PRA、PRB在子宫内膜癌孕激素治疗耐药机制中发生的分布及活性状态变化研究

目的：探究子宫内膜癌组织中的孕激素受体PRA（孕激素受体亚型A）、PRB（孕激素受体亚型B）的分布以及表达情况,并分析其意义。方法选取2011－01～2015－01间于我院接受治疗80例子宫内膜癌患者,作为观察组。另选取同期来我院体检的80例正常人作为对照组。观察两组患者子宫内膜癌组织中孕激素受体PRA、PRB受体的表达情况。另应用免疫细胞化学法观察耐药细胞与母代Ishikawa细胞的PR表达情况。结果观察子宫内膜癌患者PRA、PRB表达情况与临床病理资料的关系,结果发现PRA的表达与子宫内膜癌分化程度有关,PRB的表达与子宫内膜癌分化程度、淋巴结转移以及FIGO分期有关。观察组患者PRA蛋白、PRB蛋白、PRmRNA（孕激素受体信使RNA）均显著小于对照组,差异有统计学意义,P＜0.05。 PRA／PRB、PRBmR-NA（孕激素受体亚型B mRNA）无明显差异;耐药细胞PRB阳性表达率显著低于母代Ishikawa细胞,差异有统计学意义,P＜0.05。而PR 阳性表达率则无明显改变。结论 PRB表达的下降以及TGFɑ－EGFR（转化生长因子α－表皮生长因子受体）信号通路活性的增强可能参与了子宫内膜癌孕激素耐药的发生。     

环氧化酶-2在子宫内膜癌中的表达

目的：了解子宫内膜癌中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)在mRNA与蛋白水平的表达及其临床意义, 探讨其与血管生成、细胞凋亡及激素受体的关系。方法:收集41例正常子宫内膜组织及52例子宫内膜癌组织, 总结相关的临床资料。采用RT-PCR的方法研究COX-2 mRNA水平的表达。用免疫组织化学方法研究COX-2、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、B-cell lymphoma protein 2( Bcl-2)蛋白水平表达,并用CD105为标记计数微血管密度(microvansicular density, MVD),用TUNEL方法计数凋亡细胞数。结果:(1) COX-2 mRNA在内膜癌中的表达较正常子宫内膜增强(P<0.001)。(2) COX-2 蛋白在内膜癌中的表达较正常内膜增强(P<0.001)。(3)COX-2蛋白表达在高、中分化子宫内膜癌组较低分化组升高(P=0.020), 与手术分期、病理类型、肌层浸润深度及淋巴结转移无相关性。COX-2 mRNA水平与以上各项因素均无相关性。(4)COX-2的mRNA表达水平与蛋白表达水平无相关性(P=0.125, r=0.222)。(5) COX-2蛋白表达的升高伴有VEGF、MVD和Bcl-2的升高及凋亡细胞减少(P均<0.05)。(6) COX-2的表达增强与ER-α和ER-β蛋白表达无相关性, 但与孕激素亚型A和B（PRA、PRB）的表达升高有相关性, P值分别为0.031和0.007。结论:(1)子宫内膜癌中 COX-2在mRNA水平及蛋白水平均较正常子宫内膜中明显升高。(2)COX-2的蛋白高表达与肿瘤较好分化相关, 而与病理类型、手术分期、肌层浸润深度及淋巴结转移均无相关性。mRNA与以上各因素均无相关性。(3)子宫内膜癌中COX-2的表达增强伴有VEGF蛋白水平升高及微血管密度增加。(4)子宫内膜癌中COX-2的表达增强伴有Bcl-2蛋白水平升高及肿瘤细胞凋亡受到抑制。(5)在内膜癌COX-2阴性与阳性两组间,雌激素受体表达差异无统计学意义,而PRA及PRB在阳性组的表达均较阴性组升高。     

异位子宫内膜孕激素受体亚型表达与局部孕激素抵抗

目的 探讨卵巢子宫内膜异位症(EMS)病灶对生理状态的孕激素水平反应不良是否由局部孕激素受体亚型分布及数量改变或功能缺陷所致.方法 采用RT-PCR技术和免疫组织化学方法,检测45例EMS患者的卵巢异位子宫内膜(卵巢EMS组)和在位内膜(在位内膜组)及35例其他患者的正常子宫内膜(对照组)的孕激素受体PR(A B)、孕激素受体亚型A、B(PRA、PRB)mRNA及其蛋白的表达.结果 (1)对照组和在位内膜组的PR表达在增生期增强,并随分泌期逐渐减弱;PRA占优势,PRB/PRA比值在整个月经周期保持相对恒定.(2)卵巢EMS组PRA、PRB、PR(A B)表达绝对低于对照组(P＜0.01),无周期性变化.异位内膜腺上皮PRA表达呈绝对降低,而间质中PRB表达相对增高,PRA不占优势,PRB/PR(A B)显著增高(P＜0.01).结论 异位子宫内膜存在局部孕激素受体亚型数量和比值改变,可能是子宫内膜异位症孕激素抵抗现象的主要分子机制.     

子宫内膜癌中ER、PR的表达及意义研究

目的：探讨子宫内膜癌中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测80例正常子宫内膜（C组）、80例子宫内膜非典型增生（B组）及80例子宫内膜癌（A组）的ER、PR的表达,分析其表达及与临床分期、组织学分级、肿瘤肌层浸润和淋巴结转的相关性。结果 ER、PR在C组、B组、A组中的表达阳性率逐渐下降且统计学处理差异有统计学意义（P＜0.05）;ER、PR在子宫内膜癌不同临床分期中的阳性表达率随着期别的增加而呈降低趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）;从组织学分级来看,低分化的癌组织中ER、PR的阳性表达率显著低于中分化和高分化癌组织（P＜0.05）;肌层浸润深度＞1/2的癌组织中ER、PR的阳性表达率显著低于肌层浸润深度≤1/2组（P＜0.05）;有淋巴结转移的癌组织中ER、PR阳性表达率显著低于无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05）。ER、PR与临床分期、病理分级、肌层浸润深度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。结论ER、PR与子宫内膜癌的发生、发展、转移及预后相关。     

生长抑素受体和雌孕激素受体在子宫内膜癌的表达及临床意义

目的 研究生长抑素受体(SSTR)在子宫内膜癌中的表达及其意义;探讨SSTR表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的关系及意义.方法 采用免疫组织化学染色方法(SP法)检测60例子宫内膜癌组织中SSTR各亚型及ER、PR的表达情况,分析SSTR各亚型的表达与ER、PR表达的关系.结果 在60例子宫内膜癌组织中,SSTR各亚型(SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5)的阳性表达率分别为70%,15%,21.7%,23.3%及18.3%;ER、PR的阳性表达率分别为46.7%,70%.SSTR3、SSTR4在中高分化组表达阳性率明显高于低分化组(P＜0.05);SSTR各亚型表达与患者年龄、手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度无显著相关(P＞0.05);SSTR2、SSTR4的表达与ER的表达显著相关(P＜0.05),SSTR3、SSTR5的表达与PR表达显著相关(P＜0.05).结论 在子宫内膜癌中存在着SSTR各亚型的表达,一些亚型的表达与ER或PR的表达相关,相应的生长抑素类似物(SSTA)可能为SSTR阳性表达的子宫内膜癌的诊治及预后判定提供新的靶点,对孕激素有效的子宫内膜癌,SSTA也可能具有治疗作用.     

雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体2及增殖细胞核抗原在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨子宫内膜癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体2(Cerb B-2)及增殖细胞核抗原(Ki-67)的表达及其与临床、病理特征的关系。方法选取2008年1月至2012年11月在河北联合大学附属医院妇科收治的90例手术切除子宫内膜癌患者,应用免疫组织化学方法测定ER、PR、Cerb B-2及Ki-67在不同病理分期、组织类型、分化程度和浸润转移等的表达情况。结果子宫内膜样癌中ER、PR的阳性率高于其他组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ期和Ⅱ期ER、PR的阳性表达率高于Ⅲ~Ⅳ期,Ⅰ期Cerb B-2、Ki-67阳性表达率低于Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05);G1级Ki-67阳性率低于G2、G3级,ER、PR阳性表达率高于G3级,Cerb B-2阳性率低于G3级(P<0.05);肌层浸润深度>1/2的癌组织中ER、PR的阳性表达率低于无肌层浸润及肌层浸润深度≤1/2组,Ki-67的阳性表达率显著高于无肌层浸润及肌层浸润深度≤1/2组(P<0.05);有淋巴结转移的ER、PR阳性表达率低于无淋巴转移者,Ki-67阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。在90例子宫内膜癌中,Cerb B-2与Ki-67蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 Cerh B-2、Ki-67的高表达与子宫内膜癌的发生、发展、不良预后有关,联合检测有助于评价子宫内膜癌的生物学行为。     

雌、孕激素受体与子宫内膜癌预后

目的总结子宫内膜癌患者病理分化、临床分期和浸润程度及受体状态与生存率的关系。方法对子宫内膜癌手术患者石蜡标本应用免疫组化LSAB法测定雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)。结果5年生存率随肿瘤分化程度低、肌层浸润深和临床分期晚而下降,ER和PR阳性率也呈下降趋势。受体阳性者5年生存率为86.5%。结论受体阳性可与组织分化、临床分期及肌层浸润一起作为观察预后指标。     

异黏蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨异黏蛋白(MTDH)在子宫内膜腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用免疫印迹(Western blot)与反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测83例子宫内膜腺癌组织与50例正常子宫内膜组织中MTDH蛋白及mRNA的表达情况,分析MTDH的表达与子宫内膜腺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果 子宫内膜腺癌组织中的MTDH蛋白及mRNA的表达均明显高于正常子宫内膜组织,MTDH蛋白的过表达与腺癌组织的细胞分化程度、有无淋巴结转移、肌层浸润深度及FIGO分期有关,而与年龄、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血CA125无明显相关性。Kaplan-Meier生存结果分析提示子宫内膜腺癌组织中MTDH蛋白过表达总生存期明显差于低表达组,多因素回归分析发现分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、肌层浸润深度及MTDH表达水平这5项因素与子宫内膜腺癌患者的预后密切相关。结论 MTDH的过表达可能与子宫内膜癌增殖、侵袭、局部淋巴结转移和分期有密切关系,提示MTDH可能是根治性术后子宫内膜癌患者预后指标,可评价子宫内膜癌恶性生物学行为,为子宫内膜腺癌的治疗及预后判断提供参考。     

雌,孕激素受体与子宫内膜癌预后的探讨

目的研究子宫内膜癌患者的临床分期、肿瘤组织分化和肌层浸润深度、受体状态与预后的关系。方法对57例子宫内膜癌患者进行随访，40例随诊满5年。50例患者的石蜡标本应用免疫组化LSAB法测定雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）。结果随访提示5年生存率随肿瘤分化程度低、肌层浸润深和临床分期晚而下降，ER和PR阳性率也呈下降趋势。受体阳性者5年生存率高。结论组织分化程度、肌层浸润、临床分期和受体状态可作为观察预后的指标。     

孕激素受体亚型在子宫腺肌病异位内膜中的表达及其意义

目的研究子宫腺肌病异位内膜中孕激素受体亚型的表达。方法用免疫组织化学方法检测自供30例子宫腺肌病异位内膜间质细胞中PR、PRA、PRB表达情况。(其中晚增生期和中晚分泌期各15例)并与正常子宫内膜组织作对照。结果子宫腺肌病异位内膜间质细胞PR、PR-A、PR-B蛋白的表达水平低于正常内膜,以PR-B的减少为甚,PR-A表达占优势(P<0.05)。结论异位内膜间质细胞PR、PR-A、PR-B的表达减少可能与子宫腺肌病发生、发展及治疗中"孕激素耐受"相关。     

WT1在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义#br#

目的：探讨Wilms肿瘤基因（WT1）在子宫内膜腺癌组织、子宫内膜不典型增生组织以及正常内膜组织中的蛋白和基因表达水平及其临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析WT1 mRNA的相对表达量,应用蛋白印迹（Western blot）法检测子宫内膜组织中WT1蛋白的表达。结果：WT1在子宫内膜腺癌组织中的基因和蛋白表达均明显高于子宫内膜不典型组织和正常内膜组织（均P＜0.01）;WT1 mRNA与子宫内膜腺癌患者年龄、绝经情况、临床分期、淋巴结浸润情况、雌激素受体（ER）和体质量指数（BMI）无显著相关性,与病理分级、肌层浸润情况和孕激素受体（PR）相关（P＜0.05）;WT1蛋白的表达与患者年龄、绝经情况、临床分期、肌层浸润、ER、PR和BMI无显著相关性,与病理分级、淋巴结转移情况相关（P＜0.05）。结论：子宫内膜腺癌中存在WT1 mRNA和蛋白表达水平上调,可能与子宫内膜腺癌的发生和进展有关。     

WT1在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨Wilms肿瘤基因（WT1）在子宫内膜腺癌组织、子宫内膜不典型增生组织以及正常内膜组织中的蛋白和基因表达水平及其临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析WT1 m RNA的相对表达量,应用蛋白印迹（Western blot）法检测子宫内膜组织中WT1蛋白的表达。结果：WT1在子宫内膜腺癌组织中的基因和蛋白表达均明显高于子宫内膜不典型组织和正常内膜组织（均P〈0.01）;WT1 m RNA与子宫内膜腺癌患者年龄、绝经情况、临床分期、淋巴结浸润情况、雌激素受体（ER）和体质量指数（BMI）无显著相关性,与病理分级、肌层浸润情况和孕激素受体（PR）相关（P〈0.05）;WT1蛋白的表达与患者年龄、绝经情况、临床分期、肌层浸润、ER、PR和BMI无显著相关性,与病理分级、淋巴结转移情况相关（P〈0.05）。结论：子宫内膜腺癌中存在WT1 m RNA和蛋白表达水平上调,可能与子宫内膜腺癌的发生和进展有关。     

老年宫颈癌E2-EPF表达与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移关系的研究

目的了解老年宫颈癌E2-EPF表达水平与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移发生的关系,为老年宫颈癌转移的早期防治提供依据。方法选择2010年1月至2012年1月住院老年宫颈癌患者36例,手术切除获取癌组织标本,用实时荧光定量PCR检测癌组织中E2-EPF mRNA的表达水平,探讨E2-EPF表达水平与肿瘤深肌层浸润及盆腔淋巴结转移发生的关系。结果 36例病例中发现肿瘤深肌层浸润19例,占52.8%,盆腔淋巴结转移10例,占27.8%。深肌层浸润组E2-EPF mRNA平均表达水平为无深肌层浸润组的2.14倍,盆腔淋巴结转移组E2-EPF mRNA平均表达水平为无盆腔淋巴结转移组的1.72倍,均具有统计学差异（P〈0.05）。结论 E2-EPF在发生转移的老年宫颈癌组织中高表达,E2-EPF信号通路可望成为宫颈癌防治的新靶点。     

基质金属蛋白酶2和9在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义

目的：研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义,探讨其与子宫内膜样腺癌发展及生物学行为的相关性。方法：收集本院102例子宫切除标本,其中60例子宫内膜腺癌按临床分期分为Ⅰ期（26例）、Ⅱ期（19例）和Ⅲ期（15例）;按组织学分级分为1级（29例）、2级（19例）和3级（12例）;按肌层浸润分为无肌层浸润（8例）、肌层浸润<1/2（11例）和肌层浸润>1/2（41例）;按有无淋巴转移分为无淋巴结转移组（54例）及有淋巴结转移组（6例）,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶（SP）免疫组织化学方法检测组织MMP-2和MMP-9的表达情况。结果：MMP-2和 MMP-9在子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为76.7%和80.0%,与正常子宫内膜组织（13.60%）及内膜单纯增生组织（20.00%）比较,差异有显著性（P<0.05）;临床Ⅲ期及组织学3级子宫内膜癌组织MMP-2和MMP-9的强阳性表达率高于临床Ⅰ期及1级子宫内膜癌（P<0.05）;有肌层浸润及淋巴转移的子宫内膜癌组织中MMP-2和 MMP-9的强阳性表达率高于无肌层浸润及淋巴转移的子宫内膜癌（P<0.05）。结论：MMP-2和 MMP-9在子宫内膜样腺癌中呈高表达;MMP-2和 MMP-9的强阳性表达率与子宫内膜样腺癌临床分期、组织学分级及有无肌层浸润、淋巴转移有关联。     

子宫颈鳞癌中转移相关基因2的表达及其与预后的关系

目的：研究转移相关基因2(metastasis tumor-associated protein 2,MTA2)在子宫颈鳞癌组织中的表达水平,探讨其与子宫颈鳞癌临床病理因素之间的联系及其预后价值。方法：采用免疫组织化学和RT-PCR检测MTA2蛋白及mRNA在子宫颈鳞癌、子宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中的表达情况,分析其与临床病理因素的关系,同时综合临床病理资料及随访数据对子宫颈鳞癌患者进行预后分析。结果：MTA2蛋白在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达率分别为0,30.0%,73.4%,且其表达水平与宫颈癌国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);MTA2 mRNA 在正常宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中的表达量分别为0.437±0.028,0.737±0.102,1.172±0.068,且其表达量亦与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,MTA2蛋白表达阳性患者与阴性患者无瘤生存期分别为(23.19±1.87)和(39.57±3.16)个月,经log-rank检验得出两组患者无瘤生存期差异有统计学意义(χ2=20.225,P<0.001);多因素COX比例风险模型预后分析显示,MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移为宫颈癌有效的独立预后指标(P<0.05)。 结论：MTA2的高表达与宫颈癌的发生、进展及转移有关;MTA2蛋白表达水平、FIGO分期及淋巴结转移可作为宫颈癌预后的3个相对独立的因素;MTA2有可能成为判断宫颈癌患者进展及预后的一个新的分子标志物。     

人大肠癌PTEN基因mRNA和蛋白表达的相关性研究

目的:探讨PTEN基因的表达在人大肠癌发生发展及浸润转移过程中的作用。方法:应用RT-PCR和Western blot的方法,对75例人大肠癌及癌旁组织中PTEN mRNA和蛋白的表达进行分析。结果:PTEN mRNA在大肠癌癌旁肠粘膜,早期癌及进展期癌中的阳性表达率分别为93.3%,75.0%和47.6%,PTEN蛋白在上述组织中的表达率则分别为96.0%,66.7%和49.2%。PTENmRNA和蛋白的表达均与大肠癌癌细胞的分化程度,肿瘤的Dukes分期及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。PTEN mRNA在进展期癌中的表达明显低于早期癌(P<0.05)。PTENmRNA与PTEN蛋白的表达呈显著正相关(r=0.99,P<0.01)。结论:PTEN mRNA与蛋白表达的减少与大肠癌的发生和进展密切相关。     

uPA和VEGF在子宫内膜癌中的表达及临床意义

[目的]检测子宫内膜癌组织中uPA和VEGF的表达状况并探讨其临床意义。[方法]采用免疫组织化学SP法检测uPA与VEGF在60例子宫内膜癌与32例正常子宫内膜组织的表达情况,并分析二者的相关性。[结果]子宫内膜癌组织中uPA和VEGF表达定位于细胞浆,二者的阳性表达率分别为51.67%(31/60)和43.33%(26/60),均明显高于正常子宫内膜组织(P<0.05)。二者的表达与肿瘤肌层浸润程度、淋巴结转移、病理分期及临床分期相关(P<0.05);相关性分析显示uPA和VEGF表达呈正相关(P<0.05)。[结论]uPA和VEGF在子宫内膜癌组织中呈高表达,它们的表达可能与子宫内膜癌的发生、发展和转移相关。     

转录因子NFAT表达与大肠癌侵袭转移的关系

目的:研究活化T细胞核因子(NFAT)的表达与大肠癌侵袭及转移的关系。方法:以30例结直肠癌手术标本为研究对象,分别采用荧光实时定量PCR和免疫组织化学的方法检测肿瘤和切端组织中活化T细胞核因子基因的mRNA和蛋白表达水平,并结合相关临床病理资料进行统计学分析。结果:癌组织NFAT mRNA转录水平显著高于切端组织(P<0.01),NFAT mRNA转录水平与浸润深度、淋巴结转移情况和Dukes分期相关(P<0.05);癌组织NFAT蛋白表达水平显著高于远癌切端组织(P<0.01),NFAT蛋白表达水平与淋巴结转移情况(P<0.01)和Dukes分期显著相关(P<0.05);并且在肿瘤组织中NFAT mRNA和蛋白的表达水平呈正相关(P<0.01)。结论:NFAT在结直肠癌的恶性生物学行为中起重要作用,其高表达者肿瘤易于侵袭、转移,可作为判断肿瘤恶性程度、浸润转移的生物学指标;针对NFAT的干预有可能成为肿瘤治疗的重要手段之一。