基于自身免疫调节因子探讨左归丸对先天肾虚仔鼠T细胞迁移的影响

目的:观察左归丸对先天肾虚仔鼠胸腺和胸腺上皮细胞(TECs)内自身免疫调节因子(AIRE)、胰岛素样生长因子2 (IGF2)、套膜蛋白(Involucrin)的表达和T细胞分类的影响.方法:构建先天肾虚仔鼠模型,各组孕鼠分别给予0.9％氯化钠溶液,胸腺肽,左归丸大、小剂量混悬液灌胃,至仔鼠出生.正常仔鼠胸腺TECs做原...     

基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响

目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值.方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg-1).正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组...     

肾虚质大鼠IL-2水平变化对CD4~+T细胞和CD8~+T细胞的影响

目的:观察肾虚质大鼠IL-2水平的变化对CD4+T细胞和CD8+T细胞的影响。方法:采用"猫吓鼠"的方法造成肾虚质孕鼠,将肾虚质孕鼠所产雄性子鼠16只随机分为模型组及药物组,每组8只,随机选取正常组孕鼠所产雄性子鼠8只作为空白组,模型组和药物组的16只子代鼠于每日定时进行恐吓,空白组不予恐吓,持续1个月;同时药物组给予桂附地黄丸混悬液,空白组和模型组给予等量生理盐水。采用ELISA法检测大鼠血清IL-2含量的变化,运用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+百分率的变化。结果:与空白组相比,模型组IL-2的含量降低(P<0.05),CD4+百分率下降(P<0.05),CD8+百分率升高(P>0.05);与模型组比,药物组IL-2的含量、CD4+百分率升高,CD8+百分率降低,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:肾虚质大鼠IL-2的水平与T细胞免疫功能具有相关性。     

左归丸母代干预对先天肾虚仔鼠脑皮质层发育及ADAMTS-4、Reelin、Fyn调控因子的影响

目的 研究左归丸干预Reelin信号通路上下游相关因子在脑皮质层发育过程的作用及机制。方法 观察第21日龄仔鼠的一般情况、测量体重、体长和脑重量;观察脑皮质层发育状况;检测ADAMTS-4、Reelin和Fyn蛋白和mRNA的表达。结果 空白对照组仔鼠各方面情况较好,模型组皮肤颜色偏暗,易惊恐、小便次数增多、大便稀软,补肾组皮肤颜色、二便正常。与空白对照组比较,模型组体重、体长及脑重量减少趋势;与模型组相比,补肾组呈有所好转。与对照组比较,模型组ADAMTS-4蛋白和mRNA表达量明显升高,Reelin、Fyn蛋白和mRNA表达量明显降低;与模型组比较,补肾组ADAMTS-4蛋白和mRNA表达量降低,Reelin、Fyn蛋白和mRNA表达量升高。结论 先天肾虚仔鼠幼儿期学习记忆能力下降、生长发育迟缓,左归丸填补母鼠肾精,能抑制脑皮质层ADAMTS-4表达,增强Reelin表达和活性,激活Fyn下游通路,促进脑皮质发育。     

左归丸对痴呆鼠氧化反应及细胞凋亡的影响

目的探讨左归丸对AD鼠氧化反应及细胞凋亡的影响。方法模型组以β淀粉样蛋白(Aβ)注射海马制备AD动物模型,各治疗组分别在造模的同时灌胃左归丸和抗脑衰胶囊、脑复康。采用生化法检测各组大鼠脑匀浆CAT,MAO,免疫组化方法观察各组大鼠海马神经元TNF-α蛋白的变化,运用RT-PCR测定各组海马caspase3基因的表达。结果灌服后左归丸治疗组均能明显提高AD大鼠脑组织CAT活性、抑制MAO活性;中药治疗组能显著下降海马区域TNF-α含量和下调caspase-3 mRNA的表达。结论左归丸对痴呆鼠海马神经元细胞凋亡有抑制作用,其作用机理可能是通过提高CAT等抗氧化酶作用和抑制MAO活性,下降海马区域TNF-α蛋白含量和下调caspase-3 mRNA的表达。     

中药影响实验性自身免疫性脑脊髓炎CD4+T细胞亚群分化的研究进展

实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)是由CD4⁺T细胞介导的中枢神经系统脱髓鞘性疾病,是国际公认研究多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的动物模型。CD4⁺T细胞作为EAE模型的主要免疫应答细胞,存在多个亚群,可分泌多种细胞因子,参与病情进展。CD4⁺T细胞增殖分化及功能紊乱与EAE发病机制密切相关。目前临床尚无治疗MS的有效药物,多以对症应用皮质类固醇激素为主,但不良反应严重,且易产生药物依赖。近年来中药因作用温和、药物安全性较高、成本低、耐受性好等优点逐渐走进大众视野,针对中药对EAE中CD4⁺T细胞亚群分化的影响展开论述,为临床用药提供更多理论基础。     

左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏 TGF-β1/Smad4 mRNA表达的影响

目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制.方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig6.4,3.2,1.6g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d.取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb· Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达.结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb· Ar)显著升高(P＜0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P＜0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P＜0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P＜0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著.结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关.     

肾气丸对衰老大鼠小肠CD4+T细胞、CD8+T 细胞的影响

目的 实验研究肾气丸对D-半乳糖致衰大鼠小肠黏膜内CD4+T细胞、CD8+T 细胞的影响,探讨肾气丸延缓衰老作用.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分成4组,实验组(高、低剂量组)和模型组用D-半乳糖颈部皮下注射,实验组同时灌服肾气丸,对照组、模型组给予等量的生理盐水灌胃,持续42 d,分别取十二指肠、空肠、回肠,用免疫组化SP法显示黏膜内CD4+T细胞、CD8+T 细胞,分别对黏膜上皮和固有层内的阳性细胞计数.结果 模型组与对照组比较,上皮和固有层内CD4+T细胞有显著差异(P＜0.05);高剂量组或低剂量组与对照组比较,上皮和固有层内CD4+T细胞也有显著差异(P＜0.05);CD8+T 细胞在模型组和实验组与对照组比较,均无明显差异(P＞0.05).结论 肾气丸能改善衰老大鼠小肠黏膜内免疫细胞功能状态.     

升降散对脓毒症小鼠CD4~+、CD8~+T细胞的影响

目的观察升降散对脓毒症小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞的影响。方法雄性Balb/c小鼠84只,按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组、升降散组,各组又分为6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组。除正常组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症小鼠模型。各组在造模前72 h开始灌胃给药或0.9%Na Cl溶液,术后按各个时间点采用流式细胞仪方法检测小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞占淋巴细胞百分比。结果与脓毒症组相比,升降散组可显著上调CLP后6 h及12 h的CD4+水平,下调CLP后6 h及12 h的CD8+水平,差异均有统计学意义(P0.05)。结论升降散可以纠正脓毒症初期小鼠的细胞免疫功能紊乱,具有免疫调节作用。     

清肺抗核方对老年肺结核患者CD8+CD28-Treg细胞的影响

目的：观察清肺抗核方对老年肺结核患者外周血CD8⁺CD28^-调节性T细胞(Treg cells)的影响。方法：收集2021年1月至12月收治的185例老年肺结核患者,随机分为对照组(92例)和观察组(93例)。对照组予以常规西药抗结核治疗方案,观察组在对照组的基础上辅以清肺抗核方治疗,观察临床疗效。采用流式细胞术检测两组治疗前后CD8⁺CD28^-Treg细胞百分比及绝对计数。结果：完成试验的患者共计172例,结果显示,观察组老年肺结核患者外周血CD8⁺CD28^-Treg细胞百分比及绝对计数均显著低于对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：清肺抗核方可能是通过减少老年肺结核患者外周血CD8⁺CD28^-Treg细胞的百分比及绝对计数,改善T淋巴细胞亚群稳态,从而发挥抗结核治疗作用。     

当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠血清ET-1、NO表达的影响＊

目的 观察当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠（SHR）血压、血清中内皮素（ET-1）、一氧化氮（NO）表达的变化。方法 6周龄48只雄性SHR随机分为8组，分别是模型对照组、缬沙坦组、当归-川牛膝组和分离组（水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和90%乙醇），每组6只，并将同周龄的WKY大鼠作为正常对照组，各给药组以灌胃方式给药，模型组和正常对照组给生理盐水，连续治疗4周。Elisa法检测血清中内皮素（ET-1）、一氧化氮（NO）表达水平。结果 模型组ET-1水平明显高于正常对照组，NO水平明显低于正常对照组，差异均具有统计学意义（P < 0.05）；缬沙坦组、当归-川牛膝组、30%醇洗组ET-1水平明显低于模型组，NO水平明显高于模型组，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。结论 当归-川牛膝水煎剂及其提取物能有效降低SHR血清中ET-1水平，增加NO浓度，抑制血压升高。     

左归丸对去卵巢大鼠下丘脑Orexin及其受体mRNA表达的影响

目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组8只。灌胃给药12周后,通过显微CT(μ-CT)检测股骨骨密度(BMD)和骨小梁微观三维形态结构,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠骨组织形态学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清骨转换标志物骨钙素(OCN),I型前胶原氨基端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑Orexin,食欲素受体1(OX1R)和食欲素受体2(OX2R) mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,μ-CT示模型组大鼠BMD,骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb. Th)和骨小梁数量(Tb. N)显著下降(P 0. 01)而骨小梁间隙(Tb. Sp)升高(P 0. 01),骨小梁明显稀疏,间距加宽,结构出现较大的空白区域; HE染色示骨小梁明显稀少,结构不完整,排列疏松,间距变宽; ELISA示血清OCN,PINP含量降低,TRAP含量升高(P 0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达下调(P 0. 01)。经左归丸治疗后,大鼠BMD,BV/TV,Tb. Th,Tb. N升高(P 0. 05,P 0. 01),Tb. Sp降低(P 0. 01),骨小梁变密,空隙率下降,分布均匀,排列尚可,微观结构明显改善;血清OCN,PINP含量增加(P 0. 05,P 0. 01)而TRAP含量降低(P 0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达明显上调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:下丘脑Orexin及其受体mRNA水平降低可能是PMOP发病的机制之一。左归丸可通过上调下丘脑Orexin及其受体mRNA表达,从而纠正骨代谢失衡,改善骨小梁微结构,提高骨密度,发挥治疗PMOP的作用。     

左归丸对去势大鼠钙转运通路相关蛋白的影响

目的:探讨左归丸对去势大鼠骨密度和骨组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法:选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,尼尔雌醇组(0.167 mg·kg^-1),左归丸低、高剂量组(9.6,38.4 g·kg^-1)。除假手术组和正常组,其余组切除大鼠卵巢,造模成功后3个月进行各组干预。3个月后处死大鼠,检测大鼠骨密度(BMD)和骨代谢标志物;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测钙转运通路(骨组织)瞬时受体电位通道V5(TRPV5),钙结合蛋白-D28K(CaBP-D28K),钠钙交换器1(NCX1)和细胞膜钙汞(PMCA1b)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血钙降低(P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组和尼尔雌醇组大鼠血钙显著升高(P<0.01);与正常组比较,模型组BMD显著降低(P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组与尼尔雌醇组大鼠BMD均有改善(P<0.05);与假手术组和正常组比较,模型组各蛋白表达均有不同程度上调(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,左归丸高剂量组中TRPV5蛋白表达有显著下调(P<0.01),各干预组中的CaBP-D28K与NCX1蛋白表达均有不同程度的下调(P<0.05,P<0.01),PMCA1b蛋白表达在左归丸低剂量组和尼尔雌醇组内表达均有不同程度下调(P<0.05,P<0.01)。结论:左归丸可不同程度的降低大鼠破骨细胞中TRPV5,CAPB-D28K,PMCA1b,NCX1等介导破骨细胞吸收钙离子的重要通道蛋白的表达,左归丸的抗骨质疏松机理有可能是通过抑制TRPV5介导的破骨细胞的骨吸收而起作用。     

艾滋病中医脏腑气虚证候与CD4~+及CD8~+ T淋巴细胞相关性研究

目的观察艾滋病中医脏腑气虚证候与CD4+、CD8+T淋巴细胞相关性。方法通过对艾滋病中医脏腑气虚证候患者免疫学指标的观察,初步探讨艾滋病肺气亏虚证、脾气亏虚证、肾气亏虚证与CD4+、CD8+T淋巴细胞的内在相关。结果 153例患者中,肺气虚证患者48例,脾气虚证患者70例,肾气虚证患者35例;CD4+和CD8+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+T比值比较:肺气虚证与脾气虚证、肾气虚证比较有统计学意义(P0.05),脾气虚证与肾气虚证比较则无统计学意义(P0.05)。结论艾滋病肺气虚证患者较脾气虚证、肾气虚证患者CD4+、CD8+T淋巴细胞下降更明显,CD4+/CD8+比例失调更显著,其免疫损伤和破坏更严重,更易发生机会性感染,病情亦相对较重。     

狼疮方对体外扩增小鼠CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的影响

目的:狼疮方对体外扩增小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量的影响。方法:免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4+CD2+5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞;用CFSE法检测CD4+CD25+调节性T细胞体外抑制CD4+CD2-5T细胞的增殖情况。结果:经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4+CD25+T细胞数量明显升高,扩增后的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4+CD25+T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异(P0.05)。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4+CD2+5T细胞和扩增的CD4+CD25+T细胞对CD4+CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论:狼疮方有助于提高小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4+CD25+调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。     

中药天花粉蛋白增强诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量和功能的初探＊

目的 探讨中药天花粉蛋白（Trichosanthin，Tk）增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）数量和功能的作用。方法 研磨6-8周C57BL/6小鼠脾脏，裂解红细胞后得到单个脾脏淋巴细胞悬液，按5×10⁵/mL细胞密度均匀接种在圆底96孔板，设空白组、对照组（增殖体系：1 μg·mL^-1 anti-CD3/28 mAb）、三个不同诱导方案组，培养7天后收集细胞运用流式细胞术检测CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞比例以此确定最佳诱导方案；将低浓度Tk（0.25、0.5、1 μg·mL^-1）作用于诱导体系，7天后采用流式检测Tk对CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞比例的影响；Annexin V-PI染色法检测细胞凋亡情况；Western blotting法测定各组中Treg细胞特异性转录因子Foxp3蛋白表达情况；实时荧光定量 PCR法检测转录因子Foxp3和细胞因子TGF-β、IL-10、IL-6、IFN-γ基因水平的表达；酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组细胞培养上清中分泌IFN-γ和IL-10的浓度。结果 与对照组相比，添加TGF-β（5ng·mL^-1）诱导小鼠脾脏淋巴细胞生成Treg的数量和比例最高，此诱导方案最佳（P < 0.01）；与诱导组相比，低浓度中药天花粉蛋白可显著增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数量和比例，呈剂量依赖性（P < 0.01），且Tk需在诱导体系下发挥作用，单加不能诱导生成Treg细胞，此浓度Tk无细胞毒性；与对照组相比，诱导组和低浓度Tk组Treg特异性转录因子Foxp3蛋白和基因表达水平均显著上调（P < 0.01），II型辅助性T细胞（Th2）分泌的炎症抑制因子IL-10、TGF-β基因表达不同程度上调，反之，I型辅助性T细胞（Th1）分泌的促炎因子IFN-γ、IL-6基因表达呈相反趋势下调（P < 0.01）；与对照组相比，诱导组和低浓度Tk组细胞上清中分泌的IL-10浓度显著增加，IFN-γ浓度明显降低（P < 0.01）。结论 低浓度中药天花粉蛋白可显著增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞，上调Foxp3和Th2型炎症抑制因子IL-10、TGF-β的表达，下调Th1型促炎因子IFN-γ、IL-6的表达，从而发挥免疫抑制功能。     

龟鹿补骨方辨治绝经后骨质疏松症患者Th17/ Treg细胞因子的调节作用

目的:观察龟鹿补骨方辨治绝经后骨质疏松症(PMO)肝肾阴虚证的临床疗效,及对Th17/Treg细胞因子的影响。方法:将140例患者按随机数字表法分为对照组和观察组各70例。两组均给予西医治疗。对照组口服金天格胶囊,3粒/次,3次/d;观察组采用龟鹿补骨方辨证治疗,1剂/d;连续治疗6个月,并随访6个月。治疗前、治疗6个月和随访6个月采用双能X射线吸收检测法(DXA)测量腰椎L2-4骨密度和采用定量CT(QCT)测量腰椎骨密度;治疗前、治疗3个月和6个月进行肝肾阴虚证和中国人骨质疏松症生存质量简明量表(COQOL)评分;检测治疗前后雌二醇(E_2),Ⅰ型原胶原氨基端前肽(PINP),骨保护素(OPG),Ⅰ型胶原交联C末端肽(S-CTX),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)水平;检测治疗前后CD4~+细胞,计算Th17细胞和Treg细胞;检测治疗前后白细胞介素-17(IL-17),IL-22,IL-10和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)水平;进行安全性评价。结果:治疗6个月和随访6个月,两组DXA测量结果(腰椎L_(2-4)骨密度和T-值)和QCT骨密度均持续升高(P0.01),且观察组腰椎L_(2-4)骨密度,T-值和QCT骨密度均高于同期对照组(P0.01);治疗3和6个月,观察组肝肾阴虚证积分和生活质量评分均低于同期对照组(P0.01);观察组PINP,S-CTX和TRACP均低于对照组(P0.01),OPG,E_2水平均高于对照组(P0.01);观察组Th17细胞和Th17/Treg均低于对照组,Treg细胞高于对照组(P0.01);观察组IL-17,IL-22水平均低于对照组(P0.01),IL-10和TGF-β_1水平均高于对照组(P0.01)。未发现龟鹿补骨方相关不良反应。结论:在补充钙剂、维生素D等治疗基础上,龟鹿补骨方治疗PMO肝肾阴虚证患者,能进一步提高骨密度,升高雌激素水平,调节骨代谢标志物,Th17,Treg及相关因子的表达,逆转Th17/Treg失衡状况,减轻了临床症状,提高了生活质量,临床疗效优于金天格胶囊,且安全。     

桂枝茯苓胶囊对子宫内膜异位症大鼠脾脏 CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性的影响

目的:观察桂枝茯苓胶囊对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠脾脏CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性的影响。方法:改进制作大鼠子宫内膜异位症动物模型,ig桂枝茯苓胶囊0.256,1.024 g.kg-1,28 d后取脾脏,分离淋巴细胞,采用流式细胞分析术测定大鼠脾脏中CD4+T淋巴细胞数;将分离的NK细胞与K562细胞共孵育后,MTT法检测其杀伤活性。结果:低剂量组CD4+T淋巴细胞数比模型组提高19.0%,NK细胞杀伤活性提高54.1%,具有显著意义。结论:桂枝茯苓胶囊可显著提高CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性。     

益髓生血颗粒对AA大鼠CD4 + CD25 + Foxp3调节性T细胞的影响

目的：观察益髓生血颗粒对再生障碍性贫血（Aplastic Anemia,AA）大鼠CD4 + CD25 + 调节性T细胞（Regulatory T Cell,Treg细胞）的影响及其治疗AA的作用机制。方法：取雄性SD大鼠按体重随机分组。其中模型组连续7周隔天皮下注射苯（1 mL ? kg -1 ）、取材10天前开始腹腔注射环磷酰胺（25 mL ? kg -1 ）,连续3天,第4周将模型组大鼠按体重随机分为模型组、司坦唑醇组、益髓生血颗粒组,灌胃给药。正常组及模型对照组给予等体积生理盐水。实验结束时,检测外周血WBC、RBC、HGB、PLT;制备血涂片、骨髓涂片;免疫组织化学法检测脾组织Treg细胞Foxp3蛋白表达;RT-PCR法检测骨髓组织Foxp3 mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组WBC、RBC、HGB、PLT均显著减少（P<0.01）,血涂片示血细胞通透性差、白细胞减少、退化细胞增多,骨髓涂片示脂肪滴明显增加、造血细胞均明显降低、非造血细胞增多;经益髓生血颗粒组治疗后WBC、RBC、HGB、PLT均显著增加（P<0.01）,血涂片及骨髓涂片显示细胞通透性好转、形态趋于正常、脂肪滴明显减少,造血细胞均明显增加,脾组织Foxp3蛋白及骨髓组织Foxp3 mRNA表达明显升高（P<0.01）。结论：益髓生血颗粒可上调Foxp3的因及蛋白表达,调控AA免疫功能,进而改善AA免疫环境,促进骨髓造血功能的恢复,发挥治疗AA的重要作用。     

定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响

目的:观察定心方(DXR)在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化(AS)过程中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs)表达调控的影响。方法:50只载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气,随机分为5组,DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29,18.59,37.18 g·kg~(-1)·d~(-1);辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组。16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)及转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞法检测脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠主动脉AS斑块形成,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显升高,IL~(-1)0及TGF-β水平明显降低,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显减少,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,辛伐他汀组,DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显降低,IL~(-1)0及TGF-β水平明显升高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显增加,Foxp3蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:DXR可通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效。