阿霉素对兔心肾损伤与一氧化氦合酶表达

目的：探讨阿霉素(Adr)对心和肾损伤与一氧化氮合酶(NOS)表达。方法：用治疗剂量阿霉素静脉注射法建立兔心、肾损伤模型组，测定兔心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)；取心和肾组织进行HE染色及超薄切片染色；NADPH组化染色并进行图像分析，观察动物心和肾组织中ALP、Ca-ATP酶和NOS的变化。结果：实验组CO、LVSP均明显低于对照组，LVEDP明显高于对照组；实验组心和肾组织的超微结构受损伤，Ca2-ATP酶活性明显下降，而NOS表达明显上调。结论：治疗剂量阿霉素能够降低心和肾组织中Ca2-ATP酶的活性和上调NOS的表达，是导致心和肾组织损伤的重要原因。     

阿霉素对兔心肾损伤与一氧化氮合酶表达

目的:探讨阿霉素(Adr)对心和肾损伤与一氧化氮合酶(NOS)表达。方法:用治疗剂量阿霉素静脉注射法建立兔心、肾损伤模型组,测定兔心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP):取心和肾组织进行HE染色及超薄切片染色;NADPH组化染色并进行图像分析,观察动物心和肾组织中ALP、Ca~(2+)-ATP酶和 NOS的变化。结果:实验组CO、LVSP均明显低于对照组,LVEDP明显高于对照组;实验组心和肾组织的超微结构受损伤,Ca~(2+)-ATP酶活性明显下降,而NOS表达明显上调。结论:治疗剂量阿霉素能够降低心和肾组织中Ca~(2+)-ATP酶的活性和上调NOS的表达,是导致心和肾组织损伤的重要原因。     

环境钙对中华大蟾蜍肾脏斯钙素-1基因表达与质膜Ca2+-ATP酶活性的影响

目的 探讨血浆钙水平对肾组织斯钙素-1( STC1)基因表达与质膜Ca2+ -ATP酶(PMCA)活性的影响. 方法 将72只成体中华大蟾蜍随机分为3组,分别暴露于添加0.1 moL/L CaCI2的自来水、添加0.03mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的自来水及自来水中,于暴露前及暴露后12、24、48、72、96、120和144h取血浆和肾脏,利用比色法和半定量RT-PCR法分别检测血浆钙水平、PMCA活性和STCl mRNA水平,利用免疫组织化学染色确定STC1免疫反应. 结果 0.1mol/L CaCl2暴露致中华大蟾蜍血浆钙水平在12和24h时升高,48h时降至正常水平,48h后持续升高;12 ～ 48h内肾组织PMCA活性增强,STC1 mRNA水平上调,72h后回复至正常水平.而0.03mol/L EDTA暴露则引起血浆钙水平下降,但肾组织PMCA活性和STC1 mRNA水平与对照组相比未出现明显变化.免疫组织化学技术显示,肾脏远曲小管和集合管上皮细胞出现STC1免疫反应,且0.1mol/L CaCl2暴露可致STC1免疫反应增强. 结论 血浆钙水平升高致肾小管和集合管上皮细胞PMCA活性增强,STC1表达上调,而STC1表达上调又使血浆钙水平下降;但血浆钙水平持续升高则使PMCA活性下降,STC1基因表达下调.     

草酸钙肾结石大鼠模型肾组织中Klotho的表达及其意义

目的:初步探究Klotho在草酸钙肾结石大鼠模型肾组织中的表达及其意义.方法:将30只6～8周龄雄性SD大鼠随机分为结石组和对照组,每组15只,结石组采用乙二醇和氯化铵诱导法构建草酸钙肾结石模型.28 d造模完成后采集大鼠24 h尿液、血清标本,比较两组血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血Ca2+、24 h尿Ca2+及草酸(Ox)指标;采集肾组织标本,HE染色比较各组肾脏病理改变及草酸钙结晶的沉积情况,荧光定量PCR、Western印迹及免疫组织化学染色检测两组肾组织中Klotho mRNA及蛋白表达,并对肾脏氧化应激相关指标总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)进行测定.结果:结石组在光学显微镜观察下可见草酸钙结石晶体沉积并有伴肾小管病理性改变,血清Cr,BUN,24 h尿Ca2+及Ox较对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.01),血Ca2+差异无统计学意义(P＞0.05);结石组Klotho mRNA及蛋白表达较对照组下降,差异有统计学意义(P＜0.01);肾脏氧化应激相关指标中,结石组T-AOC,CAT较对照组降低,MDA较对照组升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:草酸钙肾结石的形成与Klotho表达异常及氧化应激反应有关;Klotho可能通过调控Ca2+代谢和氧化应激反应参与草酸钙肾结石的发病过程.     

地塞米松预处理减轻大鼠再灌注性心律失常的实验研究

目的： 探讨地塞米松预处理对大鼠再灌注性心律失常的作用及机制。方法: SD大鼠随机分成地塞米松组、对照组，分别予地塞米松和生理盐水预处理。预处理后构建缺血再灌注损伤动物模型，观察再灌注期间心律失常的发生；Western blotting法和免疫组化法观察心肌HSP72表达变化；测定心肌MDA、SOD、CAT、GSH-Px水平及心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果: 与对照组相比，地塞米松组室性心律失常的积分减少（P<0.01）、持续时间缩短（P<0.05）；HSP72的表达增加（P<0.05）；MDA降低（P<0.01），SOD、CAT、GSH-Px均升高（P<0.05）；Na+-K+-ATP酶增加（P<0.01），Ca2+-Mg2+-ATP酶无明显变化（P>0.05）。结论: 地塞米松预处理减少再灌注室性心律失常，其机制可能与其上调HSP72、Na+-K+-ATP酶、抗氧化酶的表达及抑制脂质过氧化反应有关。     

生姜透皮帖对运动病大鼠脑内酶学变化的作用

目的:建立运动病模型,观察生姜透皮帖对运动病大鼠脑组织几种生化指标的变化,并探讨其对运动病产生治疗作用的机制.方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分5组,每组8只,每天按实验方法刺激,实验第4天刺激结束后取大脑和小脑皮质、脑干前庭区.采用组织化学定位方法和图像定量分析方法,检测各组大鼠3部位脑组织中碱性磷酸酶(ALP)、 K~+-Na~+-ATP酶及细胞色素氧化酶(CCO)活性.结果:运动病大鼠3部位脑组织中ALP活性显著升高、Na~+-K~+-ATP酶及CCO活性明显减低.使用生姜透皮帖后运动病大鼠3部位脑组织中ALP活性显著减低、Na~+-K~+-ATP酶及CCO活性明显升高.结论:生姜透皮帖可能使脑血管紧张度降低,改善脑血流的分布,增加脑血流,调整脑细胞内CCO、 ALP、 Na~+-K~+-ATP酶的活性,增强脑细胞的兴奋性,从而保持中枢神经系统的兴奋性,起到抗运动病的作用.     

小鼠止血带休克后肾组织ACE/ACE2表达变化及意义

目的: 通过观察小鼠止血带休克(TS)后,不同时点血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素转换酶2(ACE2)在肾脏的表达变化与肾损伤程度的关系,探讨ACE/ACE2表达失衡在TS后肾损伤中的作用。方法: 复制小鼠TS模型,Western blotting测肢体缺血再灌注后12 h内肾组织ACE和ACE2蛋白的表达;利用化学比色方法测定血清和肾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;制作肾病理切片,观察肾组织形态变化,并利用免疫组织化学方法观察ACE和ACE2的表达部位。结果: Western blotting结果显示,各时点与对照组比较,TS后ACE表达升高,ACE2表达降低;与对照组比较血清和肾MDA水平增高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05);HE病理切片显示,TS后各时点肾组织有充血、炎细胞浸润等不同程度损伤;免疫组化结果显示,ACE在肾小管上皮细胞胞浆表达,TS后表达明显增强;ACE2主要在肾小管上皮细胞管腔膜表达,TS后表达明显降低。结论: TS后肾组织ACE表达升高,ACE2表达降低,ACE/ACE2表达失衡可能与肾损伤有关。     

己酮可可碱对新生大鼠缺氧缺血性脑病的保护作用

目的探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemicencephalopathy,HIE)脑组织中ATP酶和炎性细胞因子的影响,揭示PTX对大鼠HIE的保护机制。方法7日龄Wistar大鼠80只随机分为假手术组、缺血组、低氧组、HIE模型组和PTX组。缺血72h后测定脑组织中Na+、K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性,以及TNF-αI、L-1和TXB2含量。结果缺血组、低氧组和HIE模型组Na+、K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性降低(P<0.01),TNF-αI、L-1和TXB2含量升高(P<0.05,P<0.01)。PTX组可显著缓解上述变化(P<0.05,P<0.01)。结论PTX对新生大鼠HIE的保护作用可能与其保护脑组织中ATP酶和降低炎性细胞因子有关。     

白蛋白过载加重阿霉素肾病小鼠肾损害及辛伐他汀的肾脏保护作用

目的:探讨白蛋白过载是否可以通过脂质肾毒性加重阿霉素肾病小鼠肾脏损害及辛伐他汀的肾脏保护作用。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、阿霉素肾病组(ADR组)、白蛋白过载阿霉素肾病组(ADR+BSA组)和白蛋白过载阿霉素肾病辛伐他汀治疗组(ADR+BSA+SIMV组),所有小鼠行左肾切除术,第2周末构建阿霉素肾病模型,第6周末开始构建白蛋白过载模型。0、2、6、10、14周末检测24 h尿蛋白;14周末收集标本,检测血清生化指标;光镜和电镜观察肾脏组织病理;酶比色法和油红O染色法检测肾脏组织脂质水平;real-time PCR法检测肾组织IL-1β、TGF-β1和低密度脂蛋白受体(LDLr)的mRNA表达;免疫组化法检测IL-1β和IL-17的蛋白水平;ELISA检测肾组织匀浆上清IL-17的分泌。结果:与对照组相比,ADR组肾组织IL-1β、TGF-β1、IL-17和LDLr的表达增高(P0.05),肾组织内胆固醇含量升高(P0.05)。ADR+BSA组较ADR组尿蛋白及血清肌酐水平增加,IL-1β、IL-17及LDLr表达均显著增加(P0.05),肾组织脂滴沉积及肾小球硬化加重。而ADR+BSA+SIMV治疗组上述炎症因子表达下调,肾组织内胆固醇含量减少,肾小球硬化程度降低。结论:阿霉素肾病小鼠肾组织内炎症介质可能通过上调LDLr导致肾脏局部脂质沉积,加重肾脏损害;白蛋白过载可进一步加重这一进程;而辛伐他汀可通过降低炎症介质及LDLr的表达减少脂质沉积,对肾脏起保护作用。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肾组织诱生型一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克肾组织iNOS表达的作用。方法　静脉注射内毒素 (LPS) 1 5mg/kg、腹腔注射D 氨基半乳糖糖 (D Ga1N) 10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸干预处理 ,免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)在肾组织内的表达。结果　牛珀至宝微丸可以使肾内iNOS表达减弱 ,肾损伤减轻。结论　牛珀至宝微丸可以减轻内毒素休克造成的肾损伤 ,这种保护作用可能是通过调节肾组织NOS表达而产生的     

哮喘模型大鼠肺组织一氧化氮合酶的分布

研究一氧化氮 (NO)在哮喘大鼠肺组织中的作用。采用组化法观察一氧化氮合酶 (NOS)在大鼠哮喘模型肺组织中的分布 ,应用免疫组化法观察大鼠哮喘模型气道mIL 2R+ 细胞变化。结果显示 ,哮喘大鼠肺NADPH染色呈强阳性 ,并波及肺泡膈。肺组织中NOS含量明显高于对照组 [哮喘组 (37 44± 0 77)pmol/mg,对照组 (8 73± 0 79)pmol/mg],气道炎性细胞增多 ,特别是mIL 2R+ 细胞 [哮喘组mIL 2R+ 细胞为 (2 3 8± 7 9)个 ,对照组为 0个 ],而NOS抑制剂DMA组气道炎性细胞少 ,NADPH呈阴性。提示NO是哮喘大鼠的炎性效应分子。     

绿茶多酚对急性酒精性肝损伤Cyt C水平及酶活力的影响

<正>目的:探讨绿茶多酚对急性酒精性肝损伤的作用机制。方法:酒精灌胃复制小鼠急性酒精性肝损伤模型,酶标光度分析检测肝功能、肝组织ATP酶活力,ELISA检测胞浆及线粒体细胞色素C(Cyt C)。结果:与模型组相比,绿茶多酚高剂量组肝指数、ALT、AST、胞浆及线粒体Cyt C水平降低,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显升高。结论:绿茶多酚改善酒精     

白豆蔻对阿霉素肾病所致大鼠肾损伤和肾纤维化的保护作用及机制

目的 探究白豆蔻对阿霉素肾病所致大鼠肾损伤和肾纤维化的保护作用及可能机制。方法30只SD大鼠随机分成对照组（Control组）、阿霉素肾病组（AN组）和白豆蔻组（AK组）,每组10只。HE染色观察肾组织形态学变化;Masson染色观察肾组织纤维化;ELISA方法检测大鼠血清血肌酐和尿素氮水平及肾组织匀浆MDA和SOD水平;Western blot检测肾组织凋亡相关蛋白和Sirt1/PGC-1α信号通路相关蛋白表达。结果 白豆蔻能改善大鼠肾组织形态,降低组织纤维化,降低血清血肌酐和尿素氮水平,抑制肾组织氧化应激反应,降低肾组织细胞凋亡,激活Sirt1/PGC-1α信号通路。结论 白豆蔻改善阿霉素肾病所致大鼠肾损伤和肾纤维化,其作用机制可能与调控Sirt1/PGC-1α信号通路有关。     

大鼠肢体缺血再灌注后肺组织一氧化氮合酶的变化

目的:研究正常大鼠肺组织内一氧化氮合酶(NOS)的分布及肢体缺血再灌注(LIR)后肺组织内NOS分布及活性的变化。方法:用止血带复制肢体缺血再灌注模型,利用β-NADPH-d组织化学方法、计算机图像分析系统及分光光度法,观察对照组大鼠肺内NOS的分布及LIR组肺内NOS分布及活性的变化。结果:组织学上显示,对照组大鼠呼吸道包括支气管、细支气管、终末细支气管、肺泡管的上皮细胞和血管内皮细胞NOS表达均阳性,肺泡上皮细胞NOS表达阴性;LIR组上述肺组织阳性部位NOS表达增强,且出现血管平滑肌细胞、肺泡上皮细胞NOS表达阳性;生化测定结果显示,LIR组与对照组比较,NOS活性增强,NO₂^-/NO₃^-水平增多。结论:一氧化氮不仅参与肺的生理过程,而且在LIR后急性肺损伤(ALI)病理生理过程中可能发挥重要作用。     

灵芝孢子对大鼠脊神经腹根切断后脊髓运动神经元存活及其NT-3、NOS表达的影响

目的探讨灵芝孢子（萌动激活赤灵芝孢子）对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素-3（NT-3）及一氧化氮合酶（NOS）的影响.方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂交方法检测NT-3的表达;用酶组织化学方法检测NOS的活性.结果腹根切断后35 d,对照组运动神经元存活率为47.32%,灵芝孢子低、中、高剂量组的运动神经元存活率分别为67.11%、72.67%和81.67%;腹根切断后高剂量组存活的运动神经元NT-3和NOS的表达都高于对照组. 结论灵芝孢子促进大鼠脊髓前角受损伤的运动神经元存活,其存活率与用药剂量有关;灵芝孢子促进大鼠脊髓存活的运动神经元表达NT-3和NOS.     

肾缺血-再灌注损伤引起的脑生化改变

目的:观察血清及脑脊液生化成分变化，初步探讨肾缺血-再灌注损伤对脑的影响。 方法: 20只健康新西兰兔随机分为对照组和肾缺血再灌注组（IR组），检测和比较血清和脑脊液中肌酐（Cr）、尿素氮(UN)、Na+ 、Ca2+、一氧化氮（NO）代谢产物含量及脑组织总一氧化氮合酶（NOS）活力。 结果: 在肾缺血再灌注后24 h，IR组血清和脑脊液中的UN、Cr和NO均显著高于对照组（P<0.05），Na+明显低于对照组；IR组血清Ca2+显著低于（P<0.05）、而脑脊液中Ca2+显著高于对照组（P<0.05）。IR组脑组织中NO2-/NO3-含量和NOS活力均明显高于对照组（P<0.05）。 结论: 肾缺血再灌注损伤不仅影响血清成分，而且还可引起脑生化的改变；NO可能参与了肾缺血-再灌注损伤对脑功能的影响。     

兔急性上颌窦炎早期一氧化氮合酶的表达及意义

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)在兔急性上颌窦炎 (AMS)窦粘膜中的表达及其意义。方法 :健康新西兰白兔 36只 ,分为空白、阴性对照组和AMS组。通过阻塞窦口并注入 1.0ml的肺炎链球菌悬液 (10 9CFU)建立AMS模型 ,观察时间点为自手术第 5、10天。应用黄递酶———NADPH组织化学技术 ,以NADPH脱氢酶特异性测定NOS在空白、阴性对照组和AMS组兔上颌窦粘膜中的分布及不同时间点AMS组NOS活性表达。结果 :正常和急性上颌窦炎兔窦粘膜酶化学染色均有反应 ,主要分布于粘膜上皮、血管内皮和腺体细胞 (染色程度与正常组相比 ,P<0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :正常兔上颌窦粘膜存在NOS ,一氧化氮 (NO)与上颌窦急性炎症有关 ,炎症时NOS活性明显增高 ,过多的NO会对组织或细胞产生损伤 ,提示NO在AMS发病机制中有重要意义     

甲基叔丁基醚对大鼠小脑急性毒作用机制

目的:观察甲基叔丁基醚(MTBE)对大鼠小脑Fos蛋白、γ-氨基丁酸(GABA)、ATP酶的影响,探讨MTBE对小脑急性毒作用机制。方法:72只健康成年SD大鼠,腹腔注射MTBE染毒,染毒剂量为0、700、1050、1400mg·kg-1,在各染毒剂量及染毒后0·5、1·0、2·0、4·0、8·0h时,用免疫组织化学方法检测MTBE对大鼠小脑Fos蛋白、GABA的表达并用相对灰度值定量;用分光光度法测定ATP酶的活性。结果:与对照组比较,小脑皮质Fos蛋白、GABA在MTBE染毒后0·5h时表达增加,1·0h达到高峰,2·0h时减弱,8·0h时恢复至正常;Na ,K -ATP酶、Ca2 -ATP酶的活性染毒后1·0h时降低,染毒后8·0h时其活性无变化。结论:MTBE可作用于小脑,其急性毒作用可能与神经递质GABA含量的改变有关;MTBE可降低大鼠小脑Na ,K -ATP酶、Ca2 -ATP酶的活性,改变神经细胞能量代谢。     

黄芪多糖对麻黄素损伤小鼠肾组织Bcl-2、转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的:观察Bcl-2及转化生长因子-β1(TGF-β1)在给予黄芪多糖(APS)的麻黄素损伤小鼠肾组织中表达的变化,探讨黄芪多糖对麻黄素致损伤小鼠肾的保护作用。方法:腹腔注射麻黄素溶液后,低、高剂量APS溶液灌胃。采用比色法测定肾组织过氧化氢酶(CAT)活性的变化,免疫组织化学和免疫印迹检测肾组织Bcl-2及TGF-β1蛋白表达的变化。结果:实验对照组小鼠肾组织CAT活性显著低于空白对照组,低、高剂量APS组肾组织CAT活性显著高于实验对照组;实验对照组小鼠肾组织Bcl-2、TGF-β1蛋白表达量显著高于空白对照组,低、高剂量APS组肾组织Bcl-2、TGF-β1显著低于实验对照组。结论:APS能提高麻黄素损伤小鼠肾组织抗氧化酶活性,降低肾组织Bcl-2、TGF-β1蛋白的表达,对麻黄素致损伤小鼠肾组织有明显的保护效应。     

大鼠肾缺血再灌注损伤肝内过氧化酶Ⅰ、过氧化氢酶、细胞外超氧化物歧化酶的表达变化

目的:观察大鼠肾缺血再灌注损伤模型肝的功能、形态、氧化应激水平以及抗氧化酶过氧化酶Ⅰ(PrxⅠ)、过氧化氢酶(CAT)、细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)的表达变化,探讨肾缺血再灌注损伤对肝的影响及PrxⅠ、CAT、EC-SOD的抗氧化作用.方法:通过无损伤动脉夹钳夹肾动脉法建立肾缺血再灌注损伤模型.再灌注24 h后取血、肝和肾.血清ALT活性采用速率法测定,血清SCr含量采用苦味酸法测定;血清BUN含量采用酶耦联速率法测定.采用H-E染色观察肝、肾的形态学改变.肝组织MDA含量采用硫代巴比妥酸比色法测定;肝组织H2O2含量采用分光光度法测定.抗氧化酶PrxⅠ、CAT、EC-SOD mRNA表达水平采用RT-PCR的方法测定,其蛋白水平的表达变化采用免疫印迹测定.结果:肾缺血再灌注损伤组大鼠血清SCr含量、BUN含量和ALT活性均高于对照组;H-E染色结果显示模型组大鼠肾组织、肝组织形态结构均明显受损.肝组织内的MDA含量和H2O2含量明显高于对照组,PrxⅠ、CAT、EC-SOD的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比也明显升高.结论:肾缺血再灌注损伤可导致肝遭受过氧化损伤,形态结构和功能受损,PrxⅠ、CAT、EC-SOD在此过程中可能发挥了抗氧化应激作用,对肝具有保护功能.