miR⁃552⁃3p通过抑制DACH1促进肝细胞性肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探讨miR?552?3p在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其促进细胞增殖和迁移、侵袭的机制。方法：qRT?PCR检测HCC细胞系及人正常肝细胞系中miR?552?3p的表达情况;下载TCGA数据库中HCC样本的微阵列数据,分析miR?552?3p在HCC癌组织及癌旁组织中是否存在表达差异;miR?552?3p mimics以及miR?552?3p inhibitor转染HCC细胞,荧光素酶报告基因验证miR?552?3p与DACH1是否存在靶向关系,CCK?8及Transwell实验检测miR?552?3p及其与DACH1相互作用对于HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响。结果：TCGA数据库中HCC样本的分析结果表明,miR?552?3p在HCC中高表达,同时qRT?PCR显示miR?552?3p在HCC细胞系中的表达水平显著高于人肝细胞系L02;miR?552?3p的高表达促进HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,而抑制miR?552?3p表达后则相反;荧光素酶报告实验证实miR?552?3p靶向作用于DACH1的3′?UTR,上调miR?552?3p可抑制DACH1的表达,而下调miR?552?3p则增加DACH1表达;DACH1的过表达可抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭,但同时过表达miR?552?3p后DACH1对于HCC细胞相关功能的抑制即可解除;miR?552?3p正向调控Wnt/β?catenin信号通路的激活。结论：miR?552?3p靶向作用于DACH1促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭,并参与调控Wnt/β?catenin信号。可能为HCC的诊疗策略提供潜在靶点。     

miR-552-3p通过抑制DACH1促进肝细胞性肝癌细胞增殖、迁移、侵袭功能

目的：探讨miR-552-3p在肝细胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）中的表达及其促进细胞增殖和迁移、侵袭功能的机制。方法：qRT-PCR检测HCC细胞系及人正常肝细胞系中miR-552-3p的表达情况;下载TCGA数据库的HCC样本的微阵列数据分析miR-552-3p在HCC癌组织及癌旁组织中是否存在表达差异;miR-552-3p mimics以及miR-552-3p inhibitor转染HCC细胞,荧光素酶报告基因验证miR-552-3p与DACH1是否存在靶向关系,CCK8及Transwell实验检测miR-552-3p及其与DACH1相互作用对于HCC细胞增殖、迁徙、侵袭功能的影响。结果：TCGA数据库中HCC样本的分析结果表明miR-552-3p在HCC中高表达,同时qRT-PCR显示miR-552-3p在HCC细胞系中的表达水平显著高于人肝细胞系L02;miR-552-3p的高表达促进HCC细胞的增殖、迁移、侵袭功能而抑制miR-552-3p的结果则相反;荧光素酶报告实验验证了miR-552-3p靶向作用于DACH1的3’-UTR,上调miR-552-3p的表达抑制DACH1而下调miR-552-3p则DACH1表达增加;DACH1的过表达可抑制HCC细胞相关功能,但同时过表达miR-552-3p后DACH1对于HCC细胞相关功能的抑制即可解除;miR-552-3p正向调控Wnt/β-catenin 信号通路的激活。结论：miR-552-3p靶向作用于DACH1促进HCC细胞增殖、迁移、侵袭功能,并参与调控Wnt/β-catenin 信号。可能作为HCC的诊疗策略提供潜在靶点。     

环境雌激素壬基酚通过SRXN1促进结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用研究

目的 研究环境雌激素壬基酚(nonylphenol, NP)对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其与SRXN1(sulfiredoxin-1)表达的关系。方法 利用转录组测序及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析NP对COLO205细胞中SRXN1表达的影响。通过癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)及免疫组织化学技术(IHC)分析SRXN1在结直肠癌组织中的表达。利用特异性小干扰RNA片段(si-SRXN1)抑制SRXN1的表达,NP(10^-6 mol/L)干预24 h,通过CCK-8、克隆形成、Transwell实验检测COLO205细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,蛋白印迹(Western blot)检测细胞中ERK1/2、PI3K/Akt、Wnt/β-catenin通路激活情况。结果 转录组测序及qRT-PCR分析发现,NP显著上调COLO205细胞中SRXN1表达(P<0.05)。TCGA及IHC检测分析发现,结直肠癌肿瘤组织中SRXN1的表达均显著高于癌旁组(P<0.01)。与Control组...     

SFRP1/FZD6抑制Wnt/β-catenin信号通路对A549肺癌细胞生物学行为的影响

目的研究分泌型frizzled相关蛋白1(secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)影响A549肺癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的机制及其对细胞增殖、克隆形成和迁移侵袭能力的影响。方法 q RT-PCR和western blot检测SFRP1在肺腺癌及癌旁组织中的表达。在A549细胞中通过质粒过表达SFRP1和用si RNA敲低FZD6的表达,采用q RT-PCR、western blot检测Wnt信号通路相关基因的表达水平变化。通过CCK-8、平板克隆形成、划痕实验以及transwell实验分别检测SFRP1/FZD6对A549细胞增殖、克隆形成、细胞迁移侵袭能力的影响。结果 SFRP1在肺癌组织中表达水平显著低于癌旁组织(P0.05);过表达SFRP1显著抑制了A549肺癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路,干扰受体FZD6的表达能够显著减弱SFRP1对Wnt/β-catenin信号通路的抑制效应。过表达SFRP1显著抑制肺癌细胞的增殖、克隆形成和迁移侵袭能力等恶性表型,并且能够通过干扰FZD6被逆转。结论 SFRP1通过受体FZD6抑制A549肺癌细胞的Wnt/β-catenin信号通路活化,进而抑制细胞的增殖、克隆形成和迁移侵袭能力。SFRP1/FZD6可能在肺癌进展中发挥重要作用,靶向SFRP1/FZD6有望成为研发治疗肺癌的重要靶点。     

USP41促进MCF7乳腺癌细胞恶性表型的作用及机制

目的 探索USP41在乳腺癌组织样本及MCF7乳腺癌细胞中的表达情况,及其与恶性表型的相关性和潜在作用机制。方法 采用Western blot法、qPCR法检测USP41在MCF7细胞株及临床组织样本中的表达情况。随后通过CCK-8、克隆形成实验、Transwell、Western blot以及CoIP-MS等细胞生物学方法评价USP41对MCF7的作用及机制。结果 USP41在乳腺癌样本及MCF7细胞株的表达显著高于癌旁组织。干扰USP41可以显著地抑制细胞的增殖、克隆形成及迁移能力,促进细胞凋亡。CoIP结果显示,USP41可以与活化蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)直接相互作用,且RACK1在癌组织的表达显著高于癌旁。干扰RACK1可抑制MCF7细胞增殖、克隆形成及迁移能力。结论 USP41在MCF7中高表达,且通过上调RACK1促进MCF7乳腺癌细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡。     

采用人肿瘤类器官研究阻断Wnt信号治疗大肠癌的可行性

目的建立和优化大肠癌患者肿瘤类器官培养体系,为研究阻断Wnt信号治疗大肠癌提供新模型。方法选择大肠癌患者18例,收集癌组织及癌旁组织配对标本。采用定量PCR测定癌组织和癌旁组织Wnt3 m RNA和肠干细胞标记分子Lgr5、Ascl2的表达水平。术中采集肿瘤组织,使用类器官培养基培养肿瘤类器官。使用Wnt信号抑制剂IWP-2处理肿瘤类器官,观察IWP-2对肿瘤类器官形态、生长等的影响。结果定量PCR表明,与癌旁组织相比,肿瘤组织中的Wnt3表达水平较高[分别为(1.00±0.08)和(2.99±0.27),P0.01]。癌旁组织和肿瘤组织Lgr5[分别为(1.00±0.05)和(5.63±1.80),P0.01)]、Ascl2[分别为(1.00±0.39)和(4.03±0.33),P0.05]的表达水平也较高。IWP-2处理可显著抑制肿瘤类器官生长[未处理和处理后类器官面积分别为(10.02±1.34)×10~4m~2和(2.97±0.62)×10~4m~2,P0.01]。结论Wnt信号通路激活和大肠癌发生密切相关,抑制Wnt信号可有效抑制肿瘤细胞生长,可能是治疗大肠癌的一种有效方法。肿瘤类器官可以作为筛选大肠癌治疗药物的一种模型。     

大肠癌组织与癌旁正常组织基因差异表达图谱及信号通路研究

目的筛查人大肠癌肿瘤组织与相应癌旁正常组织差异表达基因。方法应用NimbleGen基因芯片检测4例大肠癌肿瘤组织及相应癌旁正常组织基因表达谱,并以RT-PCR技术对部分基因芯片检测结果进行验证,利用生物信息学方法对检测结果进行分析。结果大肠癌肿瘤组织和癌旁正常组织差异表达基因共5042条,其中表达水平上调3399条,下调1643条,这些基因涉及多个信号通路。结论本研究结果可为寻找大肠癌分子标记物和探索大肠癌发生的分子机制提供实验依据。     

circ_0001178靶向miR-1179调控胃癌AGS细胞增殖和凋亡的机制探讨

目的探讨circ_0001178靶向miR-1179调控胃癌AGS细胞增殖和凋亡的机制。方法选取33例胃癌组织及癌旁组织标本,实时荧光定量PCR检测circ_0001178和miR-1179的表达水平;将胃癌细胞株AGS随机分为si-NC组、si-circ_0001178组、miR-NC组、miR-1179组、si-circ_0001178+anti-miR-NC组、si-circ_0001178+anti-miR-1179组;采用克隆形成实验检测克隆形成数,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测蛋白表达;采用双荧光素酶报告实验检测circ_0001178和miR-1179的靶向关系。结果胃癌组织中circ_0001178表达水平明显高于癌旁组织,而miR-1179表达水平明显低于癌旁组织（P < 0.01）。抑制circ_0001178表达或过表达miR-1179,AGS细胞克隆形成数减少,细胞活性降低,AGS细胞凋亡率升高,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达水平均升高（P < 0.05）。结论抑制circ_0001178表达可能通过靶向上调miR-1179抑制胃癌AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

JOSD1在肝细胞癌中的表达及对细胞增殖、克隆、迁移的影响研究

目的探讨含约瑟芬结构域的蛋白1（JOSD1）在肝细胞癌（HCC）中的表达及对HCC细胞增殖、克隆、迁移的影响。方法利用公共生物信息学分析平台（http://gepia.cancer-pku.cn/detail.php）分析JOSD1在HCC组织及癌旁组织的表达差异;收集2022年10月至2023年5月在嘉兴市第一医院行肝癌根治术的4例HCC组织及癌旁组织标本,分析两种组织中的JOSD1蛋白表达差异;选择人HCC细胞株（Huh7）,转染特异性小干扰RNA（siRNA）,并设立JOSD1敲低组（siJOSD1组）和阴性对照组（siNC组）;CCK-8法、克隆形成实验、Transwell迁移实验检测敲低JOSD1对Huh7细胞增殖、克隆、迁移能力的影响;Westernblot法检测敲低JOSD1对Huh7细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达水平的影响。结果公共生物信息学分析显示HCC组织中JOSD1表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）,进一步临床样本验证发现,HCC组织JOSD1蛋白表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）;与siNC组相比,siJOSD1组Huh7细胞的增殖、克隆、迁移能力均下降（均P＜0.05）,E-cadherin蛋白表达水平上调（P＜0.05）,N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均下调（均P＜0.05）。结论HCC中JOSD1表达上调,敲低JOSD1可显著降低HCC细胞的增殖、克隆、迁移能力,可能通过上调E-cadherin,下调N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平发挥作用。     

卵巢癌中抑癌因子SUFU的表达变化及意义

目的：探讨卵巢癌中抑癌因子SUFU（suppressor of Fused）表达变化及其意义。方法：通过免疫组化检测人卵巢癌和癌旁组织样本中SUFU的表达量，并在数据库大样本和细胞水平上进行验证。同时在人正常卵巢上皮细胞系IOSE80和卵巢癌细胞系SKOV3分别抑制和过表达SUFU后，运用MTT、EdU、流式细胞术、Western blot、Transwell、平板克隆形成实验等方法分别检测细胞的增殖、凋亡、上皮间充质转化（epithelial?mesenchymal transition，EMT）、迁移与侵袭的情况，并随后用Western blot和实时定量PCR（quantitative real?time PCR，qPCR）检测Sonic Hedgehog（SHH）信号通路的下游靶基因GLI1蛋白和mRNA水平。结果：在3例卵巢癌组织样本中，相比于癌旁组织，癌组织中SUFU蛋白表达有一定下调，而这个结果在TCGA数据库大样本中也得到验证；此外在细胞水平上，人正常卵巢上皮细胞IOSE80中SUFU蛋白和mRNA表达水平明显高于卵巢癌细胞SKOV3。进一步在SKOV3细胞中过表达SUFU能够有效抑制其增殖、EMT、克隆形成、迁移和侵袭，促进凋亡；相反，在IOSE80细胞中下调SUFU则能够促进细胞EMT、迁移和侵袭能力。同时，相比正常卵巢上皮细胞，卵巢癌细胞中GLI1 mRNA和蛋白水平明显上升；当在卵巢癌细胞中上调SUFU时，SHH信号通路的下游靶基因GLI1的表达则明显下调。结论：SUFU能够抑制卵巢癌的发生发展，其作用机制与SHH信号通路相关。     

Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中的表达及相互作用

目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-Catenin信号转导通路在人肝癌组织及肝癌细胞系中的表达及相互作用.方法 选取肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织,采用免疫组化SP法检测其Oct4的表达;RT-PCR法及实时荧光定量PCR检测Oct4、Wnt5b、β-Catenin的mRNA表达.SiRNA-Oct4 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达后,以实时荧光定量PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、β-Catenin等干细胞相关基因的表达变化.结果 Oct4在肝癌组织和癌旁组织中均有表达,正常肝脏组织几乎未发现明显的Oct4表达;实时荧光定量PCR发现Oct4和β-Catenin在癌组织内表达最高,癌旁次之,正常肝最低,而Wnt5b却相反.使用SiRNA-Oct4 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-Catenin、Sox2、Nanog表达亦下调,与Oct4呈正相关关系,而Wnt5b表达却上调,与Oct4呈负相关关系.结论 Oct4在肝癌组织中高表达,且为肝癌发生过程的早期事件;Oct4及Wnt/β-Catenin在肝癌中存在一定的相互作用.     

miR-513a-3p在结肠癌中高表达并诱导细胞生长和迁移的机制研究

目的 观察miR-513a-3p在结肠癌组织与癌旁正常组织的表达差异,探讨miR-513a-3p诱导结肠癌(CRC)细胞生长和迁移的机制.方法 收集CRC患者30例作为研究对象,原位杂交和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测CRC组织与癌旁组织miR-513a-3p的表达水平.取人CRC细胞株HT-29和SW480培养后,转染miR-513a-3p类似物作为促进表达组,设置阴性对照组,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验两组细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭情况,细胞划痕实验检验细胞迁移能力,Western blot法检测NF-κB和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平.结果 原位杂交检测结果显示,CRC组织miR-513a-3p阳性表达高于癌旁组织.qRT-PCR检测结果显示,CRC组织和癌旁组织miR-513a-3p 相对表达量分别为(0.37±0.09)和(1.01±0.16),差异有统计学意义(P＜0.01).与阴性对照组比较,促进表达组细胞活力在3、4 d中均升高(P＜0.01),促进表达组的HT-29和SW480细胞侵袭细胞比例升高(P＜0.01),促进表达组HT-29和SW480的细胞迁移能力增强.Western blot结果显示,与阴性对照组比较,促进表达组的HT-29细胞和SW480细胞 p-p65、p-IκBα、Wnt3a、Wnt5a 和 β-catenin 蛋白相对表达量均升高(P＜0.01).结论 CRC组织miR-513a-3p表达异常升高,过表达的miR-513a-3p促进CRC细胞生长、迁移和侵袭作用,其作用机制可能与NF-κB通路和Wnt/β-catenin通路激活有关.     

miRNA-1271对人乳腺癌细胞增殖的影响

目的探讨miRNA-1271对人乳腺癌细胞增殖的影响。方法采用RT-PCR法检测80例乳腺癌组织及癌旁正常组织中miRNA-1271的表达。采用脂质体转染法将miRNA-1271模拟物转染至乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中,应用CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术、动物实验等探究miRNA-1271对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响。结果乳腺癌组织中miRNA-1271相对表达量较癌旁正常组织明显降低（P＜0.05）。miRNA-1271表达上调后,MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞的吸光度值明显降低（均P＜0.05）,克隆形成数明显减少（均P＜0.05）,细胞凋亡率明显增高（均P＜0.05）。动物实验结果显示,miRNA-1271在体内亦能抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖。结论miRNA-1271在乳腺癌组织中低表达;上调miRNA-1271表达,能抑制乳腺癌细胞的增殖,促进凋亡的发生,具有抑癌作用。     

三氧化二砷诱导大肠癌SW620细胞凋亡以及抑制其克隆性增生的实验研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导大肠癌细胞凋亡并抑制其克隆性增生的机制.方法 不同浓度的As2O3(0、1、2、4、8 μmol/L)作用于人的大肠癌细胞SW620,显微镜下观察细胞形态学和结构的变化;RT-PCR检测各组SW620细胞中胚胎干细胞关键蛋白(Oct4)、早幼粒细胞白血病蛋白(PML)的表达;免疫细胞化学SP法检测各组CD133的表达以及软琼脂克隆实验检测各组细胞的克隆形成率.结果 随着As2O3浓度增加:①各药物组中贴壁细胞数量逐渐减少,凋亡形态差别明显;②Oct4 mRNA的表达逐渐减少,而PML mRNA的表达逐渐增加; ③各组的CD133阳性表达逐渐减少; ④克隆形成能力逐渐减弱; ⑤相关分析显示CD133与Oct4具有正相关性.差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 As2O3对促进大肠癌细胞凋亡以及抑制其克隆性增生的作用与大肠癌干细胞有关,其机制可能为下调Oct4和上调PML的表达,以及对CD133的抑制作用.     

lncRNA RARB-AS2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响及分子机制

目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)RARB-AS2在口腔鳞状细胞癌组织中的表达，探讨RARB-AS2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响及分子机制。方法 癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析RARB-AS2在口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中表达水平。实时荧光定量PCR(qPCR)检测RARB-AS2在4种口腔鳞状细胞癌细胞SCC-9、CAL-27、HSC-3、SCC-25以及口腔上皮角质细胞HOK中表达水平。通过脂质体转染法在SCC-25细胞中分别转染RARB-AS2高表达质粒和对照质粒，定义为RARB-AS2组和对照组。qPCR检测SCC-25细胞中RARB-AS2表达水平。平板克隆实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测SCC-25细胞增殖、细胞周期和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证RARB-AS2和miR-455-3p的靶向关系。TCGA数据库分析口腔鳞状细胞癌组织中RARB-AS2和miR-455-3p表达的相关性。qPCR检测SCC-25细胞中miR-455-3p表达水平。Western blot法检测SCC-25细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白p-...     

核因子E2相关因子1过表达抑制宫颈癌细胞增殖及迁移

目的:初步探究核因子E2相关因子1(nuclear factor erythroid 2-related factor 1,Nrf1)在宫颈癌组织中的表达及其过表达对宫颈癌细胞增殖以及迁移的影响。方法:通过TCGA数据分析Nrf1在人宫颈癌及正常宫颈组织中的表达水平差异;检索OncoLnc网站,比较Nrf1高表达与低表达宫颈癌患者的生存率;采用qRT-PCR检测11对宫颈癌及癌旁组织中Nrf1 mRNA的表达水平。通过慢病毒转染方式构建Nrf1过表达宫颈癌HeLa、SiHa细胞株,以及对应的空载体细胞株;采用qRT-PCR及蛋白免疫印迹实验分别检测细胞株内Nrf1的mRNA和蛋白表达水平;采用EdU细胞增殖实验、细胞克隆形成实验、Transwell细胞迁移实验以及细胞划痕愈合实验检测宫颈癌细胞的增殖和迁移。结果:TCGA数据分析显示,宫颈癌组织中Nrf1 mRNA表达水平明显低于正常宫颈组织(P<0.01);OncoLnc网站分析显示,Nrf1高表达组患者生存率明显高于Nrf1低表达组(P<0.05);qRT-PCR结果显示,Nrf1 mRNA在宫颈癌组织中的表达水平显著低...     

miR-153-3p靶向调控CHI3L1对LPS所致人牙周膜干细胞炎症反应的影响

目的:探索miR-153-3p是否能通过靶向调控几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)改善脂多糖(LPS)所致人牙周膜干细胞(hPDLSCs)炎症反应。方法:分离培养hPDLSCs,采用LPS处理建立炎症细胞模型，并进行miR-NC、miR-153-3p mimics、si-NC、si-CHI3L1以及miR-153-3p mimics+pc-NC、miR-153-3p mimics+pcDNA-CHI3L1转染。转染48h后qRT-PCR法检测各组细胞中miR-153-3p、CHI3L1 mRNA表达，ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western Blot法检测细胞中CHI3L1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-153-3p与CHI3L1的靶向关系。结果:LPS处理后hPDLSCs中miR-153-3p表达下调(P<0.05),CHI3L1 mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.05);过表达miR-153-3p或抑制CHI3L1表达可降低LPS诱导的hPDLSCs中IL-6、IL-1β、TNF-α水平...     

Wnt2B基因在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达

目的:探讨Wnt2B基因在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达及其意义。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术检测胃癌组织及相应癌旁组织中Wnt2B基因mRNA的表达水平。结果:Wnt2B基因在37例人类胃癌组织及相应癌旁组织中均有表达,阳性率达100%;Wnt2B基因在胃癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:Wnt2B基因可能参与了胃癌的发生发展过程,在胃癌组织中表达上调可能有助于胃癌的早期诊断。     

Dickkopf-4激活Wnt/PCP通路促进肾透明细胞癌的增殖及侵袭

目的研究Dickkopf-4(DKK4)在肾透明细胞癌(clear cell Renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及其与ccRCC生物学行为、临床分期分级和预后之间的的相关性。方法采用RT-PCR、免疫组织化学及W estern印迹法比较42例肾癌和癌旁正常组织中DKK4的表达水平,观察其表达与肿瘤大小、临床分期、分级之间的关系;使用p CMV6-DKK4表达载体转染786-O和A498人肾透明细胞癌细胞,检测、观察转染后的肿瘤细胞的增殖活性、侵袭力及细胞凋亡水平,检测Wnt/β-Catenin(β-Catenin、Cyclin D1)及Wnt/Planar Cell Polarity信号通路(JNK、Rac1)蛋白表达。结果 28例(66.7%)肾癌组织中,DKK4的表达明显高于正常组织,其表达水平与肿瘤病理分级分期和临床特征之间无明显相关(P>0.05);过表达DKK4的肾癌细胞株的增殖活性及侵袭力明显增强;细胞内Wnt经典通路蛋白β-Catenin表达下调而Cyclin D1表达上调;Wnt/PCP通路下游蛋白JNK、Rac1表达上调。结论 W nt/β-Catenin通路抑制剂DKK4通过激活W nt/PCP非经典通路促进肾癌细胞增殖,增强肾癌细胞侵袭力。     

精氨酸代谢酶ASS1/CAT1与结肠癌相关性研究

目的 探究精氨酸内源性合成酶精氨酸琥珀酸盐合成酶-1( argininosuccinate synthetase, ASS1)及外源性转运载体阳离子氯基酸转运蛋白-1(cationic amino acid transporter, CAT1)与结肠癌的相关性.方法 通过TCGA数据库和组织芯片探究非配对和配对样本中 ASS1/CAT1 在癌及癌旁组织中表达及与结肠癌相关性.结果 TCGA数据库分析提示非配对样本中结肠癌组织ASS1和CAT1表达均明显高于癌旁,ASS1在癌组织中的表达与TNM分期无关,CAT1的表达与TNM分期相关.组织芯片显示在配对样本中结肠癌组织及癌旁组织均有ASS1、CAT1表达.癌及癌旁组织ASS1表达无差异,CAT1则在癌组织表达明显高于癌旁组织(P=0. 000);癌组织ASS1、CAT1表达均与临床病理特征无关,但癌与癌旁组织ASS1表达量比值与淋巴转移正相关(P=0. 035).结论 结肠癌组织中,ASS1、CAT1均具有阳性表达,提示其同时存在精氨酸的内源性合成和外源性摄取途径.结肠癌淋巴转移和结肠癌组织及癌旁组织的ASS1表达比值正相关,但癌组织ASS1、CAT1表达与其他临床病理特征无关.结肠癌高表达CAT1,提示结肠癌精氨酸外源性摄取亢进.