新型冠状病毒感染的临床表现及其实验室检测技术进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)属于冠状病毒属,是一种主要通过呼吸道传播的RNA病毒,具有极高传染性,被世界卫生组织列为对人类危害最严重的病毒之一。目前尚无批准上市的用于预防SARS-CoV-2的疫苗,该病毒导致的2019年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)需要通过实验室检测才能明确。为了解SARS-CoV-2的研究进展,该文综述了该病毒的特征、感染的流行病学、实验室检测技术,以期为诊断和防控新型冠状病毒病提供参考。     

新型冠状病毒引起的临床相关疾病及其分子生物学检测

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)潜伏期长,传染性强,发病机制不明确,在临床上引起以发热、干咳和乏力等为主要症状的新型冠状病毒肺炎(COVID-19),同时还可引起心血管等其他系统合并症状,临床尚无特效的治疗药物。目前抗疫工作重心倾向于防控,治疗感染患者的同时切断病毒传播途径,保护健康人群。因此,及时、准确地进行SARS-CoV-2核酸检测将更有利于病毒的防控。该文主要介绍了SARS-CoV-2的基因结构特征、分子生物学检测及其所引起的相关临床疾病,为临床诊断提供一定的参考依据。     

新型冠状病毒IgM/IgG抗体在病程监测中的临床意义

目的评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM/IgG抗体检测(化学发光法)在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病程监测和转归方面的临床意义。方法回顾性研究。收集2020年1月20日至2020年3月1日在天津市疾病预防控制中心核酸检测阳性的COVID-19确诊患者88例(115例血清样本)作为疾病组,排除COVID-19(核酸检测阴性)的其他疾病患者245例(245例血清样本)作为对照组。用化学发光法检测SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体。结果 SARS-CoV-2 IgM抗体检测的敏感性、特异性分别为90.91%、100%;SARS-CoV-2 IgG抗体检测的敏感性、特异性分别为88.64%、100%;IgM和IgG抗体联合检测敏感性显著提高至96.59%,特异性为100%,与核酸检测的总符合率高达99.10%。SARS-CoV-2 IgM抗体水平在COVID-19病程中呈现先升高后降低的趋势,IgG抗体水平随着病程的进展逐渐升高。结论 SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体化学发光法联合检测敏感性高,可作为COVID-19一种有效的辅助诊断,在病程监测和转归方面有一定的意义。     

COVID-19患者5种标本的SARS-CoV-2核酸与血浆IgM抗体检测结果分析

目的 分析不同标本类型与检测次数对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测结果的影响,评价SARS-CoV-2核酸与IgM抗体检测技术在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者诊断中的应用.方法 连续3次(每天1次)采集患者的痰、咽拭子、血液、唾液和晨尿标本,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SARS-CoV-2核酸,同时检测患者血浆SARS-CoV-2 IgM抗体.对检测结果进行以下分析:1次与连续3次(每天1次)检测5种标本的SARS-CoV-2核酸阳性率;1次与连续3次(每天1次)检测SARS-CoV-2 IgM抗体的阳性率;连续3次检测5种标本的SARS-CoV-2核酸阳性率与SARS-CoV-2 IgM抗体检测的阳性率比较,以及两者联合应用对COVID-19患者的检出情况.结果 1次检测5种标本SARS-CoV-2核酸,各标本的阳性率:痰46.66％,咽拭子40.00％,血浆13.33％,唾液33.33％,晨尿0;同种标本连续检测3次SARS-CoV-2核酸,各标本的阳性率:痰80.00％,咽拭子66.66％,血浆13.33％,唾液60.00％,晨尿0.1次与连续3次检测患者血浆SARS-CoV-2 IgM抗体的阳性率均为93.33％.血浆SARS-CoV-2 IgM抗体的阳性率明显高于SARS-CoV-2核酸技术,两种方法联合对COVID-19的检出率为100.00％.结论 SARS-CoV-2核酸检测阳性检出率与采集标本种类相关,多次多部位采集标本可明显提高SARS-CoV-2核酸阳性检出率.SARS-CoV-2 IgM抗体阳性检出率明显高于SARS-CoV-2核酸技术,两种方法联合可明显提高COVID-19的实验室检出率.     

新型冠状病毒检测技术的研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的出现导致了新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的大流行,快速而准确的实验室诊断对预防COVID-19的传播具有重要的作用。在获得完整的病毒基因组序列的基础上,中国开发了基于聚合酶链反应(PCR)技术的检测手段。此外,大多数患者可被检测到针对SARS-CoV-2的免疫球蛋白G、免疫球蛋白M和免疫球蛋白A的特异性抗体,为血清学检测技术的研发奠定了理论基础。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术是目前SARS-CoV-2的主要检测手段,具有特异性高、检测结果可靠等优势,但对设备和操作者有着较高的要求。本研究对目前SARS-CoV-2检测方法的研究进展进行综述,以期为临床医生及科研工作者提供参考。     

22种呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评估

目的 通过对1种新型呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评价,为新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、流行性感冒(流感)病毒等叠加流行的大规模检测提供适宜技术方法.方法 收集北京地区急性呼吸道感染病例阳性标本252份,采用4种核酸检测试剂盒(3种核酸多重检测试剂盒A、B、C及1种SARS-CoV-2检测试剂盒D)分别...     

4例COVID-19患者不同类型标本的SARS-CoV-2核酸及抗体检测结果分析

目的选择合适的标本类型进行SARS-CoV-2检测,为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的早期诊断提供依据。方法采集咽拭子核酸检测阳性的4名COVID-19患者的鼻拭子、粪便、尿液、血液(分离血清)标本,用实时荧光RT-PCR进行SARS-CoV-2核酸检测,用化学发光法检测患者血清IgM和IgG。结果 4名患者咽拭子和3例粪便标本的SARS-CoV-2核酸检测阳性、2例鼻拭子核酸检测阳性;1例患者感染SARS-CoV-2一周内血清IgM及IgG出现,其余3例患者同期血清抗体检测阴性。结论 SARS-CoV2可以通过多种途径进行传播,选择多种类型标本联合检测可提高病毒的检出率;同时血清学抗体检测可以作为核酸检测的补充。     

4种SARS-CoV-2核酸检测试剂一致性评价

目的评估4种严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测试剂盒在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的一致性。方法收集2020年2月18—24日武汉亚心总医院204例COVID-19住院患者临床资料,利用检测剩余标本,对4家通过应急注册审批的SARS-CoV-2核酸检测试剂盒进行一致性评价。在临床诊断为COVID-19的基础上,以任一试剂检出阳性为参考,分别比较4种试剂盒检测SARS-CoV-2ORF1ab基因、N基因的敏感性和特异性。采用Kappa一致性分析和χ~2检验对检测结果的一致性进行统计学分析。结果 4种试剂对SARS-CoV-2的整体检出率分别为72.4%、78.0%、59.3%和72.4%,差异有统计学意义(P=0.011)。A、B、C、D试剂对SARS-CoV-2 ORF1ab基因的检出率分别是47.7%、31.8%、68.2%和83.2%(P0.000 1);A、B、C试剂对SARS-CoV-2 N基因的检出率分别是79.0%、90.5%和16.2%(P0.000 1)。结论SARS-CoV-2核酸检测试剂盒存在一定比例的假阴性结果,不同品牌SARS-CoV-2核酸检测试剂检测性能差异有统计学意义,多试剂联合检测有利于提高病毒检出率。     

新型冠状病毒的研究现状与实验室诊断

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在全球范围内的传播对世界公共健康构成了巨大威胁。目前,预防和治疗SARS-CoV-2的选择仍然非常有限。解析病毒感染宿主的致病机制及治疗性疫苗的研制迫在眉睫。与此同时,研发快速、有效的SARS-CoV-2实验室检测技术,对于实现快速确诊感染病例、排除疑似病例、促进疫情的防控与临床救治至关重要。该文首先从SARS-CoV-2的结构特征、分子遗传变异特征、致病机制及潜在的药物靶点等方面介绍了“如何认识SARS-CoV-2”;同时立足于临床检验,重点介绍了现有的病毒实验室检测技术及问题解析、即时检验及高通量病毒筛查芯片等病毒筛查新技术,回答了“如何检测SARS-CoV-2”。最后对实验室从业人员如何安全防护进行了要点总结。     

新型冠状病毒SARS-CoV-2基因检测及其影像学对照

目的研究新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸基因检测及其影像学对照。方法实时荧光RT-PCR方法检测SARS-CoV-2 ORF1a/b和N基因,分析23例SARS-CoV-2核酸阳性患者临床及影像学资料。结果①无症状感染者3例,COVID-19确诊20例,潜伏期2~24天,成人轻型5例,儿童轻型1例,青年轻型1例,成年普通型13例。②23例SARS-CoV-2基因阳性患者,痰标本的病毒含量和检测效果高于鼻咽拭子标本,N基因粪便比痰和鼻咽拭子阳性持续时间长。③20例COVID-19中,30.0%(6/20)CT扫描未见异常。病毒载量与影像学无正比对应关系。④发病部位以外周带(13/14)和下叶后基底段(11/14)多见,两个或多个肺叶受累(11/14),双侧病变(11/14)。⑤14例CT异常COVID-19中,影像学主要表现为毛玻璃影(10/14)、双肺斑片状阴影(10/14)、晕征(8/14)、细网格征(5/14),以及伴发小叶间隔增厚(5/14)、支气管充气征(5/14)和小血管增粗影(5/14)。结论病毒载量与影像学无正比对应关系,SARS-CoV-2核酸检测联合CT扫描、流行病学史可以提高COVID-19的检出率,不能孤立仅仅依靠核酸PCR检查或CT检查。     

一种国产新型冠状病毒核酸检测试剂盒的性能验证

目的　评估一种国产新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸检测试剂盒是否满足临床SARS-CoV-2 核酸检测要求。 方法　采用15 例SARS-CoV-2 核酸阳性和15 例SARS-CoV-2 核酸阴性的临床样本,1 支SARS-CoV-2 RNA 干粉标准 品,5 支阳性定值参考品和5 支阴性定值参考品,对该试剂盒检测SARS-CoV-2 阴性和阳性符合率、精密度、检出限和 交叉反应进行验证。结果　20 例阴性和20 例阳性样本的N 基因和ORF1ab 基因阴阳符合率均为100%。2 例阳性样本 ORF1ab 基因重复性CV 为0.41%~0.56%,优于N 基因重复性,N 基因和ORF1ab 基因重复性、实验室总不精密度CV 均＜ 5%。检出限重复20 次的检出率为100%,SARS-CoV-2 与常见呼吸道病原体、与SARS-CoV-2 同种属病毒（人副 流感病毒1 型、鼻病毒、MERS,SARS,甲型流感病毒、乙型流感病毒、冠状病毒HKU1,NL63,229E 和OC43）之间不 产生交叉反应。 结论　该试剂盒阴阳性符合率一致,重复性好。SARS-CoV-2 与常见呼吸道病原体,与SARS-CoV-2 同 种属病毒不会产生交叉反应,适用于临床实验室和检测机构进行SARS-CoV-2 核酸筛查。     

胶体金免疫层析法检测SARS-CoV-2血清抗体的临床价值探讨

目的通过对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白(Ig)M和总抗体(即IgM/IgG)的检测,探讨应用胶体金免疫层析法(GICA法)在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集76例患者共计83份血清,其中32例为SARS-CoV-2核酸阳性患者(确诊组),44例为SARS-CoV-2核酸阴性患者(对照组)。确诊组中7例患者为两次时间点采集标本。采用GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体。结果GICA法检测SARS-CoV-2 IgM的灵敏度50.00%(16/32),特异度90.91%(40/44),符合率73.68%(56/76),阳性预测值80.00%(16/20)、阴性预测值71.43%(40/56);SARS-CoV-2总抗体检测的灵敏度68.75%(22/32)、特异度97.73%(43/44)、符合率85.53%(65/76)、阳性预测值95.65%(22/23)、阴性预测值81.13%(43/53)。GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体的特异度均大于90%,符合率均大于70%,满足临床需求。结论GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体,标本采集易标准化,报告时间快,灵敏度不高,但特异度较高,有辅助诊断的价值。     

SARS-CoV-2流行和血液安全

严重急性呼吸综合征冠状病毒-2(SARS-CoV-2)是引起新型冠状病毒肺炎(COVID-9)的病原体,主要经呼吸道传播,但在部分感染个体的血液中也可检测出病毒的RNA.本文就SARS-CoV-2经输血传播的风险及预防措施,SARS-CoV-2流行对血液供应的影响及其对策作了评述.     

SARS-CoV-2抗体检测在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值

目的探讨血清严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM和IgG抗体检测在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的价值。方法选取COVID-19患者173例(COVID-19组),其中140例SARSCoV-2首次核酸检测阳性,33例多次检测后呈阳性。以101例排除COVID-19的患者作为对照组。采用胶体金免疫层析法(CGIA)检测SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测SARS-CoV-2核酸。以临床诊断为金标准,分析SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体诊断COVID-19的效能。结果 SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体的敏感性分别为76.9%、74.6%,特异性分别为94.0%、95.1%,临床总符合率分别为83.2%、82.1%,与临床诊断的一致性均较好(kappa值分别为0.663、0.644)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体诊断COVID-19的曲线下面积(AUC)均为0.85。结论 SARS-CoV-2抗体检测具有较高的敏感性、特异性和临床总符合率,可用于COVID-19的辅助诊断。     

新型冠状病毒肺炎患者IgM抗体与血细胞计数及C反应蛋白的相关性研究

目的 探讨白细胞计数、C反应蛋白及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)特异性IgM抗体在新型冠状病毒感染的肺炎(COVID-19)患者临床诊断中的应用价值。方法 对59例COVID-19确诊患者疾病早期的外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白进行检测分析,并采用胶体金免疫层析技术检测不同病程患者血清中SARS-CoV-2特异性IgM抗体的水平。结果①59例确诊患者中,白细胞计数正常或降低者为57例(96.61%),淋巴细胞计数降低为20例(33.9%),C反应蛋白升高者为41例(69.49%)。COVID-19患者与健康人群相比,外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白的差异有统计学意义(P 0.05);②59例确诊患者中,52例(88.14%)患者血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体检测为阳性,健康体检者IgM抗体均为阴性。COVID-19患者在病程第(0～6)d、(7～10)d、(11～15)d、(16～20)d血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体阳性率分别为25%、81.82%、90%、100%。③IgM阳性组与IgM阴性组比较,外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白水平的差异均无统计学意义(P0.05)。结论 ①机体感染SARS-CoV-2后,外周血白细胞计数一般正常或减低,部分患者出现淋巴细胞减少,常伴有C反应蛋白升高。动态观察白细胞、淋巴细胞和C反应蛋白的变化,对于COVID-19的临床诊断和病情观察具有重要意义。②胶体金免疫层析技术检测患者血清中的SARS-CoV-2特异性IgM抗体可用于SARS-CoV-2感染患者的辅助诊断。     

新型冠状病毒IgM和IgG抗体不同检测方法在新型冠状病毒感染中的临床应用评价

目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM和IgG抗体不同检测方法在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)中的应用。方法选取25例COVID-19患者,以同期20例排除SARS-CoV-2感染的患者作为对照组,分别采用磁微粒化学发光法和胶体金法检测所有对象的血清SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体。同时检测COVID-19患者血清降钙素原(PCT)、铁蛋白及C反应蛋白(CRP)。结果化学发光法检测血清SARSCoV-2 IgM和IgG抗体的敏感性分别为48%和56%,特异性均为100%,胶体金法检测血清SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体的敏感性分别为88%和76%,临床特异性均为100%。2种方法检测血清SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体总符合率分别为68.9%和73.3%。25例COVID-19患者中有36%的患者血清PCT升高、72%的患者血清CRP升高、84%的患者血清铁蛋白水平升高。结论SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体不同检测方法之间差异较大,用于COVID-19患者的临床诊断时应综合考虑。     

医学检验技术在新型冠状病毒肺炎诊疗中的应用

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)是一种可导致烈性传染病——新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的RNA病毒,该病毒感染早期隐匿、无症状,且潜伏期较长,影像显示肺部无典型改变甚至无改变。这给COVID-19的诊断和鉴别诊断带来了极大的困难。核酸检测作为临床唯一可用的“确诊标准”,因受到标本选择和方法学灵敏度等因素影响,导致假阴性率较高,结果引起众多质疑。如何理性看待核酸检测,甚至如何正确分析并接受实验室检测结果?在此战“疫”之前,医学检验在医疗中的作用,较少被外界关注。为此,该文就医学检验技术在SARS-CoV-2感染所致疾病诊疗中所起的作用进行述评。     

新型冠状病毒肺炎患者血清SARS-CoV-2 抗体的检测分析

目的 分析新型冠状病毒肺炎（corona virus disease 2019,COVID-19） 患者血清新型冠状病毒（severeacute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）IgM 和IgG 抗体的变化规律及临床应用。方法 收集2020 年1 ～ 2 月初温州医科大学附属乐清医院收治的28 例SARS-CoV-2 核酸检测阳性的COVID-19 患者作为病例组,排除COVID-19 的30 例其他疾病患者作为对照组。利用全自动化学发光免疫分析技术检测所有研究对象的血清SARS-CoV-2IgM 和IgG,分析SARS-CoV-2 抗体的变化规律。结果 SARS-CoV-2 IgM,发病第1 ～ 6 天均阴性,发病第7 ～ 10 天,2 例患者阳性,发病第18 天后均转阳性,一个月左右达峰值,2 例患者分别在第49 天和第55 天出现9.80AU/ml（阴性）和10.79AU/ml（弱阳性）。SARS-CoV-2 IgG,发病第1 ～ 6 天均阴性,发病第8 天后均阳性。结论 发病10 天内SARS-CoV-2 IgM 阴性的患者不能排除SARS-CoV-2 感染,发病超过一周或多次核酸检测阴性的疑似患者检测SARSCoV-2 IgM 和IgG 具有重要意义。     

SARS-CoV-2抗体动态监测在COVID-19诊断中的价值

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)免疫球蛋白(Ig)M和IgG抗体检测在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的价值。方法选取COVID-19患者80例,以排除COVID-19的患者20例作为对照组。采用胶体金法检测SARS-CoV-2 IgM抗体和IgG抗体。收集23例COVID-19患者不同时间点采集的样本,并进行SARS-CoV-2抗体检测。结果 SARS-CoV-2 IgM抗体、IgG抗体和IgM+IgG抗体联用的特异性均为100%,敏感性分别为76.3%、81.3%、90.0%,总体符合率分别为81.0%、85.0%、92.0%。在发病7 d内,SARS-CoV-2 IgM抗体、IgG抗体和IgM+IgG抗体联用的敏感性分别为65.0%、70.0%、70.0%;在发病8～14 d,三者的敏感性分别为72.7%、95.5%、95.5%;在发病15 d后,三者的敏感性分别为84.2%、97.4%、97.4%。SARS-CoV-2IgM抗体在发病后第5～13天出现转阳趋势,在发病第18天后可观察到转阴趋势;SARS-CoV-2IgG抗体在第5天出现转阳趋势,之后持续阳性。结论血清SARS-CoV-2 IgM抗体和IgG抗体可作为COVID-19的辅助诊断指标,对其连续监测有助于判断疾病进程。     

北京某综合三甲医院对COVID-19疑似和非疑似患者进行SARS-CoV-2核酸筛查结果分析

目的 以北京综合三甲医院为例,对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似患者和非疑似患者的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸筛查结果进行分析,为COVID-19的实验室诊断提供实验依据.方法 SARS-CoV-2核酸检测的咽拭子标本来自2595例患者,COVID-19疑似患者81例,非疑似患者2514例.咽拭子标...