雌激素替代治疗阿尔茨海默病的机制：生后不同发育时期小鼠基底前脑内雌激素β受体的表达

目的：研究出生后不同发育时期小鼠基底前脑内雌激素β受体（estrogen receptor β，ER—β)的表达，探讨雌激素替代治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的机制。方法：选择出生0，3，7，14d，1，3，12，18个月的小鼠，每个时相点各5只。动物前脑经多聚甲醛-丙烯醛混合固定液固定、冷冻切片后于一抗(兔抗ER-β，sc-8974)内孵育过夜，再行常规的免疫组化并用硫酸镍铵增强DAB的显色。结果：小鼠基底前脑内ER—β免疫阳性物质位于细胞核。新生时在两性基底前脑ER—β免疫阳性细胞数目较少，生后第14天～3月龄时最多，老年(18月龄)时表达显著减少甚至消失，尤其在雌性更明显。ER—β的表达具有一定的性别差异，表现为生后早期和老年时雄性表达强于同期雌性。结论：小鼠生后不同发育时期基底前脑内ER-β蛋白的表达呈现弱-强-弱的变化模式，表明该受体可能参与了雌激素对基底前脑神经结构与功能的调节从而可能对AD的发病产牛影响，也可能是雌激素替代治疗AD的重要机制。     

雌激素受体β亚型的表达和定位对性功能的调节作用

目的为进一步研究雌激素受体β亚型( ERβ)对小鼠睾丸发育及性功能调节的作用,观察了出生后 1,2,3,4周的小鼠睾丸和成年小鼠睾丸中 ERβ的表达和分布情况.方法采用出生 1,2,3,4周雄性昆明小鼠的发育过程以及成年雄性昆明小鼠各 2只 ,分成 2组 ,第 1组 4只 ,第 2组 4只.采用免疫组织化学染色和免疫荧光组织化学染色方法检测小鼠睾丸中 ERβ.结果小鼠睾丸中 ERβ的表达随出生时间增长而呈逐渐上升的趋势,在出生后 1,2周的小鼠睾丸中 ERβ主要分布于睾丸间质细胞,在出生后 3,4周小鼠睾丸中 ERβ分布于睾丸间质细胞胞质和细胞核,核仁呈阴性,成年小鼠睾丸间质细胞中 ERβ分布较幼年小鼠密度增加.结论 ERβ在小鼠睾丸发育过程中可能作为一种特异性受体通过睾丸间质细胞影响和调节雄性激素的分泌进而对生精过程和精子的成熟有重要的调节作用.     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α的表达

目的：观察穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α表达的变化,了解穹窿海马伞切断对雌激素受体α表达的影响.方法：实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成.取成年健康雌性Wistar大鼠14只随机分为模型组和对照组,每组7只.模型组大鼠切断双侧穹窿海马伞,对照组不切断穹窿海马伞.所有大鼠术后第28天麻醉状态下处死,取脑组织行雌激素受体α免疫细胞化学染色,观察脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位雌激素受体α阳性细胞表达变化.结果：14只大鼠全部进入结果分析.模型组大脑皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α阳性细胞数显著少于对照组[（25.71&;#177;1.11）,（58.69&;#177;30.26）个;（3.31&;#177;1.11）,（52.31&;#177;22.52）个,P＜0.01];脑海马CA1区和杏仁复合体区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较无差异（P＞0.05）.结论：穹窿海马伞切断导致大鼠皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达减少,这种病理变化可能与基底前脑Meynert核到皮质的胆碱能神经蜕变有关.     

穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α的表达

目的:观察穹窿海马伞切断大鼠不同脑区雌激素受体α表达的变化,了解穹窿海马伞切断对雌激素受体α表达的影响。方法:实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。取成年健康雌性Wistar大鼠14只随机分为模型组和对照组,每组7只。模型组大鼠切断双侧穹窿海马伞,对照组不切断穹窿海马伞。所有大鼠术后第28天麻醉状态下处死,取脑组织行雌激素受体α免疫细胞化学染色,观察脑海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位雌激素受体α阳性细胞表达变化。结果:14只大鼠全部进入结果分析。模型组大脑皮质区和基底前脑 Meynert核区雌激素受体α阳性细胞数显著少于对照组[(25．71±1．11), (58．69±30．26)个;(3．31±1．11),(52.31±22．52)个,P<0．01];脑海马CA1区和杏仁复合体区雌激素受体α阳性细胞数与对照组比较无差异(P>0．05)。结论:穹窿海马伞切断导致大鼠皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达减少,这种病理变化可能与基底前脑Meynert核到皮质的胆碱能神经蜕变有关。     

子宫内膜异位症患者异位内膜间质细胞雌激素受体-a、雌激素受体-β的表达

目的:观察雌激素受体-a(ER-a)和雌激素受体-a(ER-β)在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中的表达,探讨其与子宫内膜异位症发生机制的关系.方法:应用体外细胞培养.流式细胞术栓测等方法,检测子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中ER-a和ER-β的表达.结果:子宫内膜异位症患者ER-a及ER-β在异位内膜间质细胞中的含量均低于在位内膜和子宫肌瘤患者在位内膜,但两组受体间均无明显差异.结论:子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜间质细胞中ER-a和ER-β表达有明显差异,表明除了已知的ER-a对子宫内膜增殖和分化有作用外,ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响,并提示深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展、临床生物特性、治疗及预后有重要价值.     

子宫内膜异位症病人雌激素受体亚型和VEGF表达

目的探讨雌激素受体亚型、血管内皮生长因子（VEGF）的表达与子宫内膜异位症（EMs）的相关性及其预后的关系。方法采用免疫组化法检测79例EMs病人异位内膜组织及20例正常子宫内膜标本中的雌激素受体亚型-α（ER-α）、雌激素受体亚型-β（ER-β）及VEGF的表达情况,并分析其与EMs预后的关系。结果异位内膜组ER-α、ER-β阳性表达率及表达强度均低于正常子宫内膜组（χ^2=9.98、4.23,P〈0.01、0.05）,VEGF阳性表达率高于正常子宫内膜组（χ^2=4.11,P〈0.05）。异位内膜VEGF高表达的EMs病人复发率明显高于低表达者（χ^2=6.39,P〈0.05）;异位内膜中ER-α高表达者VEGF表达率亦相应较高,ER-α低表达者其VEGF表达率亦相应较低（r=0.93,P〈0.01）。结论ER-α、ER-β可能参与了EMs发生发展的病理过程及异位内膜血管生成的调节,检测VEGF的表达对于估计EMs的预后可能有重要临床价值。     

雌激素受体β亚型的表达和定位对性功能的调节作用

目的 为进一步研究雌激素受体β亚型(ERβ)对小鼠睾丸发育及性功能调节的作用。观察了出生后1，2，3，4周的小鼠睾丸和成年小鼠睾丸中ERβ的表达和分布情况。方法 采用出生1，2，3，4周雄性昆明小鼠的发育过程以及成年雄性昆明小鼠各2只，分成2组．第1组4只，第2组4只。采用免疫组织化学染色和免疫荧光组织化学染色方法检测小鼠睾丸中ERβ。结果 小鼠睾丸中ERβ的表达随出生时间增长而呈逐渐上升的趋势，在出生后1，2周的小鼠睾丸中ERβ主要分布于睾丸问质细胞。在出生后3，4周小鼠睾丸中ERβ分布于睾丸间质细胞胞质和细胞核，核仁呈阴性，成年小鼠睾丸间质细胞中ERβ分布较幼年小鼠密度增加。结论ERB在小鼠睾丸发育过程中可能作为一种特异性受体通过睾丸间质细胞影响和调节雄性激素的分泌进而对生精过程和精子的成熟有重要的调节作用。     

葛根素体外影响小鼠胚胎长骨雌激素受体β表达的作用

目的:以体外培养小鼠胚胎长骨为靶器官,观察葛根素对骺板雌激素受体亚型雌激素受体β分布及含量的影响,并与内源雌激素比较,分析葛根素对骨可能的作用机制。方法:实验于2003-05/2004-05在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以小鼠胚胎长骨为靶器官,以雌二醇1×10-6mol/L处理为阳性对照组,同时设空白对照组、葛根素干预组分为1×10-6,1×10-5,1×10-4mol/L3个浓度组。①小鼠怀孕16d时取出胚胎,剔除雌性胎鼠前肢肌肉和软组织,剥离出尺骨,做为实验靶器官置于BGJb培养基中,葛根素和雌二醇作用48h后,测量长骨总长和骨干长。每组培养长骨8根,重复3次。②长骨固定、脱钙后作石蜡切片,进行免疫组织化学染色,光镜下观察阳性细胞定位,图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果:雌性胎鼠长骨全部进入结果分析,无脱失。①长骨经葛根素和经雌二醇处理48h后,葛根素1×10-4,1×10-5mol/L组及阳性对照组骨总长及骨干长与空白对照组相比,差异有非常显著性意义[(3.97±0.12),(1.51±0.07);(3.79±0.06),(1.40±0.03);(4.05±0.1),(1.62±0.05);(3.43±0.05,1.24±0.04)mm;P<0.01],葛根素10-6mol/L组仅骨总长与空白对照组相比差异有显著性意义[(3.56±0.06)mm,P<0.05];葛根素1×10-4mol/L的作用与阳性对照组差异无统计学意义(P>0.05),1×10-5,1×10-6mol/L组作用弱于阳性对照组(P<0.01)。②空白对照组骺板静止区和肥大区雌激素受体β蛋白几乎不表达,仅增殖区有较弱表达。经葛根素和1×10-6mol/L雌二醇作用后,增殖区表达明显增强,肥大区和静止区软骨细胞也都出现雌激素受体β蛋白的阳性表达。葛根素1×10-6,1×10-5,1×10-4mol/L组阳性细胞数和阳性细胞面积均小于阳性对照组[29.8±2.9,43.5±5.1,63.3±5.8,83.3±6.9,(819.78±164.53),(1175.76±188.73),(1585.15±198.93),(2036.12±384.23)μm2,P<0.01～0.05],作用明显弱于雌二醇,并表现出剂量依赖的趋势。结论:葛根素在体外可促进软骨内成骨。同雌激素一样,葛根素也能够上调骺板雌激素受体β的表达。提示葛根素对软骨内成骨的促进作用可能与其上调雌激素受体β在骺板的表达有关。     

雌激素受体与乳腺癌

介绍不同亚型的雌激素受体（ER-α及ER-β）的结构、功能、分布及表达差异，阐述其检测方法及临床应用的价值。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠皮质区及Meynert核区雌激素受体α的表达

目的:观察穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内皮质区、基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达的变化,探讨胆碱能和雌激素系统与认知障碍相关的发病过程。方法:实验于2003-03/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室(省级重点实验室)完成。①分组:成年健康雌性Wistar大鼠28只,分为穹隆-海马伞切断组、卵巢切除组、穹隆-海马伞切断加卵巢切除组、对照组,每组7只。②模型制备:穹隆-海马伞切断组动物麻醉固定于脑立体定位仪后,于前囟后2.2～2.5mm,中线外1mm处凿开颅骨,切开硬脑膜,自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除组动物麻醉后,打开腹腔,在肾脏下方的脂肪内取出卵巢,结扎并切除。对照组除不切断卵巢和穹隆-海马伞外,其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色法观察皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α阳性细胞表达变化。Olympus光学显微镜下(10×40倍)计数平均单个视野雌激素受体α阳性细胞的数量。结果:28只大鼠均进入结果分析。在皮质区,Meynert核区雌激素受体α表达阳性细胞数:双侧穹隆-海马伞切断组,双侧卵巢切除组,双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区:(25.71±1.11),(18.29±7.99),(20.31±8.96),(58.69±30.26)个/视野;Meynert核区:(3.31±1.11),(3.83±1.34),(2.26±2.45),(52.31±22.52)个/视野,(P<0.01)]。结论:穹隆-海马伞切断和/或卵巢切除可以影响大鼠皮质区和Meynert核区雌激素受体α的表达,认为胆碱能系统与雌激素系统可能存在内在的相互作用的病理过程。     

子宫内膜异位症患者异位内膜间质细胞雌激素受体-a、雌激素受体-β的表达

目的：观察雌激素受体-α（ER-α）和雌激素受体-β（ER-β）在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中的表达，探讨其与子宫内膜异位症发生机制的关系。方法：应用体外细胞培养，流式细胞术检测等方法，检测子宫内膜异住症患者在位及异住内膜间质细胞中ER—α和ER—β的表达。结果：子宫内膜异住症患者ER-α及ER-β在异位内膜间质细胞中的含量均低于在位内膜和子宫肌瘤患者在位内膜，但两组受体间均无明显差异。结论：子宫内膜异住症患者在位内膜和异位内膜间质细胞中ER—α和ER—β表达有明显差异，表明除了已知的ER—α对子宫内膜增殖和分化有作用外，ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响，并提示深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展、临床生物特性、治疗及预后有重要价值     

雌激素对雌鼠下尿路雌激素受体表达的影响

目的 研究雌激素对去势雌性大鼠膀胱和尿道组织中雌激素受体（ER）α和β亚型表达的影响。 方法 30只成年雌性大鼠分别假手术处理、卵巢切除、卵巢切除术后苯甲酸雌二醇替代治疗,应用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot方法分析大鼠膀胱底部、膀胱颈部及尿道组织中ERα和ERβmRNA及蛋白表达。 结果 Sham组中,ERαmRNA及蛋白在尿道组织中的表达高于膀胱底部和膀胱颈部,ERβmRNA及蛋白在膀胱底部和膀胱颈部的表达则远高于尿道组织。去势使大鼠膀胱尿道ERαmRNA及蛋白表达增加,补充雌激素治疗使其减少接近假手术组。大鼠膀胱尿道ERβmRNA及蛋白表达在不同雌激素状态下无明显变化。结论 ERβ是主要分布于膀胱,ERα主要分布于尿道组织中。雌激素对雌性大鼠下尿路的调控作用主要通过ERα介导。     

神经干细胞联合神经生长因子纳米粒海马移植对阿尔茨海默病转基因鼠的影响

目的:观察神经生长因子(NGF)纳米粒对神经干细胞(NSC)在APP/PS1转基因鼠脑内存活、迁移、分化的影响,以及NSC联合NGF纳米粒移植对基底前脑胆碱能神经元及海马、皮层β-淀粉样蛋白(Aβ)的影响。方法:36只12月龄雄性APP/PS1转基因小鼠采用随机数字表法分为AD对照组、NSC移植组、联合移植组,每组12只。另外选取12只12月龄野生型(WT)小鼠作为WT对照组。体外分离培养表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠胎脑来源的NSC。WT对照组和AD对照组于双侧海马分别注射5μL磷酸盐缓冲液(PBS),NSC移植组和联合移植组于双侧海马分别注射等量NSC悬液和NSC联合NGF纳米粒悬液。移植4周后,采用免疫荧光法检测移植NSC的存活、迁移、分化以及基底前脑胆碱能神经元(ChAT)的变化;采用实时荧光定量PCR法(Q-PCR)检测基底前脑ChAT和Lhx8 mRNA表达;采用Western blotting检测各组基底前脑ChAT蛋白表达情况;采用硫磺素T染色检测各组小鼠海马及皮层Aβ斑块的数量。结果:(1)移植4周后,EGFP阳性NSC在脑内存活,广泛迁移至胼胝体远端、皮层及海马深部,并能分化为神经元及星形胶质细胞,联合移植组细胞存活数量更多,并且NSC显示更多复杂的突起形态。(2) NSC移植组和联合移植组基底前脑ChAT神经元数量增加(P0.05),联合移植组ChAT及Lhx8基因表达明显高于NSC移植组(P0.05)。(3) NSC移植组和联合移植组海马及皮层Aβ斑块的数量均未明显减少(P0.05)。结论:NSC联合NGF纳米粒移植可以间接保护基底前脑胆碱能神经元和NSC的存活与成熟,并促进基底前脑ChAT和Lhx8的基因表达,但不能减少海马和皮层中Aβ斑块数量。     

去势与非去势不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达特点

目的:观察去势与非去势雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达水平,并比较其变化特点。方法:实验于2003-02/06在哈尔滨医科大学第二临床医学院科研中心完成。分别取新生,2,4,6,8,10,12个月龄的雌性Wistar大鼠各14只,按月龄分为6组,2,4,6,8,10,12个月龄组,各月龄组再随机分对照组,正常饲养不造模;去势组行卵巢切除造模,每组各7只。两个月后处死。①成骨细胞的生物学特征检测:取新生雌性Wistar大鼠14只用于大鼠成骨细胞体外培养。采用二次酶消化法、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞。采用倒置显微镜观察成骨细胞形态及超微结构。大鼠成骨细胞检验学特征碱性磷酸酶检测采用改良钙钴法,阳性反应为胞质中出现灰黑至深黑颗粒状或片状沉淀。成骨细胞培养上清液碱性磷酸酶及骨钙素检测,采用磷酸对硝基苯酯二钠盐比色法进行碱性磷酸酶检测,测得A值,换算成国际单位。采用放射免疫试剂盒进行骨钙素检测,计数器测定沉淀物cpm值,根据标准曲线得到样品中骨钙素含量。②成骨细胞内雌激素受体检测:应用半定量蛋白印迹酶促底物染色法以及发光法。测得A值,以A值越高,说明雌激素受体β表达越多。结果:纳入84只大鼠分为6组,均进入结果分析。①成骨细胞形态学观察:随着培养时间的延长,细胞伸出较多突起,细胞融合成片,培养12～18d呈多层生长。②大鼠成骨细胞碱性磷酸酶染色结果:镜下见90%的细胞呈碱性磷酸酶染色阳性。③成骨细胞培养上清液碱性磷酸酶及骨钙素含量:成骨细胞碱性磷酸酶和骨钙素明显高于成纤维细胞(P<0.01)。④去势与非去势大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达结果:应用酶促低物染色法测定,非去势组雌激素受体β表达在2个月龄组呈低度表达(90.81±2.20),4,6个月组雌激素受体β开始呈现上升趋势(121.10±5.78,143.20±4.41)至8,10个月组雌激素受体β达到高峰(186.10±6.60,190.90±6.10),10月组以后表达呈现下降趋势;去势组2,4,6,8,10,12个月组雌激素受体β都呈低度表达(87.80±2.51,89.50±2.72,89.81±2.43,90.59±2.34,92.52±2.62,90.39±2.53),除2个月龄组以外,其他各月龄组非去势组均显著高于去势组(P<0.05,0.01)。结论:①本实验采用酶消化法培养的细胞符合成骨细胞的生物学特征,具备成骨细胞功能。②去势大鼠在观察的不同时限点均出现成骨细胞雌激素受体β表达较同月龄非去势大鼠显著减少,说明去势影响成骨细胞内雌激素受体β的表达。     

雌激素、促性腺激素与大鼠成骨细胞雌激素受体β的表达

目的:观察不同剂量雌激素,卵泡雌激素及黄体生成素对大鼠成骨细胞雌激素受体β表达的影响。方法:实验于2004-02/08在哈尔滨医科大学第二临床医学院科研中心完成。①取三四个月龄雌性Wistar大鼠28只用于大鼠成骨细胞体外培养。采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞。观察其形态、改良钙钴法碱性磷酸酶染色,培养上清碱性磷酸酶、骨钙素测定来鉴定成骨细胞。②取2代培养的成骨细胞用无血清培养基培养24h,分为10组:对照组,1×10-10,1×10-8,1×10-6mol/L17β-雌二醇组,10,100,1000U/L黄体生成素组,1×10-7,1×10-6,1×10-5g/L卵泡刺激素组。每组3个孔。对照组加入基础培养基,其他各组分别加入相应终浓度药物,培养24～48h。大鼠成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测应用免疫组织化学法测定,以细胞浆有棕黄色颗粒沉积为阳性。成骨细胞雌激素受体β表达检测应用半定量免疫印渍酶促底物染色法以及化学发光法,以A值越高,说明雌激素受体β表达越多。结果:①成骨细胞形态及特征性鉴定:成骨细胞随培养时间的延长,细胞呈指数增长,分泌碱性磷酸酶和骨钙素,碱性磷酸酶染色阳性率为90%,表现出旺盛的分泌功能。②成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测结果:不同剂量卵泡刺激素组和黄体生成素组对雌激素受体表达无明显影响;雌激素1×10-8mol/L组和1×10-6mol/L组显著高于对照组[(90.95±5.89),(95.12±6.17),(81.44±5.37)个数/100个细胞,t=2.95,P<0.05;t=3.50,P<0.01]。③成骨细胞雌激素受体β表达结果:不同剂量卵泡刺激素及黄体生成素对雌激素受体β的表达无明显影响;随雌激素浓度的增加成骨细胞雌激素受体β表达呈上升趋势。结论:雌激素能促进成骨细胞雌激素受体β的表达,且表现出剂量依赖性。而黄体生成素、卵泡刺激素对雌激素受体β表达无直接影响。     

Genistein对去卵巢后大鼠基底前脑神经元一氧化氮合酶表达及认知功能的影响

目的:观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化。方法:实验于2004-07/2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成。3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组,每组12只。卵巢切除前,各组大鼠行避暗回避实验行为学检测。各组大鼠的处理:①去势组:切除双侧卵巢。②Genistein替代组:切除双侧卵巢后进行Genistein替代,剂量100μg(溶于200μLDMSO)。③雌激素替代组:切除双侧卵巢后进行雌激素替代,皮下注射苯甲酸雌二醇,剂量10μg(溶于100μL无菌芝麻油)。④假手术组:只切开双侧腰肌不触及卵巢,随即缝合伤口,相同条件下存活4周。药物注射隔日1次,时间固定,持续4周,分别于最后1次注射24h后进行灌注固定。各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验。脑切片用NADPH-d组织化学方法染色,观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布,并进行计数和统计分析。结果:实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);去势后行替代治疗1,2周后,各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);替代治疗4周后,Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少,滞留时间比去势组明显延长(P<0.05)。②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色,胞体边界清晰,突起明显,为双极或多极细胞。内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧,呈倒“V”字形排列,体积较小,胞体多呈梭形,各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显。在斜角带核垂直支则呈“人”字形排列,胞体较内侧隔核大,多呈锥形或椭圆形,多为多极神经元。各组大鼠神经元的数目呈动态变化,Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元数目上升,而去势组减少,替代治疗后1,2周内,Genistein或雌激素替代组与去势组之间差异无显著性(P>0.05);第4周时Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元的数目接近于假手术组水平,与去势组间差异有显著性(P<0.01)。结论:去卵巢后行替代治疗能增加大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达,改善大鼠认知功能,可能对中枢神经系统退行性病变起保护作用。     

植物雌激素与突触素表达及空间认知水平的相关性研究

目的观察两种雌激素—α-玉米赤霉醇(α-ZAL)和苯甲酸雌二醇(EB)对β淀粉蛋白毒性片段Aβ25-35所致神经损伤小鼠学习记忆的保护作用。方法选用雌性Balb/C小鼠,经侧脑室注射Aβ25-35造成拟老年性痴呆模型,用Morris水迷宫测其空间学习记忆能力,用RT-PCR,Westernblot等方法观察脑突触素的表达。结果模型组小鼠寻找平台的潜伏期明显延长,经两种雌激素治疗后有明显改善。模型组小鼠海马突触素mRNA表达水平较对照组明显降低,经两种雌激素治疗后其表达明显增强。结论模型小鼠学习记忆能力下降的原因之一与突触素表达下降密切相关。植物雌激素α-ZAL和EB一样能对抗Aβ25-35的毒性作用,促进突触素的表达,从而改善小鼠的学习记忆能力。     

小鼠下颌下腺发育中转化生长因子β受体的表达

背景：小鼠的下颌下腺是研究唾液腺的发育的良好模型,转化生长因子β是器官发育和疾病中重要的生长因子,但是在下颌下腺中转化生长因子β受体的表达以及作用机制至今并不明确。目的：观察胚胎小鼠下颌下腺发育过程中转化生长因子βⅠ型受体和Ⅱ型受体以及p-ERK1／2的表达,揭示转化生长因子β在小鼠涎腺发育中的作用。方法：取C57BL／6J小鼠胚胎期第14.5天的标本,使用转化生长因子βⅠ型受体和Ⅱ型受体以及p-ERK1／2抗体,对小鼠的下颌下腺进行免疫组化染色。取新生小鼠标本,大体观察下颌下腺,并且使用苏木精-伊红染色观察其形态。结果与结论：①小鼠出生时,下颌下腺位于下颌骨下方;苏木精-伊红染色发现小鼠下颌下腺的腺泡、导管和闰管细胞也已经分化完成。②在胚胎期第14．5天,转化生长因子βⅠ型和Ⅱ型受体在腺泡上皮和导管上皮内高表达,而腺体上皮细胞外的间充质没有表达。③p-ERK1／2主要也是表达在下颌下腺的上皮细胞中,与转化生长因子βⅠ型受体和Ⅱ型受体在下颌下腺中的表达基本一致。说明在小鼠下颌下腺的发育过程中,转化生长因子β蛋白可能通过与上皮细胞表面的受体结合,激活ERK信号通路来调节涎腺腺泡和导管的发育。     

雌激素对穹隆-海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的干预作用

目的:观察雌激素对阿尔茨海默病大鼠脑内不同部位烟碱型乙酰胆碱受体表达的干预作用。方法:实验于2003-11在青岛大学医学院脑病研究所进行。取健康雌性Wistar大鼠10只,随机分为穹隆-海马伞切断+卵巢切除组和雌激素组,每组5只大鼠。所有大鼠在脑立体定位仪上切断穹隆-海马伞,并切除双侧卵巢,建立模拟伴有体内雌激素水平下降的阿尔茨海默病动物模型。雌激素组大鼠术后第3天皮下注射雌二醇1mg/kg,以后每7d给药1次,30d后应用免疫组织化学技术观察两组阿尔茨海默病大鼠海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区和基底前脑Meynert核等部位的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞的表达。结果:经补充后10只大鼠进入结果分析。雌激组大鼠脑海马CA1区、脑皮质、杏仁复合体区、Meynert核区的烟碱型乙酰胆碱受体阳性细胞数均高于穹隆-海马伞切断+双侧卵巢切除组(30.20±8.65),(64.40±3.52)个/视野;(41.95±9.63),(96.81±9.13)个/视野;(38.18±9.19),(84.50±5.48)个/视野;(18.18±1.65),(89.33±10.24)个/视野;P<0.01。结论:补充外源性雌激素治疗后阿尔茨海默病大鼠各脑区内的烟碱型乙酰胆碱受体表达显著增加,从而提高了胆碱能神经元的功能。     

褪黑素与乳腺癌雌激素受体表达的相关性分析

目的 研究褪黑素对大鼠乳腺癌组织中雌激素受体表达的影响,分析褪黑素在乳腺癌发生发展中的作用。 方法 选用2月龄清洁级雌性SD大鼠90只,接种大鼠乳腺癌细胞,随机分为注射生理盐水对照组、7.5 mg/（kg·d）注射褪黑素组、15 mg/（kg·d）注射褪黑素组,10 d后乳腺癌大鼠荷瘤模型建立成功并取乳腺癌组织,采用免疫组化法检测乳腺癌中雌激素受体的表达情况。 结果 注射褪黑素组的大鼠乳腺癌组织雌激素受体表达指数低于注射生理盐水对照组,随着注射褪黑素剂量上升,雌激素受体表达指数进一步下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 褪黑素能抑制乳腺癌组织中雌激素受体的表达,可能是褪黑素拮抗乳腺癌发生发展的途径之一。