肠道病毒性脑炎患儿外周血T淋巴细胞亚群与自然杀伤细胞及相关免疫细胞因子水平变化

目的探讨肠道病毒性脑炎(enteroviral encephalitis,EVE)患儿外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、相关免疫细胞因子水平变化及其临床意义。方法246例EVE患儿为EVE组,同期体检健康儿童100例为对照组,测定2组外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)A、IgG、IgM、白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferonγ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平。结果EVE组CD8^+T淋巴细胞比率[(24.13±9.71)%]、CD3^+T淋巴细胞比率[(61.42±12.26)%]及血清IL-6[(41.63±34.26)ng/L]、TNF-α[(2.92±1.55)ng/L]、IFN-γ[(9.45±4.26)ng/L]水平高于对照组[(20.11±5.98)%、(57.94±10.53)%、(12.45±10.46)ng/L、(2.04±0.73)ng/L、(6.27±3.44)ng/L](P<0.05),CD4^+/CD8^+(1.37±0.75)、CD20^+T淋巴细胞比率[(0.87±0.75)%]、CD3^-CD16^+CD56^+T淋巴细胞比率[(7.87±5.26)%]、IgA[(0.45±0.32)g/L]、IgG[(7.67±1.35)g/L]及血清IL-2[(3.52±1.02)ng/L]水平低于对照组[1.83±1.23、(1.47±1.41)%、(13.23±6.11)%、(1.05±0.22)g/L、(8.02±1.42)g/L、(4.13±1.28)ng/L](P<0.05);EVE组CD4^+T淋巴细胞比率[(28.81±9.56)%]、IgM[(1.35±0.21)g/L、IL-4[(3.17±0.81)ng/L]与对照组[(30.95±9.22)%、(1.34±0.19)g/L、(3.12±0.86)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论T淋巴细胞调节紊乱、体液免疫紊乱可能参与EVE的发病过程。     

Graves病患者CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞及其分泌的细胞因子表达研究

目的探讨CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)及其分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)等细胞因子和血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT_3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT_4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)和促甲状腺素受体抗体(thyrotrophin receptor antibody,TRAb)水平在Graves病患者体内表达情况。方法 Graves病患者30例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,检测2组外周血CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞比率、CD3~+CD56~+NKT分泌的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平及血清FT_3、FT_4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb水平。结果观察组CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞总数比率[(1.37±0.43)%]低于对照组[(2.47±0.39)%](P0.05);观察组血清FT_3[(23.76±5.51)pmol/L]、FT_4[(88.29±31.35)pmol/L]、TSH[(1.68±1.01)mu/L]、TPOAb[(293.58±141.32)u/mL]、TGAb[(380.58±215.31)u/mL]、TRAb抗体[(10.75±8.23)u/mL]水平均高于对照组[FT_3(4.79±0.59)pmol/L、FT_4(17.84±3.15)pmol/L、TSH(0.08±0.01)u/L、TPOAb(20.06±4.85)u/mL、TGAb(31.48±22.68)u/mL、TRAb抗体(1.21±0.23)u/mL](P0.05);观察组血清IL-6[(2.51±0.31)μg/L]、IL-10[(43.79±21.54)ng/L]、IL-12[(1 306.14±514.39)ng/L]、TNF-α[(4.38±0.66)ng/L]水平均高于对照组[(1.01±0.20)μg/L、(27.68±5.41)ng/L、(584.34±214.57)ng/L、(2.41±0.81)ng/L](P0.05);观察组IL-2表达水平[(1.26±0.43)ng/L]低于对照组[(4.81±0.71)ng/L](P0.05)。结论 Graves病患者存在免疫功能紊乱情况及免疫调节细胞失衡,通过CD3~+CD56~+NKT减少及其分泌的细胞因子调节Th1/Th2分化,参与Graves病的发病过程。     

重型再生障碍性贫血患者CD8+效应T细胞损伤骨髓造血途径的研究

目的 研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血CD8+ CD25+和CD8+HLA-DR+T细胞数量及其杀伤靶细胞的途径,探讨SAA的免疫发病机制。方法 应用流式细胞术检测29例SAA(初治14例、缓解15例)患者及12名健康对照者外周血CD8+ CD25+和CD8+ HLA-DR+T细胞的数量及其胞质内穿孔素、颗粒酶B、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、胞膜FasL表达。结果 SAA初治组患者CD8+ CD25+T细胞占CD8+和CD3+T细胞的比例分别为(3.67±2.58)％和(2.25±1.35)％,缓解组为(5.19±4.29)％和(2.98±1.35)％,正常对照组为(4.84±2.31)％和(2.11±1.88)％,CD8+CD25+T细胞占CD8+和CD3+T细胞的比例三组间比较差异无统计学意义(P值均＞0.05)。初治组CD8+ HLA-DR+T细胞占CD8+T细胞比例为(39.30±8.13)％,缓解组为(20.65±5.38)％,正常对照组为(18.34±6.68)％,初治组明显高于缓解组及正常对照组(P＜0.01),缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。SAA初治组CD8+ HLA-DR+T细胞占CD3+T细胞比例为(27.81±7.10)％,缓解组为(12.02±3.03)％,正常对照组为(8.50±2.33)％,初治组明显高于缓解组及正常对照组(P＜0.01),缓解组明显高于正常对照组(P＜0.05)。SAA初治组CD8+ HLA-DR+T细胞穿孔素、颗粒酶、TNF- β、FasL中位表达比例分别为8.51％、96.08％、72.11％、94.25％,均明显高于缓解组(1.78％、85.20％、34.38％、51.20％)及正常对照组(1.86％、82.09％、17.92％、32.91％)(P值均＜0.05),缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 SAA患者外周血CD8+ HLA-DR+效应T细胞比例增加,CD8+效应T细胞影响靶细胞的穿孔素-颗粒酶途径、细胞因子(TNF-β)途径、Fas/FasL途径均参与了骨髓造血细胞损伤的过程。     

肝素雾化吸入治疗喘息样支气管炎反复发作的免疫学机制

目的探讨在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗小儿喘息样支气管炎反复发作的疗效及免疫学机制。方法喘息性支气管炎患儿50例,随机分为观察组30例和对照组20例,对照组给予吸氧、抗感染等常规治疗,观察组在对照组基础上给予肝素100u/kg+生理盐水5mL雾化吸入,2次/d,共14d。记录2组喘息时间和肺部啰音时间;分别于治疗前及治疗14d后检测2组血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-8、正常T细胞表达分泌的活性调节蛋白(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、干扰素-γ(interferon-gamma,INF-γ)水平及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,并与18例体检健康者(阴性对照组)进行比较。结果观察组喘息时间[(4.5±1.1)d]及肺部啰音时间[(6.9±0.8)d]较对照组[(6.6±1.4)、(8.1±0.9)d]短(P<0.01);治疗前,观察组和对照组血清IL-4[(2.45±0.22)、(2.38±0.18)ng/L]、IL-8[(33.90±2.20)、(32.10±2.00)ng/L]、RANTES[(48.8±8.7)、(41.9±9.5)μg/L]水平均明显高于阴性对照组[IL-4(1.41±0.17)ng/L、IL-8(15.60±2.20)ng/L、RANTES(13.3±4.8)μg/L](P<0.01),INF-γ[(0.37±0.14)、(0.38±0.09)ng/L]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(6.4±0.9)%、(5.5±0.8)%]均低于阴性对照组[(1.44±0.20)ng/L、(7.9±1.2)%](P<0.01);观察组治疗后血清IL-4[(1.52±0.13)ng/L]、IL-8[(18.60±2.10)ng/L]及RANTES[(23.1±4.5)μg/L]水平均较对照组治疗后[(1.78±0.16)ng/L)、(22.90±1.20)ng/L、(28.0±6.1)μg/L]降低(P<0.05),观察组治疗后血清INF-γ[(1.46±0.16)ng/L)]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(7.2±0.9)%]均较对照组治疗后[(0.83±0.09)ng/L、(6.4±1.0)%]增高(P<0.05)。结论喘息样支气管炎反复发作患儿在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗,可下调血清IL-4、IL-8、RANTES水平,上调INF-γ和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,缩短喘息时间及肺部啰音时间。     

不同剂量丙种球蛋白对急性免疫性血小板减少症患儿血清白细胞介素-6和白细胞介素-10及自然杀伤细胞表达的影响

目的探讨急性免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患儿应用不同剂量丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin, IVIG)治疗前、后血清白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-10水平及自然杀伤(natural killer, NK)细胞占外周血单个核细胞百分比(NK细胞比率)变化。方法新确诊急性ITP患儿50例,随机分为低剂量组和高剂量组各25例,同期健康儿童25例为对照组。低剂量组静脉滴注IVIG 0.4 g/(kg·d),高剂量组静脉滴注IVIG 1.0 g/(kg·d),均连续2 d;之后均口服泼尼松1.5～2.0 mg/(kg·d),血小板计数≥100×10~9/L后稳定1周,逐渐减量至停药。分别于IVIG治疗前、后测定血清IL-6、IL-10水平,NK细胞计数及NK细胞比率,并与对照组进行比较。结果急性ITP患儿治疗前血清IL-6[(7.72±6.37)ng/L]、IL-10[(6.01±3.67)ng/L]高于对照组[(3.63±2.55)、(4.28±1.97)ng/L](P0.05),NK细胞比率[(9.06±3.99)%]低于对照组[(11.61±5.23)%](P0.05),NK细胞计数[(571.31±394.35)个/μL]与对照组[(602.97±497.27)个/μL]比较差异无统计学意义(P0.05)。IVIG治疗前,低、高剂量组血清IL-6[(7.18±6.04)、(11.85±2.12)ng/L]、IL-10[(5.39±3.15)、(6.64±4.09)μg/L]、NK细胞计数[(544.20±340.42)、(598.59±447.29)个/μL]及NK细胞比率[(9.11±3.73)%、(9.01±4.30)%]比较差异无统计学意义(P0.05)。IVIG治疗后,低、高剂量组血清IL-6水平[(8.76±5.12)、(16.35±6.87)ng/L]均高于治疗前(P0.05),IL-10水平[(4.75±2.50)、(5.22±3.90)ng/L]、NK细胞比率[(6.90±4.13)%、(8.31±5.52)%]、NK细胞计数[(340.39±471.55)、(374.24±268.27)个/μL]较治疗前下降(P0.05),高剂量组治疗后IL-6水平高于低剂量组(P0.05),IL-10、NK细胞计数及NK细胞比率与低剂量组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论低、高剂量IVIG均可上调ITP患儿血清IL-6水平,降低IL-10、NK细胞计数、NK细胞比率。     

维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的影响及其治疗支气管哮喘的效果。方法支气管哮喘患儿160例,随机分为观察组和对照组各80例,对照组在常规对症支持治疗基础上给予硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂1揿/次,3次/d,喷吸;观察组在对照组治疗基础上给予维生素D_30.25μg/次,1次/d,口服;2组疗程均为12周。采用ELISA法检测2组治疗前、后血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3]、白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-10,IL-17水平,采用流式细胞技术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达,比较2组疗效。结果观察组总有效率(96.2%)高于对照组(87.5%)(P0.05);观察组和对照组治疗后CD4~+CD25~+调节性T细胞[(7.56±1.24)%、(5.44±1.34)%]、1,25(OH)_2D_3[(36.06±5.98)、(31.44±6.32)nmol/L]水平均高于治疗前[CD4~+CD25~+调节性T细胞:(3.53±1.03)%、(3.54±1.01)%;1,25(OH)_2D_3:(25.64±5.24)、(25.72±4.65)nmol/L],Th17细胞[(1.94±0.73)%、(2.87±0.97)%],IL-17[(58.26±10.24)、(76.21±9.42)ng/L]、IL-4[(14.26±3.24)、(21.21±4.26)ng/L]及IL-10[(42.44±9.53)、(64.37±11.33)ng/L]水平均低于治疗前[Th17细胞:(4.38±1.68)%、(4.36±1.21)%;IL-17:(110.22±15.32)、(109.24±16.64)ng/L;IL-4:(41.22±9.32)、(41.24±10.64)ng/L;IL-10:(92.43±12.83)、(92.40±10.42)ng/L](P0.05),且观察组治疗后各指标改善较对照组明显(P0.05)。结论补充维生素D_3可提高支气管哮喘患儿临床疗效,其机制可能与上调CD4~+CD25~+调节性T细胞、抑制Th17细胞表达有关。     

全反式维A酸对慢性阻塞性肺疾病患者外周血中Th17/Treg平衡的影响和意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血Th17细胞、Treg细胞分别占CD4+T细胞比例及全反式维A酸(ATRA)对其影响,探讨ATRA对COPD患者外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg的影响及其对COPD的意义。方法收集COPD急性加重期患者23例(A组),COPD缓解期患者23例(B组),肺功能正常健康吸烟者23例(C组),肺功能正常健康非吸烟者23例(D组);分别抽取试验对象外周静脉血制备单个核细胞悬液(PBMC),分为空白对照组和ATRA干预组,应用流式细胞术检测所有对象ATRA干预前后Th17细胞、Treg细胞分别占CD4+T细胞的比例。结果 CD4+Th17细胞占外周血CD4+细胞比例:空白对照组均高于ATRA干预组(P<0.05),空白对照组中,A组[(6.95±2.33)%]高于B组[(5.21±1.37)%]、C组[(4.15±1.23)%]、D组[(2.84±1.21)%](P<0.05),B组高于C、D组(P<0.05),C组高于D组(P<0.05);ATRA干预组中,A组[(4.66±1.86)%]高于B组[(2.77±1.10)%]、C组[(3.10±1.28)%]、D组[(1.68±0.80)%](P<0.05),B组和C组相比差异无统计学意义(P>0.05),二者均高于D组(P<0.05);CD4+Treg细胞占外周血CD4+细胞比例:各ARTA干预组均高于空白对照组(P<0.05),空白对照组中,C组[(4.64±1.36)%]高于A组[(2.50±1.21)%]、B组[(3.46±1.29)%]、D组[(3.55±1.59)%](P<0.05),B组和D组相比差异无统计学意义(P>0.05),二者均高于A组(P<0.05),ATRA干预组中,C组[(6.28±1.44)%]高于A组[(3.26±1.44)%]、B组[(4.53±1.54)%]、D组[(4.45±1.94)%](P<0.05),B组和D组相比差异无统计学意义(P>0.05),二者均高于A组(P<0.05)。结论 Th17和Treg的失衡可能和COPD的发病机制相关,且Th17和Treg比例失衡程度和患者病情严重程度相关,ATRA在一定程度上能纠正Th17和Treg失衡。     

NK细胞及其受体表达与再生障碍性贫血的相关性研究

目的 研究再生障碍性贫血(AA)病人外周血NK细胞及其受体表达的变化，探讨NK细胞在AA发病机制中的作用。方法 利用流式细胞术检测28例AA病人(其中SAA 9例，NSAA 19例)外周血NK细胞功能，包括NK细胞数量，活化性受体NKG2D,抑制性受体NKG2A,穿孔素，颗粒酶β的表达，T淋巴细胞亚群及与造血指标的相关性分析，另有18例健康志愿者为对照组。结果 AA病人外周血NK细胞数，NKG2D,颗粒酶表达减少，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);NSAA病人活化性受体NKG2D表达与血红蛋白含量(r=0.979,P=0.007)、血小板数(r=0.943,P=0.018)有相关性；颗粒酶表达与血红蛋白含量(r=0.942,P=0.018)、网织红细胞数(r=0.906,P=0.029)有相关性；SAA病人的穿孔素表达与网织红细胞数有相关性(r=0.907,P=0.046); NSAA病人NK细胞的活化性受体NKG2D表达与CD3+T淋巴细胞有相关性(r=0.984,P=0.005);NK细胞的胞浆颗粒酶表达与CD3+T淋巴细胞(r=0.865,P=0.042),CD...     

急性白血病患儿T淋巴细胞亚群及血清白三烯B4含量变化的临床意义

目的 探讨急性白血病(AL)患儿外周血T淋巴细胞亚群和血清白三烯B4含量的变化及临床意义.方法 用免疫荧光流式细胞技术检测40例AL患儿(观察组)及40名正常儿童(对照组)外周血T淋巴细胞亚群CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞水平及自然杀伤(NK)细胞活性;同时采用酶联免疫吸附试验(ELSA)方法检测上述AL患儿与正常儿童血清白三烯B4含量的变化情况.结果 AL患儿CD3+T细胞[(49.51±6.53)%]、CD4+T细胞[(22.15±4.87)%]及CD8+T细胞[(23.41±3.96)%]均低于对照组[分别为(67.63±5.23)%、(34.43±5.07)%(28.17±4.61)%],差异有统计学意义(t=13.698、t=11.047、t=4.953,P＜0.01);AL患儿自然杀伤细胞活性[(5.41±4.25)%]明显低于对照组[(13.10±4.91)%],差异有统计学意义(t=7.498,P＜0.01);而AL患儿血清白三烯B4含量[(25.23±6.24)ng/L]明显高于对照组[(8.28±2.53)ng/L],差异有统计学意义(t=15.921,P＜0.01).结论 AL患儿T淋巴细胞亚群及白三烯B4发生明显改变,对揭示AL发病机制提供重要的理论依据.

Abstract：

Objective To study the changes of T lymphocyte subtype levels and serum levels of leukotriene B4 ( LTB4 )in children with acute leukemia (AL). Methods The activity of T lymphocyte subsets:CD3+ T cells,CD4+ T cells,CD8 + T cell levels and NK cell were detected in 40 cases of AL and 40 control by Flow Cytometry(FCM). The serum level of LTB4 was measured by ELISA in all subjects. Results Compared with normal control , the percentages of CD3 + T cells ( [ 49.51 ± 6.53 ] ％ vs [ 67.63 ± 5.23 ] ％ ), CD4 + T cells ([22.15±4.87]％ vs [34.43 ±5.07]％),CD8+ T cell ([23.41 ±3.96]％ vs [28. 17 ±4.61]％),NK cell ( [5.41 ± 4.25 ] ％ vs [ 13.10 ± 4.91 ] ％ ) were significantly lower in children AL patients, ( Ps ＜0.01 ). However,the serum levels of LTB4 increased significantly in AL patients compared with normal control ( [ 25.23 ± 6.24 ] ng/L vs [ 8.28 ± 2.53 ] ng/L, P ＜ 0.01 ). Conclusion T lymphocyte subtype and serum level of LTB4 showed significant changes in children AL patients compared with normal control, which revealed an important theoretical basis to AL pathogenesis.     

乳腺癌患者外周血中颗粒酶B和穿孔素的表达及意义

目的 分析乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达对乳腺癌的诊断价值，明确颗粒酶B和穿孔素的表达与乳腺癌分子分型、肿瘤分期等临床病理特征的相关性及其对乳腺癌治疗效果的评价。方法 应用流式细胞术检测108例乳腺癌和70例乳腺良性疾病患者样本中CD3⁺T细胞、CD8⁺T细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达；采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各指标对乳腺癌的诊断效能，比较不同临床病理特征乳腺癌患者颗粒酶B和穿孔素的表达及治疗前后各指标的变化。结果 乳腺癌患者T淋巴细胞亚群与NK细胞中颗粒酶B和穿孔素表达均高于对照组，差异均有统计学意义(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示，CD3⁺T细胞、CD8⁺T细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素阳性率的曲线下面积(AUC)大于0.5。CD3⁺T细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达与乳腺癌肿瘤大小及临床分期呈正相关(P <0.05),CD8⁺T细胞中颗粒酶B也与乳腺癌肿瘤大小及临床分期呈正相关(P...     

免疫抑制剂治疗重型再生障碍性贫血患儿的临床效果

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白(antithymocyte globulin, ATG)联合环孢菌素A(cyclosporinem, CsA)治疗儿童重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia, SAA)的临床疗效及对患儿免疫功能的影响。方法 66例SAA患儿,46例采用ATG联合CsA治疗者为观察组,20例应用CsA治疗者为对照组。比较2组治疗前,治疗3、6、12个月免疫功能,分别于治疗3、6、12个月评定治疗效果,并记录治疗期间不良反应发生率及病死率。结果观察组治疗3、6、12个月缓解率(65.22%、69.56%、73.91%)高于对照组(35.00%、40.00%、45.00%)(P0.05);观察组治疗3、6、12个月CD8~+T淋巴细胞比率[(33.26±3.25)%、(28.15±3.24)%、(23.15±4.69)%]、IgG水平[(8.22±3.69)、(7.25±2.85)、(6.25±2.45)g/L]低于对照组[CD8~+T淋巴细胞比率:(39.45±2.58)%、(32.64±1.58)%、(30.16±2.45)%;IgG:(9.68±4.12)、(8.63±2.15)、(8.05±1.23)g/L],CD4~+/CD8~+(0.77±0.15、1.15±0.13、1.78±0.22)、IgA水平[(1.25±0.34)、(1.36±0.25)、(1.62±0.48)g/L]高于对照组[CD4~+/CD8~+:0.67±0.22、0.86±0.15、1.06±2.36;IgA:(1.22±0.16)、(1.28±0.26)、(1.45±0.36)g/L](P0.05);观察组治疗6、12个月CD3~+T淋巴细胞比率[(76.18±4.69)%、(78.59±6.58)%]、CD4~+T淋巴细胞比率[(32.36±5.12)%、(41.25±4.25)%]高于对照组[CD3~+T淋巴细胞比率:(74.56±2.36)、(75.69±3.58)%;CD4~+T淋巴细胞比率:(28.46±2.58)%、(32.15±4.26)%](P0.05);观察组治疗12个月不良反应发生率(56.25%)高于对照组(5.00%)(P0.05),病死率(17.39%)与对照组(25.00%)比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 ATG联合CsA治疗可改善SAA患儿免疫功能,其临床效果明显优于单纯CsA治疗。     

氯沙坦对类风湿性关节炎合并高血压患者白细胞介素-22的抑制作用及机制

目的探讨氯沙坦对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)合并高血压患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中细胞因子白细胞介素(interleukin, IL)-22的抑制作用及机制。方法 RA合并高血压患者20例为RA组,体检健康者20例为健康对照组,单纯高血压患者20例为高血压组。采用ELISA法测定健康对照组及高血压组、RA组治疗前、后血清IL-22水平。采用密度梯度离心法提取RA患者外周血PBMCs,分为空白对照组(正常培养)、刺激组(加CD3和CD28抗体)、阳性对照组(加CD3和CD28抗体+100 mmol/L甲基强的松龙)和实验组(加CD3和CD28抗体+100 mmol/L氯沙坦),采用ELISA法检测各组PBMCs培养上清液中IL-22表达水平;采用Western blot法测定各组PBMCs信号传导相关分子核因子-κB p65、p-p38、p-STAT-3和p-ERK蛋白表达水平。结果 RA组治疗前血清IL-22水平[(52.426±7.673)ng/L]高于健康对照组[(32.285±5.732)ng/L]和高血压组[(34.472±5.045)ng/L](P0.05),高血压组与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05);治疗后RA组血清IL-22水平[(41.269±6.824)ng/L]低于治疗前(P0.05),高血压组[(32.794±5.624)ng/L]与治疗前比较差异无统计学意义(P0.05);刺激组PBMCs培养上清液中IL-22水平[(118.722±16.700)ng/L]高于阳性对照组[(64.624±9.120)ng/L]、实验组[(71.120±12.053) ng/L]和空白对照组[(24.032±6.786)ng/L](P0.05),阳性对照组与实验组比较差异无统计学意义(P0.05);实验组PBMCs内p-STAT-3蛋白表达(2.46±0.82)低于刺激组(3.78±0.94)(P0.05)。结论氯沙坦能抑制RA患者PBMCs促炎性细胞因子IL-22的表达,可能是通过抑制JAK/STAT-3通路而实现。     

再生障碍性贫血患者CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化

目的 测定再生障碍性贫血(AA)患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg)的数量及叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA、Notch1 mRNA的表达水平,探讨Treg在AA发病中的作用及其机制.方法 流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素(CsA)治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low T细胞、CD4+ CD25+ T细胞的数量,并与正常对照比较;采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平,分析两者相关性.结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4+ CD25+ T细胞占CD4+ T细胞比例分别为(4.3±0.7)%、(4.2±0.6)%,明显高于正常对照组[(2.4±0.8)%](P＜0.05).CsA治疗后恢复组患者比例下降为(2.6±0.7)%(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.AA初发组及未恢复组CD4+ CD25+ CD127low T细胞在CD4+ T细胞中的比例分别为(2.4±1.2)%、(2.5±1.1)%,较正常对照组[(7.1±2.7)%]及恢复组[(5.3±1.0)%]明显降低(P值均＜0.01);但后两组比较差异无统计学意义.AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为(0.260±0.011)和(0.018±0.005),较正常对照[(1.307±0.011)和(0.308±0.028)]表达明显下调(P值均＜0.01),治疗后分别为(1.287±0.012)和(0.281±0.013),表达较初发组显著提高(P值均＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).AA患者CD4+ CD25+ CD127low T细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性(P值均＜0.01).结论AA患者外周血CD4+ CD25+ CD127low Treg减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血.其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关.     

腹腔镜下直肠癌手术对免疫平衡及CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T细胞的影响

目的 通过分别测定腹腔镜手术和开腹手术直肠癌患者Th1/Th2平衡偏移情况及CD4+CD45R细胞的比例变化,以比较两种术式对直肠癌患者免疫功能的影响.方法 分别采用流式细胞学和酶联免疫吸附法方法 检测行腹腔镜下直肠癌手术和常规开腹手术2组患者术前1 d、术后2、7 d的外周血中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T细胞比率及IFN-γ和IL-4血清浓度,同时检测CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞在不同手术影响下的比例变化.结果 开腹组术后2、7 d的Th1细胞[(4.51±1.52)%,(7.26±2.59)%]与术前[(12.06±1.82)%]相比明显减少(P均<0.05),Th2细胞[(6.70±2.41)%,(6.70±2.41)%]与术前[(4.47±1.90)%]相比明显增加(P均<0.05);开腹组术后2、7 d的IFN-γ[(57.15±23.64)ng/L,(72.70±27.31)ng/L]与术前(123.47±32.52)ng/L相比明显下降(P均<0.05),而术后2、7 d的IL-4[(55.55±7.29)ng/L,(57.56±7.13)ng/L]与术前[(41.87±5.83)ng/L]相比明显升高(P均<0.05);腹腔镜组Th1细胞、Th2细胞、IFN-γ和IL-4手术前后数量无明显变化(P均>0.05);术后7 d开腹组CD4+CD45RA+T细胞(35.11±7.82)与术前(31.11±6.72)相比明显增加(P均<0.05),开腹组术后CD4+CD45R O+T细胞(61.21±9.13)较术前(68.11±11.42)减少(P<0.05).结论 腹腔镜下直肠癌手术较开腹手术对机体免疫平衡影响较小,有利于保护直肠癌患者的细胞免疫功能.     

内皮细胞蛋白C受体基因6936A/G多态性和深静脉血栓形成相关性研究

目的 通过病例对照研究,了解内皮细胞蛋白C受体(EPCR)基因6936A/G多态性和深静脉血栓形成(DVT)的相关性,进一步了解EPCR在DVT形成中的重要性.方法 用ELISA法检测65例DVT患者和71名健康体检者的外周血血浆可溶性EPCR(sEPCR)水平;提取血细胞中的DNA,PCR扩增后将目的 片段EPCR基因直接测序,分析EPCR基因第6936位点的多态性.结果 ①正常对照组中,AG基因型组血浆sEPCR水平[(0.97±0.32)ng/L]明显高于AA基因型组[(0.61±0.24)ng/L](P＜0.01);DVT患者组中AG基因型组[(0.87±0.21)ng/L]亦明显高于AA基因型组[(0.50±0.18)ng/L](P＜0.01).②DVT组的血浆sEPCR水平[(0.68±0.32)ng/L]明显高于正常对照组[(0.54±0.22)ng/L](P＜0.05).③EPCR基因6936位点AG基因型分布频率DVT组高于正常对照组(P＜0.05).④AG基因型患DVT的危险性较AA基因型高(OR=2.75,95%可信区间为1.04～7.30)(P＜0.05).结论 血浆sEPCR水平与EPCR基因6936A/G多态性有关.DVT患者血浆sEPCR水平较正常人增高.EPCR基因6936 AG基因型者可能患DVT的风险高.     

急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障功能临床研究

目的探讨急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障的功能变化。方法急性肝衰竭患儿30例为肝衰竭组,体检健康儿童30例为对照组,检测2组细胞免疫、调节性T细胞、血浆内毒素、二胺氧化酶水平变化。结果肝衰竭组患儿CD4~+细胞比率[(21.6±8.7)%]、CD4~+/CD8~+比值(1.33±0.42)、CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞比率[(4.22±1.33)%]较对照组[(59.7±9.2)%、3.75±0.53、(8.35±2.89)%]明显减少(P0.01),CD8~+细胞比率[(29.8±5.4)%]、血浆内毒素[(21.71±4.47)EU/mL]、二胺氧化酶[(18.91±4.03)u/L]水平较对照组[(23.1±4.4)%、(3.10±1.73)EU/mL、(3.59±1.99)u/L]明显增高(P0.05)。结论急性肝衰竭患儿存在细胞免疫紊乱,参与肝衰竭的发生、发展,并加重肠道黏膜屏障功能受损。     

原因不明习惯性流产患者外周血CD3~+CD16~+CD56~+自然杀伤T细胞的表达及意义

目的探讨自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)在原因不明习惯性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)发生机制中的作用。方法有URSA史患者50例,其中未孕者20例为URSA非孕组,难免流产者30例为UESA难免流产组,52例正常体检者中正常未生育者20例为正常未育组,正常妊娠孕妇20例为正常妊娠组,有正常生育史12例为正常生育组,采用流式细胞术检测各组外周血中CD3+CD16+CD56+NKT细胞的表达水平。结果外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率正常未生育组[(4.62±1.38)%]与正常生育组[(4.90±3.00)%]比较差异无统计学意义(P0.05);URSA非孕组外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率[(2.42±1.52)%]低于正常生育组(P0.05),URSA难免流产组[(4.18±2.77)%]低于正常妊娠组[(14.40±2.27)%](P0.05);正常妊娠组外周血中NKT细胞百分率是正常生育组的3倍,而URSA难免流产组是URSA非孕组的2倍。结论 URSA患者外周血NKT细胞表达水平降低,NKT细胞可能参与了URSA的发生。     

血液系统恶性肿瘤病人外周血NK细胞及其受体检测的临床意义

目的探讨血液系统恶性肿瘤病人外周血NK(CD3-CD16+CD56+)细胞及其受体检测的临床意义。方法用流式细胞术检测18例正常对照及20例淋巴瘤、22例急性白血病、16例MDS病人外周血NK细胞占淋巴细胞百分比,NK细胞膜活化性受体NKG2D和抑制性受体NKG2A及穿孔素、颗粒酶的表达。结果 (1)初治淋巴瘤和白血病组NK细胞数量显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05),MDS组与正常对照组无显著性差异(P0.05);(2)初治淋巴瘤组、白血病组、MDS组活化性受体NKG2D表达均显著低于正常对照组(P0.05),差异有统计学意义;淋巴瘤组、白血病组、MDS组抑制性受体NKG2A与正常对照组无显著性差异(P0.05)。(3)初治淋巴瘤组和白血病组的穿孔素、颗粒酶表达均显著低于正常对照(P0.05),差异有统计学意义。MDS组穿孔素、颗粒酶表达与对照组无显著性差异(P0.05)。结论淋巴瘤、白血病病人免疫功能减低与NK细胞数量减少及NKG2D、穿孔素、颗粒酶表达减少有关,MDS病人免疫功能减低可能只与NKG2D表达减低有关。     

莫西沙星联合匹多莫德治疗老年呼吸道感染患者的效果及细胞免疫指标评估

目的评估老年呼吸道感染患者应用莫西沙星联合匹多莫德治疗的效果及对细胞免疫指标的影响。方法选取84例老年呼吸道感染患者,根据不同治疗方案纳入A组(42例)与B组(42例)。A组应用莫西沙星治疗,B组应用莫西沙星联合匹多莫德治疗,对比两组的治疗效果、临床症状改善时间(发热、肺啰音、咳嗽咳痰)、细胞免疫指标(CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)以及血清炎性因子水平[白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]。结果 B组的总有效率(95.24%)高于A组(80.95%),P0.05;B组发热、肺啰音、咳嗽咳痰的改善时间[(2.84±0.23)d、(4.11±0.40)d、(3.51±0.62)d]均短于A组[(3.91±0.36)d、(5.25±0.56)d、(4.76±0.83)d],P均0.05;B组治疗后的CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+[(42.16±6.53)%、(27.15±3.96)%、1.84±0.79]均优于A组[(35.87±4.21)%、(32.82±4.11)%、1.36±0.53],P均0.05;B组治疗后的IL-6、IL-8、TNF-α[(72.89±64.36)ng/L、(162.37±105.91)ng/L、(107.86±59.62)μg/L]均低于A组[(159.66±75.80)ng/L、(385.84±142.68)ng/L、(189.44±76.56)μg/L],P均0.05。结论老年呼吸道感染患者应用莫西沙星联合匹多莫德治疗的效果显著,可有效消除患者的临床症状,且可改善免疫功能指标,降低血清炎性因子水平。