脂联素在兔主动脉动脉粥样硬化斑块内的表达研究

目的:探讨脂联素在兔动脉粥样硬化斑块内的分布特点。方法:选择动脉粥样硬化新西兰兔12只,对照组12只,处死每组动物后取出主动脉,观察脂联素在各组动脉粥样硬化斑块中的表达。结果:动脉粥样硬化兔血管壁脂联素蛋白表达均显著低于正常对照组(P<0.05)。结论:脂联素蛋白在动脉粥样硬化兔血管壁表达显著减低,脂联素蛋白表达水平上调可抑制动脉粥样硬化的发展。     

Pentraxin3蛋白在兔动脉粥样硬化斑块中的表达研究

目的研究炎症因子正五聚素蛋白3(pentraxin 3,PTX3)在兔动脉粥样硬化斑块及正常动脉组织中的表达。方法 16只新西兰大白兔随机分为正常饮食对照组和高脂饮食组(每组8只),分别喂食普通饲料(100 g/d)和高脂饲料(100 g/d),持续16周。于实验第8周和第16周时,超声检查观察高脂饮食组主动脉粥样硬化斑块形成情况。于实验第16周,取高脂饮食组兔主动脉组织,苏丹Ⅲ染色观察主动脉粥样硬化情况。分别采用Real-Time PCR技术和Western blotting法测定高脂饮食组兔动脉粥样硬化斑块和正常饮食对照组兔正常动脉组织中PTX3 mRNA及蛋白表达。结果实验第16周,超声检查和组织学观察均证实高脂饮食组兔主动脉有粥样硬化斑块形成;高脂饮食组动脉粥样硬化斑块中PTX3 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于正常饮食对照组正常动脉组织,PTX3 mRNA表达分别为(2.815±0.531)和(1.022±0.175),PTX3蛋白表达分别为(0.470±0.056)和(0.248±0.053),差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PTX3在动脉粥样硬化斑块中的表达明显上调,是参与动脉粥样...     

低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块中HIF-1α、VEGF及MMP-9表达的影响

目的观察低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法将日本大耳兔随机分为常氧对照组和低压缺氧组,高胆固醇饮食12周建立兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变模型后,取主动脉内膜组织分别采用免疫组织化学方法和real-time PCR检测斑块组织中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA表达。结果低压缺氧组高斑块中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA的表达明显升高,与常氧对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低压缺氧能明显升高斑块中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA表达,可降低兔动脉粥样硬化斑块的稳定性。     

Pentraxin 3蛋白在兔动脉粥样硬化斑块中的表达研究

目的研究炎症因子正五聚素蛋白3(pentraxin 3,PTX3)在兔动脉粥样硬化斑块及正常动脉组织中的表达。方法 16只新西兰大白兔随机分为正常饮食对照组和高脂饮食组(每组8只),分别喂食普通饲料(100 g/d)和高脂饲料(100 g/d),持续16周。于实验第8周和第16周时,超声检查观察高脂饮食组主动脉粥样硬化斑块形成情况。于实验第16周,取高脂饮食组兔主动脉组织,苏丹Ⅲ染色观察主动脉粥样硬化情况。分别采用Real-Time PCR技术和Western blotting法测定高脂饮食组兔动脉粥样硬化斑块和正常饮食对照组兔正常动脉组织中PTX3 mRNA及蛋白表达。结果实验第16周,超声检查和组织学观察均证实高脂饮食组兔主动脉有粥样硬化斑块形成;高脂饮食组动脉粥样硬化斑块中PTX3 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于正常饮食对照组正常动脉组织,PTX3 mRNA表达分别为(2.815±0.531)和(1.022±0.175),PTX3蛋白表达分别为(0.470±0.056)和(0.248±0.053),差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PTX3在动脉粥样硬化斑块中的表达明显上调,是参与动脉粥样...     

阿托伐他汀钙对动脉粥样硬化兔主动脉TLR2表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀钙对新西兰大白兔主动脉粥样硬化斑块内TLR2表达的影响及其抗动脉粥样硬化TLR机制。方法:将新西兰大白兔30只分为高脂饮食加阿托伐他汀钙组、高脂饮食组、正常对照组,喂养8周后处死每组动物取出主动脉,测量动脉粥样硬化病变面积;行免疫组化染色及Western blot检测,观察兔主动脉粥样硬化程度及TLR2蛋白在动脉粥样硬化斑块中的表达。结果:高脂饮食加阿托伐他汀钙组、高脂饮食组动脉粥样硬化斑块面积与动脉内膜面积比值及TLR2蛋白表达均高于正常对照组;高脂饮食加阿托伐他汀钙组动脉粥样硬化斑块面积与动脉内膜面积比值及TLR2蛋白表达均低于高脂饮食组。结论:阿托伐他汀钙可使主动脉粥样斑块内TLR2蛋白表达下调,具有显著抗动脉粥样硬化的作用。     

小剂量阿司匹林对动脉粥样硬化兔主动脉MMP-2表达的影响

目的评估小剂量阿司匹林对动脉粥样硬化兔主动脉基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达及动脉硬化严重程度的影响。方法 24只雄性新西兰兔随机分为对照组(喂食普通兔料)、模型组(喂食高脂饲料)、阿司匹林组(喂食高脂饲料并给予小剂量阿司匹林干预),每组8只。饲养12周后处死动物,取主动脉进行病理学检查,分别应用RT-PCR和Western-bolt分析主动脉病灶中MMP-2 mRNA和蛋白的表达。结果病理学大体观察发现,对照组无动脉粥样硬化斑块形成,模型组和阿司匹林组主动脉斑块最大厚度、平均斑块厚度、管腔狭窄度和斑块所占周径比值等4项指标两两比较均有显著性差异(P<0.01)。对照组中MMP-2蛋白和mRNA呈低水平表达,而在模型组中的表达均明显增高,阿司匹林组MMP-2蛋白和mRNA的表达降低(P均<0.01)。结论 MMP-2在正常血管组织中低水平表达,随血管动脉粥样硬化程度的加重而升高;小剂量阿司匹林可以有效地减少动脉粥样硬化兔主动脉MMP-2表达,减轻动脉硬化的严重程度。     

番茄红素对动脉粥样硬化斑块中P选择素和VEGF表达的影响

目的：观察动脉粥样硬化家兔斑块内P选择素和VEGF的表达情况并分析其机制。方法：雄性新西兰兔36只,随机分为3组：正常对照组（12只）,高胆固醇模型组（12只）和番茄红素治疗组（12只）。正常组每天给予正常饮食,模型组每天除正常饮食外,给予1．5％的胆固醇和3％的猪油,治疗组在模型组饮食的基础上给予60mg／kg的6％的番茄红素粉荆。实验周期为12周,待12周后确定模型组成功后麻醉处死家兔,取主动脉标本观察大体形态,进行HE染色观察病理变化,免疫组织化学方法观察斑块内P选择素和VEGF的表达情况。结果：与高胆固醇模型组相比,番茄红素治疗组相对于模型组的主动脉斑块面积减少,斑块内P选择素和VEGF表达也明显减少。结论：番茄红素能减少动脉粥样硬化斑块的P选择素和VEGF的表达,这可能是番茄红素减少动脉粥样斑块的机制之一。     

趋化因子受体4与血管内皮生长因子在兔动脉粥样硬化斑块演进中的表达变化及意义

目的 检测兔动脉粥样斑块中趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)蛋白表达与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor receptor,VEGF)mRNA表达变化及其相关性分析,探讨CXCR4在粥样斑块血管生成中的作用及可能机制.方法 15只新西兰大白兔高脂饲料喂养+球囊拉伤腹主动脉建立动脉粥样硬化模型,分别于4、8、12周末处死动物,截取动脉血管,采用Western blot法检测CXCR4蛋白含量变化;实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA表达变化,对两者结果进行相关性统计学分析;免疫组织化学法检测动脉粥样硬化斑块CXCR4、CD34表达与定位.结果 第4、8、12周3个时相点动脉血管CXCR4蛋白含量分别为(0.46±0.03)、(0.58±0.05)、(0.65±0.07),VEGF mRNA表达分别为(1.04±0.24)、(1.99±0.21)、(3.97±0.75),两者之间呈显著正相关(Pearson相关系数r=0.869,P<0.05).免疫组织化学CXCR4染色在血管内膜及斑块内部可见多处阳性染色;CD34染色在血管内膜斑块部位可见丰富的新生血管,棕黄色阳性表达.结论 兔腹主动脉粥样硬化进程中,CXCR4和VEGF表达含量呈正相关,可能在动脉粥样硬化斑块的血管生成中具有重要作用.     

脂蛋白诱导平滑肌细胞表达载脂蛋白E及其在动脉粥样硬化斑块中的表达

目的探讨氧化脂蛋白及β型极低密度脂蛋白(β-VLDL)能否诱导动脉壁细胞表达载脂蛋白E(apoE)及其在动脉粥样硬化中的作用。方法用超速离心法从正常人血分离得到两种脂蛋白(n-LDL，n-VLDL)并使之氧化，同法从兔高脂血分离得β-VLDL，将所得5种脂蛋白作用于培养的兔主动脉平滑肌细胞(SMC)，用地高辛原位杂交方法检测其apoE的表达。并用同法检测食饵性动脉粥样硬化兔的主动脉粥样斑块中apoE的表达。结果原位杂交显示，体外培养的正常兔主动脉SMC能表达apoE，5种脂蛋白均能诱导培养的兔主动脉SMC表达高水平的apoE mRNA。在兔主动脉粥样斑块中巨噬细胞源性及肌源性泡沫细胞表达apoE非常明显，而正常兔主动脉壁细胞几乎不见apoE表达信号。结论受各种脂蛋白刺激的培养的SMC及动脉粥样硬化斑块内的泡沫细胞均表达较高水平的apoE；动脉粥样硬化斑块内的泡沫细胞和培养的SMC内apoE的增加可能参与细胞内胆固醇的流出，从而具有抗动脉粥样硬化作用。     

全反式维甲酸对实验性动脉粥样硬化兔动脉平滑肌细胞骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对动脉粥样硬化(AS)模型兔动脉骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 复制AS兔模型,采用免疫组化和Western blot分析主动脉OPN的表达.结果成功建立As兔模型,高脂组兔主动脉OPN蛋白表达水平增加,经ATRA治疗后OPN蛋白表达下降,AS斑块减少.结论 ATRA可能通过降低动脉OPN的表达抑制AS的形成.     

辛伐他汀对家兔主动脉粥样硬化斑块血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察辛伐他汀对动脉粥样硬化斑块血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:雄性纯种新西兰大白兔,采用高脂肪、高胆固醇饲料喂饲构建主动脉粥样硬化(AS)模型,并随机分为辛伐他汀组(n=10)和单纯高脂饮食组(n=6);另有一组动物喂饲普通饲料作为空白对照组(n=8).采用免疫组织化学方法,观察3组动物AS斑块VEGF的表达情况.结果:辛伐他汀组和单纯高脂饮食组AS斑块VEGF阳性信号强度均显著高于空白对照组(P＜0.05);辛伐他汀组VEGF阳性信号强度又显著低于单纯高脂饮食组(P＜0.05).结论:提示辛伐他汀可一定程度稳定斑块,延缓AS的进程.     

Experimental Study on the Preventive Mechanism of Salviae Miltiorrhizae Against Atherosclerosis in Rabbits Models

Therelatedstudiesapprovedthatthepathogene sisofatherosclerosisandacutecoronarysyndromesin volvesinflammationandapoptosismechanisms.Theevidenceoftheroleofinflammationandapoptosisinatheroscleroticplaquesallowstodeveloptherapeuticstrategiesto preventthedisea…     

兔颈动脉粥样硬化早期斑块内 HIF-1α与新生血管的关系

目的：通过建立颈动脉粥样硬化（CAS）模型来探讨早期斑块内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与新生血管形成的关系;研究超声造影（CEUS）能否检测早期斑块内新生血管的变化。方法：采取高脂饮食联合硅橡胶圈干预建立兔CAS模型。第14,28天行CEUS检测CAS斑块内新生血管形成,通过时间-强度曲线得出斑块内的造影剂峰值强度（PI）并进行前后对比分析。通过免疫组织化学检测斑块内CD31,HIF-1α,VEGF,α-actin,RAM-11的表达,进行组间比较及相关性分析。同时对PI与CD31进行相关性分析。结果：第14天CEUS显示CAS斑块内已有新生血管形成;第14,28天斑块内PI差异有统计学意义（P＜0.01）。CAS斑块内HIF-1α,VEGF,RAM-11,α-actin,CD31第14,28天表达差异具有统计学意义（P＜0.01）。CAS斑块内HIF-1α分别与VEGF,RAM-11,α-actin,CD31表达呈正相关;PI与CD31表达亦呈正相关。结论：在CAS演变过程中,早期斑块内即有新生血管形成,HIF-1α在CAS早期病变中促进新生血管形成。CEUS能检测CAS早期斑块内新生血管形成及其变化。     

穿心莲提出物对动脉粥样硬化家兔动脉壁PDGF-B、c-sis和c-myc基因表达的影响

用高胆固醇喂饲 免疫损伤方法建立家兔动脉粥样硬化(AS)模型。应用免疫组织化学染色和原位杂交方法,观察中药穿心莲成分API_(0134)(API)对家兔主动脉壁血小板源生长因子B链蛋白(PDGF-B)、c-sis基因和c-myc基因表达的影响。结果发现:与AS模型组比较,API预防用药能够显著减少主动脉脂质斑块面积百分比(P<0.01)。AS模型组,呈粥样硬化改变的主动脉内膜,可见PDGF-B、c-sis mRNA和c-myc mRNA强阳性表达;API用药组,PDGF-B、c-sis mRNA和c-myc mRNA的表达则被显著抑制。结论:API抑制c-sis和c-myc基因表达的作用,可能是其抗AS的分子机制之一。     

吡格列酮对兔动脉粥样硬化血管壁ICAM-1表达的影响

目的:探讨吡格列酮对动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)血管壁细胞间粘附分子(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响.方法:新西兰兔随机分成5组:A:正常对照,B:正常+低剂量吡格列酮(Pioglitazone,PIO),C:病理对照,D:病理+低剂量PIO,E:病理+高剂量PIO.采用免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法观察吡格列酮血管壁ICAM-1蛋白及mRNA表达的影响.结果:AS斑块内有ICAM-1蛋白和mRNA高表达,PIO可抑制ICAM-1蛋白和mRNA表达(P<0.05),高剂量较低剂量抑制程度更大(P<0.05).结论:PIO可抑制AS斑块ICAM-1的mRNA和蛋白表达,进而发挥抗AS炎症的作用.     

参红通络颗粒对 ApoE－／－小鼠动脉粥样硬化斑块内细胞凋亡的影响及其抗动脉粥样硬化作用机制

目的：探讨参红通络颗粒对载脂蛋白E基因缺陷（ApoE^-/-）小鼠血脂水平、主动脉粥样硬化斑块及斑块内细胞凋亡的影响,阐明参红通络颗粒抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：选取无特异病原（SPF）级6周龄雄性ApoE^-/-小鼠40只,适应性喂养1周后,按随机数字表法分为正常对照组、模型组、低剂量中药治疗组和高剂量中药治疗组,每组10只。正常对照组给予普通饲料,其余各组小鼠通过喂饲高脂饲料建立小鼠动脉粥样硬化模型,造模成功后,低和高剂量中药治疗组小鼠分别给予参红通络颗粒5.06和10.12g·kg^-1·d^-1灌胃治疗6周。6周后腹腔麻醉下摘眼球取血,测定各组小鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;分离主动脉弓,行HE染色,观察各组小鼠主动脉粥样硬化斑块形态并计算斑块面积;TUNEL法检测小鼠主动脉粥样硬化斑块内细胞凋亡情况,计算凋亡指数;免疫组织化学染色法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果：低剂量中药治疗组小鼠血清TG水平明显低于模型组（P<0.05）,低和高剂量中药治疗组小鼠血清HDL-C水平明显高于模型组（P<0.05或P<0.01）;高剂量中药治疗组小鼠血清TG和HDL-C水平均明显高于低剂量中药治疗组（P<0.05）。与模型组比较,低和高剂量中药治疗组小鼠主动脉粥样硬化斑块面积明显缩小（P<0.01）,主动脉粥样斑块内细胞凋亡指数明显降低（P<0.01）,主动脉粥样斑块内Bcl-2蛋白表达水平明显降低、Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：参红通络颗粒能够显著升高ApoE^-/-小鼠血清HDL-C水平,并通过调控Bcl-2、Bax蛋白表达抑制细胞凋亡,从而有效抑制动脉粥样斑块进展。     

羟苯磺酸钙对动脉粥样硬化斑块形成的影响及其机制

目的：探讨羟苯磺酸钙对兔动脉粥样硬化（AS）斑块形成的影响及其作用机制。方法：24只健 康雄性新西兰兔,以液氮冻伤术在兔右颈总动脉处建立AS斑块模型,随机分为模型组和治疗组,每组12只。 模型组给予高脂饲料喂养8周,治疗组给予高脂饲料加羟苯磺酸钙0.15mg·g-1·d -1喂养8周。分别于实验前 及实验8周后取血,ELISA测定血清内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）和血管内皮生长因子（VEGF）含量。8周 后处死动物,取右颈总动脉,光镜和电镜观察病理形态学变化,免疫组织化学检测兔右颈总动脉基质金属 蛋白酶9（MMP-9）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的表达。结果：8周后,模型组兔血管内膜具有典型 的AS斑块表现,治疗组兔血管内膜AS斑块病变轻微;2组兔颈动脉局部可见PAI-1和MMP-9蛋白表达,但治疗 组的表达量较模型组明显减少,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;2组ET-1显著降低,NO、VEGF显著升高,差 异有统计学意义（ P ＜0.05）,且治疗组ET-1降低幅度大于模型组,NO、VEGF升高幅度大于模型组,差异有统 计学意义（ P ＜0.05）。结论：羟苯磺酸钙通过减少血管壁局部组织中PAI-1和MMP-9蛋白的表达,降低血循 环中ET-1含量,升高NO、VEGF水平等改善内皮功能障碍,进而发挥抗AS斑块形成作用。     

光甘草定通过p38/MAPK通路调控动脉粥样硬化模型兔动脉MLCK表达

目的 研究光甘草定能否通过p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路影响动脉粥样硬化(AS)兔模型主动脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达.方法 建立AS兔模型,将新西兰大耳白兔随机分为3组:正常对照组、高脂模型组、光甘草定组.正常对照组用正常饲料喂养;高脂模型组、光甘草定组用高脂饲料喂养,12周后分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)成分的变化,通过苏木精-伊红(HE) 染色分析兔动脉壁形态结构变化;免疫组织化学方法观察兔模型主动脉内膜MLCK的分布和表达;Western blot 分析兔动脉内膜MLCK水平及p38蛋白磷酸化变化.结果 成功建立AS兔模型,在给予高脂饮食12周以后,与正常对照组相比,血清中TC增高(P<0.05),TG有所增加,但差异无统计学意义;大体标本观察到大量兔动脉粥样斑块形成,HE染色显示高脂模型组兔主动脉血管内皮细胞间隙明显增大并伴有大量泡沫细胞,内膜增厚明显;免疫组化显示主动脉内膜MLCK表达量增多;Western blot显示动脉p38磷酸化水平增强(P<0.05).而加喂光甘草定后,血管内膜病变程度有所下降,MLCK表达有所下降,动脉p38磷酸化水平有所下降(P<0.05). 结论 光甘草定可能通过p38/MAPK通路影响AS兔模型主动脉内皮细胞MLCK的表达.     

αSMA、MMP-13及VEGF在应用口服枸杞多糖预防动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义

目的探讨αSMA、MMP-13及VEGF在应用枸杞多糖治疗动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义。方法将24只雄性新西兰白兔随机分成3组:空白对照组、模型组、预防组,每组8只。空白对照组喂饲普通饲料,模型组喂饲含2%胆固醇的饲料,预防组喂饲含2%胆固醇的饲料,并在每天早晨饲料中按体重加入枸杞多糖(LBP)20mg/kg。第16周末空气栓塞处死所有动物并观察主动脉形态学变化及应用免疫组织化学染色进行指标的检测及分析。结果与空白对照组相比,模型组全部形成动脉粥样硬化模型,预防组也形成了动脉粥样硬化,但是斑块厚度明显低于模型组。通过免疫组织化学染色发现:预防组与模型组比较,主动脉斑块厚度和斑块内平滑肌细胞明显减少;血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达降低,预防组与模型组相比,VEGF的阳性表达率显著减小(P<0.05);MMP-13(Matrix metalloproteinase 13)的表达降低,预防组与模型组相比,MMP-13的阳性表达率显著减小(P<0.05)。结论 1.口服枸杞多糖能明显抑制高脂血症所诱发的VSMC增殖,促进已经增殖的VSMC凋亡;2.枸杞多糖能够降低动脉斑块内MMP-13和VEGF的表达,从而抑制动脉粥样硬化的发生与发展;3.口服枸杞多糖能有效预防高脂饲料诱发的家兔主动脉AS斑块的形成。