Rifampicin attenuates brain damage in focal ischemia

Rifampicin is an antibacterial agent that is widely used in tuberculosis and leprosy therapy. Interestingly, some experimental studies indicate that rifampicin acts as a hydroxyl radical scavenger and a glucocorticoid receptor activator. In this study, the neuroprotective effect of rifampicin was evaluated after transient and permanent focal cerebral ischemia. Anaesthetized male C57BL/6j mice were submitted to permanent or transient thread occlusion of the middle cerebral artery (MCA). Reperfusion in transient ischemia was initiated 30 min later by thread retraction. Rifampicin or vehicle were applied intraperitoneally before permanent or immediately after 30 min of transient ischemia. Later, 24 h after permanent or transient ischemia, animals were re-anesthetized and decapitated. Brain injury was evaluated by triphenyltetrazolium chloride staining (TTC), terminal transferase biotinylated-dUTP nick end labeling (TUNEL) and cresyl violet staining. A 20-mg/kg sample of rifampicin showed a significant neuroprotection after cerebral ischemia. The number of TUNEL-positive cells in the striatum, where disseminated tissue injury was observed, was also reduced by application of rifampicin as compared with vehicle-treated animals. The present report shows that administration of rifampicin efficiently reduces brain injury after permanent and transient focal cerebral ischemia in mice.     

升压联合亚低温治疗对局灶性脑缺血再灌注的脑保护作用

目的　观察升压联合亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血再灌注的脑保护作用。方法　 32只大鼠随机分为对照组、升压组、亚低温组、升压 亚低温组 ,采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,观察各组神经功能缺损评分和脑梗死体积。结果　升压组、亚低温组及升压 亚低温组神经功能缺损评分 (P <0 .0 5 )、脑梗死体积 (P <0 .0 1)均明显低于对照组 ;升压 亚低温组脑梗死体积明显低于升压组和亚低温组 (P <0 .0 5 )。结论　升压、亚低温对局灶性脑缺血再灌注损伤有明显脑保护作用 ,升压联合亚低温应用效果更佳     

Risperidone attenuates brain damage after focal cerebral ischemia in vivo

Since their introduction, atypical neuroleptic agents have been discovered to have some beneficial effects beyond their effectiveness as neuroleptic drugs. Among these initially unexpected effects are their potential effects as mood stabilizers in bipolar disorder and their efficacy in improving long-term outcome in schizophrenia. These effects recently raised the question whether these drugs may also have some neuroprotective effect in the brain. To examine this matter, in this study we evaluated the neuroprotective effect of risperidone after permanent focal cerebral ischemia. Anaesthetized male C57BL/6j mice were submitted to permanent thread occlusion of the middle cerebral artery (MCA). Risperidone (0.1, 1 or 10 mg/kg) or vehicle was applied intraperitoneally just after permanent ischemia. Twenty-four hours after permanent ischemia, brain injury was evaluated by triphenyltetrazolium chloride staining (TTC). Risperidone (0.1, 1 and 10 mg/kg) showed significant neuroprotection after permanent focal cerebral ischemia.     

Olanzapine attenuates brain damage after focal cerebral ischemia in vivo

Atypical antipsychotic drugs are widely used in the treatment of schizophrenia. These agents are discovered to have some additional beneficial effects beyond their effectiveness as antipsychotic drugs. Among these initially unexpected effects are their potential effects as mood stabilizers in bipolar disorder and their efficacy in improving long-term outcome in schizophrenia. These effects recently raised the question whether these drugs may also have some neuroprotective effect in the brain. To examine this matter, in this study we evaluated the neuroprotective effect of olanzapine after permanent focal cerebral ischemia. Anaesthetized male C57BL/6j mice were submitted to permanent thread occlusion of the middle cerebral artery (MCA). Olanzapine (0.1 and 1 mg/kg) or vehicle was applied intraperitoneally just after permanent ischemia. Twenty-four hours after permanent ischemia, brain injury was evaluated by triphenyltetrazolium chloride staining (TTC). Olanzapine (0.1 and 1 mg/kg) showed significant neuroprotection after permanent focal cerebral ischemia.     

局灶性脑缺血/再灌注损伤后大鼠脑组织tPA表达变化与细胞凋亡研究

目的　探讨大鼠脑缺血 /再灌注后脑组织内组织型纤溶酶原激活物 (t PA)表达变化及与细胞凋亡的关系和意义。方法　采用大鼠局灶性脑缺血 /再灌注模型 ,应用免疫组化染色及原位杂交技术检测脑组织 t PA表达变化 ,TU NEL 染色观察神经元的凋亡及其发生规律。结果　 t PA蛋白及 m RNA在缺血再灌注早期即开始表达 ,主要见于皮质损伤区周围及海马区 ,阳性着色的神经元表达明显 ,血管表达较弱。再灌注 4 8h神经元表达明显增强 ,缺血灶及其周边的微血管内皮表达也明显增强。再灌注 72 h表达有所下降。凋亡细胞主要出现于大脑皮质及尾壳核病变中心区的周围 ,再灌注 4 8～ 72 h达高峰。结论　脑缺血 /再灌注损伤可诱导神经元及血管内皮细胞 t PA表达增加 ,t PA可能通过促进细胞凋亡而介导再灌注损伤。     

胰岛素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用,并探讨其作用机制.方法用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,根据胰岛素的给药时间不同共分成2大组,第1大组再分为A、B、C、D4组,第2大组再分为2组.在第1大组检测各组不同时限的血糖,测量计算脑梗死灶体积,并进行神经功能缺损评分;在第2大组采用TUNEL法原位标记DNA片段,检测TUNEL阳性细胞的变化.结果在6 h内给予胰岛素治疗可使神经功能缺陷评分显著降低,脑梗死灶体积缩小,TUNEL阳性细胞也明显减少(P＜0.05).结论早期应用胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤,减轻再灌注后细胞损伤可能是其作用机制之一.     

巴曲酶、尿激酶联合应用对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的　探讨降纤、溶栓疗法联合应用对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法　采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型 (MCAO) ,分为尿激酶 (U K)、巴曲酶单药治疗组及巴曲酶与 UK合并用药治疗组和空白对照组 ,观察缺血 2 h再灌注后神经功能缺损评分、死亡率、梗死体积、组织病理学改变。结果　神经损伤及出血改变以 U K组为最重 (其中死亡 6只 ,出血 5只 ) ,空白组其次 (其中死亡 5只 ,出血 5只 ) ,巴曲酶单药治疗组及合并用药组均较前两组减轻 (其中巴曲酶单药治疗组死亡 4只 ,出血 2只 ,合并用药组的死亡及出血的例数均相同 ,各为死亡 3只 ,出血 5只 )。结论　巴曲酶与 U K联合应用对局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用 ;联合用药后对出血的影响较单一 U K治疗未见明显加重。巴曲酶可能具有减轻脑缺血 /再灌注损伤的神经保护作用 ,且使用安全。     

脑缺血后脑室内注射胰岛素减轻大鼠学习记忆力损害的实验研究

目的探讨经脑室直接注射胰岛素对全脑缺血后大鼠学习记忆力的影响.方法以4-VO法建立大鼠全脑缺血再灌注模型.全脑缺血20min后行再灌注,于再灌注即刻经脑室注入1U胰岛素,缺血再灌注后8周利用三等分Y型迷宫箱测试大鼠的学习记忆功能,并对大鼠海马CA1区神经元的病理改变进行观察.结果经Y型迷宫测试,对照组、治疗组及缺血组大鼠达9/10正确反应所需电击数分别为5.6±1.2,8.6±1.3,19.6±2.6;对照组、治疗组及缺血组大鼠海马CA1区神经元计数分别为176.5±10.6,112.4±11.7,10.5±0.4.结论全脑缺血后脑室内注射胰岛素可明显减少大鼠海马CA1区神经元的死亡,进而减轻大鼠学习记忆力损害.     

脑缺血再灌注后脑内脑源性神经营养因子的基因表达与调节

探讨：探讨脑缺血再灌注损伤后脑内脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｍＲＡＮ水平的变化,推测ＢＤＮＦ对损伤病理的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模,原位交检测大鼠海马神经元内ＢＤＮＦｍＲＮＡ,图像分析间接定量ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平。结果（１）脑缺血及缺血再灌注均能诱导双侧海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高;（２）缺血损伤过重后海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高的程度反而小;（３）再灌注后ＢＤＮＦｍＲＮ     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后bcl-2蛋白在大脑皮质的表达

目的观察bcl-2蛋白在大鼠局灶性脑缺血再灌注(FCIR)后表达的变化。方法大脑中动脉内线栓法(MCAO)建立缺血再灌注(IR)模型,用免疫组化(SP)法观察bcl-2蛋白不同时间的表达。HE染色观察各个时间点细胞形态学变化。结果脑缺血2h再灌注2hbcl-2表达升高(P<0.01),IR6h达到高峰,IR12h开始下降。结论随着脑缺血再灌注时间延长脑损伤加重,bcl-2蛋白表达减少,bcl-2蛋白表达增加对细胞存亡有重要意义。     

脑缺血大鼠神经细胞凋亡与坏死的时空动态演变

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡与坏死的数量与空间分布的动态演变过程.方法采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO-R)、HE染色与TUNEL技术,观察脑缺血30 min 和2 h,再灌注1～～48 h后神经细胞凋亡与坏死的时空分布.结果坏死细胞主要集中于梗死灶中心区,凋亡细胞分布于梗死边缘区的内侧,并呈放射状动态地向四周扩展;随着脑缺血时间与再灌注时间的延长,坏死细胞和凋亡细胞均增加.脑缺血30mtn凋亡细胞较坏死细胞明显增多,而脑缺血2 h再灌注早期坏死细胞较凋亡细胞增多.结论脑缺血再灌注后坏死细胞主要位于缺血中心区,凋亡细胞主要分布于梗死边缘区的内侧,并均呈放射状动态地向四周扩展.     

大鼠局灶性脑缺血再灌后转录因子ATF4的表达变化

目的观察鼠脑缺血再灌注后ATF4mRNA及蛋白的表达变化。方法制备SD大鼠大脑中动脉闭塞模型,RT-PCR法、免疫组化染色分别测定鼠脑缺血半暗带区再灌注后不同时相ATF4mRNA及蛋白的表达变化。结果模型组ATF4mRNA与蛋白于再灌注后1h表达增加;ATF4mRNA表达于再灌注后6h达高峰,其蛋白表达于再灌注后24h达高峰。结论鼠脑缺血再灌注可诱导ATF4在缺血半暗带区表达,提示ATF4可能在脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用。     

异丙酚预处理大鼠缺血再灌注脑皮质细胞的凋亡

The present study aimed to observe cortical expression of Bcl-2 and Bax,cysteine-dependent aspartate directed proteases-3 activity and apoptotic cell death in a rat model of middle cerebral artery occlusion pretreated with propofol.Results showed that,propofol pretreatment significantly reduced oxidative stress levels and attenuated neuronal apoptosis in the cortex of rats.Propofol pretreatment upregulated Bcl-2 expression,and downregulated Bax expression and cysteine-dependent aspartate directed proteases-3 activity.These findings indicate that propofol pretreatment inhibits cell apoptosis during focal cerebral ischemia/reperfusion injury.This neuroprotective effect is most likely achieved through the Bcl-2/Bax/cysteine-dependent aspartate directed proteases-3 pathway.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.     

孕酮对局灶脑缺血再灌注大鼠血—脑脊液屏障变化的影响

目的探讨孕酮（PROG）减轻缺血/再灌注（I/R）时脑水肿的机制。方法采用大鼠局灶性脑I/R模型,分光光度计定量测定大脑中动脉阻塞(MCAO)2h再灌注22h后脑皮层伊文思蓝（EB）含量的变化及PROG的影响。结果MCAO侧EB含量I/R组为5.89±1.37μg/g湿重,溶剂（DMSO)组为5.03±2.70μg/g湿重,PROG组为2.07±0.96μg/g湿重;PROG组显著低于I/R组和DMSO组（P<0.05）。结论PROG显著降低缺血2h再灌注22h时血-脑脊液屏障（BBB）的通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一。     

局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑、肝中IGF-1的动态表达及其意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑、肝中的表达变化及其意义.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化染色方法检测大鼠脑缺血再灌注后2h、1d、3d、7d时脑、肝标本中IGF-1蛋白的含量.结果 正常脑组织有低水平的IGF-1表达,脑缺血再灌注后2h后表达即有明显升高,1d时持续升高,至3d时达高峰,7d时又有所回落,其表达主要位于大脑皮质区.经方差分析,脑组织中IGF-1蛋白含量脑缺血再灌注组与对应各时间点假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.05);假手术组各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);脑缺血再灌注组1d和7d间比较差异无统计学意义(P>0.05),其余脑缺血再灌注组各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05).正常肝组织中有极低水平IGF-1表达,脑缺血再灌注2h、1d、3d后肝组织中IGF-1蛋白含量与假手术组各对应时间点比较差异无统计学意义(p>0.05),脑缺血再灌注7d时与脑缺血再灌注组其余各时间点及假手术组对应时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 脑缺血再灌注损伤后大鼠脑、肝中内源性IGF-1水平有明显变化,提示IGF-1的变化与脑缺血再灌注损伤有关联.     

大鼠脑缺血再灌流后海马氨基酸水平变化与神经元损害的关系探讨

目的探讨脑缺血再灌流后海马氨基酸递质变化与神经元损害的关系。方法建立大鼠前脑缺血再灌流模型,测定海马ＣＡ１区和ＣＡ３／齿状回区游离氨基酸含量,观察阻断隔－海马通路对海马神经元损害和氨基酸水平的影响。结果（１）海马结构中仅ＣＡ１区神经元明显损害,但ＣＡ１区和ＣＡ３／齿状回区的Ｇｌｕ、Ａｓｐ和ＧＡＢＡ含量无差异。（２）阻断隔－海马通路可明显减轻海马神经元损害,但对海马氨基酸水平变化无影响。结论脑缺血再灌流后,氨基酸递质水平的异常变化不是海马ＣＡ１区神经元选择性易损的唯一决定因素,隔－海马通路末梢释放的神经递质也参与海马神经元损害过程。     

局灶性脑缺血大鼠脑内mdr1/P-glycoprotein表达的变化

目的观察大鼠局灶性脑缺血损害后脑内mdr1／P—glycoprotein的表达变化。方法大鼠大脑中动脉栓塞法(MCAO法)制作局灶性脑缺血模型,脑切片免疫组织化学染色检测mdr-1／P—glycoprotein在脑内的表达部位及表达时程的变化。结果 mdr-1／P—glycoprootein在缺血侧皮层和纹状体的血管内皮细胞表达增多,并出现在同侧损伤部位的神经元,其在损伤后2h开始出现,6h达到高峰,之后开始下降,到24h不能被检测到。结论大脑中动脉阻塞后可以诱导缺血损伤侧的血管内皮细胞P—glycoprotein过量表达,而同侧的神经元短暂表达P-glyco- protein．     

小鼠脑缺血后氧化DNA损伤的早期修复与神经保护的相关性研究

目的建立原位检测C57BL／6小鼠脑缺血所致AP位点和3＇-PO4型氧化DNA损伤的方法。同时采用TUNEL测定神经细胞凋亡，探讨两者的相关性，并观察nNOS在此过程中的作用。方法制作小鼠前脑缺血／再灌注模型（FbIR）：夹闭双侧颈总动脉90min后恢复血流，按实验设计的再灌注不同时间点处死动物后制作脑组织冰冻切片。用大肠杆菌核苷酸外切酶Ⅲ敏感位点法（EXOSS）检测AP位点和3’-PO4末端型两种氧化DNA损伤；采用TUNEL技术观察细胞凋亡，并检测特异性nNOS抑制剂3BR7NI对此氧化DNA损伤及细胞凋亡的影响。结果与假手术对照组相比，EXOSS阳性率在再灌注15min时至少增高20倍（P〈0．01），并在此后的30min内持续增高；EXOSS阳性主要出现在神经元的细胞核内；细胞死亡在再灌注24h组能检测到，并主要发生在神经元细胞内；在一定时间内大脑皮质区神经元细胞内的氧化DNA损伤和细胞凋亡均能被特异性nNOS抑制剂3-bromo-7-nitroindazole（3BR7NI，30mg／kg，腹腔内注射）所抑制。结论EXOSS是一种原位检测AP位点和3’-PO4末端型氧化DNA损伤的有效方法，该损伤在一定时间内可以得到修复，nNOS在这一过程中起着重要作用。     

大鼠局灶脑缺血病灶周围新血管生成的相关实验研究

目的本研究主要探讨大鼠局灶脑缺血病灶周围新血管形成现象,探讨外周血CD34+细胞和脑组织AC133抗原在新血管形成中的作用。方法将成年SD雄性大鼠随机分为:1.正常组,2.假手术组,3.动物模型组。分别取缺血再灌注1h、3h、6h、12h、24h、48h、3d、4d、7d、14d、28d共11个观察点。取前10个观察点外周血标本,采用流式细胞术检测单个核CD34+细胞平均荧光强度。采用免疫组化染色法检测48h、3d、4d、7d脑组织AC133抗原表达。对28d组进行脑血管荧光分布面积的检测。每个观察点5只大鼠,共65只大鼠,根据神经功能计分纳入实验。结果1.脑缺血再灌注28d梗死半球半暗带区域的血管荧光总面积较非梗死半球相似区域增加24.79%。2.大鼠脑缺血/再灌注3d外周血单个核CD34+细胞平均荧光强度明显降低,直到7d。14d恢复到基线水平。3.AC133抗原在再灌注4d梗死半球半暗带区域的血管内皮细胞表达阳性,3d、7d组无阳性表达。结论本研究证实大鼠脑缺血28天梗死半球半暗带区域的血管面积较非梗死半球增大。研究提示循环CD34+干细胞和AC133+细胞可能参与脑缺血损伤的血管修复和新血管形成。