γ-生育三烯酚与5-氟尿嘧啶联用对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用

目的离体条件下研究γ-生育三烯酚(γ-tocotrienol,γ-T3)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制的作用方式。方法采用CCK-8法用不同浓度5-FU(0、30、50、70、90、110μmol/L)、不同浓度γ-T3(0、5、10、20、30、40μmol/L)以及不同浓度5-FU(0、30、50、70、90、110μmol/L)联合γ-T3(20或30μmol/L)分别作用于对数生长期的SGC-7901细胞48h,测定各药物对SGC-7901细胞增殖抑制率,并通过两药相互作用系数(coefficient of drug interaction,CDI)值[1]判定5-FU和γ-T3联合作用效果。用AnnexinⅤ-FITC/PI双染的流式细胞术法分别检测5-FU(30μmol/L)和γ-T3(20μmol/L)单独应用及两药联合应用48h诱导SGC-7901细胞凋亡情况。结果 5-FU和γ-T3均可抑制SGC-7901细胞的增殖,并随着浓度的增加抑制作用增强(P<0.05),增殖抑制作用呈明显的剂量效应关系;而联合应用与对照组和单药组相比对SGC-7901细胞的增殖抑制作用增强,有增效作用,其差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术凋亡结果表明,5-FU和γ-T3均可诱导SGC-7901细胞发生凋亡的作用(P<0.05),5-FU和γ-T3联合较单独应用,诱导细胞凋亡的作用增强(P<0.05)。结论γ-T3与5-FU联合用药与单独用药相比对人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制及诱导凋亡有明显的增效作用。     

虎杖苷对神经母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨虎杖苷对神经母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及机制。方法:以不同梯度浓度的虎杖苷处理神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞24、48和72 h, CCK-8法检测细胞增殖,并计算其IC₅₀。1 120.00μmol/L的虎杖苷处理SH-SY5Y细胞72 h后(以不加虎杖苷处理为空白对照组),采用Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70 S6K、p-p70 S6K蛋白的表达。结果:虎杖苷可有效抑制SH-SY5Y细胞的增殖,72 h的IC₅₀为1 120.00μmol/L。与空白对照组相比,1 120.00μmol/L的虎杖苷作用72 h后,SH-SY5Y细胞凋亡率增加(P<0.05);细胞周期中S期的细胞比例增高(P<0.05),G₀/G₁期细胞比例下降(P<0.05);PI3K、AKT、p-AKT、p-p70 S6K蛋白表达降低(P<0.05),而mTOR...     

新型小分子化合物cyy-287联合CDK抑制剂roscovitine抑制SBC-2细胞生长的机制

目的：探讨新型小分子化合物cyy-287联合细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂roscovitine抑制小细胞肺癌细胞SBC-2生长的机制。方法：取对数生长期的SBC-2细胞,通过MTS检测cyy-287和顺铂(DDP)的IC₅₀值,以及cyy-287和roscovitine联合使用的联合指数(CI)。cyy-287与roscovitine联用抗肿瘤活性实验分组：DMSO(对照)组、roscovitine(20μmol/L)组、cyy-287(1.5μmol/L)组、cyy-287+roscovitine组。通过克隆形成实验检测各组药物处理后肿瘤细胞的生长和增殖情况;流式细胞术测定细胞周期分布和凋亡比例的变化情况。采用Western blot法检测各组CL-PARP的蛋白表达水平,以及AKT的磷酸化水平。结果：cyy-287对SBC-2的IC₅₀值为(1.77±0.10)μmol/L,与roscovitine联合使用的CI<1,说明两药联合使用存在协同作用。与cyy-287组比,cyy-287+roscovitine组能够显著抑制S...     

欧前胡素抑制人肾癌786-O细胞增殖并促进其凋亡

目的 探究欧前胡素(imperatorin)对人肾癌细胞786-O增殖及凋亡的影响，初步研究其作用机制。方法 分别使用0,20,40,60,80,100,120,140,160,180,200μmol/L的欧前胡素处理786-O细胞24,48,72 h后，CCK-8法检测786-O细胞增殖，并计算IC₅₀,筛选最佳干预浓度进行后续实验。生物显微镜观察细胞形态变化；CCK-8实验和克隆形成实验检测各组细胞增殖能力的变化；流式细胞术检测各组细胞凋亡的情况；RT-qPCR和Western blot方法检测各组Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2的表达情况。从TCMSP和HERB数据库收集欧前胡素作用靶点。由GeneCards数据库获取肾癌疾病靶点，使用STRING数据库构建蛋白互作网络，并筛选欧前胡素治疗肾癌的核心靶点。结果 欧前胡素作用786-O细胞24 h和48 h的IC₅₀分别为94.36μmol/和65.66μmol/L。与0μmol/L组相比，40μmol/L组786-O细胞体积减小，细胞密度略减少，增殖能力受到抑制...     

三苯氧胺联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌细胞HT-29的抑制作用

目的 探讨三苯氧胺(tamoxifen,TAM)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌细胞株HT-29的增殖、凋亡及细胞迁移的影响.方法 采用MTT法、流式细胞仪分别检测不同浓度(12.5、25、50 μmol/L)5-FU及其联合TAM对HT-29细胞增殖的抑制作用、细胞凋亡的诱导作用,应用细胞划痕实验检测TAM(1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L)、5-FU及其联合TAM对细胞迁移的抑制作用.结果 5-FU及其联合TAM均可提高HT-29细胞增殖抑制率,单用5-FU的抑制率分别为(50.8±8.9)%和(62.8±8.8)%和(69.7±9)%,12.5 μmol/L 5-FU联合低浓度TAM(1×10-7、1×10-6 mol/L)的抑制率分别为(82.9±2.9)%和(84.0±1.6)%,其作用呈剂量依赖关系;高浓度(1×10-4mol/L)TAM联合12.5 μmol/L 5-FU表现出明显的促细胞凋亡作用[凋亡率为(95.7±4.2)%];划痕实验证实经1×10-6和1×10-5mol/L TAM及单用5-FU处理HT-29细胞72 h后均可明显地抑制细胞的迁移,但联合用药未显示出较TAM单药更明显的抑制作用.结论 TAM和5-FU均具有抑制细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的作用,TAM亦可增加结肠癌细胞株HT-29对5-FU的敏感性.     

Fe3+抑制醋酸棉酚对脑胶质瘤细胞的杀伤作用

目的：探讨人脑胶质瘤微环境中Fe³⁺对醋酸棉酚(gossypol acetate, GAA)杀伤脑胶质瘤细胞的影响。方法：用不同浓度GAA(0、5、10、15、20、25 μmol/L)处理人脑胶质瘤LN229、SW1783、U87MG、U251MG细胞,CCK-8法检测细胞活性,计算GAA半数致死量(IC₅₀)。将4种脑胶质瘤细胞各分为4组：对照组、Fe³⁺组、GAA组、Fe^{3+ ₊}GAA组,分别予以培养基,FeCl ₃·6H₂O,GAA,FeCl₃·6H₂O+ GAA处理。GAA浓度以各胶质瘤细胞IC₅₀为准,FeCl₃·6H₂O浓度与GAA浓度相同。CCK-8法检测细胞活性;Transwell实验检测细胞迁移情况;运用流式细胞术分析脑胶质瘤细胞凋亡水平。结果：GAA显著抑制胶质瘤细胞活性,对LN229、SW1783、U87MG、U251MG细胞IC₅₀分别为9.38、9.56、14.53、10.39 μmol/L。与对照组相比,Fe³⁺组细胞增殖变化不明显,GAA组细胞增殖和迁移显著抑制(P<0.05);与GAA组相比,Fe³⁺ +GAA组细胞活性和迁移能力明显增强(P<0.05),细胞凋亡水平显著降低(P<0.05)。结论：Fe ³⁺抑制GAA对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。     

对香豆酸诱导弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞内质网应激介导的凋亡

目的 探讨对香豆酸诱导弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞内质网应激介导的凋亡。方法 选择弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY1),以不同浓度对香豆酸(0、0.4、0.8、1.6、3.2 mmol/L)作用于OCI-LY1细胞,采用CCK8法检测其抑制率及半数抑制浓度(IC₅₀);随后设置分组：(1)空白对照组、对香豆酸(1/2 IC₅₀组、IC₅₀组、2 IC₅₀组);(2)空白对照组、对香豆酸IC₅₀组、4-PBA组(5 mmol/L)、4-PBA+IC₅₀组,采用CCK8检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞GRP78、ATF6、CHOP、p-PERK、p-IRE1α蛋白相对表达量。结果 对香豆酸以剂量依赖性方式抑制OCI-LY1细胞增殖,其IC₅₀值为2.601 mmol/L;与空白对照组相比,1/2 IC₅₀组、IC₅₀组、2 IC_5...     

氯化两面针碱促进骨髓瘤细胞凋亡的机制研究

目的 探究氯化两面针碱促进骨髓瘤细胞凋亡的机制。方法 将人多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI 8226培养至对数生长期,采用CCK-8法检测细胞活性并测定半数抑制浓度(IC₅₀)。将MM细胞株RPMI8226随机分为空白组、硼替佐米(BTZ)组、氯化两面针碱(NCe)组和BTZ+NCe组。BTZ组加入500μL10 nmol/L BTZ溶液,参照IC₅₀在NCe组加入500μL 4.5μmol/L NCe,BTZ+NCe组加入250μL 10 nmol/L BTZ和250μL 4.5μmol/L NCe,继续培养24 h。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting检测各组细胞STK4、YAP1、Cl-caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果 与空白孔相比,其余各孔的细胞存活率均降低(P <0.05);与0μmol/L NCe孔比较,1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L NCe孔的细胞存活率均降低(P <0.05)。孵育24 h的IC_50<...     

白藜芦醇联合5-FU对人乳腺癌细胞系MCF7的促凋亡作用

目的:研究白藜芦醇联合5-FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用. 方法:4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDA-MB-231,SK-BR-3和Bcap-37)与不同浓度的白藜芦醇或/和5-FU共孵育48 h,MTT法检测细胞存活率,并用相差显微镜观察细胞形态学改变. 用流式细胞术(检测细胞凋亡相关指标Annexin V/PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡. 结果:白藜芦醇能够不同程度地抑制4种人乳腺癌细胞系(MCF7, MDA-MB-231,SK-BR-3和Bcap-37)的生长. 白藜芦醇对MCF7,MDA-MB-231,SK-BR-3和Bcap-37细胞的IC50(半数抑制浓度)分别为65,207,139和213 μmol/L. 单用5-FU对MCF7细胞的IC50为13 μmol/L,联合使用5-FU和白藜芦醇的IC50分别为9 μmol/L和3 μmol/L. 与单用组相比,65 μmol/L白藜芦醇和13 μmol/L 5-FU联合使用后,MCF7细胞Annexin V水平升高. Hoechst33258荧光染色和流式细胞术分析MCF7细胞的结果一致. 结论:白藜芦醇与5-FU合用可协同促进MCF7细胞凋亡,提示白藜芦醇可能用作治疗乳腺癌的二线化疗药.     

血根碱基于PI3K/AKT通路抑制结肠癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的 研究血根碱在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其机制。方法 使用不同剂量(2、4、8μmol/L)血根碱对结肠癌细胞系(HCT-8、SW-620)进行处理，利用光学显微镜观察结肠癌细胞形态变化；细胞计数试剂CCK-8及细胞克隆试验观察血根碱对结肠癌细胞生长的影响；细胞划痕实验测定血根碱对结肠癌细胞迁移的影响；蛋白质印迹法测定相关蛋白E-钙黏蛋白(Ecad)、N-钙黏蛋白(N-cad)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。建立HCT-8皮下瘤体模型，分别采用生理盐水和10 mg/kg的血根碱液进行腹腔内灌注，以探讨其对结肠癌的抑制作用。结果 CCK-8实验表明，血根碱对结肠癌细胞有明显杀伤作用[HCT-8和SW-620的IC₅₀分别是(3.40±0.03)μmol/L和(5.32±0.12)μmol/L]，而对正常结肠黏膜细胞具有较小的杀伤作用[IC₅₀为(14.98±1.34)μmol/L]。不同浓度(0、2、4、8μmol/L)的血根碱以剂...     

硼替佐米靶向NF-κB信号通路抑制结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的研究

  目的  研究硼替佐米对结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（ENKTL）的抗肿瘤作用。  方法  单独使用不同质量浓度（0、1、2、4、5、6 ng/mL）硼替佐米处理SNK-6细胞24、48、72 h,及不同浓度核因子-κB （NF-κB）信号通路抑制剂BAY11-7082（0、1、2.5、5、10、20 μmol/L）处理SNK-6细胞24 h后,采用CCK8法检测细胞存活率并计算其半数抑制浓度（IC₅₀）。联合使用30 μmol/L Z-VAD-FMK（Pan-caspase抑制剂）+3 ng/mL硼替佐米,以及5、10 μmol/L BAY11-7082+3 ng/mL硼替佐米处理SNK-6细胞24 h,CCK8法检测细胞存活率。不同质量浓度硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,采用Annexin Ⅴ/PI流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶（PARP）和Bcl-2的表达,检测NF-κB信号通路相关蛋白P65和P100/52的表达。  结果  硼替佐米可呈剂量依赖性的抑制SNK-6细胞增殖（P<0.05）,24 h IC₅₀﹝（2.87±0.06） ng/mL﹞低于48 h和72 h（P<0.05）。BAY11-7082亦可抑制SNK-6细胞增殖,24 h IC₅₀= （9.73±0.36） μmol/L。联合用药结果表明,Z-VAD-FMK能减弱硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用（P<0.05）,BAY11-7082能增强硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用（P<0.05）。硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,凋亡相关蛋白Caspase-3裂解、PARP激活,以及Bcl-2裂解;NF-κB信号通路相关蛋白P65磷酸化水平降低,P52减少。  结论  硼替佐米通过阻断NF-κB信号通路抑制ENKTL细胞增殖,并且经线粒体介导的Caspase途径诱导ENKTL细胞凋亡。     

白藜芦醇通过上调miR-361-3p逆转卵巢癌顺铂耐药的研究

目的 研究白藜芦醇(RES)逆转卵巢癌顺铂(DDP)耐药的作用机制。方法 选取人卵巢癌SKOV3细胞,采用DDP构建SKOV3/DDP耐药细胞株。使用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测RES和DDP对SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)和增殖能力的影响;采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测RES对微RNA-361-3p(miR-361-3p)的调控作用;采用流式细胞术检测RES和DDP对细胞凋亡的作用;细胞转染miR-361-3p抑制剂后检测DDP对细胞增殖和凋亡的作用。采用Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路关键蛋白的表达。结果 RES终浓度4μmol/L对SKOV3/DDP细胞生长无明显抑制作用(P>0.05),可作为最大安全浓度。RES+DDP组的IC₅₀明显低于DDP组(P<0.05)。RES可明显上调SKOV3/DDP细胞miR-361-3p的表达(P<0.05)。miR-361-3p抑...     

异丙酚对卵巢癌进展和顺铂敏感性的影响及机制

目的 探讨异丙酚对卵巢癌进展及顺铂(DDP)敏感性的影响及机制。方法 取对数生长期的卵巢癌细胞A2780和耐DDP卵巢癌细胞A2780/DDP,分别与异丙酚(0、1、5、10及20 mg/L)和DDP(0、5、10、20、40及80μmol/L)进行孵育,采用CCK-8法观察A2780和A2780/DDP细胞存活率;取对数生长期的A2780和A2780/DDP细胞分为Control组(等量培养基)、异丙酚组(10 mg/L异丙酚)、DDP组(10μmol/L DDP)、异丙酚+DDP组(10 mg/L异丙酚+10μmol/L DDP),克隆形成实验观察细胞克隆数,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)单克隆抗体、细胞凋亡调节因子(Bim)及活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)表达,Transwell检测各组A2780和A2780/DDP细胞的侵袭;裸鼠移植瘤实验观察各组肿瘤生长情况。结果 A2780、A2780/DDP细胞活力随异丙酚和DDP浓度升高均下降,A2780/DDP细胞系半抑制浓度(IC_...     

As2O3对肾癌786-0细胞5-氟尿嘧啶药物敏感性的研究

目的 探讨As2O3与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对肾癌细胞786-0细胞株细胞增殖、细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响.方法 取对数生长期786-0细胞,MTT比色法检测As2O3和/或不同浓度5-FU对细胞生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR法及蛋白质印迹法检测XIAP mRNA表达及XIAP蛋白质表达的变化.结果 不同浓度的5-FU分别作用786-0细胞后,细胞生长受到抑制,但无明显的时间、浓度相关性;2μmol/L As2O3与不同浓度5-FU联合应用对786-0细胞的增殖抑制率随作用时间、药物浓度的增加逐渐升高,与单药相比较(P＜0.01),两药相互作用系数显示为协同作用.48h检测2μmol/L As2O3与不同浓度5-FU联合用药处理的786-0细胞的凋亡率明显增加,与单药相比(P＜0.01);XIAP mRNA表达明显减少,与单药相比(P ＜0.01);2μmol/L As2O3与400 μg/ml 5-FU联合应用48h XIAP蛋白表达亦明显减少,与单药相比(P＜0.01).结论 As2O3联合5-FU可以明显提高肾透明细胞癌的化疗敏感性,抑制786-0细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,这一作用与抑制786-0细胞XIAP基因的表达有关.     

3-溴丙酮酸联合顺铂抑制肺癌细胞株A549的生长

目的 探讨3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)联合顺铂体外抗肺癌A549细胞的作用及其可能机制.方法 采用CCK-8检测不同浓度的3-BrPA、顺铂单用及联用对A549细胞的增殖抑制;选择低于半数抑制浓度(IC50)的40 μmol/L 3-BrPA与1 mg/L顺铂单独和联合作用A549细胞48 h后,用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡;不同浓度的3-BrPA作用A549细胞48 h后,流式细胞术检测细胞周期变化,己糖激酶(hexokinase,HK)活性检测试剂盒检测3-BrPA对细胞内HK活性的影响.结果 CCK-8结果显示,与阴性对照组比较,3-BrPA浓度大于20 μmol/L时对A549细胞有明显抑制作用(P＜0.01),与单用顺铂组比较,3-BrPA联合顺铂组可显著增强顺铂对A549细胞的毒性作用(P＜0.01);3-BrPA作用A549细胞48 h后,倒置显微镜观察到3-BrPA组大多数细胞出现凋亡,而联合用药组细胞凋亡更加明显,部分区域出现细胞碎片等坏死征象;流式细胞术结果显示,3-BrPA和顺铂单用组及联合用药组细胞凋亡率均明显高于阴性对照组(P＜0.01),且联合用药组细胞凋亡率明显高于单独用药组(P＜0.01);细胞周期检测结果显示3-BrPA可将A549细胞阻滞于G1期;HK活性结果显示:与阴性对照组比较,3-BrPA组HK活性明显降低(P＜0.01).结论 3-BrPA有抑制肺癌A549细胞增殖、诱导其凋亡的作用,且与顺铂具有协同抗肺癌A549细胞增殖作用,其机制可能为抑制肺癌细胞糖酵解,进而影响肺癌细胞能量代谢.     

姜黄素与5-氟尿嘧啶联用对人结肠癌HT-29细胞凋亡及环氧合酶-2表达的影响

目的:探讨姜黄素是否能增强5-氟尿嘧啶(5-FU)的抗癌作用,并探讨其与细胞凋亡及COX-2蛋白表达的关系。方法:采用MTT法观察不同浓度姜黄素、5-FU单独或联合应用对HT-29细胞的生长抑制作用;流式细胞仪和荧光显微镜检测对HT-29细胞凋亡的影响;并且应用Western blotting分析联合应用后对于COX-2蛋白表达的影响。结果:姜黄素和5-FU可明显抑制HT-29细胞的生长,并呈剂量依赖性,半数生长抑制率(IC50)分别为(15.9±1.96)μmol/L和(17.3±1.85)μmol/L;当二者联合应用时,在较高的作用水平可以定量地观察到对HT-29细胞的协同抑制作用。流式细胞仪结果表明,单独应用姜黄素以及联合应用姜黄素与5-FU均能使HT-29细胞在加药后24和48 h出现凋亡峰,但联合用药所诱导的细胞凋亡比例较单独应用姜黄素低;荧光显微镜观察的结果与流式细胞仪的结果相同;免疫印迹实验结果显示两种药物联合作用可以使COX-2的表达降低约75%。结论:姜黄素与5-FU联合应用可协同抑制大肠癌细胞的增殖并协同抑制HT-29细胞内COX-2的表达。     

双氢青蒿素对非小细胞肺癌细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫应答的影响

目的 探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8⁺T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用。方法 将NSCLC细胞系A549细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50和100μmol/L)处理A549细胞,根据半抑制浓度(IC₅₀)选择最适浓度的DHA处理A549细胞0、24、48、72 h; CCK-8法和集落形成实验检测DHA对A549细胞增殖和集落形成能力的影响;密度梯度离心法分离健康个体外周血单个核细胞(PBMC),经黏附贴壁法去除单核细胞,随后与丝裂霉素C预处理的A549细胞按照10∶1比例共培养,2周后采用流式细胞术分别检测CD8⁺T细胞比例及其穿孔素和颗粒酶B的表达水平。结果 与对照组相比,25、50和100μmol/L DHA处理24 h后的A549细胞增殖的抑制率均升高(P<0.01);DHA对A549细胞的IC₅₀为46.26μmol/L;依据IC₅₀浓度检测50μmol...     

1,25二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株Hs578T的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的 研究1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3](VitD3)联合塞莱昔布(CELE)对乳腺癌细胞株Hs578T的增殖抑制及凋亡诱导作用.方法 采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记(TUNEL)法计数凋亡细胞,免疫组化SP法分别检测凋亡与凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的变化.结果 10-7mol/L的VitD3联合5×10-5mol/L CELE、10-8 mol/L的VitD3联合5×10-5mol/L CELE联合用药组通过MTT法测得72 h对Hs578T细胞的A值分别为0.517±0.045、0.572±0.022,有统计学意义;流式细胞术显示72 h后细胞凋亡实验组细胞凋亡率高于对照组凋亡率;细胞周期分析实验组可分别造成S期、G0/G1期阻滞;免疫组化SP法显示实验组凋亡相关基因Bax增高,bcl-2降低.结论 VitD3联合CELE可以抑制Hs578T细胞增殖,改变细胞周期时相分布并诱导其调亡.     

5-氟尿嘧啶联合替尼泊苷对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)和替尼泊苷(VM-26)联合应用对胃癌BGC-823细胞的体外抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法:采用MTT法测定5-FU单药(15.63、31.25、62.50、125.00、250.00 mg/L),VM-26单药(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/L)及联合用药(15.63/1.25、31.25/2.50、62.50/5.00、125.00/10.00、250.00/20.00mg/L)对BGC-823细胞的体外生长抑制率,应用流式细胞仪测定15.63 mg/L 5-FU、1.25 mg/L VM-26单药及其联合用药0、12、24、48 h各时间点的细胞周期和凋亡率.结果:VM-26和5-FU单药及联合用药对胃癌BGC-823细胞的生长抑制率随药物质量浓度的增加而增加.15.63 mg/L 5-FU单药处理后12、24 h时S期细胞增多,G2/M期细胞减少;1.25 mg/L VM-26单药处理细胞后G2/M期细胞随时间的延长逐渐增多;联合用药24 h后S期细胞显著减少,G2/M期细胞显著增多;联合用药处理后12、24 h细胞凋亡率比单药5-FU和VM-26处理相同时间点显著增加.结论:5-FU和VM-26单药均可抑制胃癌BGC-823细胞的生长,低剂量联合用药抑制作用较单药应用增加.单药和联合用药均可诱导细胞凋亡,且细胞周期的分布不同.     

基于线粒体凋亡通路探讨防己诺林碱对前列腺癌PC3细胞的生物学行为的影响

目的 基于线粒体凋亡通路探究防己诺林碱（fangchinoline, FAN）对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法 将前列腺癌PC3细胞按照FAN处理浓度分为4组,分别为FAN 0μmol/L组、FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组,各组依次采用FAN 0μmol/L (DMSO替代)、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L进行处理,孵育48 h后进行实验。CCK-8法检测PC3细胞增殖,平板克隆法检测PC3细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测PC3细胞凋亡,Transwell实验检测PC3细胞侵袭,划痕实验检测PC3细胞迁移,Western blot检测PC3细胞自噬相关蛋白和线粒体凋亡通路蛋白。结果 与FAN 0μmol/L组相比,FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组的PC3细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭和迁移能力明显降低（P<0.001）,凋亡率明显升高（P<0.001）;与FAN 5μmol/L组和FAN 10μmol/L组相比,FAN 20μmol/L组的PC3...