自制新型多器官保存液低温保存小型猪肾

背景:在前期实验的基础上,此次实验成功配制了含聚乙二醇的新型上海多器官保存液.目的:以普通器官保存液为对照,验证自制含聚乙二醇的上海多器官保存液低温保存小型猪肾的效果.设计、时间及地点:随机分组,对照实验观察,2006-05/2007-07在解放军器官移植研究所移植实验室完成.材料:健康成年实验用巴马小型猪12头.自制新型新帮上海多器官保存液,主要含聚乙二醇,相对分子质量20 000.pH7.43±0.10,渗透压825～900 kPa,UW液,购白美国Bristol-Myers Squibb公司.方法:巴马小型猪肾分别以4℃器官保存液或上海多器官保存液原位灌注后离体保存24,48,72 h.保存终点测保存液pH值及乳酸脱氢酶含量,左肾取标本行组织学检查,右肾采用体外非循环猪肝/肾灌注系统灌注30,60,120 min测灌注液乳酸脱氢酶含量.灌注终点取肾皮质标本测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性.主要观察指标:光镜、电镜观察肾冷保存后的形态学变化;灌注液及保存液乳酸脱氢酶含量;肾皮质标本测丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性:肾组织细胞凋亡指数.结果:保存48,72 h后,器官保存液组保存液pH值高于上海多器官保存液组(P<0.05).保存72 h终点保存液及再灌注30,60,120 min灌注液中乳酸脱氢酶活性器官保存液组高于上海多器官保存液组(P<0.05).同时间点两组肾组织光镜、电镜下形态学改变、肾皮质凋亡指数、超氧化物歧化酶、丙二醛含量差芹均无显著性.结论:新型上海多器官保存液对小型猪肾脏低温保存效果与普通器官保存液基本一致,对缺氧代谢器官细胞内酸中毒的缓冲能力以及对低温和缺血再灌注损伤的保护作用优于普通器官保存液.     

胰岛素笔注射针头重复使用保存方法的探讨

目的 探讨胰岛素笔注射针头多次使用的安全性,以节约患者开支.方法 将60例接受胰岛素治疗的糖尿病患者按入院先后顺序随机分为常温组和冰箱保存组各30例,常温组注射后胰岛素笔放于清洁干燥容器中常温保存备用;冰箱保存组注射后胰岛素笔放于冰箱冷藏室中保存备用.采用咽拭子细菌培养的方法 ,比较2组注射针头在第1、3、5、7天细菌生长情况.结果 无论室温保存或是冰箱保存,所有标本均未见细菌生长.结论 在临床工作中,胰岛素笔注射针头可重复使用,但必须专人专用,常温保存与冰箱保存均能达到同样效果.     

血站应加强业务档案的管理

2006年3月1日实施的<血站管理办法>规定,献血、检测和供血的原始记录应当至少保存10年.这是血站进行业务档案管理的法律依据.但业务档案的保存种类和保存期限仅按此规定执行是远远不够的,因科学研究和应对诉讼的需要,必须扩大保存业务档案的范围,并延长保存期限.     

保存板在保存血样中的应用

根据《血站管理办法》(暂行)第三十一条规定"血清标本的保存期应在全血有效期满后半年".为达到这一要求,笔者使用了保存板,结合全自动加样设备和条形码技术用于保存血样(血清),取得了满意效果.现将该方法报告如下. 1 材料与方法 1.1 材料保存板(Archive plate,孔深35mm,孔容量1.5ml)、Microlab AT plus2全自动样品处理系统(均为瑞士HAMILTION公司);献血者常规复检标本. 1.2 方法 1.2.1 血样保存板的形成将保存板放在Microlab AT plus 2全自动样品处理机的血清保存架上,读取该保存板的条码和需保存血样的标本条码,然后每份标本吸取血清1ml放入保存板的板孔中,不干胶封板后标注加样日期.同时通过打印和软盘备份保存加样文件.     

冷冻干燥保存血小板的研究进展

血小板是血液中的一种重要组成成分,它主要参与血栓形成和凝血过程.在大量失血和化疗、放疗等处理后造成的血小板减少症患者的治疗过程中,需要进行血小板输注.因此,保证足够的血小板贮备和供应显得尤为重要.目前,临床应用血小板存在供应不足和浪费问题,主要是血小板保存技术在方法学上的局限性所造成的.血小板的保存方式有以下三种:①常温(22±2℃)保存,此条件下保存的血小板由于部分活性的丧失和微生物的污染,根据美国药品监督管理局规定最多只能保存5天;②冰冻保存,这种保存方法可以大大延长血小板的保存时间,临床实验证明冻-融血小板聚集功能仅为新鲜血小板的50%～60%,而且需要笨重的冰箱和存储设备;③冷冻干燥保存,冷冻干燥血小板可以在常温下长时间保存,不需要冷冻存储设备.在此,本文对冷冻干燥保存血小板(简称冻干血小板)进行综述.     

血小板保存损伤的研究进展

血小板保存损伤(storage lesion)是指在保存过程中血小板出现的一系列的形态、功能和代谢上的改变.尽管血小板的保存研究已有几十年的历史,但是迄今为止,血小板的有效保存时间仅为5d.其原因在于保存过程中,血小板的损伤机制十分复杂,涉及到多个方面,笔者现综述这方面的研究进展.     

奶粉液菌种保存效果的研究

目的建立一种配方简单、保存期长而且微生物各种特性保持基本不变的保存方法.方法选用奶粉作基础液,将此液分装于小标本杯内灭菌后,装入需要保存的菌种置-56℃长期保存,并与其它保存方法进行比较,将需要保存的革兰氏阳性菌、阴性菌、真菌及较难保存的嗜血杆菌和淋病双球菌共6069株中,选取了保存超过3年的菌株1085株复苏后进行存活率、抗原凝集特性、生化反应、菌落形态特点和溶血等多方面测试.结果该方法在保持细菌各种特性基本不变的情况下平均存活率达到99.2%,与真菌干燥法基本一致.结论此方法配制简单,操做方便,菌种保存期长,一次接种可保存3年以上,不须反复传代.不要特殊设备,是一种值得推荐的菌种保存方法.     

红细胞冰温保存的研究

输血用红细胞通常采用5±1℃保存.人们已习惯于这种温度,似乎不太关心改变这一保存温度.然而,红细胞的代谢直接受保存温度的影响,国内外都曾有专家认为若能在5℃以下低温保存,一定会改善其保存状态和延长其保存期.基于这种设想,作者对输血用红细胞进行了冰温保存试验.所谓冰温保存是近年来食品保存领域的用语,即将食品置于冻结与未冻结之间的结冰点温度(通常是+2～-2℃),试验证明红细胞是可以在0℃状态下保存的.在研究中,为阐明0士1℃保存的红细胞能否发     

自制低钾右旋糖苷改良液用于保存犬肺移植离体肺的最长时间

背景:低钾右旋糖苷液用于肺移植,灌注保存效果较好,但有效供肺保存时间仍较短,价格较昂贵.目的:观察改良自制低钾右旋糖苷液保存供肺不同时间供肺变化,评价改良自制低钾右旋糖苷液的供肺保存期限.方法:成年家犬32只,随机分成对照、实验两组.对照组采用低钾右旋糖苷液作为供肺灌注保存液,实验组采用改良自制低钾右旋糖苷液.比较两组供肺组织灌注前、灌注后、保存4,8,12,24 h的髓过氧化物酶、丙二醛、湿干比、病理光镜检查、透射电镜检查结果.结果与结论:两组离体肺组织的髓过氧化物酶、丙二醛和湿干比值随着保存时间的延长呈渐增趋势,髓过氧化物酶值在保存12 h以后与灌注前有显著差异,丙二醛和湿干比值保存8 h后与灌注前有显著差异.保存8 h后,实验组肺组织结构和超微结构的变化仍然可逆,较对照组变轻,但保存4,12,及24 h两组变化基本相似.结果提示,在实验条件下,供肺在改良自制低钾右旋糖苷液中保存8 h后开始出现显著变化,保存12 h后开始出现不可逆变化.     

血液有核细胞冷冻干燥保存的研究进展

细胞冷冻干燥保存与传统的常温保存和低温保存相比,具有储存期限长、储存运输方便等优点.目前,冷冻干燥技术多见于对血小板、红细胞保存的研究上,而应用于血液有核细胞的研究较少.本文就冷冻干燥对细胞的损伤机制、冷冻干燥保存需要解决的问题、血液有核细胞冷冻干燥保存的研究进展等方面进行综述.     

玻璃化法和低温冷冻法保存兔股动脉的形态结构及力学性能比较

背景:一种有效的保存方法必须能够保存组织的完整结构.目的:比较玻璃化法和低温冷冻法保存对动脉形态结构和力学性能的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2001-0912004-08在解放军总医院骨科研究所完成.材料:新两兰兔18只,按随机数字法分为3组:玻璃化法保存组,低温冷冻法保存组,新鲜血管组,每组6只.方法:切取股动脉标本,置于平衡液中备用.玻璃化法保存组血管在4℃条件下经25%,50%和100%梯度玻璃化溶液浸泡后,直接投入液氮中.低温冷冻法保存组血管由常温状态下,经过0,-20,-70℃梯度降温,平衡60 min,直接投入液氮中.样本在液氮中保存14d以上.主要观察指标:进行大体形态和显微形态观察,以了解保存后动脉形态结构的改变;观察动脉的滞后环和应力松弛,测定其断裂强度.结果:两种方法均较好地保存了动脉的结构,玻璃化法保存组完整率为91.67%,低温冷冻法保存组完整率为54.17%(P<0.01):3组动脉均具有滞后环和应力松弛现象,玻璃化法保存组的断裂张力为(2.286 3±0.417 6)N,低温冷冻法保存组的断裂张力为(1.951 0±0.413 0)N,新鲜血管组的断裂张力为(2.543 5±0.5454)N,3组之间的差别无显著性意义(P>0.05).结论:玻璃化法和低温冷冻法对动脉的形态结构和力学性能无显著影响;玻璃化法保存造成的组织断裂较少,适合大段血管的保存.     

维生素E对红细胞保存液保存效果改善的研究

目的 探索生物试验用红细胞体外保存时间延长的方法.方法 将健康成人的新鲜血液保存在已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's中,并在两种保存液中均添加维生素E.在56天实验期间,每7天检测一次红细胞SOD、红细胞ATP、游离血红蛋白.结果 添加了维生素E10 mg/ml的红细胞保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用增强.在4"C保存条件下,准备应用于生物试验的红细胞的保存期限由28天提高到42天(CPDA)和由7天提高到21天(Alserve's).在最初7天保存期内两种保存液的效果近似.结论维生素E可以明显增强已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用.珍贵血液样本在短期内使用建议选用配方简单的Alserve's+维生素E保存液.珍贵血液样本长期保存建议选用配方全面均衡的CPDA+维生素E保存液.     

红细胞保存研究的新策略——冰冻干燥

成分血的输注在发达国家已占血液输注的90%以上,因此红细胞的保存研究倍受重视.血细胞的保存通常是在4℃条件下进行,保存时间可以有效地延续至42d.特殊情况下实行深低温保存,放在-80℃冰箱或液氮(-196℃)中长期保存[1].这两种方法都需要低温设备,在进一步改进保存技术的研究中,冰冻干燥红细胞已成为细胞保存研究的新策略,引起了人们的关注.现将以此为主要内容的研究作一简要文献回顾.     

抗凝剂、标本保存温度和保存时间对流式T淋巴细胞亚群检测的影响

目的 调查抗凝剂、标本保存温度和保存时间对流式T淋巴细胞亚群检测结果的影响程度,为流式T淋巴细胞亚群检测标准化提供科学依据.方法 采用三色流式细胞术FSC/SSC设门策略分析健康体检人群外周血T淋巴细胞亚群,调查EDTA-K2和肝素锂两种抗凝剂以及标本保存温度与标本保存时间对检验结果的影响.结果 常温(18 ℃)保存的标本检测结果最为稳定,极端低温和极端高温都将引起检测结果的降低.EDTA-K2抗凝的标本18 ℃可至少保存3 d,肝素锂抗凝的标本18 ℃可保存2 d.EDTA-K2抗凝的标本检测结果较肝素锂抗凝的标本高.结论 流式T细胞亚群检测标本宜采用EDTA-K2抗凝,不能及时检测时宜18 ℃保存,冬季和夏季需要采取措施将标本的保存温度调节至常温为宜.     

预约灭菌保存法在特殊专科器械包管理中的应用

目的:探讨预约灭菌保存法在管理特殊专科器械包中的应用及临床效果.方法:以10种特殊专科器械包为研究对象,比较常规灭菌保存法和预约灭菌保存法的灭菌次数.结果:特殊专科器械包行预约灭菌保存法灭菌次数明显低于常规灭菌保存法(P＜0.05).结论:预约灭菌保存法在特殊专科器械包管理中具有良好的应用价值,减少了重复消毒灭菌导致的器械损耗和无效工作量.     

标本保存时间及温度对血液生化检测结果的影响分析

目的 探讨标本保存时间及温度对血液生化检测结果的影响.方法 采用分离胶促凝管采集60例患者静脉血,准确记录采集时间并编号,放置30 min后离心.一份置于4 ℃冰箱分别保存0、6、12、24 h后检测总蛋白、清蛋白、葡萄糖、尿酸、丙氨酸转氨酶（ALT）、钾离子;另一份于室温保存0、6、12、24 h后检测上述生化指标.检测采用罗氏MODULAR P800全自动生化分析仪及其配套试剂.结果 室温下放置超过6 h和4 ℃保存超过12 h,钾离子的测定结果明显高于立即测定结果（P〈0.05）.室温保存时间的长短对总蛋白、清蛋白和尿酸的测定结果没有影响（P〉0.05）;4 ℃保存超过6 h,保存时间的长短明显影响总蛋白、清蛋白和葡萄糖的测定结果（P〈0.05）.4 ℃的尿酸测定及室温保存 24 h内的葡萄糖测定,不受时间长短影响（P〉0.05）.室温保存6 h和4 ℃保存24 h会对ALT的检测结果产生影响（P〉0.05）.结论 实验室应对标本保存条件标准化以保证检测结果的准确性.     

医学研究中生物样本的低温冷冻处理及其进展

低温冷冻保存是活体组织长期保存的一种有效方法,主要是通过降低细胞代谢率来达到保存目的.一般而言,0℃-196℃之间的保存均属于低温保存,但以-20℃-40℃冰箱保存、-60℃-80℃深低温冰箱保存和液氮(-196℃)超低温保存形式居多.……     

血清标本的保存温度和时间对乙型肝炎两对半定量测定的影响

目的 探讨血清标本保存时间和温度件对乙型肝炎(下称乙肝)两对半定量检测结果的影响,寻求保存血清标本的理想方法.方法 分别采用2～8 ℃和-20 ℃两种温度保存标本,应用雅培i2000SR化学发光仪定量测定两对半指标,2～8 ℃的保存标本每隔3 d检测1次,-20 ℃的保存标本按照1、3、5、6个月周期检测.结果 2～8 ℃保存标本7 d,结果差异无统计学意义(P＞0.05),超过7 d,乙肝病毒e抗原和核心抗体结果发生变化,差异有统计学意义(P＜0.05);-20 ℃连续保存6个月,测定结果无统计学意义(P＞0.05).结论 标本的保存温度和时间直接影响乙肝两对半定量结果的准确性,在各种保存条件下,随着温度的下降,标本保存时间延长.2～8 ℃标本可稳定7 d;-20 ℃可以保存6个月.     

两种菌种保藏方法对金黄色葡萄球菌抗力影响的研究

目的 研究菌种保藏管法和冷冻真空干燥保藏法中对金黄色葡萄球菌抗力的影响.方法 菌种分别用以下两种保存方法进行保存:冷冻真空干燥保藏法4℃保存和菌种保藏管法-80℃保存.测试速干手消毒液对不同菌种保藏方法的金黄色葡萄球菌的杀菌率.结果 随着保存时间延长,菌种保藏管法的金黄色葡萄球菌抗力下降明显,而冷冻真空干燥保藏法的金黄...     

红细胞保存损伤及其对策

红细胞保存损伤是指血液保存在液体基质中红细胞发生的生物化学与形态学上的改变,红细胞保存损伤是影响红细胞保存效期和临床输血效果的一个重要因素,本文就红细胞保存损伤的主要机制及对策进行综述.