酒精滥用对HIV脑炎动物模型的影响

目的研究氯化锂对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和对荷肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察氯化锂(LiCl)对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;以流式细胞仪分析氯化锂处理SMMC-7721肝癌细胞后,细胞凋亡情况;同时利用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型,观察氯化锂对荷肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用;对肿瘤组织超微结构进行透射电镜观察。结果氯化锂对SMMC-7721细胞具有抑制作用并有浓度依赖性;且氯化锂可诱导SMMC-7721细胞发生凋亡;荷肝癌小鼠动物实验中氯化锂中浓度组和高浓度组抑瘤率分别达到50.0%和60.7%,提示氯化锂对小鼠的肿瘤生长具有一定的抑制作用;电镜下可见氯化锂处理组肿瘤组织的凋亡细胞和凋亡小体。结论氯化锂对SMMC-7721细胞的增殖和荷肝癌小鼠肿瘤的生长具有抑制作用,作用机制可能与其诱导肝癌细胞凋亡有关。     

肿瘤相关线粒体蛋白12对移植瘤细胞增殖的影响

目的 探讨肿瘤相关线粒体蛋白12(TAMP12)对小鼠移植瘤细胞增殖的影响.方法 采用脂质体法将TAMP12基因及空载体转染肝癌细胞系SMMC-7721,经CA18筛选获得稳定高表达TAMP12细胞株(SMMC-7721-TAMPl2)及对照细胞(SMMC-7721-pcDNA3.1),实时定量PCR和蛋白印迹检测TAMP12在这两组细胞中的表达.将SMMC-7721-TAMP12和对照SMMC-7721、SMMC-7721-pcDNA3.1三组细胞分别接种于BALB/cnu/nu小鼠的前肢腋下,连续观察荷瘤小鼠中肿瘤的生长状况.接种4周后处死小鼠,取瘤块分别测量瘤体质量和体积,应用实时定量PCR和免疫组化方法检测三组移植瘤中TAMP12的表达;透射电镜观察移植瘤细胞中亚细胞器形态;并应用基因芯片技术检测三组移植瘤肿瘤细胞中的基因差异表达.结果 将经实时定量PCR和蛋白印迹检测显示高表达TAMP12的SMMC-7721和对照细胞分别接种裸鼠后,三组荷瘤小鼠中肿瘤的生长曲线呈现明显差异,转染TAMP12的荷瘤小鼠中肿瘤生长速度明显快于对照组荷瘤小鼠.肉眼观察可见实验组肿瘤组织中血管较对照组丰富;电镜观察发现实验组的细胞分裂增殖明显.基因芯片显示,该基因的高表达可促进多个与细胞增殖相关的基因表达上调.结论 TAMP12基因具有促进细胞增殖的作用,其机制可能与调节细胞增殖的胰岛素样受体介导的信号转导通路有关.     

肿瘤相关线粒体蛋白12对移植瘤细胞增殖的影响

目的探讨肿瘤相关线粒体蛋白12(TAMP12)对小鼠移植瘤细胞增殖的影响。方法采用脂质体法将TAMP12基因及空载体转染肝癌细胞系SMMC-7721,经G418筛选获得稳定高表达TAMP12细胞株(SMMC-7721-TAMP12)及对照细胞(SMMC-7721-pcDNA3.1),实时定量PCR和蛋白印迹检测TAMP12在这两组细胞中的表达。将SMMC-7721-TAMP12和对照SMMC-7721、SMMC-7721-pcDNA3.1三组细胞分别接种于BALB/cnu/nu小鼠的前肢腋下,连续观察荷瘤小鼠中肿瘤的生长状况。接种4周后处死小鼠,取瘤块分别测量瘤体质量和体积,应用实时定量PCR和免疫组化方法检测三组移植瘤中TAMP12的表达;透射电镜观察移植瘤细胞中亚细胞器形态;并应用基因芯片技术检测三组移植瘤肿瘤细胞中的基因差异表达。结果将经实时定量PCR和蛋白印迹检测显示高表达TAMP12的SMMC-7721和对照细胞分别接种裸鼠后,三组荷瘤小鼠中肿瘤的生长曲线呈现明显差异,转染TAMP12的荷瘤小鼠中肿瘤生长速度明显快于对照组荷瘤小鼠。肉眼观察可见实验组肿瘤组织中血管较对照组丰富;电镜观察发现实验组的细胞分裂增殖明显。基因芯片显示,该基因的高表达可促进多个与细胞增殖相关的基因表达上调。结论TAMP12基因具有促进细胞增殖的作用,其机制可能与调节细胞增殖的胰岛素样受体介导的信号转导通路有关。     

青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721选择性抑制作用的实验研究

目的研究青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721的选择性抑制作用。方法将人肝癌细胞株SMMC-7721接种于小鼠腰部皮下,制成小鼠荷瘤动物模型,分别用青蒿素、琥珀酸亚铁、青蒿素＋琥珀酸亚铁、生理盐水（对照组）对荷瘤小鼠进行干预,观察小鼠肿瘤体积的变化;TUNEL法检查肿瘤细胞的凋亡,计算抑瘤率和凋亡指数。结果青蒿素和青蒿素＋琥珀酸亚铁与生理盐水相比,明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长（P〈0.05）,其抑瘤率分别为33.21%和55.04%,2组间存在明显差异（P〈0.05）。青蒿素联合琥珀酸亚铁表现出明显的促凋亡作用,凋亡指数为31.35%,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721均有肿瘤抑制作用和促进肿瘤细胞凋亡的作用,但是联合用药作用更强。     

微波和毫米波抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的研究

目的 探讨微波和毫米波联合应用对于人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用。方法实验分为对照组、微波组、毫米波组及微波联合毫米波组，应用MTT比色法检测各组的OD值，计算其抑制率。结果微波或毫米波对人肝癌细胞SMMC-7721均有生长抑制作用，二者联合应用抑制作用更强。结论微波联合毫米波对于人肝癌细胞SMMC-7721有明显的协同抑制效应，这些结果将为临床上肝癌等肿瘤的辅助治疗提供一定的实验基础。     

斯普瑞达（SPRIDA）对SMMC-7721肝癌细胞生长和粘附功能的影响

目的使用SMMC-7721肝癌细胞株对SPRIDA—A、SPRIDA—B和SPRIDA—A SPRIDA—B体外抑制肿瘤生长和粘附功能进行研究。方法采用MTT比色分析法观察SPRIDA—A、SPRIDA—B、SPRIDA—A SPRIDA—B对SMMC-7721肝癌细胞生长和粘附功能的影响，测定其生长抑制率和粘附抑制率。结果SPRIDA—A对SMMC-7721肝癌细胞生长抑制作用不明显，SPRIDA—B和SPRIDA—A SPRIDA—B对肝癌细胞生长有明显抑制作用，并呈剂量依赖关系；SPRIDA-B对SMMC-7721肝癌细胞粘附功能有明显抑制作用，并呈剂量依赖关系。SPRIDA—B作用于SMMC-7721肝癌细胞后，可见明显的凋亡细胞形态出现。结论SPRIDA—B对SMMC-7721肝癌细胞生长和粘附功能有明显抑制作用，并可诱导细胞凋亡，是一个极具研究价值的抗肿瘤及抗转移的新药。     

血管生成抑制素基因对人原发性肝细胞癌裸鼠移植瘤的治疗作用

目的：研究血管生成抑制素基因对人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法：建立人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤模型。将荷瘤裸小鼠随机分为3组；肿瘤对照组，空载体组及angio基因治疗组分别瘤内直接注射裸露DNA质粒，不同时段观察皮下肿瘤生长情况，绘制计算皮下肿瘤生长曲线：病理学检查；原位末端标记（TUNEL）法检查细胞原位凋亡；放射免疫法检测裸小鼠血清甲胎蛋白变化；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果：皮下肿瘤生长曲线及病理学检查结果显示，angio基因瘤内注射可部分抑制肿瘤生长。TUNEL法检测显示，angio组凋亡指数明显高于肿瘤对照组。扫描电镜观察细胞超微结构变化。发现angio基因治疗组内有明显的细胞凋亡发生。结论：angio基因直接瘤内注射能抑制人原发性肝癌裸小鼠移植瘤肿瘤生长。其作用机理可能为抑制肝癌的血供从而抑制肿瘤生长。     

清热解毒类中药单体的体外内抗肝癌作用研究

目的：探讨5种清热解毒中药单体对SMMC-7721肝癌细胞增殖和对H22荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用。方法 SMMC-7721人肝癌细胞分别经不同浓度的迷迭香酸、黄芩苷、橙黄决明素、绿原酸和黄连素作用48 h后,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖抑制率并筛选出有效中药单体。采用H22肝癌细胞建立小鼠移植性肝癌模型,给予H22荷瘤小鼠不同浓度的迷迭香酸（300 mg／kg、150 mg／kg、75 mg／kg）和黄芩苷（200 mg／kg、100 mg／kg、50 mg／kg）10 d后,剥取瘤块、胸腺、脾脏称重,并计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果迷迭香酸500 mg／L、250 mg／L、125 mg／L 浓度组和黄芩苷500 mg／L、250 mg／L浓度组吸光度A值均明显低于对照组（ P＜0．05）,且细胞增殖抑制率均达到30％以上;橙黄决明素及黄连素组的细胞增殖抑制率均低于30％,绿原酸组细胞增殖抑制率＜0。各剂量迷迭香酸组的瘤重均较模型组明显下降（P＜0．05）,对H22移植瘤的抑制率分别为48．2％、43．0％和39．0％,迷迭香酸各剂量组的胸腺指数和脾脏指数与模型组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。300 mg／kg黄芩苷组肿瘤重均低于模型组（P＜0．05）,抑瘤率达到55．7％,黄芩苷各剂量组的脾脏、胸腺指数与模型组比较无显著性差异（P＞0．05）。结论迷迭香酸和黄芩苷体外对SMMC-7721肝癌细胞和体内对H22移植瘤均有明显的抑制作用。     

20(S)-原人参二醇对肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的研究20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞凋亡及周期的影响,并在裸小鼠人肺癌模型上观察20(S)-原人参二醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果20(S)-原人参二醇对A549细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系,并且流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,24小时凋亡率分别为32.47%、32.75%、33.51%。荷瘤裸小鼠动物实验表明,20(S)-原人参二醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为18.78%、34.37%、50.02%。结论20(S)-原人参二醇对A549细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用。     

新疆紫草素对荷H22肝癌小鼠抗肿瘤的实验性研究

本文通过体外细胞毒试验和肿瘤抑瘤率的测定，观察了新疆紫草素对人肝癌细胞SMMC-7721体外杀伤作用及对荷H22小鼠肿瘤抑瘤率和免疫功能的影响。结果显示在对SMMC-7721肿瘤细胞的杀伤作用中新疆紫草素组的杀伤活性分别为47．2％，31．9％，24．8％。新疆紫草素组对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为66．32％，53．30％，50．02％。结果表明新疆紫草素是一种能抑制肿瘤细胞的增殖以及调控机体免疫功能的中药。     

荷瘤裸鼠证候特征的研究

目的：观察SMMC-7721肝癌与SGC-7901胃癌荷瘤裸鼠证候及其差异。方法：分别在雄性BALB／c—nu裸鼠右腋下接种SMMC-7721肝癌细胞和sGC-7901胃癌细胞悬液，并设立正常对照组，采用小鼠四诊工作站平台与方法收集裸鼠四诊信息，并进行计量辨证。结果：接种第6---50天，SMMC-7721肝癌裸鼠肿瘤增长与裸鼠死亡速度较sGC-7901胃癌裸鼠速度快，第23天SMMC-7721肝癌裸鼠全部自然死亡；而至第50天，sGC-7901胃癌裸鼠生存率仍达90％（9／10）。SMMC-7721肝癌与SGC-7901胃癌荷瘤裸鼠均自发形成了常见虚证，其中SMMC-7721肝癌裸鼠证候出现早，程度重，发展快。结论：SMMC-7721肝癌与SGC-7901胃癌荷瘤裸鼠存在证候的自然发生与演变。可用以模拟临床肿瘤证候的发生与演变，用于辨证论治的实验研究。     

内皮抑制素对小鼠肝癌细胞种植瘤的抑制作用

目的研究内皮抑制素对裸鼠人肝癌细胞种植瘤生长的抑制作用及其机制。方法培养人肝癌细胞株SMMC-7721细胞;裸鼠皮下接种人SMMC-7721肝癌细胞建立动物模型,观察不同浓度内皮抑制素对裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果内皮抑制素组裸鼠肿瘤的瘤重较低,体积增长缓慢,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论内皮抑制素对裸鼠人肝癌细胞种植瘤生长有显著抑制作用。     

凋亡抑制因子反义寡核苷酸对肝癌细胞生物学作用

目的: 探讨survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞凋亡、增殖、化疗药物敏感性的影响. 方法: 设计合成特异性survivin的反义寡核苷酸(ASODN). 以高表达survivin基因的人肝癌细胞系(SMMC-7721)为靶细胞、ASODN为阻断剂,Western blot法检测细胞survivin表达情况, 通过MTT试验观察ASODN对该细胞系的生长抑制作用, 倒置显微镜观察细胞形态变化, 流式细胞仪分析细胞增殖周期, MTT法检测survivin表达抑制前后细胞对紫杉醇敏感性影响. 结果: ASODN明显抑制了SMMC-7721肝癌细胞的生长, 细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡, 而各对照组细胞生长良好; 各ASODN药物组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P<0.05)且细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05); 紫杉醇药物组细胞IC50低于对照组(16.2±2.2) μg/L vs (35.5±4.3) μg/L, P<0.01. 结论: survivin ASODN能下调其蛋白表达, 诱导人肝癌细胞凋亡, 抑制细胞增殖,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性.     

塞来昔布对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察塞来昔布对肝癌增殖的抑制作用.方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,四唑氮蓝还原法(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术检测细胞周期,并用小鼠肝癌细胞株H22建立昆明鼠移植瘤模型,观察塞来昔布对移植瘤生长的抑制效果.结果 MTT显示塞来昔布对人肝癌细胞SMMC-7721生长有显著的抑制作用,且呈现出时间和剂量依赖性;塞来昔布(40 μmol/L)作用于SMMC-7721细胞36h后,G1期细胞比率由44.7%上升至49.9%,S G2/M期细胞比率由55.4%下降至50.1%,细胞增殖受抑制.在体动物实验表明,塞来昔布对移植瘤的生长和局部转移有显著的抑制效果.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对不同来源的肝癌细胞株均有增殖抑制作用,可能是预防和治疗肝癌的重要候选药物之一.     

干扰素-α对人肝癌细胞的抑制作用的研究

目的研究人干扰素-α对人肝癌细胞系BEL-7402增殖及转移的抑制作用，探讨其抗肿瘤作用的机制。方法常规培养的人肝癌细胞株BEL-7402细胞加入人干扰素-α共同孵育，作用24h后，以MTr法检测干扰素-α对肿瘤细胞增殖的影响；Boyden小室法检测肝癌细胞侵袭能力的变化。体内实验中以BEL-7402细胞10^6个皮下接种于BALB／C裸鼠，肉眼可见成瘤后以干扰素-α隔天瘤旁皮下注射，观察小鼠的一般状态并测量肿瘤体积的变化；小鼠处死后，HE染色检测肿瘤细胞向附近淋巴结及其它脏器的转移情况，免疫组化法检测肿瘤细胞增殖核抗原的表达：Tunel法检测肿瘤细胞的凋亡。结果人干扰素-α可以明显抑制体外BEL-7402细胞的增殖（抑制率为20．2％）；干扰素-α作用后在Boyden小室穿膜的肿瘤细胞数明显减少；干扰素-α治疗组荷瘤小鼠肿瘤体积明显小于对照组；所有小鼠都有近侧腋窝淋巴结的肿瘤转移，未见有其它脏器的转移；干扰素-α组裸鼠生长肿瘤细胞增殖核抗原的表达明显下降，凋亡明显增加。结论干扰素-α可以直接抑制体内、外肝癌细胞株BEL-7402的增殖，对BEL-7402细胞的侵袭有明显的抑制作用；可以抑制裸鼠移植肿瘤细胞增殖核抗原的表达并诱导细胞凋亡；但对BEL-7402细胞局部淋巴结转移无抑制作用。     

蛋白激酶Cδ对人原发性肝癌细胞增殖的影响

目的初步探讨PKCδ对人原发性肝癌细胞增殖的影响．方法体外培养SMMC-7721细胞,脂质体介导基因体外转导,通过细胞计数、细胞形态学观察、MTT法、流式细胞仪检测技术等方法研究PKCδ对人原发性肝癌细胞的影响．结果细胞计数的生长曲线示转导人PKCδ的SMMC-7721细胞数目明显减少;MTT法显示转导人PKCδ的SMMC-7721细胞的OD值减小,活细胞数目显著减少（P〈0．01）;细胞形态学观察转导入PKCδ的SMMC-7721细胞脱落,连接疏松,失去光泽;流式细胞仪检测到加入PKCδ的SMMC-7721细胞凋亡率增加．结论PKCδ有抑制SMMC-7721细胞增殖,促进凋亡的作用．     

CB125等四种合成物对人肝癌细胞体外增殖的抑制作用

目的观察CB125等四种合成物对人肝癌SMMC7721细胞体外增殖的抑制作用。方法采用MTT比色法，观察CB125等四种合成物对人肝癌SMMC7721细胞增殖的影响。结果1．CB125对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制浓度为10^-8～10^-4 mol.L^-1，（与对照组比较，P〈0．01。），抑制率为55％～73％，呈现明显的剂量依赖性；2．CB97对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制浓度为10^-17～10^-4mo1．L^-1（与对照组比较，P〈0．05或P〈0．01。），抑制率为60％～63％；3．JS86对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制浓度为10^-7～10^-4mol．L^-1（与对照组比较，P〈0．01。），抑制率为59％～72％，呈现明显的剂量依赖性；4．JS146对人肝癌SMMC7721细胞的生长抑制浓度为10^-6～10^-14mol．L^-1（与对照组比较，P〈0．05或P〈0．01。），抑制率为60％～65％。结论CB125等四种合成物对人肝癌SMMC7721细胞的生长均有抑制作用。其中CB125抑制作用较明显。     

重楼、土鳖虫对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制的协同作用

目的体外观察重楼及土鳖虫提取物对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用及两者联合应用的抑制率及相互作用。方法采用MTT法测定两者对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制率,利用金式公式判定两药舍用的效果。结果重楼及土鳖虫提取物能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,并呈浓度和剂量依赖性。两者作用于人肝癌SMMC-7721细胞72h的IC50分别为0．17mg／mL和1．99mg／mL。重楼提取物0．1-0．8mg／mL与土鳖虫提取物1～4mg／mL同时给药对人肝癌SMMC-7721细胞可产生单纯相加至协同杀伤作用.结论重楼、土鳖虫提取物联合用药可产生协同作用,两者联合应用在抗肿瘤治疗中具有合理性:      

槲寄生碱对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制作用的研究

目的:研究槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用.方法:取对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞接种96孔板,待细胞生长良好后加入含不同浓度槲寄生碱培养液,取3个时间点(作用24h、48h、72h)采用MTT比色法观察槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用,抑制率(%)=(1-实验组A值/对照孔A值)×100%.结果:0.1mg/mL和0.2mg/mL浓度组在24h、48h、72h均表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,且作用强于5-Fu.0.05mg/mL组在3个时间点也表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,但作用弱于5-Fu.0.025mg/mL组在作用48h后才表现出对SMMC-7721细胞生长抑制作用.结论:槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长有显著的抑制作用,且呈剂量和时间依赖方式.