鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究

目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4．7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。     

耐药鲍曼不动杆菌耐药基因检测及同源性分析

目的了解南京市某医院鲍曼不动杆菌的感染和耐药情况。方法对2011年2月至2013年4月临床检出的56例鲍曼不动杆菌标本进行药敏试验;采用聚合酶链式反应(PCR)进行OXA-51、OXA-23、OXA-24、OXA-58、VIM、SHV、GES、IMP和TEM共9种耐药基因的检测;从中选择44株应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。结果 56株检出泛耐药株38株,不同病区泛耐药与非泛耐药株的阳性率差异有统计学意义。菌株对常用抗生素除阿米卡星和妥布霉素外,耐药率均大于60.00%。56株经PCR检出OXA-51 49例(87.50%)、OXA-23 46例(82.14%)、OXA-58 1例(1.79%)、TEM 56例(100.00%)、VIM 45例(80.36%)、GES 16例(28.57%)及SHV 4例(7.14%);未检出OXA-24和IMP。44株经PFGE共分为14个型,其中A型20株,为主要流行株;B型5株,C型8株,剩余菌株为互不相同型。结论该院鲍曼不动杆菌感染以ICU和呼吸科居多,对常用抗生素高度耐药,OXA-51,OXA-23,TEM和VIM为主要耐药基因。近半数菌株以同源形式传播,交叉感染现象严重,应引起重视和采取改进措施。     

儿科多重耐药鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性性及超广谱β-内酰胺酶基因携带情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集2016年日照市妇幼保健院儿科分离的鲍曼不动杆菌38株,采用纸片扩散法对分离菌株进行药物敏感性试验。对其中21株多重耐药菌进行PCR检测PER、SHV、TEM、CTX和VEB基因携带情况。结果38株鲍曼不动杆菌,对多粘菌素B、替加环素均敏感,对头孢哌酮-舒巴坦(34.2%)、阿米卡星(36.8%)耐药率较低,对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、喹诺酮类耐药率均>50%。在21株多重耐药菌中,16株SHV型基因阳性,8株PER型基因阳性,未检出TEM、CTX和VEB基因。结论儿科鲍曼不动杆菌多重耐药与携带SHV、PER基因相关。     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药基因研究

目的研究邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征与相关耐药基因流行情况。方法对临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌经采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法同源性分析获得的A、B、C、D 4种克隆株,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析耐药基因类型。结果本院多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,未检出SHV、DHA、OXA-24、GES、IMP、VIM耐药基因。TEM-1检出率为100%,OXA-23(45%),PER-1(10%),其中2株菌同时检测到TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,分别为A型和C型各1株,另2株菌同时检测到TEM-1和PER-1两种耐药基因,分别为C型和D型各1株,有16株菌同时检测到TEM-1和OXA-23两种耐药基因。结论携带TEM-1和OXA-23耐药基因多重耐药鲍曼不动杆菌是本院主要流行菌株,且存在克隆流行。携带TEM-1、OXA-23、PER-1三种耐药基因的菌株和携带TEM-1、PER-1两种耐药基因的菌株在临床分离株中已不鲜见。临床应加强鲍曼不动杆菌医院感染的控制,防止耐药菌株在医院暴发流行。     

呼吸系统不动杆菌感染的多重耐药性与耐药基因的检测

目的　检测引起呼吸系统感染的不动杆菌多重耐药性及耐药基因。方法　采用标准的纸片扩散法 (KirbyBauer法 )检测不动杆菌对 16种抗生素耐药状况 ,用单纸片扩散法检测ESBLs表型 ,并用PCR方法对多重耐药菌株进行超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)TEM、SHV、OXA、IMP、CTX M耐药基因的检测。结果　 10 8株不动杆菌中77.78%对 >2种的抗生素具有耐药性 ,其中有 8株菌对 15种抗菌药物均耐药 ;10 8株不动杆菌检出ESBLs表型阳性 2株 ,且均为多重耐药菌株 ;2株ESBLs表型阳性的耐药基因为TEM型 ,扩增产物长 5 35bp ,SHV、OXA、IMP、CTX M耐药基因均未检出。结论　不动杆菌对抗生素已产生明显多重耐性药 ,对有些常规使用的抗生素正向耐药方面转变 ,山东济南地区不动杆菌的ESBLs耐药基因可见TEM型。     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺类耐药基因研究

目的了解β-内酰胺类耐药基因在某院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)中的流行情况。方法对该院临床分离的22株MDRAB进行药敏试验,同时,采用聚合酶链反应(PCR)技术对其进行β-内酰胺类耐药基因(TEM、SHV、CTX-M、PER、DHA、IMP、VIM、SIM、OXA-23、OXA-24、OXA-58)检测。结果 22株MDRAB对头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星和复方磺胺甲口恶唑耐药率均为100.00%;对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为50.00%、40.91%、31.82%,中介率分别为31.82%、36.36%、31.82%。22株(100.00%)MDRAB均携带耐药基因OXA-23群,16株(72.73%)携带TEM,12株(54.55%)携带IMP,4株(18.18%)携带PER;SHV、CTX-M、DHA、VIM、SIM、OXA-24群、OXA-58群基因检测均为阴性。结论携带IMP、TEM、PER、OXA-23耐药基因是导致该院MDRAB对β-内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

OXA 23基因阳性耐亚胺培南鲍曼不动杆菌感染暴发调查研究 FREE

目的了解某院神经内科重症监护室 （ICU） 暴发流行耐亚胺培南鲍曼不动杆菌感染的基因型及耐药机制。方法以API20NE鉴定菌株,纸片扩散法测定分离菌株对常用抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应 （PCR） 扩增3种酶基因 （OXA、IMP、VIM）,并对产物进行测序。结果患者痰标本分离的7株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均携带OXA 23基因,未检出IMP、VIM基因。结论此次暴发流行中,耐碳青霉烯类药物的鲍曼不动杆菌携带的耐药基因为OXA 23基因。     

某院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性和碳青霉烯酶耐药基因分析

目的分析某院重症监护室(ICU)多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和碳青霉烯酶耐药基因。方法8株MDRAB在同一时期分离自ICU患者痰标本、环境物品表面。用VITEK 2 COMPACT进行抗菌药物敏感试验(MIC),同时用PCR技术分析其产碳青霉烯酶相关耐药基因类型。结果对左氟沙星的耐药率为75.0%,对其余18种抗菌药物的耐药率为100.0%。8株菌均检出OXA-51、OXA-23基因,未检出OXA-24、OXA-58、IMP和VIM耐药基因。结论该院ICU分离的MDRAB对临床常用的抗生素耐药性严重,携带OXA-23基因可能是其耐碳青霉烯类抗生素的主要原因。     

多重耐药菌中β-内酰胺酶基因监测

目的了解多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶联链反应(PCR)检测78株多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的TEM、SHV和CTX—M等3种β-内酰胺酶基因,并进行DNA测序。结果 50株铜绿假单胞菌中37株TEM基因阳性(74.0%),未检出SHV和CTX—M基因,28株鲍曼不动杆菌中25株TEM基因阳性(89.3%),2株SHV阳性(7.1%),未检出CTX—M基因。结论多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的β-内酰胺酶基因类型以TEM型较为流行。     

OXA-23酶基因在多药耐药鲍氏不动杆菌的流行研究

目的 了解临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)中OXA-型β-内酰胺酶基因在医院存在状况,探讨MDRAB的耐药机制.方法 收集2009年1月-2010年12月临床分离的MDRAB,采用纸片扩散(K-B)法再次测定MDRAB对各类抗菌药物的敏感性;采用PCR法检测OXA- 23群、OXA- 24群、OXA- 58群基因.结果 除头孢哌酮/舒巴坦外,22株分离株对β-内酰胺类抗菌药物均表现为耐药,对亚胺培南与美罗培南的耐药率分别达到了63.6％、36.4％;PCR检测OXA- 23群基因,22株均呈阳性,但其他碳青霉烯酶基因均为阴性.结论 临床分离的鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药性非常严重,且OXA-23群基因携带率高达100.0％,分离株的耐药性可能与OXA- 23碳青霉烯酶有关.     

呼和浩特地区耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性及OXA基因检测

目的了解呼和浩特地区临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药性和OXA碳青霉烯酶基因携带情况,为预防和控制多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染提供依据。方法收集2012年1—12月3所呼和浩特三级甲等医院患者临床分离的非重复IRAB49株,采用纸片扩散法进行药敏试验,应用聚合酶链反应(PCR)检测4种OXA碳青霉烯酶基因(blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like)的携带情况。结果 49株IRAB对米诺环素的耐药率(8.16%)较低,对其他抗菌药物均具有较高的耐药率(81.63%~100.00%)。49株IRAB均携带blaOXA-51-like基因(检出率为100.00%),其中42株同时携带blaOXA-23-like基因(检出率为85.71%);3所医院均检出blaOXA-23-like、blaOXA-51-like基因,均未检出blaOXA-24-like、blaOXA-58-like。结论 IRAB呈多重耐药现象,对米诺环素耐药率最低;该地区IRAB的主要耐药机制是产OXA-23型碳青霉烯酶。     

鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因检测分析

目的检测分析鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因。方法采用K-B法(CLSI 2008年标准)测定鲍氏不动杆菌临床分离株耐药性;PCR方法检测TEM、SHV、CTX-M、I MP、VI M、OXA-23、OXA-24耐药基因以及Ⅰ、Ⅱ类整合酶。结果 130株鲍氏不动杆菌,除阿米卡星和碳青霉烯类外,对其他抗菌药物耐药率非常高,TEM、SHV、CTX-M、Int1、Int2基因阳性率分别为68.5%、10.8%、17.7%、75.4%、0;51株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌中I MP、VI M、OXA-23、OXA-24基因阳性率分别为25.5%、19.6%、72.5%、0。结论鲍氏不动杆菌耐药性较高,携带TEM型β-内酰胺酶、OXA-23、I MP和VI M型碳青霉烯酶基因和Ⅰ类整合酶;产生OXA-23型碳青霉烯酶和金属酶是医院鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要机制。     

江西地区鲍曼不动杆菌NDM-1及其他碳青霉烯酶基因检测研究

目的了解江西地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)NDM-1及其他碳青霉烯酶基因携带情况,为预防和控制医院感染提供实验室依据。方法收集2015年1月—2016年6月江西地区3所三级甲等医院临床标本分离的CRAB共64株,采用K-B法测定其对常用抗菌药物的敏感性,采用改良Hodge试验和EDTA协同试验筛查CRAB产碳青霉烯酶和金属酶的情况,采用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因,对产NDM-1的鲍曼不动杆菌进行接合试验。结果 CRAB对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星耐药率高达95.31%、98.44%、90.63%、54.69%。CRAB菌株改良Hodge试验阳性率为76.56%,EDTA协同试验阳性率为96.88%。PCR扩增结果显示,87.50%(56株)的CRAB携带OXA-23、VIM-1基因,18.75%(12株)携带SIM基因,3.13%(2株)携带OXA-24基因,26.56%(17株)携带NDM-1基因。携带NDM-1基因的CRAB均来自于南昌大学第一附属医院,其中64.70%(11/17)表现为泛耐药。接合试验结果显示,携带NDM-1基因的菌株可将NDM-1基因传递给受体菌大肠埃希菌J53,使其获得对亚胺培南的耐药性。结论该地区临床分离的CRAB耐药率高,碳青霉烯酶基因以OXA-23、VIM-1基因型为主,检出NDM-1基因阳性CRAB,NDM-1基因可能存在医院内的克隆传播,应尽快采取有效措施预防和控制NDM-1基因阳性CRAB的传播。     

呼吸ICU耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因的携带情况及同源性

目的了解我院呼吸ICU耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)携带的β-内酰胺酶的耐药基因及其流行特征。方法收集2015年10—12月呼吸ICU临床患者送检标本分离的CRAB。试验菌株进行5种耐药基因(KPC-2、IMP、VIM、NDM-1、OXA-23)PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,并且进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性分析。结果 2015年10—12月呼吸ICU共分离CRAB22株,其中19株(86.36%)分离于痰。22株CRAB对复方磺胺甲口恶唑的耐药率为59.09%,对米诺环素的耐药率为9.09%,对多粘菌素B均敏感,对其他检测抗菌药物的耐药率均为80%以上。PCR扩增未检出KPC-2、IMP、NDM-1三种耐药基因,而VIM、OXA-23阳性率均为100%。PFGE同源性分析结果:22株菌分为13种不同带型,每种带型包含菌株数为1~5株不等,其中9种带型(69.23%)分别只包含1株菌,其他4种(30.77%)带型包含菌株数为2~5株不等。其中,A5、A7和A8为同一型,A9、A11、A14、A19和A22为同一型,A4、A10和A12为同一型,A16和A18为同一型。结论呼吸ICU分离CRAB携带的β-内酰胺酶耐药基因主要为VIM、OXA-23型基因。同源性分析证实,有小部分为同一克隆株,存在小范围的流行。     

青岛两所医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分析

目的了解青岛市两所医院鲍曼不动杆菌(AB)耐药情况、分布特征,碳青霉烯酶基因携带情况。方法收集两所医院临床分离的145株(A院78株,B院67株)AB进行药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶基因,肠杆菌科基因间一致重复序列(ERIC)-PCR对菌株进行同源性分析。结果 A院AB对临床常用的16种抗菌药物普遍耐药,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(3.85%),其次是米诺环素(16.67%),对其他抗菌药物耐药率均73%。B院AB对常用的23种抗菌药物普遍耐药,对米诺环素和替加环素均不耐药,对阿米卡星和左氧氟沙星的耐药率分别为23.88%、38.81%,对其他抗菌药物的耐药率均64%。两院所有菌株均携带OXA-51基因,A、B两院碳青霉烯耐药组OXA-23基因的携带率分别为86.76%(59/68),56.67%(34/60),差异有统计学意义(χ2=14.53,P0.001);A院3株菌携带OXA-58基因,B院未检出OXA-58基因。145菌株共分为8个基因型,其中A型71株和E型37株,为主要流行株;A院主要流行A型(46.15%)和E型(41.03%),B院主要流行A型(52.24%)和C型(17.91%)。结论两所医院临床分离的AB耐药情况严重,且存在医院流行,OXA型酶OXA-23、OXA-51基因在介导AB对碳青霉烯类药物耐药中发挥重要作用。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶及其相关耐药基因的检测分析

目的 了解医院临床分离的多药耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,以及β-内酰胺类相关耐药基因的存在状况.方法 采用K-B法测定临床分离铜绿假单胞菌对17种抗菌药物的敏感性,筛选出135株多药耐药菌株;采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶;采用聚合酶链反应检测β-内酰胺酶编码基因及oprD2基因.结果 135株多药耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶按检出率依次为AmpC酶占36.3％,ESBLs+ AmpC酶占14.8％,金属β-内酰胺酶占13.3％,ESBLs+ AmpC酶变异子占11.9％,AmpC酶变异子占5.2％,ESBLs占4.4％;β-内酰胺酶编码基因的检出率CTX-M-1群为45.9％、TEM为25.9％、CARB为12.6％、DHA为10.4％、IMP为3.7％,未检出SHV、OXA- 10群、PER、GES、VEB和VIM基因;oprD2基因的缺失率为69.6％.结论 多药耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,β-内酰胺类对抗菌药物的耐药主要与CTX-M-1群、TEM、CARB、DHA、IMP型耐药基因有关,对碳青霉烯类抗菌药物耐药主要与oprD2基因缺失有关.