮Ⅱa与MTX配伍作用于JAR/MTX细胞后的逆转耐药倍数为5.3。结论丹参酮Ⅱa对人绒毛膜癌耐药细胞株JAR/MTX具有杀伤与逆转耐药的效应,丹参酮Ⅱa可使JAR/MTX细胞HSP27及GST-π的表达明显下调,并且与MTX同时应用具有协同增效作用。     

卵巢癌患者化疗前、后谷胱甘肽S转移酶-π的表达及谷胱甘肽的浓度

对化学耐药的机理有几种学说,包括药物累积的减少,由蛋白质如谷胱甘肽(glutathione,GSH)在组织中去毒作用的增加及DNA修复的增加等。其中GSH介导药物失活的增加,在化疗耐药性中起重要作用。谷胱甘肽S转移酶-π(glutathione S-transferase-π,GST-π)是胞浆中的多功能蛋白质,能催化     

子宫颈癌组织三磷酸腺苷肿瘤体外药物敏感试验及其与耐药蛋白表达的关系

目的探讨三磷酸腺苷肿瘤体外药物敏感试验（ATP-TCA）用于检测宫颈癌组织对化疗药物敏感性的可行性,分析耐药蛋白P糖蛋白（P—gp）、谷胱甘肽巯基转移酶π（GST-π）、胸苷酸合成酶（as）的表达与ATP-TCA结果的关系。方法采用ATP—TCA对35例宫颈癌患者的新鲜癌组织进行体外药物敏感试验,分别检测宫颈癌组织对紫杉醇、顺铂、博来霉素、吉西他滨、5氟尿嘧啶、依立替康6种化疗药物的敏感性;采用免疫组化法检测35例宫颈癌患者癌组织中p-gp、GST-π、TS蛋白的表达;分析ATP-TCA结果与P-gp、GST-π、鸭蛋白表达的关系。结果（1）35份宫颈癌标本中,32份标本成功进行了ATP-TCA检测,ATP—TCA的可评价率为91％。宫颈癌组织对药物的敏感率分别为紫杉醇88％（28／32）、5氟尿嘧啶72％（23／32）、吉西他滨62％（20／32）、顺铂19％（6／32）、博来霉素16％（5／32）、依立替康12％（4／32）。（2）GST-π、鸭蛋白的高表达率[分别为66％（21／32）、44％（14／32）]与宫颈癌组织体外对顺铂、5氟尿嘧啶的耐药有相关性（P=0．011、P=0．022）,P-gp蛋白的阳性表达率[41％（13／32）]与宫颈癌组织体外对紫杉醇、5氟尿嘧啶、吉西他滨、顺铂、依立替康、博来霉素的耐药无相关性（P＞0．05）。结论ATP-TCA可用于宫颈癌患者个体化化疗的药物筛选。GST-π、鸭蛋白可能是预测宫颈癌患者对顺铂、5氟尿嘧啶耐药的标志物。     

卵巢癌组织谷胱甘肽S转移酶-π表达与耐药关系的研究

目的 :研究卵巢癌GST -π表达与化疗耐药及预后的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测 6 8例卵巢上皮癌GST -π的表达 ,分析GST -π表达与化疗耐药及预后之间的关系。结果 :卵巢上皮癌GST -π的总阳性率为 6 9.1% ,GST -π表达与一般临床病理参数无相关性。GST -π阳性和阴性病例对化疗的反应率分别为 2 9.8%和 90 .5 %(P <0 .0 0 5 )。GST -π阳性患者的预后明显比阴性者差 (P =0 .0 0 4 )。结论 :卵巢癌GST -π表达在耐药形成中起重要作用 ,GST -π可作为估计卵巢癌患者预后的独立标志物     

卵巢肿瘤组织中c-met蛋白表达的意义

目的：探讨肝细胞生长因子（HGF）受体c-met蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达及其与细胞增生和血管形成之间的关系。方法：应用免疫组化SABC法检测34例卵巢恶性肿瘤、15例卵巢交界性肿瘤和20例卵巢良性肿瘤组织的c-met蛋白的表达及其增殖细胞核抗原（PCNA）指数和微血管密度（MVD）。结果：c-met在卵巢良性，交界性和恶性肿瘤组织之间的表达有显著性差异，且有逐渐增高趋势。在卵巢恶性肿瘤组织中c-met蛋白表达与PCNA指数及MVD数值相关，c-met蛋白表达与卵巢恶性肿瘤病理分化之间密切相关。结论：HGF和c-met可能促进细胞增殖和血管形成的途径而在卵巢恶性肿瘤的发生，发展过程中起重要作用。     

RASSF1A基因在卵巢癌组织及腹腔冲洗液中的表达及意义

目的探讨RASSF1A(RAS 相关区域家族1A) 基因转录表达与卵巢癌发生、发展的关系.方法 2003年7月至2005年2月蚌埠医学院附属医院采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 的方法检测42 例卵巢恶性肿瘤患者癌组织、腹腔冲洗液(或腹水)中RASSF1A mRNA 的表达水平,以及11例正常卵巢和19例卵巢良性肿瘤组织中RASSF1A mRNA的表达.结果 RASSF1A mRNA 在所有正常和卵巢良性肿瘤组织中均表达,而在卵巢恶性肿瘤组织中存在较高的表达缺失率(57.1%).RASSF1A mRNA的表达缺失率与卵巢恶性肿瘤的临床分期有关,Ⅲ～Ⅳ期卵巢恶性肿瘤组织中RASSF1A mRNA的表达缺失率显著高于Ⅰ～Ⅱ期,淋巴结转移阳性者RASSF1A mRNA 表达缺失率(73.9%) 明显高于淋巴结转移阴性者(36.8%) (P< 0.05) ;腹腔冲洗液(或腹水)细胞学阳性者,其RASSF1A mRNA的表达缺失率显著升高.结论 RASSF1A 转录表达缺失可能参与调控卵巢癌的发生、发展过程,并且提示RASSF1A表达可作为判断卵巢癌预后的一个指标.