青蒿素通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响宫颈癌细胞的迁移和凋亡

目的:探究青蒿素对宫颈癌细胞行为学影响及增殖相关蛋白的变化,为治疗宫颈癌奠定一定基础。方法:分别用35μmol/L、70μmol/L、140μmol/L浓度的青蒿素刺激宫颈癌Hela和Caski细胞48h。MTT法确定青蒿素的IC_(50)值;qPCR法检测肝细胞生长因子(HGF)和cMet表达水平;hoechst33258染色法检测细胞的凋亡水平;Western blot法检测p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR表达。结果:随着青蒿素作用浓度的增加,Hela和Caski细胞荧光度升高,HGF和c-Met表达均显著降低,细胞HGF、c-Met、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR表达均降低。结论:青蒿素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路和减少HGF/c-Met信号传导通路的表达,减缓细胞的迁移和宫颈癌的发展。     

miRNA-101通过调控胎盘滋养细胞功能参与妊娠期糖尿病的发病

目的:研究miRNA-101对胎盘滋养细胞(HTR-8/SVneo)增殖和迁移能力的影响,探讨其在妊娠期糖尿病(GDM)中的可能作用机制。方法:收集GDM患者及正常孕妇胎盘组织,PCR、Western blot法检测胎盘组织中miR-101及下游因子EZH2表达,免疫组化法检测胎盘中EZH2及其下游因子H3K27me3的定位及表达。分别上调和抑制HTR-8/SVneo细胞中miRNA-101表达,PCR法检测EZH2 mRNA表达水平,Western blot法检测EZH2及H3K27me3蛋白表达,CCK-8法、Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力。结果:GDM组胎盘组织中miR-101 mRNA表达明显高于正常组(P0.05),EZH2及H3K27me3表达显著低于对照组(P0.05)。上调miRNA-101后,HTR-8/SVneo细胞中EZH2及H3K27me3表达显著降低(P0.05),细胞增殖能力显著降低(P0.01),迁移能力明显降低(P0.05);抑制miR-101表达后,EZH2及H3K27me3表达显著升高(P0.05),细胞增殖能力无明显变化(P0.05),迁移能力显著增强(P0.001)。结论:GDM患者胎盘中miRNA-101表达异常升高,miRNA-101可能通过EZH2-H3K27me3途径使胎盘滋养细胞增殖及迁移能力降低,参与GDM发病的病理机制。     

胎盘生长因子在妊娠期糖尿病患者胎盘中抑制滋养细胞凋亡的作用研究

目的:探讨胎盘生长因子(PLGF)对妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘滋养细胞凋亡的影响。方法:收集20例GDM和20例正常孕妇胎盘组织,采用HE染色法观察GDM患者胎盘组织形态学变化。TUNEL染色以及Caspase-3活性检测胎盘中细胞凋亡情况。Western blot检测胎盘中PLGF蛋白表达情况,免疫组化观察PLGF的原位表达。离体培养人绒毛滋养细胞(HTR-8/SVneo),分为对照组、高糖组(HG)、PLGF+高糖组(PLGF+HG)和PLGF组,应用流式细胞术检测各组HTR-8/SVneo滋养细胞的凋亡率。结果:与对照组相比,GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡明显减少,Caspase-3活性明显减弱。PLGF在GDM胎盘中的表达明显高于对照组;高糖诱导HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加,PLGF预处理明显逆转高糖诱导的HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加。结论:GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡明显减少,而胎盘中PLGF表达升高。离体实验进一步证明PLGF能够抑制高糖所致HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加,因此PLGF表达升高可能是GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡减少的原因。     

PCOS患者外周血miR-21与PI3K/AKT通路的关系及其临床意义#br#

目的研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血微小RNA-21(micro RNA-21,miR-21)与PI3K/AKT通路的关系及其临床意义。方法选择2018年6月至2020年12月在上海市浦东新区人民医院就诊的156例PCOS患者作为研究对象。按是否存在胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)分为86例IR PCOS组及70例非IR PCOS组。另取同期在本院体检的70例健康女性作为对照组。检测所有受试者空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA insulin resistance index,HOMA-IR)、荧光定量PCR检测外周血miR-21 mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA表达水平,Western blot检测内膜组织的p-PI3K、p-AKT表达及miR-21下游靶基因的预测。结果与对照组比,非IR PCOS组和IR PCOS组外周血的mi R-21m RNA、PI3Km RNA、AKTm RNA、HOMA-IR、FBG及FINS,内膜p-PI3K、p-AKT表达均明显增高(P<0.05),与非IR PCOS组比,IR PCOS组外周血的mi R-21m RNA、PI3Km RNA、AKTm RNA、HOMA-IR、FBG及FINS,内膜p-PI3K、p-AKT表达均明显增高(P<0.05)。外周血mi R-21m RNA与HOMA-IR呈正相关关系(r=0.646,P<0.05),外周血PI3K mRNA、AKT mRNA、子宫内膜p-PI3K、p-AKT与HOMA-IR呈负相关关系(r=-0.546、-0.567、-0.578、-0.643,均P<0.05)。根据Targetscan检索,miR-21的靶基因为PI3K/AKT通路基因。结论PCOS患者miR-21表达增加可过度激活PI3K/AKT通路,导致IR。     

Perlecan蛋白在子痫前期小鼠肾脏中的变化及作用机制研究

目的:探讨Perlecan蛋白在子痫前期(PE)小鼠肾脏中的变化及其作用机制。方法:构建正常孕鼠、PE样小鼠模型(动物水平)及HSPG2特异性肾敲低小鼠模型并分离肾小球内皮细胞(细胞水平),对比观察小鼠肾脏基底膜负电荷改变、Perlecan蛋白及其降解酶Hpa含量变化,同时检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白以及自噬蛋白标志物的含量。结果:(1)成功构建了PE小鼠和HSPG2条件肾敲低小鼠模型。(2)相对于正常孕鼠,PE小鼠胶体铁染色显示负电荷基本消失,肾小球电荷屏障被破坏,蛋白免疫印迹结果显示PE小鼠肾小球中Perlecan蛋白表达(0.255±0.028)较正常孕鼠(0.509±0.022)显著降低;而Hpa表达(0.519±0.041)较正常孕鼠(0.260±0.063)显著升高(P均0.05)。(3)与正常孕鼠相比,PE小鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白PI3K(0.146±0.018 vs 0.448±0.048)、p-AKT(0.031±0.008 vs 0.286±0.030)和p-mTOR(0.179±0.029 vs0.364±0.025)表达显著下调,自噬相关标志物LC3-I/LC3-Ⅱ(0.546±0.060 vs 0.244±0.060)和Beclin-1(0.527±0.029 vs 0.191±0.044)表达显著升高,差异均有统计学意义(P均0.05);PI3K/AKT/mTOR通路药理激活剂740 Y-P和MHY1485可以有效地弥补Perlecan敲低引起的自噬增加。结论:PE小鼠Perlecan蛋白下降除外引起肾小球电荷屏障损伤,还可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路来促进细胞自噬引起肾脏血管内皮细胞损伤。     

缺氧通过TrkB抑制人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞增殖和侵袭

目的:探讨缺氧对人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞增殖和侵袭的影响及可能的分子机制。方法:将人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞分为缺氧培养(实验组)和常氧培养(对照组),培养48h后,采用CCK8法检测细胞增殖能力,采用Transwell实验评估细胞侵袭能力;采用RT-PCR和Western blot法分别检测HIF-1αmRNA、p-TrkB、TrkB、p-Akt和Akt表达。结果:缺氧处理显著抑制了HTR-8/SVneo细胞的增殖和侵袭能力(P0.05);48h的缺氧处理降低了HIF-1αmRNA表达;缺氧处理48h后,p-TrkB表达显著减少(P0.05);同时Akt的磷酸化水平明显被抑制(P0.05)。结论:长时间持续缺氧通过抑制HTR-8/SVneo细胞中TrkB的活化,进而抑制PI3K/Akt通路的激活来抑制人滋养细胞的增殖和侵袭。     

PTEN在子痫前期胎盘滋养细胞浸润不足中的作用及机制研究26

目的:检测子痫前期(PE)患者胎盘组织中PTEN表达,探讨PTEN对滋养细胞迁移功能的调控及其可能机制.方法:收集重度PE患者和正常孕妇的胎盘组织各20例,实时定量PCR和Western blot法检测胎盘组织中PTEN表达;将PTEN过表达质粒(pcDNA3.1-HA-PTEN)或特异性siRNA(siPTEN)瞬时转染至HTR-8/SVneo细胞,同时转染pcDNA3.1或siCTL作为对照.采用划痕实验评估细胞迁移能力,Western blot法检测p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)、Akt、MMP-2和MMP-9表达.结果:重度PE患者胎盘组织中PTEN mRNA和蛋白表达明显高于正常孕妇,差异均有统计学意义(P<0.01).与转染pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-HA-PTEN瞬时转染HTR-8/SVneo细胞48 h后,细胞迁移率明显降低[(26.42±6.68)%vs(52.92±6.71)%,P<0.01],p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)表达显著下调,Akt表达无明显改变,MMP-2和MMP-9蛋白表达下降;与转染siCTL组比较,siPTEN瞬时转染HTR-8/SVneo细胞48 h后,细胞迁移率则明显升高[(50.39±6.84)%vs(30.04±5.40)%,P<0.01],p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的表达明显上调,Akt表达无明显改变,MMP-2和MMP-9蛋白表达升高.结论:重度PE患者胎盘组织中PTEN表达明显升高,PTEN可通过下调Akt活性降低MMP-2和MMP-9表达,抑制滋养细胞的迁移.提示PTEN在PE的发病中发挥了一定的作用.     

PTEN在子痫前期胎盘滋养细胞浸润不足中的作用及机制研究

目的:检测子痫前期(PE)患者胎盘组织中PTEN表达,探讨PTEN对滋养细胞迁移功能的调控及其可能机制。方法:收集重度PE患者和正常孕妇的胎盘组织各20例,实时定量PCR和Western blot法检测胎盘组织中PTEN表达;将PTEN过表达质粒(pcDNA3.1-HA-PTEN)或特异性siRNA(siPTEN)瞬时转染至HTR-8/SVneo细胞,同时转染pcDNA3.1或siCTL作为对照。采用划痕实验评估细胞迁移能力,Western blot法检测p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)、Akt、MMP-2和MMP-9表达。结果:重度PE患者胎盘组织中PTEN mRNA和蛋白表达明显高于正常孕妇,差异均有统计学意义(P0.01)。与转染pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-HA-PTEN瞬时转染HTR-8/SVneo细胞48h后,细胞迁移率明显降低[(26.42±6.68)%vs(52.92±6.71)%,P0.01],p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)表达显著下调,Akt表达无明显改变,MMP-2和MMP-9蛋白表达下降;与转染siCTL组比较,siPTEN瞬时转染HTR-8/SVneo细胞48h后,细胞迁移率则明显升高[(50.39±6.84)%vs(30.04±5.40)%,P0.01],p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的表达明显上调,Akt表达无明显改变,MMP-2和MMP-9蛋白表达升高。结论:重度PE患者胎盘组织中PTEN表达明显升高,PTEN可通过下调Akt活性降低MMP-2和MMP-9表达,抑制滋养细胞的迁移。提示PTEN在PE的发病中发挥了一定的作用。     

长链非编码RNA中OIP5-AS1在重度子痫前期孕妇胎盘组织中的表达及意义

目的 探讨长链非编码RNA Opa相互作用蛋白5-反义转录物1(Opa-interactingprotein 5 antisense RNA 1, OIP5-AS1)在重度子痫前期孕妇胎盘组织中的表达及其可能作用。方法 采用实时定量荧光（RT-qPCR）法测定30例重度子痫前期孕妇和30例正常胎盘中OIP5-AS1和miR-29b表达情况;采用过划痕实验和Transwell侵袭实验检测缺氧条件下向人绒毛膜滋养层细胞系（HTR-8/SVneo细胞）内转染OIP5-AS1对HTR-8/SVneo细胞迁移和侵袭能力的影响;采用RT-qPCR法测定转染OIP5-AS1和OIP5-AS1基因的小干扰RNA(OIP5-AS1siRNA)后HTR-8/SVneo细胞微小RNA(microRNA,miRNA)miR-29b的表达情况。结果 在mRNA水平上,重度子痫前期组胎盘组织中OIP5-AS1较对照组表达降低（P <0.01）;过表达OIP5-AS1后,HTR-8/SVneo细胞迁移和侵袭能力增加,差异有统计学意义（P <0.01）;过表达OIP5-AS1后HTR-8/SVneo细胞中...     

NQO1基因在五味子乙素降低苯并（a）芘对HTR-8/SVneo细胞毒性中的作用研究

目的：探索醌氧化还原酶1[NAＤ（Ｐ）Ｈ：ｑuinine oxidoreductase1,NQO1]基因在五味子乙素（Schisandrin B,Sch B）降低苯并（ａ）芘[Benzｏ（ａ）ｐｙrene,BaP]对人早孕胎盘绒毛膜外滋养层细胞（human trophoblast HTR-8/SVneo,HTR-8/SVneo）毒性中的作用。方法：在前期实验的基础上,以HTR-8/SVneo细胞为载体,利用基因转染技术、MTS细胞增殖实验、实时聚合酶链反应（real-time PCR）等方法从细胞层面分析NQO1基因干扰后Sch B细胞保护率的变化以及NQO1基因干扰前后各组NQO1 mRNA的表达量变化。结果：在细胞层面上,NQO1基因干扰后,20 μmol/L的BaP对HTR-8/SVneo细胞增殖的抑制作用增强,抑制率达到30.48%;0.50、1.00、2.00 μmol/L的Sch B仍然降低了BaP的毒性作用,但其细胞保护率均明显下降,细胞保护率分别为4.68%、9.56%、14.85%;同时,在基因表达层面上,NQO1基因干扰后Sch B激活NQO1的能力明显下降,其中0.10、0.25、0.50、1.00、2.00、5.00 μmol/L的Sch B作用后NQO1 mRNA的表达量从NQO1基因干扰前是对照组的1.36、1.40、1.46、1.79、2.30、2.91、1.42倍,分别降至1.22、1.24、1.30、1.53、1.71、2.01、1.29倍。结论：NQO1基因的激活在Sch B降低BaP对HTR-8/SVneo细胞毒性作用中起到重要作用。     

PTEN基因逆转卵巢上皮性癌细胞耐药的机制研究

目的通过检测PTEN基因在卵巢上皮性癌（卵巢癌）顺铂敏感细胞株0V2008及0V2008配对的顺铂耐药细胞株C13K中的表达,探讨转染PTEN基因能否逆转C13K细胞对顺铂的耐药及其相关机制。方法半定量RT-PCR技术和蛋白印迹法检测0V2008和C13K细胞中PTENmRNA和蛋白的表达。将野生型PTEN基因真核表达质粒在脂质体介导下转染C13K细胞,同时以转染空载体和未转染的C13K细胞作为对照,分别应用RT-PCR技术检测各组细胞PTENmRNA表达的变化,应用蛋白印迹法检测各组细胞PTEN、蛋白激酶B（AKT）及磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达的变化;四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）比色法观察转染PTEN基因后C13K细胞对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪分析顺铂作用后的细胞凋亡情况。结果（1）PTENmRNA在0V2008和C13K细胞中的表达水平分别为1．02±0.05和0．45±0.03,而0V2008、C13K细胞中PTEN蛋白的表达水平分别为1.02±0.07、0．55±0．03,两种细胞PTENmRNA和蛋白的表达水平分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）PTEN基因转染48h后,C13K细胞中PTENmRNA、蛋白的表达水平分别为2.04±0．10和0．94±0．04,分别与转染空载体和未转染的C13K细胞比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;p-AKT蛋白的表达水平（0.94±0．07）较转染空载体（1．66±0．10）和未转染（1．68±0．14）的C13K细胞显著降低（P〈0．05）。（3）转染PTEN基因的C13K细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC50）为（7.2±0．3）μmol／L,明显高于转染空载体和未转染的C13K细胞[分别为（12．7±0．4）、（13．0±0．3）μmol／L,P〈0,05]。（4）顺铂作用24h后,转染PTEN基因、转染空载体和未转染的C13K细胞的凋亡率分别为（41.7±0.9）％、（18．6±0．7）％和（15,3±0．8）％,前者明显高于后两者（P〈0．01）。结论PTEN基因在0V2008细胞中的表达明显高于C13K细胞。转染野生型PTEN基因能有效提高C13K细胞内PTEN基因的表达,并通过降低C13K细胞中AKT磷酸化的水平恢复C13K细胞对顺铂的敏感性。     

RNA干扰技术抑制HLX1基因表达对滋养细胞生物学性能的影响

目的:研究小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人类同源异型盒基因HLX1的表达对胎盘滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞生物学性能的影响。方法:常规体外培养HTR-8/SVneo细胞,设实验组(转染HLX1基因的特异性siRNA)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)及空白对照组(除不含siRNA片段,余试剂与另两组相同)3组分别进行瞬时转染。用流式细胞术测定siRNA转染效率,应用实时定量PCR技术和蛋白印迹法测定转染后各组HTR-8/SVneo细胞中HLX1 mRNA和蛋白的表达;应用MTT比色实验、Matrigel侵袭实验分别检测转染后各组细胞的增殖能力与侵袭能力的变化。结果:(1)转染24h后测得siRNA转染效率达(86.3±2.6)%。(2)转染48h后HLX1 mRNA的表达水平下调(77.0±1.2)%(P<0.01),转染72h后HLX1蛋白的表达水平下调(82.6±1.2)%(P<0.01),与HLX1 mRNA的表达水平下调相一致。(3)转染HLX1 siRNA 24h后,HTR-8/SVneo细胞的增殖活性已受到抑制,转染72h后细胞增殖抑制最显著,抑制率达到(58.1±4.4)%(P<0.01)。(4)转染HLX1 siRNA后,HTR-8/SVneo细胞侵袭Matrigel基质胶的能力受到显著抑制,其穿膜细胞数为(29±3)个,与空白对照组(穿膜细胞数为[53±8]个)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HLX1基因表达水平的下降可以显著抑制滋养细胞的增殖活性与侵袭能力;HLX1基因表达异常可能通过影响滋养细胞增殖、侵袭等过程参与IFGR、子痫前期等疾病的发生。     

SIRT3在早发型子痫前期胎盘组织中的表达及作用

目的:检测早发型子痫前期(eoPE)患者胎盘组织中SIRT3表达,探讨SIRT3对滋养细胞功能的调控及其可能机制。方法:免疫组化法和免疫印迹法检测eoPE患者胎盘中SIRT3表达。试剂盒检测eoPE患者胎盘组织氧化应激因子水平。应用瞬时转染质粒使HTR-8/SVneo细胞过表达SIRT3,检测滋养细胞的侵袭和迁移能力。通过CoCl₂构建滋养细胞氧化应激模型,研究SIRT3对HTR-8/SVneo细胞抗氧化应激能力的调控。免疫印迹法检测Akt信号通路关键蛋白表达。结果:eoPE患者胎盘组织中SIRT3表达较对照组显著降低,SOD和GSH-Px水平明显降低,MDA水平明显升高。过表达SIRT3可促进HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移,显著缓解CoCl₂诱导的滋养细胞氧化应激。过表达SIRT3可显著上调Akt信号通路上的关键蛋白表达。结论:胎盘组织中SIRT3下调参与eoPE病理过程。SIRT3可能通过Akt信号通路促进滋养层细胞侵袭、迁移以及维持细胞氧化应激处于平衡状态。     

清肺通络膏对呼吸道合胞病毒感染大鼠肺组织PI3K-AKT-NFκB信号通路的影响

目的观察清肺通络膏对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达的影响,探讨清肺通络膏对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的调控机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组各10只,模型组、治疗组均给予RSV滴鼻接种3d,治疗组于接毒第1天予清肺通络膏背部贴敷,连续7d。于造模第7天后取大鼠肺组织,运用免疫组织化学染色法检测各组大鼠肺组织中PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RSV感染大鼠时激活了PI3K/AKT/NF-κB信号通路,清肺通络膏能够抑制PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达,可能是清肺通络膏干预RSV肺炎的机制之一。     

过表达NDRG1通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进滋养层细胞上皮-间质转化

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)过表达对滋养层细胞上皮-间质转化(EMT)的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的作用。方法:采用携带NDRG1基因的慢病毒感染人胎盘滋养层细胞系HTR-8/SVneo,建立NDRG1基因稳定过表达的HTR-8/SVneo细胞株。qRT-PCR和Western blot法检测慢病毒感染后细胞中NDRG1基因mRNA和蛋白的表达水平,Transwell小室法观察细胞侵袭和迁移能力,免疫荧光实验检测β-catenin蛋白核转位情况,Western blot法分析EMT相关蛋白、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9等蛋白表达。结果:慢病毒介导NDRG1过表达后,HTR-8/SVneo细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平显著上调。NDRG1过表达可显著增强细胞的侵袭和迁移能力,并上调MMP-2、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、β-catenin、Snail1和环氧化酶-2(COX-2)等蛋白的表达水平,下调上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)磷酸化水平,同时促进β-catenin蛋白由细胞质向细胞核转位。结论:NDRG1过表达可促进HTR-8/SVneo细胞EMT过程,提高细胞侵袭和迁移能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路转导相关。     

Fat-1基因过表达抑制宫颈癌Hela细胞生长机制研究

目的:探讨fat-1基因对宫颈癌Hela细胞生长的影响,并研究PI3K/Akt/mTOR通路是否参与fat-1对Hela细胞生长的调控作用。方法:构建真核表达载体(p-EGFP-fat-1),并转染人宫颈癌Hela细胞,使其过表达fat-1基因,为fat-1组,以转染空载质粒的Hela细胞为阴性对照组,以未经任何处理的Hela细胞为空白对照组。采用气相色谱法检测fat-1基因对ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)和ω-6多不饱和脂肪酸(ω-6PUFA)含量的影响;采用MTT和Hoechst实验检测fat-1基因对细胞增殖和凋亡的影响;采用Transwell和细胞划痕实验检测fat-1基因对细胞侵袭和迁移的影响;采用Western blot检测fat-1基因对PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达情况的影响。结果:Fat-1组细胞中fat-1基因表达水平高于空白对照组和阴性对照组(P0.01)。Fat-1组细胞中ω-3PUFA含量高于空白对照组和阴性对照组,ω-6PUFA含量和ω-6PUFA/ω-3PUFA比例均低于空白对照组和阴性对照组(P均0.01)。Fat-1组细胞的增殖、侵袭和迁移能力均低于空白对照组和阴性对照组,Fat-1组细胞凋亡水平高于空白对照组和阴性对照组(P均0.01)。Fat-1组细胞中p-PI3K、p-Akt和p-mTOR表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(P0.01)。结论:Fat-1基因可通过增加细胞内ω-3PUFA含量,靶向作用于PI3K/Akt/mTOR通路,抑制宫颈癌Hela细胞的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。     

LncRNA NEAT1通过靶向miR-103a-3p/SDF2轴调节滋养层细胞增殖、凋亡和侵袭

目的:探讨lncRNA NEAT1在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及对滋养层细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测lncRNA NEAT1在PE患者胎盘组织中的表达,将人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo随机分为对照(control)组、pcDNA-NC组、pcDNA-NEAT1组、si-NC组、si-NEAT1组、si-NEAT1+inhibitor NC组、si-NEAT1+miR-103a-3p inhibitor组,分别检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,Western blot检测SDF2蛋白表达。双荧光素酶报告基因验证LncRNA NEAT1、SDF2与miR-103a-3p的靶向关系。结果:LncRNA NEAT1在PE患者胎盘组织中表达水平升高。与pcDNA-NC组比较,pcDNA-NEAT1组lncRNA NEAT1表达、SDF2蛋白表达、细胞凋亡率显著升高,miR-103a-3p表达及细胞增殖活性、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-NEAT1组lncRNA NEAT1表达...     

MiR-506通过PI3K/AKT信号通路调控人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨MiR-506是否通过PI3K/AKT通路对人绒毛膜癌细胞JEG-3的增殖、迁移、侵袭和凋亡发挥调控作用。方法 采用qRT-PCR法测定绒毛膜滋养层细胞HTR8/Svneo和绒毛膜癌细胞JEG-3中MiR-506的表达水平,将JEG-3细胞分组后转染MiR-506模拟物或抑制物后进行培养,采用CCK-8法测定细胞增殖情况,采用流式细胞术测定各组细胞凋亡情况,采用Western blot法测定PI3K/AKT通路相关蛋白表达情况。结果JEG-3细胞中MiR-506表达水平较HTR8/Svneo细胞降低;MiR-506模拟物组JEG-3细胞中MiR-506表达水平升高,MiR-506抑制物组MiR-506表达水平降低;MiR-506模拟物组24 h、48 h、72 h时吸光度增加,而MiR-506抑制物组吸光度显著降低;MiR-506模拟物组细胞凋亡数量升高（P <0.05）,而MiR-506抑制物组细胞凋亡数量降低（P <0.05）;MiR-506模拟物组PI3K和AKT蛋白表达水平降低（P <0.05）,MiR-506抑制物组PI3K和AKT蛋白表达水平增加...     

长链非编码RNA与子宫内膜癌关系的研究进展

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增长。长链非编码RNA(lncRNA)是非编码RNA家族的成员之一,近年研究发现其在子宫内膜癌的病理过程中发挥重要的调控作用,成为研究热点。lncRNA可作为促进基因,通过人类第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)、Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-Catenin)、细胞外信号调节激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(ERK/AMPK)等多种信号通路调控子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡过程,亦可通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR途径抑制子宫内膜癌过程。在lncRNA调控子宫内膜癌的过程中,形成的lncRNA-miRNA轴可作为未来干预治疗的新方向。lncRNA还可影响化疗药的耐药性,并对子宫内膜癌的诊断和预后有重要价值。综述近年lncRNA和子宫内膜癌的研究,为lncRNA对于子宫内膜癌的诊断、预后或治疗靶点提供理论依据。     

长链非编码RNA与子宫内膜癌关系的研究进展

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增长。长链非编码RNA(lncRNA)是非编码RNA家族的成员之一,近年研究发现其在子宫内膜癌的病理过程中发挥重要的调控作用,成为研究热点。lncRNA可作为促进基因,通过人类第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)、Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-Catenin)、细胞外信号调节激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(ERK/AMPK)等多种信号通路调控子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡过程,亦可通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR途径抑制子宫内膜癌过程。在lncRNA调控子宫内膜癌的过程中,形成的lncRNA-miRNA轴可作为未来干预治疗的新方向。lncRNA还可影响化疗药的耐药性,并对子宫内膜癌的诊断和预后有重要价值。综述近年lncRNA和子宫内膜癌的研究,为lncRNA对于子宫内膜癌的诊断、预后或治疗靶点提供理论依据。