血浆外泌体miR-21对胃癌细胞药物敏感性的影响

目的 探索外泌体来源的miR-21作为胃癌奥沙利铂化疗过程中评价药物敏感性生物标志物的价值。方法透射电镜观察外泌体的形态;构建SGC7901奥沙利铂耐药细胞株,并利用RT-qPCR检测耐药细胞和亲本细胞中miR-21的表达水平;CCK8检测miR-21对SGC7901耐药细胞株增殖抑制率的影响;Western blot检测外泌体的标记蛋白;使用受试者工作特征曲线（ROC）分析奥沙利铂治疗胃癌的过程中miR-21评估药物敏感性的价值。结果miR-21过表达后,亲本细胞对奥沙利铂的敏感性由IC50 16.40μmol/L增加至39.46μmol/L;miR-21在化疗耐药患者血浆外泌体中的相对表达量较化疗敏感患者高,在化疗敏感患者血浆外泌体中的相对表达量为2.235±1.491,而在耐药患者血浆外泌体中的相对表达量为7.682±4.490;ROC曲线结果显示,外泌体miR-21预测胃癌患者化疗敏感性的曲线下面积为0.792(95%CI:0.7118-0.8725,P<0.001),灵敏度和特异性分别为62.90%和96.77%。结论 胃癌患者血浆外泌体来源的miR-21可能作为预测奥...     

多囊卵巢综合征患者血清外泌体中miR-184的表达水平及其对卵巢颗粒细胞增殖的影响

目的研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清外泌体中miR-184的表达水平及其对卵巢细胞颗粒增殖的影响。方法回顾性选取2018年2月至2020年4月期间盘锦辽油宝石花医院收治的60例PCOS患者作为PCOS组,另纳入同期30名健康成年女性作为对照组,提取2组受试者血清外泌体。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测2组受试者血清外泌体中及人卵巢颗粒细胞KGN和人正常卵巢上皮细胞IOSE80中的miR-184的相对表达。转染miR-184抑制剂的KGN细胞设为miR-184抑制剂组,转染抑制剂对照物的KGN细胞设为对照组,不做任何处理的KGN细胞设为空白组。应用MTT法检测各组KGN细胞的增殖情况,应用平板克隆实验检测各组KGN细胞的克隆形成率。结果PCOS患者血清外泌体中和KGN细胞中的miR-184的相对表达量为4.23±0.49、5.81±0.73,显著高于对照组(1.32±0.21)和IOSE80组细胞(1.19±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-184抑制剂组KGN细胞在24、48、72、96 h的吸光度值分别为0.20±0.05、0.22±0.07、0.26±0.08、0.29±0.07,均显著低于阴性对照组(0.31±0.09、0.52±0.11、0.78±0.12、0.96±0.18)和空白对照组(0.31±0.08、0.53±0.10、0.77±0.14、0.94±0.18),克隆形成率(26.78±5.98)%显著低于阴性对照组[(45.98±4.12)%]和空白对照组[(43.56±4.34)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCOS患者血清外泌体和人卵巢颗粒细胞KGN中miR-184呈现高表达,PCOS的发病可能与miR-184促进卵巢颗粒细胞增殖有关。     

外周血miR-125b-5p和miR-155相对表达量对冠状动脉狭窄程度的预测价值

目的探讨冠心病患者外周血miR-125b-5p与miR-155相对表达量与冠状动脉病变程度的相关性及其对冠状动脉狭窄程度的预测价值。方法冠心病患者57例为冠心病组,体检健康者57例为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测2组血浆miR-125b-5p和miR-155相对表达量,分析冠心病患者血浆miR-125b-5p和miR-155相对表达量与冠状动脉病变支数及最大狭窄程度的相关性;绘制ROC曲线,评估血浆miR-125b-5p和miR-155相对表达量对冠心病患者冠状动脉狭窄50%的预测价值。结果冠心病组患者血浆miR-125b-5p(0.81±0.10)和miR-155(0.64±0.09)相对表达量低于对照组(0.98±0.12、0.82±0.13)(P0.05);冠状动脉狭窄≥50%冠心病患者血浆miR-125b-5p(0.74±0.11)和miR-155(0.59±0.10)相对表达量低于狭窄50%冠心病患者(0.87±0.08、0.72±0.09)(P0.05)。冠心病患者血浆miR-125b-5p、miR-155相对表达量与冠状动脉病变支数(r=—0.643,P0.001;r=—0.669,P0.001)及最大狭窄程度(r=—0.718,P0.001;r=—0.728,P0.001)均呈负相关。当血浆miR-125b-5p相对表达量0.776、miR-155相对表达量0.641为最佳截断值时,预测冠心病患者冠状动脉狭窄≥50%的AUC分别为0.949(95%CI:0.892～0.982,P0.001)、0.907(95%CI:0.839～0.954,P0.001),敏感度分别为91.2%、79.4%,特异度分别为92.5%和92.5%。结论血浆miR-125b-5p和miR-155相对表达量与冠心病病变程度具有负相关性,对冠状动脉狭窄≥50%具有较好预测价值。     

血清外泌体miR-21诊断心肌梗死后心室重塑的价值

目的 探讨心肌梗死后心衰患者血清外泌体miR-21表达水平变化预测心室重塑的临床意义。方法 收集2017年1月至2019年12月本院收治的心肌梗死后心室重塑患者102例作为观察组,另选取同期进行健康体检者50例作为对照组。收集两组的血常规、血脂、脑钠肽（BNP）等实验室检查指标和左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左室舒张末期容积（LVEDV）等心脏超声检查参数,Real-time PCR法检测血清外泌体miR-21的相对表达量,分析外泌体miR-21表达水平与心室重塑临床指标的相关性。结果 观察组患者血清外泌体miR-21的表达水平（50.70±3.78）显著高于对照组（3.17±0.62）,差异有统计学意义（P<0.01）。外泌体miR-21表达与LVEF呈负相关（r=-0.653,P<0.05）,与BNP、LVEDD、LVEDV呈正相关（r=0.545,P<0.05;r=0.672,P<0.05;r=0.641,P<0.05）。外泌体miR-21诊断心肌梗死合并心室重塑的ROC曲线下面积为0.876。结论 外泌体miR-21可作...     

腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p检测对胃癌腹膜转移的诊断价值

目的探讨腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p检测对胃癌腹膜转移的诊断价值。方法纳入2017年5月至2020年6月荆门市第二人民医院收治的胃癌患者298例,其中胃癌腹膜转移患者87例作为转移组,胃癌无腹膜转移患者132例作为无转移组,胃癌预后良好患者79例作为对照组。通过实时荧光定量PCR检测受试患者腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p的表达水平。用受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)分析腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p检测对胃癌腹膜转移的诊断价值。结果转移组腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p的相对表达水平均高于无转移组和对照组(P0.05),无转移组与对照组腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p的相对表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p检测用于鉴别胃癌腹膜转移患者与胃癌无腹膜转移患者的灵敏度分别为93%、91%、92%,特异度分别为93%、92%、91%。腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p联合检测对胃癌腹膜转移诊断的灵敏度为94.25%,特异度为90.99%,准确度为91.95%。结论腹腔灌洗液外泌体中miR-21、miR-320c、miR-1225-5p的表达水平可作为诊断胃癌腹膜转移的潜在标志物。     

血清miR-126和miR-1323水平与食管癌关系及诊断价值

目的探讨血清miR-126和miR-1323在食管癌发生、发展中的作用及其对食管癌的诊断价值。方法食管癌患者87例为食管癌组,食管良性病变患者87例为食管良性病变组,体检健康者45例为健康对照组,采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-126和miR-1323相对表达量;观察食管癌患者血清miR-126和miR-1323相对表达量与临床病理指标的关系;绘制ROC曲线,评估血清miR-126和miR-1323相对表达量诊断食管癌的效能;将对数生长期人食管癌EC9706细胞分为正常培养组、miR-126模拟剂组、miR-126抑制剂组、miR-1323模拟剂组和miR-1323抑制剂组,正常培养组细胞正常培养,miR-126模拟剂组、miR-126抑制剂组、miR-1323模拟剂组和miR-1323抑制剂组分别转染miR-126模拟剂、miR-126抑制剂、miR-1323模拟剂和miR-1323抑制剂。转染后24、48、72 h时,采用CCK-8法检测5组细胞增殖率;转染后72 h采用Transwell小室试验检测迁移细胞数。结果食管癌组血清miR-126相对表达量(0.92±0.35)低于食管良性病变组(1.52±0.48)和健康对照组(1.76±0.52),食管良性病变组低于健康对照组(P0.05);食管癌组血清miR-1323相对表达量(3.74±0.98)高于食管良性病变组(2.14±0.87)和健康对照组(1.63±0.64),食管良性病变组高于健康对照组(P0.05)。血清miR-126、miR-1323相对表达量的最佳截断值分别为1.16、2.78时,诊断食管癌的AUC分别为0.836(95%CI:0.773～0.888,P0.001)、0.883(95%CI:0.826～0.927,P0.001),灵敏度分别为75.9%、83.9%,特异度分别为80.5%、81.6%;二者联合检测诊断食管癌的AUC(0.974)高于miR-126和miR-1323单独检测(P0.05)。食管癌组血清miR-126和miR-1323相对表达量在性别、年龄、肿瘤部位和病理类型上差异无统计学意义(P0.05),在临床分期、肿瘤直径、分化程度和淋巴结转移上差异有统计学意义(P0.05)。miR-126模拟剂组和miR-1323抑制剂组转染72 h时迁移细胞数和转染48、72 h时细胞增殖率小于正常培养组(P0.05);miR-126抑制剂组和miR-1323模拟剂组转染72 h时迁移细胞数和转染48、72 h时细胞增殖率大于正常培养组(P0.05)。miR-126模拟剂组和miR-1323抑制剂组转染72 h时迁移细胞数和转染48、72 h时细胞增殖率小于miR-1323模拟剂组和miR-126抑制剂组(P0.05),miR-126模拟剂组与miR-1323抑制剂组、miR-126抑制剂组与miR-1323模拟剂组比较差异均无统计学意义(P0.05);5组细胞转染72 h时细胞增殖率高于转染24、48 h时(P0.05),转染48 h时高于转染后24 h时(P0.05),5组细胞增殖率均随转染时间延长而增高。结论 miR-126和miR-1323参与了食管癌的发生、发展过程,联合诊断食管癌具有较高的诊断效能,其表达水平可预测食管癌的临床分期及预后,对临床食管癌放、化疗方案的选择有一定价值。     

血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的研究血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达变化及临床应用价值。方法回顾性研究。收集南方医科大学南方医院2016年11月至2018年2月就诊的92例非小细胞肺癌患者和91名健康对照者的血清,分离血清外泌体,同时进行RNA提取。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-744-5p的表达量,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价外泌体miR-744-5p的诊断效能。结果非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0122±0.0197)较健康对照组(0.0936±0.0819)明显下调,差异有统计学意义(U=553.5,P<0.001)。在肺癌组中,早、晚期肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0117±0.0139,0.0126±0.0212)与健康对照组相比,均明显降低(U=72.5,U=471.5,P均<0.001);肺腺癌外泌体miR-744-5p表达水平(0.0106±0.0203)低于肺鳞癌(0.0173±0.0178),差异具有统计学意义(U=394.5,P<0.001)。ROC曲线显示血清外泌体miR-744-5p能够有效区分非小细胞肺癌患者和健康人群,曲线下面积为0.9339(95%CI=0.8996~0.9681,P<0.0001);外泌体miRNA-744-5p能够有效诊断早期肺癌,曲线下面积为0.9431(95%CI=0.8837~1.0000,P<0.0001)。结论血清外泌体miR-744-5p有希望作为非小细胞肺癌非侵入性的分子诊断标志物,但尚需要进一步比较研究和扩大验证。     

血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测对乙型肝炎相关早期肝细胞癌的诊断价值

目的探讨血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测对乙型肝炎(简称乙肝)相关早期肝细胞癌的诊断价值。方法选取2018年1月至2019年12月该院收治的乙肝相关早期肝细胞癌患者120例作为肝癌组,120例肝炎患者作为肝炎组,120例健康体检者作为对照组。通过实时荧光定量PCR检测患者血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平。用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平用于乙肝相关早期肝细胞癌诊断的价值。结果 3组间外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平比较,差异有统计学意义(P0.05),其中肝癌组外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平高于肝炎组和对照组(P0.05),肝炎组外泌体miR-15b、miR-224、miR-501相对表达水平高于对照组(P0.05)。血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501检测用于鉴别乙肝相关早期肝细胞癌和肝炎的灵敏度分别为93.00%、93.00%、95.00%,特异度分别为94.00%、93.00%、93.00%;用于诊断乙肝相关早期肝细胞癌的灵敏度分别为95.00%、96.00%、94.00%,特异度分别为95.00%、95.00%、93.00%。血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501联合检测用于乙肝相关早期肝细胞癌诊断的灵敏度为93.33%,特异度为92.92%,准确度为93.05%。结论血清外泌体miR-15b、miR-224、miR-501是乙肝相关早期肝细胞癌诊断的潜在标志物。     

乳腺癌患者血清miR-765,miR-200b水平检测及与临床病理学相关研究

目的 探讨乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b的表达及其临床应用价值。方法 选取乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-765和miR-200b的表达水平,评价指标的诊断价值,并分析与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 乳腺癌患者血清miR-765和miR-200b相对表达量均显著性低于乳腺良性疾病患者(t=3.955,2.657,P<0.05)和健康对照者(t=4.465,3.518,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-765在乳腺癌诊断中的AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.897(95%CI:0837～0.957)。miR-765联合miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.952(95%CI:0.941～0.990),两者联合优于单一检测miR-765或miR-200b。在乳腺癌患者中血清miR-765相对表达量与临床分期相关(t=3.222,P<0.05); miR-200b相对表达量与临床分期、淋巴结转移相关(t=1.855,3.987,P均<0.05)。结论 乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b表达水平显著降低,并与乳腺癌临床病理特征明显相关,血清miR-765与miR-200b联合检测具有较高的临床应用价值。     

血清miR-10b在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的探讨乳腺浸润性导管癌患者血清miR-10b表达情况及其与临床病理特征的关系。方法乳腺浸润性导管癌患者29例为乳腺癌组,成年女性体检健康者48例为对照组;采用实时荧光定量PCR法检测2组血清miR-10b相对表达量;绘制ROC曲线,评估血清miR-10b水平对乳腺浸润性导管癌的诊断价值,分析其与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组血清miR-10b相对表达量(2.140±1.769)高于对照组(1.408±1.328)(P0.05);当血清miR-10b最佳截断值为0.334时,诊断乳腺浸润性导管癌的AUC为0.646(95%CI:0.523～0.769),灵敏度为89.70%,特异度为41.70%;乳腺癌组术前有淋巴结转移患者血清miR-10b相对表达量(3.449±1.855)高于无淋巴结转移者(1.077±0.630)(P0.05),不同年龄、月经状态、肿瘤直径及雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2阳性或阴性患者血清miR-10b相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论血清miR-10b对乳腺浸润性导管癌有一定诊断价值,其升高可能与患者不良预后有关。     

男性不育患者精液质量与精浆微量元素水平及精浆外泌体miR-184水平的关系

目的 探讨男性不育患者精液质量与精浆微量元素水平及精浆外泌体（exosome）miR-184水平的关系。方法 选取2022年1月至2023年7月155例男性不育患者为不育组,另选同期155例男性体检正常者为正常组。比较两组一般资料、精液质量参数、微量元素、外泌体中miR-184水平,另通过Spearman秩相关分析男性不育患者与上述实验室指标的相关性。结果 不育组精子浓度、精子总活力（PR+NP）、前向运动精子（PR）、精子平均曲线运动速度、精子平均直线运动速度、精子平均路径运动速度、精子头部侧向平均振幅（ALH）低于正常组（P <0.05）;不育组Zn、Mg、Ca水平低于正常组,Cu、Pb水平及miR-184相对表达量高于正常组（P <0.05）;男性不育患者Zn、Cu元素水平分别与精子浓度、精子总活力（PR+NP）、前向运动精子（PR）呈正、负相关,Pb元素水平与精子头部侧向平均振幅（ALH）呈负相关,且P <0.05。男性不育患者miR-184相对表达量与精子浓度、精子总活力（PR+NP）、前向运动精子（PR）、精子平均曲线运动速度呈负相关,且P <0.0...     

急性心肌梗死患者血浆外泌体miR-21-3p/PTEN/AKT 表达水平及诊断价值研究

目的　探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者血浆外泌体miR-21-3p/PTEN/AKT 表达水平及诊断价值。方法　选取2019 年2 月~ 2021 年8 月于陕西省汉中市三二〇一医院内分泌与风湿免疫科住院并诊断为急性心肌梗死的120 例患者作为AMI 组,另选同期在该科住院,经冠脉造影发现冠脉无明显狭窄患者120 例为对照组。提取所有研究对象的血浆外泌体,并采用透射电镜和Western blot 鉴定。qRT-PCR 法检测外泌体中miR-21-3p 表达水平,Western blot 检测外泌体中蛋白酪氨酸酶基因（PTEN）和丝苏氨酸激酶（AKT）蛋白的表达水平。Pearson 相关分析明确AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p,PTEN 与AKT 表达水平之间的相关性。绘制受试者工作特征（receiver operatorcharacteristic curve,ROC）曲线,根据曲线下面积（area under curve, AUC）分析血浆外泌体miR-21-3p,PTEN 及AKT对AMI 的联合诊断价值。结果　透射电镜观察到,血浆外泌体呈双层膜的泡状结构,且外泌体特征蛋白CD9,CD63和CD81 在外泌体中表达明显升高。与对照组相比,AMI 患者的miR-21-3p（1.45±0.31 vs 1.05±0. 17）和AKT（1.23±0.27 vs 1.03±0.15）表达显著上升,而PTEN（0.68±0.10 vs 1.01±0. 23 ）表达水平显著下降,差异有统计学意义（t=125.735,112.628,72.309,均P ＜ 0.001）。Pearson 相关性分析显示,AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p 和PTEN 呈明显负相关（r=-0.440,P=0.000）,PTEN 和AKT 呈明显负相关（r=-0.674,P =0.000）,而miR-21-3p 和AKT 之间无明显相关性（r=-0.072,P=0.438）。ROC 曲线结果显示,血浆外泌体miR-21-3p,PTEN 及AKT 单独检测时,其对应曲线下面积（AUC）分别为0.805,0.782 及0.720,联合检测时AUC 为0.885,比单独检测更具有诊断价值,差异有统计学意义（P<0.001）。结论　AMI 患者血浆外泌体中miR-21-3p 表达上升,其与PTEN 呈负相关,PTEN 又负向调控AKT 表达。三项指标均可作为辅助诊断AMI 的潜在标志物,且联合检测对AMI 有较高的诊断价值。     

miR-206、miR-125、miR-21在乳腺癌新辅助化疗疗效和预后评估中的价值

目的 探讨miR-206、miR-125、miR-21在乳腺癌新辅助化疗疗效和预后评估中的价值。方法 选取2021年7月—2022年7月河北北方学院附属第一医院行新辅助化疗的乳腺癌患者82例(乳腺癌组),以40名健康体检者作为正常对照组。收集所有对象的临床资料,并检测乳腺癌患者化疗前和正常对照者的血清miR-206、miR-125、miR-21水平。根据新辅助化疗的疗效分为化疗无效组和化疗有效组。化疗结束后随访1年,根据乳腺癌患者的生存情况分为生存组和死亡组。采用Logistic回归分析评估乳腺癌患者新辅助化疗疗效的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标判断新辅助化疗疗效的效能。采用Kaplan-Meier生存曲线评估乳腺癌患者的生存情况。采用Cox回归分析评估影响乳腺癌患者生存率的危险因素。结果 乳腺癌组血清miR-206、miR-125相对表达量低于正常对照组(P<0.001),血清miR-21水平高于正常对照组(P<0.001)。化疗无效组与化疗有效组之间肿瘤直径、临床分期、病理分级和血清miR-206、miR-125、miR-21相对表达量差异均有统...     

血清miR-181b及miR-210在妊娠期高血压疾病中表达及与炎性细胞因子的相关性

目的探讨妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders in pregnancy, HDP)患者血清miR-181b、miR-210表达变化,分析其与白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的关系。方法 HDP患者226例,其中妊娠期高血压(gestational hypertension, GH)60例(GH组)、轻度子痫前期(mild preeclampsia, MP)90例(MP组)、重度子痫前期(servere preeclampsia, SP)76例(SP组),同期健康孕妇60例为对照组。检测4组血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量及IL-1β、IL-6及TNF-α水平;Pearson相关分析HDP患者血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6及TNF-α的相关性。结果对照组、GH、MP、SP组血清miR-181b mRNA相对表达量(1.42±0.65、5.73±1.60、10.94±4.28、17.13±8.16)、miR-210 mRNA相对表达量(0.84±0.13、3.62±1.05、4.74±1.36、7.92±2.17),IL-1β[(2.60±0.84)、(11.26±2.53)、(17.65±6.24)、(23.92±9.16)ng/L]、IL-6[(90.26±27.45)、(106.35±33.74)、(128.42±36.18)、(151.46±40.27)ng/L]及TNF-α[(12.40±2.28)、(19.25±4.42)、(35.84±6.53)、(64.73±9.50)ng/L]水平依次增高(P0.05);HDP患者血清miR-181b mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.694,P0.001;r=0.735,P0.001;r=0.846,P0.001)、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.548,P=0.003;r=0.718,P0.001;r=0.815,P0.001)。结论 HDP患者miR-181b及miR-210表达上调,且上调程度与HDP病情严重程度及IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化相关,可能参与HDP的发生、发展。     

人胶质瘤组织中miR-125b表达研究

目的:探讨miR-125b在人胶质瘤组织中的表达。方法:选取不同恶性程度胶质瘤手术患者20例为胶质瘤组(Ⅰ级5例、Ⅱ级5例、Ⅲ级5例、Ⅳ级5例),另选择实施脑外伤内减压手术的患者5例为正常对照组。术中取下胶质瘤组胶质瘤组织和正常对照组的正常脑组织,采用荧光定量PCR方法检测miR-125b的表达。结果:正常对照组的miR-125b相对表达量为(0.28±0.12),胶质瘤组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的miR-125b相对表达量分别为(0.43±0.07)、(0.69±0.08)、(0.90±0.05)、(1.12±0.04),差异有统计学意义(P0.05)。肿瘤病理恶性程度越高,生存期越短(P0.05)。结论:miR-125b异常表达可能与胶质瘤的发生和发展密切相关。     

miR-21、miR-155在胰腺癌患者血浆中的表达及临床意义

目的研究微小RNA-21(miR-21)、微小RNA-155(miR-155)在胰腺癌早期患者血清中的表达水平,探讨其与胰腺癌发病之间的相互关系。方法回顾性采集42例胰腺癌患者、42例慢性胰腺炎患者、42例健康对照组患者血液。利用荧光定量PCR仪对血液中miR-21、miR-155的表达水平进行检测,比较miR-21、miR-155与胰腺疾病临床特征之间的关系,绘制出ROC曲线,判定miR-21与miR-155表达水平与胰腺癌之间存在的联系。结果 miR-21、miR-155在胰腺癌患者血清中表达水平(3.88±3.12,5.29±4.37)高于慢性胰腺炎患者、健康对照组的表达水平(1.09±2.74、0.14±2.59,0.31±3.73、-1.31±3.47),差异有统计学意义(P0.05);慢性胰腺炎患者血浆中miR-21、miR-155表达水平(1.09±2.74,0.31±3.73)稍高于健康对照组(0.14±2.59,-1.31±3.47),但差异无统计学意义(P0.05);miR-21、miR-155在胰腺癌与健康对照组、胰腺癌与慢性胰腺炎组、胰腺癌与慢性胰腺癌+健康对照组3组人群中对胰腺癌的诊断效能的曲线下面积(AUC)分别为0.863(95%CI:0.779,0.938)、0.747(95%CI:0.648,0.833)和0.793(95%CI:0.714,0.873);在鉴别胰腺癌与健康对照组准确性为73.12%、胰腺癌与慢性胰腺炎中为67.81%;在胰腺癌+慢性胰腺炎+健康对照组中诊断胰腺癌的敏感度和特异度分别为70.31%与68.92%,准确性为69.61%。结论胰腺癌患者血浆miR-21与miR-155的表达水平明显异常,可作为胰腺癌早期诊断的依据。     

Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及意义

目的探究exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p在前列腺癌患者尿液中的表达及在前列腺癌诊断和预后评估中的价值。方法回顾性选择2014年5月至2017年3月中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院收治的45例前列腺癌患者、31例前列腺增生患者及26例健康对照者作为研究对象。收集3组受试者尿液,检测exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p表达量。分析exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p与前列腺癌患者临床病理资料的关系及在前列腺癌患者诊断和预后评估中的价值。结果3组受试者尿液中exosomal miR-501-5p、miR-501-3p的表达量比较,差异有统计学意义(P<0.001)。前列腺癌组exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p表达量(0.14±0.06、0.08±0.03)低于前列腺增生组(0.31±0.13、0.14±0.05)和健康对照组(0.30±0.09、0.17±0.04),差异均有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌患者尿液中exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p相对表达量与临床分期和骨转移有关(P<0.05),与年龄、Gleason评分和前列腺特异抗原水平无关(P>0.05)。Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测诊断前列腺癌的效能高于exosomal miR-501-3p单独诊断(P<0.05),与exosomal miR-196a-5p诊断效能比较,差异无统计学意义(P>0.05)。45例前列腺癌患者2年内共死亡14例,生存患者31例。前列腺癌组生存患者中exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p的表达量(0.17±0.04和0.09±0.02)均高于死亡患者(0.10±0.06和0.06±0.03),差异均有统计学意义(P<0.05)。Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测诊断前列腺癌患者预后的效能高于exosomal miR-501-3p单独诊断(P<0.05),与exosomal miR-196a-5p诊断效能比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Exosomal miR-196a-5p、miR-501-3p联合检测有助于前列腺癌患者的诊断及预后评估。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中miR-146a表达分析

目的探讨miR-146a在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法 MG患者35例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,采用Ficoll分层液法分离外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR法检测2组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量;Pearson法分析MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分的相关性。结果观察组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(3.41±0.25)明显高于对照组(0.95±0.12)(P0.05);全身型MG患者外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(4.18±0.21)高于眼肌型者(3.01±0.15)(P0.05);MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分呈正相关(r=0.584,P0.001)。结论 MG患者外周血单个核细胞miR-146a表达明显上调,且与病情严重程度有关。     

miR-22修饰的骨髓间充质干细胞外泌体抑制急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡

目的探讨miR-22修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法扩增培养从SD大鼠骨髓中分离的BMSCs,将携带miR-22重组慢病毒载体及其阴性对照(miR-NC)载体分别转染至BMSCs,并提取转染后BMSCs的外泌体。将60只SD大鼠随机分为Sham组、AMI组、Exo BMSCs组、Exo BMSCs/miR-NC组和Exo BMSCs/miR-22组,每组12只。采用冠状动脉左前降支结扎术构建AMI大鼠模型,于心肌梗死区原位注射外泌体进行干预。干预72 h后,采用超声心动图监测大鼠心脏功能;TTC染色观察大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡水平;qRT-PCR检测心肌组织中miR-22及p53 mRNA表达水平;Western blot检测心肌组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶剪切体(Cleaved-caspase-3)及p53蛋白表达水平。结果与Sham组比较,AMI组大鼠心脏功能明显降低(P <0.05),心肌梗死面积(%:1.16±0.84 vs.38.68±5.31)和心肌细胞凋亡率(%:9.04±1.95 vs.66.70±5.92)明显增加(P <0.05),心肌组织中miR-22和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P <0.05),而p53、Bax和Cleavedcaspase-3等蛋白表达水平明显升高(P <0.05);与AMI组比较,各外泌体干预组大鼠心功能明显改善(P <0.05),心肌梗死面积(%:38.68±5.31 vs.23.54±3.94,22.33±4.12,13.79±2.25)和心肌细胞凋亡率(66.70±5.92 vs.43.73±3.39,42.67±2.87,30.73±2.97)明显降低(P <0.05),心肌组织中miR-22以及Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P <0.05),而p53、Bax和Cleaved-caspase-3等蛋白表达水平明显降低(P <0.05),其中Exo BMSCs/miR-22组大鼠各指标改善情况均优于Exo BMSCs组和Exo BMSCs/miR-NC组。结论 miR-22修饰的BMSCs外泌体可有效抑制p53介导的心肌细胞凋亡,从而改善AMI大鼠的心功能。     

miR-223与脓毒症炎性反应的相关性

目的探讨miR-223与脓毒症炎性反应的相关性及临床意义。方法 187例脓毒症患者,根据28 d生存情况分为生存组132例和死亡组55例,采用实时荧光定量PCR法检测2组患者血浆miR-223相对表达量,采用ELISA法检测2组患者血清C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平;采用Spearman相关分析脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与急性生理学和慢性健康(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Scoring System, APACHE)Ⅱ评分及血清CRP、TNF-α、IL-1β、-6、-8、-10水平的相关性;绘制ROC曲线,评估血浆miR-223相对表达量预测脓毒症患者存活的效能。结果死亡组患者血浆miR-223相对表达量[4.898(2.591,7.327)]明显高于生存组[2.727(1.043,4.017)](P0.05);死亡组患者血清CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平高于生存组(P0.05);脓毒症患者血浆miR-223相对表达量与APCHEⅡ评分(r=0.459,P0.001)、CRP(r=0.326,P0.001)、TNF-α(r=0.325,P0.001)、IL-1β(r=0.165,P=0.024)、IL-6(r=0.229,P=0.002)和IL-8(r=0.154,P=0.035)均呈正相关,与IL-10呈负相关(r=-0.289,P0.001);血浆miR-223相对表达量最佳截断值为3.975时,预测脓毒症患者存活的AUC为0.600(95%CI:0.505～0.695),灵敏度为83.5%,特异度为38.9%。结论血浆miR-223相对表达量与脓毒症患者病情严重程度及炎性反应明显相关,可作为判断脓毒症预后的生物标志物之一。