大鼠隐睾生殖细胞发育和凋亡与eNOS蛋白与mRNA表达

目的　探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)蛋白及其mRNA表达与实验性大鼠隐睾生殖细胞发育和凋亡的关系。　方法　采用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测SD大鼠单侧隐睾模型睾丸生殖细胞凋亡 ,免疫组化方法检测大鼠睾丸生殖细胞中eNOS基因表达 ,原位杂交法检测大鼠生殖细胞中eNOSmRNA的表达。　结果　术后第 7天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数与对侧正常睾丸相比显著增加 (P <0 .0 1)。术后第 4 0天 ,对侧正常睾丸的精子细胞中可见eNOS基因表达。术后第 3、7天 ,隐睾侧睾丸生殖细胞中eNOSmRNA表达与对侧正常睾丸相比无明显变化 (P >0 .0 5 )。　结论　在大鼠青春前期 ,eNOS基因表达与雄激素生成和生殖细胞发育有关 ;在成年期 ,eNOS基因表达可能仅与精子的成熟及活力有关而与生殖细胞凋亡无关。     

一氧化氮、总抗氧化能力对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的 :探讨一氧化氮 (nitricoxide,NO)、总抗氧化能力 (totalantioxidecapacity ,T AOC)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。　方法 :健康SD雄性大鼠 2 0只 ,日龄 2 2d时复制单侧隐睾模型。生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,采用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量 ,化学比色法测定睾丸组织中T AOC。　结果 :术后第 7d ,与对侧正常睾丸相比 ,隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 (P <0 .0 1) ;T AOC显著下降 ;NO含量显著上升 (P <0 .0 1)。　结论 :实验性大鼠隐睾可导致睾丸生殖细胞凋亡增加 ,且与睾丸组织中NO升高及T AOC下降密切相关     

Fas/FasL和C-myc基因表达与隐睾生殖细胞凋亡的关系

目的：探讨Fas／FasL和C—myc基因表达与隐睾生殖细胞凋亡的关系，以及C—myc与Fas／FasL介导的细胞凋亡途径之间的关系。方法：采用22d龄SD雄性大鼠建立单侧隐睾模型，运用生物素—dUTP／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡，运用免疫组织化学SP法检测Fas／Fasl和C—myc基因表达。结果：①与对侧睾丸相比，术后第3天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞无显著增加(P＞0．05)，Fas／FasL和C—myc基因表达亦无显著增加(P＞0．05)；第7天隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞显著增加(P＜0．01)；Fas／FasL和C—myc基因表达均有显著增加(P＜0．01)。②实验性隐睾术后第3天和第7天，C—myc基因表达与相应Fas／FasL基因表达间均存在着正相关关系。结论：手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加；Fas／FasL和C—myc基因表达上调可能是生殖细胞发生凋亡的重要原因之一；隐睾生殖细胞凋亡可能是通过与C—myc相偶联的Fas／FasL细胞凋亡途径调控的。     

总抗氧化能力、一氧化氮、丙二醛对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的 探讨一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(T—AOC)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。方法 采用SD雄性健康大鼠20只，鼠龄22d时复制单侧隐睾模型。采用生物素—dUTP／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡。采用化学比色法测定大鼠组织中丙二醛(MDA)、T—AOC。采用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量。结果 术后第7天，与对侧正常睾丸相比，隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加(P＜0．01)；T—AOC显著下降；No和MDA含量显著上升(P＜0．01)。结论 大鼠隐睾可导致睾丸生殖细胞凋亡增加，且与睾丸组织中No和MDA升高及T—AOC下降密切相关。     

大鼠单侧隐睾对侧睾丸的损害与抗氧化酶mRNA的表达

目的　从基因表达水平探讨单侧隐睾对侧睾丸损害机制。方法　 3 0只SD雄性大鼠分为对照组与隐睾组 ,每组各 15只。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测对侧睾丸中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)、铜 /锌超氧化物岐化酶 (Cu/Zn SOD)、过氧化氢酶 (CAT)mRNA的表达 ;化学比色法测定丙二醛 (MDA)的含量 ;生物素 dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡。结果　术后 2周 ,与对照组比较 ,隐睾组GSH PX和SODmRNA表达明显下降 ,MDA和生殖细胞凋亡明显升高 (P <0 .0 1) ,而CATmRNA表达无明显改变 (P >0 .0 5 )。结论　单侧隐睾对侧睾丸存在GSH PX和SODmRNA表达降低 ,氧自由基升高和生殖细胞过度凋亡。     

Ν-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用。　方法 :用 2 2dSD雄性大鼠复制单侧隐睾模型。实验分假手术组、隐睾组、隐睾 +L NAME组 [术后腹腔注射L NAME ,10mg/(kg·d) ],每组大鼠各 10只。术后 7d ,用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中N0含量 ,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性。　结果 :术后第 7d ,与假手术组睾丸相比 ,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 ,隐睾 +L NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少 (P <0 .0 1) ,隐睾 +L NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低 (P<0 .0 1)。　结论 :隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一 ,L NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用。     

Bcl-2/Bax基因表达对隐睾生殖细胞凋亡的影响

为探讨Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达对隐睾生殖细胞凋亡的影响。采用ＳＤ雄性大鼠日龄２２天时复制单侧隐睾模型;用生物素－ｄＴＵＰ／酣标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡;用免疫组织化学ＳＰ法检测Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达。结果发现术后第７天,与对侧正常睾丸相比,隐睾侧睾丸发生凋亡的生殖细胞显著增加（Ｐ〈０．０１）;Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ表达均有显著差异（Ｐ〈０．０１）。提示手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加;Ｂｃ     

总抗氧化能力和一氧化氮合酶对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

目的：探讨总抗氧化能力（T－AOC）和一氧化氮（NO）合物（NOS）对隐睾生殖细胞凋亡的影响。方法：SD雄性大鼠日龄22d时复制单侧隐睾模型。用生物素－dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡；用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量；用化学比色法测定睾丸组织中T－AOC、NOS活性。结果：术后第7天，与对侧睾丸相比，隐睾发生凋亡的生殖细胞数显著增加，NO含量及NOS活性显著上升（P＜0．01），在隐睾组织中两者呈正相关（γ3=0.890,P＜0．01）；T－AOC显著降低（P＜0．01）。结论：隐睾组织中NO和NOS升高、T－AOC下降是隐睾生殖细胞凋亡增加的生化机制之一。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用.方法用22 d SD雄性大鼠复制单侧隐睾模型.实验分假手术组、隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射L-NAME,10 mg/(kg·d)],每组大鼠各10只.术后7 d,用生物素-dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO含量,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性.结果术后第7 d,与假手术组睾丸相比,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加,隐睾+L-NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少(P＜0.01),隐睾+L-NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低(P＜0.01).结论隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一,L-NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用.     

单侧隐睾对侧睾丸生精上皮保护作用的实验研究

目的探讨单侧隐睾鼠对侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞变化和还原型谷胱甘肽(GSH)对对侧睾丸的保护作用。方法30只SD雄性大鼠分为对照组(A组)、隐睾组(B组)、隐睾加GSH组(C组),每组各10只。采用化学比色法测定对侧睾丸GSH、丙二醛(MDA)含量;生物素-dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡;透射电镜观察Sertoli细胞的超微结构。结果术后2周,与A组比较,B组对侧睾丸GSH明显降低,MDA和细胞凋亡明显增加(P<0.01),Ser-toli细胞线粒体和滑面内质网扩张。C组这种变化则明显减轻(P<0.01),与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性GSH对单侧隐睾鼠对侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞有保护作用。     

睾丸扭转后生精细胞凋亡与iBOS基因表达

本文研究了睾丸扭转复位后生精细胞凋亡与iBOS基因表达的关系。采用大鼠建立左侧睾丸扭转复位模型（720,2h)。用TUNEL法和免疫组化SP法分别检测扭转复位后第五天生精细胞凋亡和iBOS基因表达。研究发现凋亡主要见于染色质降解的生精细胞（初级精母细胞和圆形精子细胞）。间质细胞和支持细胞未见凋亡发生。iBOS表达见于各级生精细胞,在染色质降解的生精细胞（即凋亡细胞）强表达。本文研究表明睾丸扭转复位后生精细胞凋亡增加与iBOS基因表达密切相关。睾丸局部NO生成异常可能是生精细胞凋亡增加的原因之一。     

Assessment of germ cell apoptosis in cryptorchid rats

Aim: To investigate the relationship between germ cell degeneration and apoptosis in cryptorchid rats. Methods: Thirteen 21-day-old Wistar rats were made unilaterally cryptorchid by closing the left inguinal canal. At day 30 (Group 1, n=6) and day 60 (Group 2, n=7) after operation, the testes were removed for histopathological examination. The controls (n=8) were sham operated and were sacrificed at day 60. Germ cell apoptosis was assessed by means of the TUNEL method. Results: Spermatogenesis was arrested and the testicular and seminiferous tubular diameters were significantly reduced In the unilateral undescended testes (UUTs) compared with the contralateral descended testes (CDTs) and the control rats. However, atrophic changes, pathological calcification, necrosis of seminiferous tubule, and absence or sloughing of germ cells were not found in all the animals. The spermatocytes were the main type of germ cells undergoing apoptosis in all the groups. In the UUTs, there was a significant and time-depe     

单侧隐睾大鼠对侧睾丸的损害与Bcl-2和Bax基因表达

目的:探讨单侧隐睾大鼠对侧睾丸生精细胞凋亡与Bcl-2/Bax基因表达的关系。方法:20只健康SD雄性大鼠(22日龄)随机分成隐睾组和对照组,每组10只。通过手术建立单侧隐睾动物模型。术后90 d取对侧睾丸,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡,免疫组化SP法检测Bcl-2/Bax基因表达。结果:与对照组相比,隐睾组对侧睾丸生精细胞凋亡显著增多(P<0.01),重量显著减轻(P<0.01),Bax表达显著升高(P<0.01),Bcl-2表达显著降低(P<0.01)。凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞。结论:单侧隐睾大鼠对侧睾丸的生精细胞凋亡增多与Bcl-2基因表达降低、Bax基因表达升高密切相关。细胞内Bc l-2/Bax比值是影响生精细胞凋亡的重要因素之一。