慢性血吸虫感染对脓毒症小鼠保护作用的研究

目的 初步探讨慢性血吸虫(SJ)感染对脓毒症小鼠的保护作用及其机制.方法 选择BALB/c雄性小鼠,按随机数字表法分组进行三部分实验.实验1:经腹部皮肤接种SJ尾蚴感染8周建立慢性SJ感染模型,分为正常组和SJ组,每组10只;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素(IL-4和IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测腹腔巨噬细胞IL-10和TNF-α的mRNA表达,了解慢性SJ感染小鼠免疫状态.实验2:以脂多糖(LPS)腹腔注射诱导小鼠脓毒症模型,分为LPS组和SJ-LPS组,每组15只;用ELISA法动态观察注射LPS后0、24、48和72 h细胞因子的变化,0 h的水平相当于正常小鼠和SJ感染8周水平,观察慢性SJ感染对脓毒症过程的影响.实验3:分别以盲肠结扎穿孔术(CLP)和LPS诱导两种不同的脓毒症模型,评价慢性SJ感染对脓毒症小鼠72 h存活率的影响.结果 实验1:SJ组血清抗炎因子IL-4[(151.35±12.24)ng/L]和IL-10[(133.22±11.09)ng/L]水平较正常组[IL-4(56.32±8.66)ng/L,IL-10(48.17±7.23)ng/L]显著升高(均P＜0.05),并可使巨噬细胞向替代活化性巨噬细胞分化,慢性SJ感染使腹腔巨噬细胞高表达IL-10 mRNA(SJ组4.46±1.82,正常组1.52±0.60),抑制TNF-α mRNA表达(SJ组1.61±0.93,正常组2.32±1.03,均P＜0.05).实验2、3:慢性SJ感染小鼠血清IL-4、IL-10于注射LPS后0 h即显著升高,随后下降,至72 h仍明显高于LPS组[IL-4(ng/L):92.2±7.6比41.5±4.5;IL-10(ng/L):92.1±7.8比35.6±4.0,均P＜0.05];TNF-α、IFN-γ均于24 h达峰值后逐渐下降,至72 h SJ-LPS组仍显著低于LPS组[TNF-α(ng/L):82.9±5.6比91.5±5.2;IFN-γ(ng/L):44.1±4.8比52.6±4.0,均P＜0.05].慢性SJ感染可明显改善CLP或LPS所致脓毒症小鼠的存活率(CLP:80%比20%,LPS:70%比30%,均P＜0.05).结论 慢性SJ感染可使脓毒症小鼠血清抗炎因子升高,存活率上升,从而起到保护作用.

Abstract：

Objective To preliminarily study the protective effect of chronic schistosoma japonica (SJ)infestation against sepsis in mice and its mechanism. Methods BALB/c male mice were used, and the experiment was divided into three parts. Experiment 1: chronic SJ infestation model was reproduced by SJ cercaria inoculation through abdominal skin for 8 weeks. Twenty mice were randomly grouped into normal group (n=10) and SJ group (n=10). The levels of interleukins (IL-4, IL-10), tumor necrosis factor-α(TNF-α) and interferon-γ (IFN-γ) in serum were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).Real-time polymerase chain reaction (PCR) was employed to detect the levels of IL-10 mRNA and TNF-αmRNA in abdominal macrophages. This experiment was meant to evaluate immune state in mice with chronic SJ infestation. Experiment 2: lipopolysaccharide (LPS) was intraperitoneally injected to reproduce sepsis model. Thirty mice were randomly grouped into LPS group (n=15) and SJ-LPS group (n=15). The levels of cytokines were determined by ELISA at 0, 24, 48 and 72 hours after LPS injection. This experiment was meant to detect the effect of chronic SJ infestation in mice during the septic process. Experiment 3 : two types of sepsis model were reproduced by cecal ligation and puncture (CLP) and LPS injection, respectively. The survival rate of mice with chronic SJ infestation in 72 hours in either type of sepsis was evaluated. Results Experiment 1, compared with normal group [IL-4 (56.32±8.66) ng/L, IL-10 (48.17±7.23) ng/L],chronic SJ infestation showed an increase in serum IL-4 [(151. 35 ± 12. 24) ng/L] and IL-10 [(133. 22 ±11. 09) ng/L, both P＜0. 05]. Chronic SJ infestation also resulted in an increase in IL-10 mRNA expression (SJ group 4. 46±1. 82, normal group 1. 52±0. 60) and inhibited TNF-α mRNA expression (SJ group 1. 61±0.93, normal group 2. 32±1.03) in abdominal macrophages (both P＜0. 05), indicating that macrophages could be differentiated into alternative activated macrophages. Experiments 2 and 3 showed that the levels of serum IL-4 and IL-10 were increased at 0 hour after LPS injection, and then gradually decreased in SJ-LPS group, but the levels were still higher than those in LPS group at 72 hours [IL-4 (ng/L): 92. 2±7. 6 vs.41.5±4. 5; IL-10 (ng/L): 92. 1±7. 8 vs. 35. 6±4. 0, both P＜0. 05]; the levels of TNF-α and IFN-γ were increased at 24 hours, and then decreased in SJ-LPS group, and the levels were lower than those in LPSgroup at 72 hours [TNF-α (ng/L): 82. 9±5. 6 vs. 91. 5±5. 2; IFN-γ (ng/L): 44.1±4. 8 vs. 52. 6±4. 0,both P＜0. 05]. Therefore, chronic SJ infestation could improve the survival rate of mice with sepsis induced by CLP or LPS (CLP: 80% vs. 20%, LPS: 70% vs. 30%, both P＜0.05). Conclusion Chronic SJ infestation could elevate anti-inflammatory factors in septic mice, thus ameliorating the survival rate, so it has protective effect on mice with sepsis.     

氢气对脓毒症小鼠肾损伤的保护作用

目的 观察氢气对脓毒症小鼠肾损伤的保护作用,并初步探讨相关机制.方法 采用盲肠结扎穿孔术诱导的小鼠脓毒症模型.24只雄性C57BL/6小鼠,体质量20～25 g,随机(随机数字法)分为4组:假手术组(Sham)、假手术+氢气吸入组(Sham+ H2)、脓毒症组(Sepsis)和脓毒症+氢气吸入组(Sepsis+ H2).氢气治疗为盲肠结扎穿孔术或假手术后1h和6h,分别吸入2％氢气1h.观察各组小鼠24 h时间点肾脏组织病理学变化和细胞凋亡情况,测定血肌酐(blood creatinine,Cr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,同时检测血清及肾组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、人8异前列腺素F2α(8-iso-prostaglandin F2α,8-iso-PGF2α)和高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1,HMGB1)的水平.结果 吸入氢气可显著改善脓毒症小鼠肾组织损伤,减少肾组织细胞凋亡,提高血清及肾组织SOD和CAT活性,降低血清及肾组织8-iso-PGF2a和HMGB1水平(P＜0.05).结论 吸入氢气对脓毒症小鼠急性肾损伤具有保护作用,其机制与提高机体抗氧化酶活性及降低炎症因子水平有关.     

乌司他丁对脓毒症急性肺损伤的保护作用研究

目的:观察乌司他丁对脓毒症急性肺损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:收集2017-04—2018-05期间接受治疗的脓毒症伴发急性肺损伤患者124例,按照患者入院顺序随机分为观察组和对照组,每组62例。对照组常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用乌司他丁20万单位/d,静脉滴注。ELISA法检测p65、TNF-α、IL-6表达。结果:治疗前,两组p65、TNF-α和IL-6水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组p65、TNF-α和IL-6水平分别为(24.36±4.33)μg/L、(31.38±6.06)μg/L和(18.52±3.38)μg/L,显著低于对照组的(38.24±7.25)μg/L、(46.36±7.54)μg/L和(32.16±5.23)μg/L(P0.01)。治疗前,两组PaO_2和PaO_2/FiO_2比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组PaO_2和PaO_2/FiO_2分别为(80.23±12.63)mmHg、(387.82±62.33)mmHg,均显著高于对照组的(67.28±10.26)mmHg和(322.18±54.27)mm-Hg,差异有统计学意义(P0.05)。观察组有效率为90.3%(56/62),显著高于对照组的75.8%(47/62)。结论:乌司他丁可以抑制脓毒症急性肺损伤患者炎症反应,改善患者肺功能,临床疗效显著。     

谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激损伤的保护作用研究

目的：探讨谷氨酰胺是否可以减轻脓毒症小鼠的氧化应激损伤,从而为临床应用提供实验依据。方法按随机数字表采取完全随机化方法将5周龄雄性昆明小鼠分为对照组、模型组、谷氨酰胺组3组,每组10只。模型组与谷氨酰胺组腹腔注射内毒素5 mL/kg制备脓毒症模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。制模成功后,谷氨酰胺组即刻尾静脉注射丙氨酰谷氨酰胺注射液0.75 g/kg,模型组和对照组尾静脉注射等量无菌生理盐水。6 h后终止实验,眼眶取血后处死动物,取血清和肝、肾组织匀浆检测氧化应激指标超氧化物酶歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）。结果与对照组比较,模型组血清、肝、肾组织SOD活性、GSH-Px明显降低,MDA含量明显升高。与模型组比较,谷氨酰胺组血清、肝、肾组织SOD活性、GSH-Px明显升高,MDA含量明显降低〔血清SOD（U/mL）：134.78±3.74比124.60±3.49,肝脏SOD （U/mg）：56.71±1.35比49.84±0.86,肾脏SOD（U/mg）：46.22±1.22比43.22±1.52;血清GSH-Px（U/mL）：325.15±21.86比267.04±13.5,肝脏 GSH-Px（U/mg）：91.35±1.59比83.40±1.33,肾脏 GSH-Px（U/mg）：136.08±0.58比132.97±0.74;血清MDA（μmol/L）：9.20±0.32比13.67±1.24,肝脏MDA（nmol/mg）：1.85±0.10比4.88±0.17,肾脏MDA（nmol/mg）：2.47±0.12比3.52±0.27,均P＜0.01〕。结论脓毒症造成氧化应激与氧化损伤,使用谷氨酰胺可以提高抗氧化酶GSH-Px、SOD水平,增强抗氧化能力,减少脂质代谢产物MDA含量,减少有毒代谢产物,从而起到减少氧化应激损伤的作用。     

地塞米松对脓毒症大鼠心肌保护作用的研究

目的观察脓毒症大鼠心脏功能、心肌力学的改变并探讨地塞米松对心脏的保护作用及其机制。方法将96只Wistar大鼠随机分为对照组(32只)、脂多糖(LPS)组(32只,静脉注射LPS4mg/kg)及LPS+地塞米松组(32只,注射LPS的同时静脉注射地塞米松2mg/kg)。各组动物均于实验前(0h)及给药后2、4和6h采血(每个时间点8只)。经右颈总动脉左心室内插管,监测各组动物左心室功能变化并检测血清肿瘤坏死因子α(TNFα)、血浆肌钙蛋白T(TnT)含量。结果1脓毒症状态下TnT显著升高;应用地塞米松后TnT明显降低〔给药后6h为(1.76±0.57)μg/L比(0.70±0.36)μg/L,P<0.01〕。2脓毒症状态下左心室收缩峰压(LVPP)、左心室压力上升/下降最大速率(±dp/dtmax)均有不同程度变化,左心室舒张末期压(LVEDP)升高;应用地塞米松后可明显改善各项指标。3脓毒症状态下TNFα浓度明显升高,应用地塞米松可显著降低TNF浓度〔给药后2h为(11.22±2.38)pmol/L比(7.62±3.21)pmol/L,P<0.01〕。结论脓毒症状态下心肌可发生明显损伤;TNFα为脓毒症状态下心肌损害因素;应用地塞米松可明显减轻内毒素对心肌的损伤。     

巨噬细胞移动抑制因子在脓毒症小鼠中的作用及其干预研究

目的 观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在脓毒症小鼠血清和肺组织中的表达及MIF拮抗剂ISO-1对脓毒症小鼠存活率的影响.方法 用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症BALB/c小鼠模型.40只小鼠随机分为假手术组及CLP后12、24、36、48 h组,各取8只小鼠心脏血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MIF水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免迹印迹法(Western blotting)检测肺组织中MIF的mRNA和蛋白表达.另选择40只小鼠制备脓毒症模型,观察用ISO-1干预后脓毒症小鼠10 d的存活率.结果 与假手术组比较,脓毒症小鼠血清MIF水平逐渐升高,36 h达峰值,48 h有所下降,但仍高于假手术组(P均<0.01);肺组织MIF mRNA和蛋白表达自12 h起即明显增加,之后逐渐增加至48 h达峰值(P<0.05或P<0.01).使用MIF拮抗剂ISO-1的脓毒症组小鼠10 d存活率为60%(12/20),较脓毒症对照组25%(5/20)明显升高(P<0.05).结论 MIF可能作为晚期炎症细胞因子参与脓毒症小鼠的发病过程,使用MIF拮抗剂ISO-1能提高脓毒症小鼠的存活率,提示MIF可作为脓毒症治疗的靶向.     

氯沙坦对脓毒症大鼠的脑保护作用及可能机制

目的探讨血管紧张素ⅡAT1受体拮抗剂氯沙坦干预在脓毒症大鼠中枢神经系统损伤中的调节作用及可能机制。方法应用盲肠结扎穿孔(CLP)法建立大鼠脓毒症模型,清洁级Wistar大鼠45只随机分为3组,假手术组15只(Sham,S组)、CLP模型组15只(C组)、氯沙坦干预组15只(L组),术后12 h内死亡者剔除,并再次补足每组大鼠数量,术后24 h行神经功能评分,收集血清,后断颈处死大鼠取脑组织。分别检测血清及脑组织TNF-α、IL-6炎症因子表达,测定脑组织含水量及半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)含量,并观察脑组织病理变化。结果与S组相比,C、L组神经功能评分明显降低、脑组织含水量及caspase-3含量明显增加,血清及脑组织局部TNF-α、IL-6表达上调(P<0.05),病理损伤严重。与C组相比,L组神经功能评分升高、脑组织含水量、血清及脑组织TNF-α、IL-6、caspase-3表达明显下调(P<0.05),脑组织病理损伤减轻。结论氯沙坦可通过下调炎症因子、抑制细胞凋亡蛋白表达对脓毒症大鼠起到一定脑保护作用。     

大黄素对脓毒症大鼠保护作用的实验研究

目的探讨大黄素对于脓毒症大鼠的保护作用。方法将健康大鼠随机分为三组,A组：假手术组;B组：盲肠结扎穿刺（CLP）组;C组：CLP大黄素治疗组。造模72h后分别测定各组血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血浆和腹腔白蛋白浓度、肠系膜微静脉流速等并观察肠粘膜损伤程度。结果CLP后大鼠血浆TNF-α浓度、白蛋白渗出率明显升高,而B组升高较C组明显（P〈0.01）,肠粘膜损伤评分变化也有相同趋势（P〈0.017）;肠系膜微静脉流速减慢,血浆白蛋白浓度降低,而B组下降较C组明显（P〈0.05）。结论大黄素能减轻CLP所致脓毒症大鼠的炎症反应和肠粘膜的损伤。     

维生素C联合乌司他丁对脓毒症伴ARDS患者血管内皮功能的保护作用研究

目的 探究脓毒症伴急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者应用维生素C联合乌司他丁对患者血管内皮功能的保护作用。方法 前瞻性选取2021年5月至2022年7月合肥市第二人民医院收治的80例脓毒症伴ARDS患者,按随机数字表法分成对照组与观察组,各40例。对照组给予常规治疗+糖皮质激素,观察组在对照组基础上加用维生素C+乌司他丁。对比两组患者治疗前、治疗后3 d的急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(SOFA)评分、血清炎症因子[白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10]、血管内皮功能[血管内皮生长因子(VEGF)]、多糖包被损伤标志物[多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)]及多糖包被降解产物[透明质酸(HA)、硫酸乙酰肝素(HS)]各指标的水平差异。结果 治疗后3 d,两组患者的APACHEⅡ、SOFA评分较治疗前均降低,观察组的APACHEⅡ、SOFA评分分别为(15.40±3.70)、(4.61±2.02)分,均低于对照组[(20.20±4.90)、(7.50±3.10)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后3 d,...     

辛伐他汀对脓毒症内皮细胞的保护作用

目的 观察辛伐他汀对脓毒症内皮细胞的保护作用并探讨其机制.方法 盲肠结扎穿孔法制作脓毒症雄性SD大鼠模型,6h后收集脓毒症SD大鼠血清备用.将体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECS)株(ECV-304)随机(随机数字法)分为3组:对照组、脓毒症组和辛伐他汀组.予相应条件培养液处理24h后,采用四唑盐比色法检测HUVECS的生长情况,Hoechst染色法、吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡形态变化及流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞Bcl-2和Bax基因的表达情况.细胞相对生长率比较采用两独立样本t检验,组间吸光度值及细胞凋亡率比较采用one-way ANOVA方差分析.结果 (1)与脓毒症组比较,辛伐他汀组HUVECS相对生长率(％)显著增加[(64.06±1.70)％ vs.(37.59±2.13)％,t=-16.846,P=0.000].(2) Hoechst染色法与吖啶橙荧光染色法均显示,与对照组比较,脓毒症组凋亡细胞显著增加;而辛伐他汀组较脓毒症组显著减少.流式细胞术凋亡检测发现与对照组比较,脓毒症组细胞凋亡率显著增加[(4.07±1.55)％vs.(30.20±8.94)％,P=0.001];辛伐他汀组细胞凋亡率较脓毒症组显著减少[(16.50±4.26)％vs.(30.20±8.94)％,P=0.027].(3)脓毒症大鼠血清处理后,HUVECS中Bcl-2基因表达降低,而Bax基因表达增高;与脓毒症组比较,辛伐他汀组两者呈反向改变.结论 辛伐他汀通过上调Bcl-2和下调Bax基因表达抑制脓毒症内皮细胞凋亡,发挥其保护血管内皮细胞的作用;这可能是辛伐他汀治疗脓毒症的机制之一.     

比较不同剂量地塞米松对小鼠脓毒症致急性肾损伤的保护作用

目的 比较不同剂量地塞米松(DEX)对脓毒症导致的急性肾损伤(AKI)的影响.方法 健康雄性昆明小鼠130只,按随机数字表法均分为假手术组、脓毒症模型组和DEX生理剂量组(0.12 mg/kg)、应激剂量组(1.2 mg/kg)、大剂量组(12 mg/kg).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,分别在术后24 h、48 h观察肾组织病理学变化,免疫组化法检测肾组织糖皮质激素受体-α(GR-α)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肾组织GR-α、核转录因子-κB(NF-κB)的mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量.结果 与假手术组比较,脓毒症模型组小鼠肾小管病理损害严重;肾组织GR-α蛋白和mRNA表达明显降低,NF-κB mRNA表达及血浆TNF-α、IL-1β水平均明显升高.与脓毒症模型组比较,各剂量DEX组肾小管病理损害不同程度减轻;肾组织GR-α蛋白和mRNA表达均明显升高,NF-κB mRNA表达和血浆TNF-α、IL-1β水平均明显降低,其中以DEX生理剂量组作用尤佳[AKI评分(分)24 h:1.480±0.334比3.040±0.517,48 h:1.840±0.167比3.400±0.400;GR-α蛋白(A值)24 h:0.102±0.009比0.088±0.005,48 h:0.103±0.008比0.085±0.006;GR-o mRNA 24 h:0.0400(0.0300,0.0400)比0.0100 (0.0093,0.0100),48 h:0.0350 (0.0300,0.0475)比0.0100 (0.0010,0.0138); NF-κBmRNA 24 h:0.009±0.001比0.012±0.000,48 h:0.011±0.000比0.013±0.001;TNF-α (ng/L)24 h:105.84±3.84比135.52±4.49,48 h:111.35±3.67比141.22±4.46;IL-1β(ng/L)24 h:45.71±2.93比64.12±3.62,48 h:57.04±3.04比74.87±3.67; P＜0.05或P＜0.01].结论 生理剂量DEX可以通过上调肾组织中GR-α表达,减轻脓毒症引起的肾组织损伤,其作用明显优于大剂量DEX.     

高渗盐水液体复苏对脓毒症患者免疫功能的调节作用

目的 探讨高渗盐水液体复苏对脓毒症患者免疫功能的调节作用.方法 回顾性选择2009年1月到2010年9月在外科重症监护病房( SICU)接受5％高渗盐水液体复苏的24例脓毒症患者,于输注前15 min及输注15 min、6h、12h和24 h抽取全血,用流式细胞仪检测中性粒细胞呼吸爆发能力和表面CD11b、L-选择素,同时留取血浆测定可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性L-选择素(sL-选择素)、肿瘤坏死因子-α(TN F-α)、白细胞介素(IL-6、IL-1β)水平.结果 设定患者输注高渗盐水前的基础值为100.脓毒症患者输注高渗盐水6h的呼吸爆发能力明显升高[(160.0±19.6)％],与基础值相比有显著差异(P＜0.05),此后逐渐恢复到基础水平.中性粒细胞表面CD11b、L-选择素表达在输注后15 min立刻下调,此作用维持到12h达最低点[(70.4±5.7)％、( 70.6±8.1)％],而后作用逐渐消失,L-选择素在24 h恢复到基础水平.高渗盐水输注短期内,血浆炎症因子TN F-α水平明显下降,此作用维持到12h,并逐渐回升;IL-1β无明显改变;IL-6、sICAM-1逐渐上调,分别在24 h和12h达峰值,并维持在较高水平;sL-选择素于输注15 min即明显高于基础值,并维持至12h,24 h时回落到基础值水平.结论 延迟性高渗盐水复苏对脓毒症患者能发挥显著的免疫调节作用,可抑制中性粒细胞的活化.     

依达拉奉对脓毒症大鼠的保护作用研究

目的 探讨依达拉奉及地塞米松对脓毒症大鼠的保护作用.方法 将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、依达拉奉治疗组、地塞米松与依达拉奉联合治疗组,每组10只.用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型.各治疗组于术后即刻经阴茎背静脉分别注射地塞米松和(或)依达拉奉各5 mg/kg,假手术组及模型组给予等量生理盐水.于术后12 h采集腹主动脉血,用化学反应法检测血清丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC);取肺组织,采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,并进行病理评分.结果 与假手术组比较,模型组MDA及细胞凋亡指数(AI)升高,而T-AOC水平下降;与模型组比较,各治疗组MDA及AI降低,T-AOC升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且联合治疗组疗效优于地塞米松组和依达拉奉组.模型组大鼠肺组织中肺泡破坏、间质水肿、炎性细胞浸润明显,用药物干预后损害程度降低.结论 依达拉奉可通过减少氧自由基产物,抑制组织中脂质过氧化,从而减轻脓毒症.依达拉奉和地塞米松联合应用对脓毒症有更好的治疗效果.     

通腑泻肺法对脓毒症大鼠的肺保护作用研究

目的 观察通腑泻肺法对盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症大鼠的肺保护作用,并探讨其可能机制.方法 42只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组(n=6)、模型组(n=18)和通腑泻肺组(n=18).模型组和通腑泻肺组采用CLP制备脓毒症模型,制模后即刻通腑泻肺组灌胃通腑泻肺颗粒0.01 mL/g,模型组灌胃等量生理盐水,空白对照组不给予任何处理.制模后3、6、12 h经腹主动脉取血行血气分析;经下腔静脉取血检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;行支气管肺泡灌洗留取灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酞胆碱(DSPC)含量;取肺组织测定湿/干质量(W/D)比值和肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量;光镜下观察肺组织病理学改变.结果 与空白对照组比较,模型组制模后pH值、动脉血氧分压(PaO2)、碳酸氢根(HCO3-)、剩余碱(BE)降低,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)升高,血清TNF-α和IL-6逐步升高,BALF中TP升高,TPL、DSPC/TPL降低,肺W/D比值及肺组织MDA、MPO含量升高.与模型组比较,通腑泻肺组pH值在制模后3 h升高(7.27±0.04比7.18±0.07,P<0.05),PaO2 (mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)在制模后3、6、12 h升高(3 h:128.00±16.05比106.78±10.73,6 h:98.46±15.97比72.80±16.33,12 h:90.70±9.31比74.28±12.19,均P<0.05);血清TNF-α(ng/L)在制模后12 h显著降低(508.20±94.08比756.60±138.77,P<0.05),IL-6(ng/L)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:687.80±35.00比849.40±148.28,12 h:728.80±214.41比917.00±245.96,均P<0.05);BALF中TP(g/L)在制模后12 h显著降低(1.01±0.23比1.60±0.47,P<0.05),TPL(mg/L)在制模后12 h显著升高(86.40±11.33比62.40±16.33,P<0.05),DSPC/TPL在制模后6 h、12 h显著升高(6 h:0.58±0.13比0.38±0.10,12 h:0.45±0.13比0.24±0.07,均P<0.05);肺W/D比值在制模后3 h显著升高(3.84±0.25比2.99±0.50,P<0.01),制模后12 h显著降低(3.21±0.53比4.89±1.14,P<0.05);肺组织匀浆中MDA(nmol/mg)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:4.04±2.58比8.89±2.61,12 h:11.31±3.60比20.60±8.10,均P<0.05),MPO(U/g)在制模后12 h显著降低(4.79±0.66比7.22±1.76,P<0.05).光镜下通腑泻肺组肺组织水肿、充血、渗出和纤维化等病理变化均较模型组减轻.结论 通腑泻肺法治疗脓毒症大鼠能改善低氧血症和代谢性酸中毒,减轻肺水肿和肺组织病理损伤;其肺保护作用机制可能是通过抗氧化、抑制炎症因子表达和释放以及抑制肺表面活性物质降解等途径实现.     

MaFGF对慢性脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能保护的机制研究

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对慢性脑缺血再灌注损伤小鼠神经保护的可能机制。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为Sham组、BCAO组和BCAO+MaFGF组,每组各8只。建模完成后,BCAO+MaFGF组鼻内给药MaFGF20μg/(kg.d),其余2组给予相同体积的生理盐水。采用mNSS评估小鼠神经功能损害程度,通过Morris水迷宫试验评估小鼠的学习记忆能力,Nissl染色法观察小鼠海马CA1区神经元细胞的形态结构学改变,Western biot法检测小鼠海马区p-PI3K、p-AKT、GRP170、CHOP、caspase-12蛋白表达水平,免疫荧光染色法观察小鼠海马CA1区神经元p-AKT、GRP170的表达情况。结果与Sham组比较,BCAO组小鼠mNSS评分明显升高(P<0.05),学习记忆能力下降(P<0.05),BCAO组小鼠海马CA1区神经元细胞结构破坏明显,坏死细胞数目明显增多(P<0.05),其海马区CHOP和caspase-12明显升高(P<0.05),而p-PI3K、p-AKT、GRPI70均未见明显改变(P>0.05);与:BCAO组比较,BCAO+MaFGF组小鼠mNSS评分明显降低(P<0.05),学习记忆能力上升(P<0.05),BCAO组小鼠海马CA1区神经元细胞结构较为完整,排列整齐,坏死细胞数目明显减少(P<0.05),其海马区CHOP和caspase-12表达明显降低(P<0.05),而p-PI3K、p-AKT、GRP170表达明显升高(P<0.05)。结论MaFGF能够改善慢性脑缺血再灌注损伤小鼠的神经功能,其可能机制是通过激活PI3K/AKT信号通路,减轻内质网应激,减少细胞凋亡而起神经保护作用。