黄杆菌对硫磷水解酶及大肠杆菌过氧化氢酶无水解梭曼活性

黄杆菌对硫磷水解酶及大肠杆菌过氧化氢酶无水解梭曼活性邵煌孙曼霁（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．ｓｔｒａｉｎＡＴＣＣ２７５５１）和缺陷假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｄｉｍｉｎｕｔａＭＧ）的对...     

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶赵毅民荣康泰徐勤惠（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）梭曼是难防难治的有机磷毒剂．为了寻找新的解毒途径，本研究设计并合成了全新化合物１－羟基－１－对胺基苯基甲膦酸单频哪基醇酯．此化合物可竞争性地抑制梭曼水解酶...     

人肝梭曼水解酶的微量比色测定及性质

建立了人肝二异丙基氟磷酸酯酶（ＤＦＰａｓｅ，ＥＣ．３．１．８．２．）的微量比色测定法并探讨了此酶的部分生化性质。梭曼在过硼酸钠及丙酮存在时，可与盐酸联苯胺反应生成橙黄色偶氮化合物，橙黄色产物的量与梭曼量在１０－２００ｎｍｏｌ范围内呈正相关。本文将此呈色反应与酶反应相结合，通过测定剩余梭曼的量来测定酶活力，并探讨了测定的最适条件。测定的变异系数为５％，测得人肝ＤＦＰａｓｅ的Ｋｍ值为３ｍｍｏｌ·Ｌ－１，最适ｐＨ范围为７．０－７．２，酶反应时间为２５ｍｉｎ，在－２０℃保存７个月，或在３７℃保温１８ｈ活性无明显丧失，反复冻融３次活性不变，但经冻融６次时活性下降１／５．人肝ＤＦＰａｓｅ活性主要存在于细胞的可溶性部分。     

过氧化氢酶对梭曼水解的催化作用

本文就过氧化氢酶与梭曼反应的性质进行了研讨，证明过氧化氢酶是催化梭曼水解的反应物，而不是简单的“中和”反应物；过氧化氢酶催化梭曼水解的米氏常数为０．２ｍｍｏｌ·Ｌ－１．叠氮化钠对过氧化氢酶催化梭曼和过氧化氢反应的影响是不同的，这种差别意味着过氧化氢酶分子具有两个分离的活性部位。     

用荧光法测定环氧化物水解酶活性

建立了一个快速筛选程序，从数百个酶样或变体中筛选对任何底物均具有环氧化物水解酶活性的酶。通过高碘酸盐剪切裂解，并保留羧基荧光素的荧光来检测酶反应产物。     

梭曼中毒对大鼠心功能的影响

梭曼中毒对大鼠心功能的影响刘勇王仕丽魏相德（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）本研究采用大鼠离体灌流工作心脏为模型，观察梭曼对心脏的直接作用．初步结果表明，急性梭曼中毒后，大鼠心功能在早期出现暂时兴奋后转入进行性抑制，表现为反映大鼠心脏整体...     

卡托普利对大鼠血液中梭曼消除的影响

啮齿类动物对梭曼有很强的解毒能力,但在梭曼解毒中,肝脏及肠道等外周器官中羧酸酯酶强大的解毒能力并未得到充分发挥,如能调法提高它们的利用度,就有可能减少梭曼到达靶器官的量,并降低梭曼的毒性,梭曼中毒后,可以引起外周血管痉挛,使更多的梭曼向脑中分布,因此加重脑功能性乙酰胆碱酯酶的抑制程度。尼莫地平通过外周血管扩张作用,山莨菪碱通过改善外周微循环作用,增加了梭曼与外周解毒酶的结合而加快了梭曼的消除。为了解其他因管扩张机制的药物是否也有类似作用,我们观察了卡托普利对大鼠血液中梭曼消除的影响。     

过氧化氢酶活性测定的新方法

目的 建立一种简单、灵敏和快速检测过氧化氢酶(CAT)活性的方法.方法 采用两步法检测CAT活性.第一步是CAT催化H2O2分解,第二步是剩余的H2O2在CAT作用下,氧供体(TOOS)被氧化成蓝色醌亚胺物质,测定在555 nm处的吸光度,计算CAT活性.对反应的影响因素,如显色剂、底物浓度、反应时间、酶浓度、灵敏度和稳定性等,与其它CAT活性测定方法进行比较分析.结果 从pH7.5、30℃、16.2 mmol·L-1作为最佳反应条件,TOOS作显色试剂.结论 所建方法用于测定CAT活性,具有简单、快速和灵敏度高等特点,尤其适用于诊断试剂盒中CAT活性的检测.     

梭曼对体外培养神经细胞的影响

目的　研究梭曼对体培养神经细胞的直接作用 ,为在细胞水平上构建出评价梭曼毒性和抗毒药物救治效果的模型奠定基础。方法　小鼠神经细胞的体外培养方法 ,乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性测定法 ,细胞死亡率及LC50 等。结果　梭曼浓度为 0 .96mg·L- 1时 ,对神经细胞的形态变化无明显影响 ,当梭曼浓度增加到 96 0mg·L- 1时 ,神经细胞形态学发生变化 ,表现为突触收缩 ,细胞收缩、变圆、死亡等。梭曼在 2 4h对神经细胞LC50 值为 2 0 .35mg·L- 1。神经细胞培养液中AChE活性随培养时间的延长 ,AChE活性有显著增加的趋势 (P <0 .0 1) ,而梭曼能显著抑制培养液中AChE活性 (P <0 .0 1)。结论梭曼对体外培养的神经细胞AChE活性的影响与整体动物一致 ,提示该细胞可作为快速评价梭曼细胞损伤及抗毒药物筛选的方法之一     

阿托品对大鼠体内梭曼解毒作用的影响

目的　研究阿托品对大鼠血液中梭曼消除的影响 ,并探索相关作用机制。方法　阿托品 (5mg·kg- 1)ip后 10min ,大鼠按 4 15 μg·kg- 1(5LD50 )尾静脉注射梭曼。乙酰胆碱酯酶抑制法测定梭曼中毒后0 .2 5 ,0 .5 ,1,1.5 ,2 ,3,4 ,6 ,8和 10min大鼠血液中梭曼残留浓度。测定对照及梭曼中毒后 3min大鼠血液、肺脏、膈肌、肝脏、心脏、脑、小肠、肌肉和肾脏组织中羧酸酯酶活性 ,测定脑胆碱酯酶活性。结果　梭曼给予后 15s时 ,阿托品即显著加速了梭曼在大鼠血液中的消除 ,使血中梭曼浓度由 (4 34±70 ) μg·L- 1下降到 (16 6± 4 2 ) μg·L- 1(P <0 .0 1) ;阿托品预防给药 ,可使AUC( 0 .2 5～ 10min) 由 (773± 89.0 ) μg·min·L- 1下降到 (387± 39) μg·min·L- 1(P <0 .0 1)。羧酸酯酶活性测定表明 ,羧酸酯酶的体内分布存在明显的组织差异 ,其中肝脏、肺脏、肾脏、肠道CaE活性较高 ,而肌肉、脑CaE活性相对较低。梭曼中毒后 ,血浆及肺脏中CaE的抑制率可达 80 %以上 ,其他组织羧酸酯酶抑制率相对较低。阿托品有加强梭曼抑制肠道及血浆中CaE的作用 ,可使大鼠肠道羧酸酯酶的活性 (对硝基戊酸苯酯 )由 (2 .3± 1.3)μmol·min- 1·g- 1组织下降到 (1.0± 0 .6 ) μmol·min- 1·g- 1组织 (P <0 .0 1) ,血浆?     

梭曼引起神经肌肉接头阻滞的机理研究

梭曼引起神经肌肉接头阻滞的机理研究刘传缋１纪占欣１邹飞２李军２１．军事医学科学院毒物药物研究所（北京１００８５０）２．第一军医大学神经性毒剂中毒引起肌无力和麻痹是严重的中毒症状，可导致呼吸肌无力和麻痹，使中毒者窒息死亡。神经毒中毒后，神经肌肉接头处Ａ...     

动态浊度法测定加替沙星注射液细菌内毒素含量

加替沙星 ( gatifloxacin)注射液为治疗呼吸道感染和泌尿系统感染安全有效的药物。原热原检查采用家兔法 ,但干扰因素较多。为探索快速、方便且定量的内毒素测定方法 ,本研究采用动态浊度法测定加替沙星注射液中内毒素的含量。1　材料与仪器细菌内毒素工作标准品 (中国药品生物     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠血清和心肌磷脂酶A2活性的变化

目的探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠磷脂酶A2(PLA2)活性变化与心脏损伤的关系.方法实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和高原中毒组,采用放射免疫法测定模拟高原4 000 m缺氧条件下梭曼中毒后大鼠血清和心肌PLA2活性的变化.结果缺氧和梭曼中毒单一或复合损伤均可引起PLA2活性升高.与平原中毒组比较,高原中毒组大鼠血清PLA2活性在各时间点均明显升高(P＜0.01),心肌PLA2活性在12小时和24小时显著增强(P＜0.01).结论PLA2活性增强可能是导致高原梭曼中毒心脏功能损伤加重的重要原因之一.     

缺氧条件下梭曼中毒对 PC12 细胞游离钙的影响

缺氧条件下梭曼中毒对ＰＣ１２细胞游离钙的影响吴强董兆君魏相德（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）梭曼是一种强有力的胆碱酯酶抑制剂，一般认为抑制胆碱酯酶，造成乙酰胆碱大量堆积，作用于胆碱能受体而引发一系列效应是其中毒的主要机理．Ｃａ２＋作为细...     

血浆中游离梭曼的电鳐乙酰胆碱酯酶抑制测定法

梭曼是一种对体内乙酰胆碱酯酶 (ＡＣｈＥ)有强烈抑制作用的有机磷化合物。由于梭曼毒性强且在体内降解迅速 ,国外目前主要通过大进样量气相色谱或气 质联用方法来检测[1,2 ] ,其优点是 :(1)灵敏度较高 ,如检测下限可达1 5 ｐｇ/ｍｌ血浆 ;(2 )可以将梭曼的 4个异构体分开 ,以便研究各异构体在体内的动力学过程。不足之处是 :检测设备价格昂贵 ,样本的预处理过程比较繁琐 ,检测时间较长 ,不适合临床上对毒剂浓度的快速检测。基于ＡＣｈＥ活性抑制测定有机磷毒剂浓度的文献也有报道 ,优点是灵敏、简便[3 ] 。然而 ,该法在检测血浆中残留梭曼…     

C-反应蛋白测定对细菌性肺炎的诊断价值

目的分析并研究血清C-反应蛋白对于细菌性肺炎进行测定的临床诊断价值,以便于为临床的病情诊断提供指导。方法本研究所选择的研究对象为我院在2016年4月至2017年5月收治的80例肺炎患者,对所有患者的临床资料进行回顾性分析,研究C-反应蛋白测定对于细菌性肺炎的诊断价值。结果 C-反应蛋白被临床上当作是较为灵敏的一种急性时相反应指标,而且C-反应蛋白在不能控制的细菌性肺炎当中表现为持续上升的状态,当患者恢复正常以后会下降到正常状态。而且C-反应蛋白的值在细菌性肺炎当中的指标明显高于支原体肺炎,也明显高于病毒性肺炎,相互比较,P <0.05,差异明显,具有统计学意义。结论对于肺炎患者进行血清C-反应蛋白的检测,能够有效的区分细菌性肺炎和病毒性肺炎以及支原体肺炎,能够当做是对于细菌性肺炎进行鉴别的一个重要的辅助诊断标准,为患者及时应用抗生素治疗提供可行性的依据,具有推广使用的研究价值。     

纳豆激酶活性测定方法的比较

纳豆激酶是由纳豆芽孢杆菌经发酵产生的一种丝氨酸蛋白酶,可用于溶栓药物的开发。本文比较了两种测定纳豆激酶活性方法：琼脂糖——纤维蛋白平板法和枯草杆菌蛋白酶活力测定方法,为快速、准确地标示纳豆激酶的效价提供技术支撑。     

纳豆激酶活性测定方法

对先后建立的纤维平板法等几种测定纳豆激酶活性的方法进行概括总结介绍.