泛素-蛋白酶体抑制剂的研究及应用进展

泛素( ubiquitin,Ub)是一个由76个氨基酸残基组成的高度保守的蛋白质,属于热休克蛋白基因家族,它是一种非常小的球形蛋白,主要作用是以多聚泛素链与底物蛋白结合,从而标记降解蛋白.泛素-蛋白酶体途径(UPP)是生物体内蛋白质选择性降解的重要途径之一.最近研究发现,UPP广泛参与细胞凋亡、主要组织相容性复合物(MHC) -Ⅰ类抗原的递呈、细胞周期以及细胞内信号传导等多种生理过程[1].蛋白酶体是UPP的重要组成部分,对于维持细胞功能至关重要.其抑制剂通过干扰蛋白酶体活性抑制肿瘤细胞生长,故有可能成为抗肿瘤的先导药物[2].同时,蛋白酶体抑制剂改变蛋白酶体的酶切位点活性也是免疫、炎症等研究领域的热点.     

泛素样蛋白-蛋白酶体系统与结核分枝杆菌致病性的相关性研究进展

结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis, MTB)中的泛素样蛋白-蛋白酶体系统(prokaryotic ubiquitin-like protein-proteasome system, PPS),主要介导和调控MTB体内蛋白质的降解。在特定环境下,MTB中泛素样蛋白(prokaryotic ubiquitin-like protein, Pup)选择性标记特定的蛋白质,并在辅助因子的帮助下将靶蛋白送入蛋白酶体内降解,对MTB在宿主体内的生长、繁殖及致病性发挥重要调控作用。本文首先简单介绍了MTB中Pup、蛋白酶体的结构特点、作用及PPS降解靶蛋白的主要过程,接着重点介绍了PPS对MTB致病性的调控机制,及如何通过改变PPS作用来降低MTB致病性等一些最新进展,希望能够为寻找新型抗结核药物提供方向。     

泛素-蛋白酶体系统的研究进展

几乎所有生命活动均需蛋白质的参与,其在机体中的代谢对生物体具有重要影响。正常细胞蛋白质代谢是一个持续降解和再合成的动态过程。真核细胞内主要存在两种蛋白降解系统：一种是溶酶体,主要降解经胞吞进入细胞中的胞外蛋白质;另一种是泛素一蛋白酶体系统（ubiquitinpro—teasomesystem,UPS）。UPS是细胞内ATP依赖的蛋白质选择性降解的主要途径,是真核细胞内重要的蛋白质质控系统,主要降解细胞内80％-90％泛素化的蛋白质,并调节炎症、细胞增生与分化、信号转导、细胞周期进程、转录调控、抗原提呈、免疫应答、细胞凋亡和DNA修复等各种细胞生物学功能。     

泛素-蛋白酶体系统及其与肝病关系的研究现状

泛素-蛋白酶体系统（UPS）主要由泛素、泛素活化酶、泛素结合酶、泛素连接酶、26S蛋白酶体及去泛素化酶等组成,是降解细胞内蛋白质的非溶酶体途径。UPS与多种疾病的发生发展有关,在肝病研究中也具有重要的病理生理意义。本文就UPS及其与肝病关系的研究现状作一综述。     

泛素-蛋白酶体系统在肺动脉高压中的研究进展

泛素化是真核细胞中最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,可参与调节细胞的各种生理过程,包括细胞周期进程、细胞分化、细胞凋亡以及先天性和适应性免疫反应。目前越来越多的靶向泛素-蛋白酶体系统(UPS)的药物被开发出来。有证据表明,肺动脉高压(PH)发病过程中存在UPS功能紊乱,但其机制尚不明确,也无相关药物应用于临床。本文回顾了UPS的结构和功能,并对PH中功能异常的UPS相关蛋白及其作用机制进行综述,以为临床精准诊断及靶向治疗方案的制定提供新思路。     

丙型肝炎病毒感染促进53BP1蛋白通过泛素-蛋白酶体途径降解的研究

目的 探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)对53BP1表达的影响及机制。方法 建立HCV体外感染Huh7细胞模型,采用Western blot检测HCV感染对53BP1总蛋白、胞浆和胞核蛋白表达的影响,qPCR检测53BP1的mRNA表达,采用免疫荧光(Immunofluorescence, IF)方法检测HCV感染对53BP1亚细胞定位的影响;采用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)法定量检测HCV相关肝癌中53BP1蛋白的表达,并与癌旁组织及正常肝脏相比较;采用免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, CO-IP)方法检测HCV对53BP1蛋白泛素化水平的影响。结果 HCV感染导致Huh7细胞53BP1蛋白的相对表达水平为(0.41±0.03),明显低于对照组(1.00±0.08),差异有统计学意义(P<0.01);在HCV感染后,胞核53BP1蛋白相对表达水平为(0.35±0.03),明显低于对照组(1.00±0.09),差异有统计学意义(P<0.01);而胞浆53BP1相对表达水平为(1.2...     

泛素-蛋白酶体系统与动脉粥样硬化性疾病的发生

泛素-蛋白酶体系统(ubiqutin proteasome system,UPS)广泛存在于真核细胞中,在维持细胞的生理功能方面,UPS起着非常重要的作用。它除了降解损伤的蛋白质,还与炎症、增殖和细胞凋亡相关,其在动脉粥样硬化性疾病中的作用涉及了动脉粥样硬化斑块发展的各个阶段。本文综述了UPS与动脉粥样硬化的关系以及蛋白酶体抑制剂在动脉粥样硬化疾病中的治疗前景。     

泛素-蛋白酶体系统与动脉粥样硬化性疾病的发生

泛素-蛋白酶体系统(ubiqutin proteasome system,UPS)广泛存在于真核细胞中,在维持细胞的生理功能方面,UPS起着非常重要的作用.它除了降解损伤的蛋白质,还与炎症、增殖和细胞凋亡相关,其在动脉粥样硬化性疾病中的作用涉及了动脉粥样硬化斑块发展的各个阶段.本文综述了UPS与动脉粥样硬化的关系以及蛋白酶体抑制剂在动脉粥样硬化疾病中的治疗前景.     

丙型肝炎病毒感染促进53BP1蛋白通过泛素-蛋白酶体途径降解的研究北大核心CSCD

目的探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)对53BP1表达的影响及机制。方法建立HCV体外感染Huh7细胞模型,采用Western blot检测HCV感染对53BP1总蛋白、胞浆和胞核蛋白表达的影响,qPCR检测53BP1的mRNA表达,采用免疫荧光(Immunofluorescence,IF)方法检测HCV感染对53BP1亚细胞定位的影响;采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法定量检测HCV相关肝癌中53BP1蛋白的表达,并与癌旁组织及正常肝脏相比较;采用免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP)方法检测HCV对53BP1蛋白泛素化水平的影响。结果HCV感染导致Huh7细胞53BP1蛋白的相对表达水平为(0.41±0.03),明显低于对照组(1.00±0.08),差异有统计学意义(P<0.01);在HCV感染后,胞核53BP1蛋白相对表达水平为(0.35±0.03),明显低于对照组(1.00±0.09),差异有统计学意义(P<0.01);而胞浆53BP1相对表达水平为(1.20±0.18),对照组相对表达水平为(1.00±0.17),两者表达无显著改变(P>0.05);HCV感染可导致53BP1蛋白,尤其是胞核53BP1蛋白的表达下降。免疫荧光结果显示HCV感染导致53BP1从胞核到胞浆的亚细胞定位改变;免疫组化结果显示,与正常肝脏相比,53BP1在HCV相关HCC的癌组织(P<0.01)和癌旁组织(P<0.05)中显著降低。机制分析表明HCV感染促进53BP1的泛素-蛋白酶体途径降解。结论HCV感染可致Huh7细胞53BP1发生由细胞核到细胞质的定位改变,并促进其通过泛素-蛋白酶体途径降解。     

泛素蛋白酶体途径对高糖刺激肾系膜细胞连接蛋白43表达和纤维连接蛋白分泌影响的初步观察

目的 探讨高糖对系膜细胞连接蛋白43(Cx43)表达和纤维连接蛋白(FN)分泌的影响,以及泛素蛋白酶体途径在其中的作用.方法 将培养的大鼠肾小球系膜细胞用高糖作为刺激因子,泛素蛋白酶体特异性抑制剂MG132作为阻断剂,甘露醇作为渗透压对照,观察各组细胞间Cx43的表达并检测细胞上清液中FN的含量.结果 (1)不同浓度的葡萄糖刺激系膜细胞48h后,Cx43表达较正常对照组显著降低,MG132可部分逆转高糖所致的Cx43的低表达(P＜0.05),甘露醇对Cx43表达无影响(P＞0.05).(2)高糖呈浓度依赖性促进系膜细胞 FN的分泌,MG132可部分抑制高糖所致的系膜细胞 FN的分泌(P均＜0.05).结论 高糖呈浓度依赖性抑制系膜细胞Cx43的表达和促进FN的分泌;泛素蛋白酶体途径参与了高糖所致Cx43的低表达和FN分泌.     

阻断泛素-蛋白酶体通路对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的　研究阻断泛素 蛋白酶体通路对胃癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法　将泛素 蛋白酶体通路特异性阻断剂MG 132加入胃癌细胞株SGC 790 1,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定细胞抑制效应 ,流式细胞仪 (FCM )检测细胞周期及凋亡 ,DNA片段分析进一步证实凋亡的存在 ,TRAPPCR ELISA法检测端粒酶活性 ,免疫细胞化学检测 p2 7kip1的表达。 结果　MG 132对SGC 790 1细胞有显著抑制作用 ;FCM显示对照组胃癌细胞G0 /G1期比例为 (46 .3± 4 .1) % ,MG 132作用后为 (72 .1± 5 .0 ) % ,较对照组增加 (P <0 .0 1) ,并有明显的亚二倍体凋亡峰 ;细胞DNA抽提电泳后发现特征性凋亡梯状条带 ,TRAPPCR ELISA法检测示MG 132作用胃癌细胞 2 4、4 8、72、96h时A值分别为 0 .197± 0 .0 0 7、0 .0 81± 0 .0 0 5、0 .0 74± 0 .0 0 4、0 .0 6 3± 0 .0 0 2 ,对照组A值分别为 1.80 1± 0 .0 4 8、1.887± 0 .0 72、2 .0 4 7± 0 .0 85、2 .131± 0 .0 76 ;端粒酶活性显著受抑制 (P <0 .0 1) ;p2 7kip1在胃癌细胞中为胞质表达 ,经MG 132作用后 ,胞质、胞核均有表达。结论　MG 132能显著抑制胃癌细胞株SGC 790 1的增殖、诱导其凋亡 ,其机制是增强 p2 7kip1表达 ,使细胞产生G1期阻滞 ,并抑制端粒酶活性。     

泛素-蛋白酶体系统在非小细胞肺癌中作用机制的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是一个复杂的控制系统,负责降解80%~90%的蛋白质,是调节细胞功能和维持蛋白质同源性的关键。研究显示其在多种肿瘤发生、发展中有重要的作用,因此,近年来UPS的成分作为肺癌诊断以及治疗的潜在靶点引起了广泛的关注。本综述将对非小细胞肺癌中的UPS和UPS在非小细胞肺癌发生、发展中潜在的作用机制的研究现状作一综述。     

胰腺癌中过氧化物酶体增生激活受体和泛素-蛋白酶体系统的相关致癌机制

胰腺癌是人类癌症中最致命的种类之一。虽然肿瘤学在很多种癌症中取得了很大成就,但胰腺癌取得的进步很小,而且预后不容乐观。几个经常在胰腺癌中被定义并且变异的分子包括K-RAS、P53、P16和DPC4。过氧化物酶体增生激活受体(PPARy)在许多肿瘤中都起作用,而且在胰腺癌中过度表达,它跟NF-κB类似,具有肿瘤抑制作用和对抗一般蛋白质的致癌作用。调节通路是由泛素-蛋白酶体系统(UPS)完成并参与胰腺癌发生发展。本文将研究PPARy和核受体的UPS在胰腺致癌机制中的关系。     

Smad泛素化调节因子2在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子的作用研究

目的:在体内和体外研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子(CTGF)的作用。方法:建立四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,收集人类肝硬化和正常肝组织样本,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot,WB)、免疫组织化学(IHC)方法检测Smurf2和CTGF的表达;培养人类肝星状细胞(LX-2),构建Smurf2表达质粒和小干扰RNA(siRNA),在转化生长因子β1(TGF-β1)作用后,通过WB检测Smurf2过表达和小干扰后对CTGF表达的影响。结果:在大鼠肝纤维化时,Smurf2表达增加,伴有CTGF水平增高;大鼠和人类肝硬化组织中,Smurf2表达反而减少,CTGF表达仍然增加。体外肝星状细胞用TGF-β1处理后,CTGF蛋白水平升高;过表达Smurf2可以阻断CTGF蛋白的合成;抑制Smurf2表达后,CTGF表达持续增加。TGF-β1处理LX-2后可以诱导Smurf2表达内源性轻度增加。结论:Smurf2可以由TGF-β1诱导产生,作为负反馈抑制子抑制肝纤维化过程中CTGF表达的增加。     

高糖对肾小球系膜细胞ERK1／2蛋白表达泛素化调节的影响

目的探训高糖作用的肾小球系膜细胞ERK1／2蛋白表达与泛素一蛋白酶体调节途径的关系。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,将高糖作为刺激因子,特异性泛素蛋白酶体抑制剂MG132作为干预闪素。脂蛋白免疫印迹法检测各组系膜细胞ERK1／2的表达,细胞免疫荧光染色及激光共聚焦娃微镜检测各组系膜细胞ERK1/2的表达、转位。结果高糖组系膜细胞ERK1/2表达较正常血糖组均增多（P〈0．05）,还可促进ERK1/2由胞浆向胞核内激活、转位,高糖组加入MG132后,系膜细胞ERKl／2表达和激活、转位均减弱（P〈0．05）。结论高糖可通过泛素蛋白酶体途径诱导肾系膜细胞ERK1／2表达增强和ERK1／2由胞浆向胞核内激活、转位。     

支气管哮喘患者T淋巴细胞的细胞周期分布及周期调节蛋白表达的意义

目的通过检测T淋巴细胞的细胞周期分布及其细胞周期调节蛋白(CCRP)的表达,探讨发作期支气管哮喘(简称哮喘)患者T淋巴细胞过度活化、增殖的调控机制.方法采用碘化丙啶DNA染色法应用流式细胞仪分析30例发作期哮喘患者(哮喘组)及20名正常人(正常组)外周血T淋巴细胞的细胞周期分布;采用间接免疫荧光法,应用流式细胞仪同步测定相应T淋巴细胞内CCRP、依赖激酶抑制蛋白(P27kipl)、细胞周期蛋白E(cyclin E)、cyclin A、cyclin B的表达水平.比较哮喘患者和正常人上述指标的差异.结果哮喘组S期、S+G2/M期的T淋巴细胞百分率分别为(18±9)%和(25±10)%,对照组分别为(5±4)%、(11±6)%, 两组比较差异有显著性(P均<0.01);哮喘组G0/G1期的T淋巴细胞百分率为(76±10)%,对照组为(90±6)%,两组比较差异有显著性(P<0.01).哮喘组T淋巴细胞内P27kipl的表达水平为 (4.0±2.4)%,对照组为(6.7±4.8)%,两组比较差异有显著性(P<0.05);哮喘组cyclin E、cyclin A、cyclin B的表达水平分别为(25±24)%、(9±7)%、(6.4±5.9)%,对照组分别为(6±5)%、(4±4)%、(3.4±1.6)%,两组比较差异均有显著性(P均<0.01).结论 T淋巴细胞内CCRP异常表达与发作期哮喘患者T淋巴细胞过度活化、增殖有关,将CCRP作为调控靶点,可望成为治疗哮喘的新途径.     

COPD大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体降解通路与IL-10相关性的研究

目的：研究 COPD 大鼠模型的骨骼肌泛素(Ub)-蛋白酶体降解途径中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达,肿瘤坏死因子α(TNF-α)和炎症抑制因子 IL-10在大鼠血清和骨骼肌中含量变化,探讨 IL-10在 COPD 骨骼肌蛋白高分解过程中的作用及调控机制。方法成年雄性 SD 大鼠45只,其中分为模型组30只、对照组15只,采用反复熏香烟+气管内注入脂多糖法复制 COPD 大鼠动物模型。蛋白质印迹法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达。用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中 IL-10和 TNF-α的含量。结果模型组膈肌、肋间肌、腓肠肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白的相对表达量显著增加。在模型组中,血清和骨骼肌肌内 TNF-α较对照组显著升高,IL-10表达均下降[血清(44.68±8.67)vs (75.96±10.59),膈肌(50.55±7.41)vs (80.06±9.22),肋间肌(47.47±8.98)vs (78.10±7.21),腓肠肌(48.60±10.88)vs (76.77±8.92),P <0.01]。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10和 TNF-α水平呈负相关(血清 r =-0.67,膈肌 r =-0.78,肋间肌 r =-0.80,腓肠肌 r =-0.77,P <0.05)。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10都与中性粒细胞百分比、E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白相对表达量呈负相关(血清 r =-0.80、r =-0.73、r =-0.69、r =-0.81;膈肌 r =-0.83、r =-0.81、r =-0.75、r =-0.79;肋间肌 r =-0.81、r =-0.80、r =-0.74、r =-0.54;腓肠肌 r =-0.74、r =-0.69、r =-0.71、r =-0.62,P <0.05)。血清 IL-10与骨骼肌IL-10呈显著正相关(膈肌 r =0.83、肋间肌 r =0.80、腓肠肌 r =0.73,P <0.01)。结论 IL-10的下调在 COPD 炎症中起重要作用,可能参与骨骼肌 Ub-蛋白酶体降解途径降解机制的调控。     

高糖和泛素蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠肾系膜细胞IκB-a蛋白表达的影响

目的探讨泛素蛋白酶体途径对高糖刺激的肾系膜细胞IκB-a蛋白表达的影响。方法体外培养大鼠HBZY-1肾系膜细胞,高糖作为刺激因子,MG132作为干预因素。分别设正常对照组、高糖组（10,20,30mmol／L葡萄糖）、甘露醇组以及MG132加高糖（30mmol／L）组,分别作用12、24、48小时,用Western blot法测各组IκB-a蛋白的表达。结果（1）与正常对照组比较,高糖作用后IκB-a蛋白的表达呈时间、浓度依赖性下降。（2）与高糖组比较,高糖加入MG132后,IκB-a蛋白的表达下降被明显逆转。结论高糖可通过泛素蛋白酶体途径促进肾系膜细胞IκB-a蛋白泛素化降解。     

高糖和泛素蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠肾系膜细胞IκB-α蛋白表达的影响

目的 探讨泛素蛋白酶体途径对高糖刺激的肾系膜细胞IκB-α蛋白表达的影响.方法 体外培养大鼠HBZY-1肾系膜细胞,高糖作为刺激因子,MG132作为干预因素.分别设正常对照组、高糖组(10,20,30mmol/L葡萄糖)、甘露醇组以及MG132加高糖(30mmol/L)组,分别作用12、24、48小时,用Western blot法测各组IκB-α蛋白的表达.结果 (1)与正常对照组比较,高糖作用后IκB-α蛋白的表达呈时间、浓度依赖性下降.(2)与高糖组比较,高糖加入MG132后,IκB-α蛋白的表达下降被明显逆转.结论 高糖可通过泛素蛋白酶体途径促进肾系膜细胞IκB-α蛋白泛素化降解.     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的 观察肺表面活性物质(PS)对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4+、CD8+T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义.方法 利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4+、CD8+T细胞的细胞周期分布和CD4+、CD8+T细胞内细胞周期调节蛋白p27kipl、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平.结果 哮喘患者CD4+、CD8+T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4+T比例显著低于对照组(P＜0.01);G0/G1期的CD4+T细胞比例显著高于对照组(P＜0.01).加PS组的S期CD8+T比例显著低于对照组(P＜0.01);G2期的CD8+T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);G0/G1期的CD8+T细胞比例高于对照组(P＜0.05).CD4+T细胞内p27kipl的表达水平高于对照组(P＜0.05);CD4+T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组(P＜0.01);CD4+T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组(P＜0.05).CD8+T细胞内p27kipl的表达水平高于对照组(P＜0.05);CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组(P＜0.01);CD8T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PS通过抑制CD4+T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kipl的表达,抑制CD4+T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4+T细胞增殖;通过下调CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kippl的表达,抑制CD8+T细胞DNA合成.

Abstract：

Objective The aim of this study was to observe the effect of pulmonary surfactant (PS)on the cell cycle distribution and expression of cell cycle regulatory proteins in T lymphocyte subsets in patients with asthma attack and evaluate the molecular regulatory mechanism of PS on T lymphocyte subsets cell proliferation cycle during asthma attack and its therapy significance. Methods The CD4+、CD8+ T lymphocytes obtained from peripheral blood of 30 patients with asthma attack were incubated with PS,the cell cycle and the expression of p27kipl , CyclinE, CyclinA, CyclinB in CD4+ , CD8+ T lymphocytes with PS and without PS were anasyzed by flow cytometry. Results CD4 + T lymphocytes with PS progressed into S phase and G2/M phase were significantly lower than those without PS( P ＜0.01). But remained in G0/G1 phase were significantly higher than those without PS (P ＜ 0.01). CD8+ T lymphocytes with PS progressed into S phase were significantly lower than those without PS( P ＜0.01),G2/M phase were little lower than those without PS( P ＞ 0.05), Go/G1 phase were higher than those without PS( P ＜0.05). The expression of p27kipl in CD4+T lymphocytes with PS was higher than that without PS( P ＜0.05). The expression of cyclinE in CD4+ T lymphocytes with PS was significantly lower than that without PS( P ＜0.01 ). The expression of cyclinA,cyclinB in CD4+ T lymphocytes with PS were lower than those without PS( P ＜0.05). The expression of p27kipl in CD8+ T lymphocytes with PS was higher than that without PS( P ＜0.05). The expression of cyclinE and cyclinA in CD8+ T lymphocytes with PS were significantly lower than that without PS( P ＜0. 01). The expression of cyclinB in CD8+ T lymphocytes with PS was little lower than that without PS( P ＞0.05). Conclusions During asthma attack,PS can inhibit the DNA synthesis, cell division and proliferation of CD4+T lymphocytes by inhibiting positive cell cycle regulatory proteins cyclinE, cyclinA, cyclinB expression and increasing negative cell cycle regulatory protein p27kipl expression in CD4+ T lymphocytes. PS can inhibit the DNA synthesis of CD8+ T lymphocytes by inhibiting positive cell cycle regulatory proteins cyclinE, cyclinA,expression and increasing negative cell cycle regulatory protein p27kipl expression in CD8+ T lymphocytes.