MicroRNA-34家族的功能及应用研究进展

MicroRNA-34(miR-34)家族包括miR-34a、miR-34b、miR-34c,与人体正常发育及多个器官功能的维持密切相关。MiR-34的表达受抑癌基因p53和长链非编码RNA(long non-coding RNAs, lncRNAs)的调控,其表达失衡会导致一系列疾病的发生发展。MiR-34与肿瘤发生发展密切相关,主要通过阻碍细胞周期、诱导细胞凋亡与自噬、抑制上皮-间充质转化、阻止细胞迁移与侵袭等机制,发挥抑癌作用。MiR-34在心脏保护中也发挥着重要作用。MiR-34功能的发挥主要涉及NF-κB、Notch等多个信号通路,基于miR-34表达的调控有利于部分疾病的控制和转归,是潜在的临床诊治靶标,具有广阔的临床应用前景。因此,本文就miR-34家族的功能及应用进展进行综述,以期为后续研究提供参考。     

微小RNA-31在肿瘤中的作用研究进展

微小RNA-31 (miR-31)是在动物和人体组织中广泛存在的一种多功能miRNA,可调控靶基因的表达并参与细胞增殖、分化和凋亡等生理、病理过程。miR-31与肿瘤的发生发展密切相关。miR-31可作为抑癌或促癌基因表达于各个肿瘤中,并在肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移等多个生物学过程中发挥重要作用。因此,miR-31有望成为恶性肿瘤的新型生物标志物和治疗靶点。本文就miR-31在恶性肿瘤中的作用机制、治疗预后等方面的研究进展进行综述,以期为恶性肿瘤的早期诊断及个性化治疗提供策略。     

节拍化疗在晚期非小细胞肺癌中的研究进展

晚期非小细胞肺癌是当今世界难治的恶性肿瘤之一。目前,化疗是治疗非小细胞肺癌最常见的手段。然而,传统化疗在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常细胞产生杀伤作用。为了解决这一问题,节拍化疗应运而生,其通过一种连续高频率、低剂量的给药方式,以抑制肿瘤血管的生成并抑制肿瘤生长。节拍化疗可以有效控制晚期非小细胞肺癌患者的疾病进展,延缓患者寿命,改善其生活质量。因此,节拍化疗已经成为治疗晚期非小细胞肺癌有效的治疗方法。     

miR-146b在恶性肿瘤中的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类常见的非编码RNA,一般不被翻译为蛋白质,其主要作用是对基因表达进行调控。miRNA种类众多,作用机制十分复杂,其中miR-146b是一类多功能的miRNA,研究发现其在恶性胶质瘤、甲状腺癌、肺癌、肝细胞癌、胰腺癌、结直肠癌等诸多恶性肿瘤中的表达水平常常发生变化。本文就miR-146b的 结构、主要作用机制以及在上述恶性肿瘤中的研究进展做一综述。     

循环microRNA对非小细胞肺癌诊断和化疗效果评价的研究

目的探讨血清中miR-19b,miR-125b,miR-34a,miR-200b的表达与非小细胞肺癌发生发展的相关性,以及这4种microRNAs在化疗过程中表达水平的变化和对患者化疗的监测效果。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测43例健康体检者和非小细胞肺癌患者血清中miR-19,miR-125b,miR-34a,miR-200b的表达水平,以及化疗过程中的表达变化,比较第二次、第六次化疗后microRNAs的表达差异。结果与健康对照组相比,非小细胞肺癌患者血清中miR-19b,miR-125b和miR-200b表达上调,与淋巴结转移相关;miR-34a表达下调,与淋巴结转移无关。在化疗期间,miR-19b、miR-125b的表达随着化疗的进行而降低,第六次化疗后与第二次化疗后相比表达下降(P0.05)。结论血清miR-19b,miR-125b,miR-34a和miR-200b可作为NSCLC的辅助诊断指标;miR-19b,miR-125b可作为NSCLC患者化疗效果评价的潜在标志物。     

miR-200a和YAP1在肺癌的不同表达及病理学意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-200a与Yes相关蛋白1(YAP1)表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床病理意义。方法回顾性选取259例非小细胞肺癌患者术后切除的肿瘤组织及癌旁组织为本次研究对象,采用RT-PCR方法检测并比较患者的miR-200a与YAP1表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床病理意义。结果所选患者中miR-200a及YAP1在非小细胞肺癌中表达量显示,miR-200a与YAP1的表达量在病理类型、浸润深度、肿瘤分级、肿瘤数目中的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-200a与YAP1的表达量在肿瘤分化程度、淋巴结转移的比较中,差异有统计学意义(P<0.05)。所选患者中miR-200a、YAP1在非小细胞肺癌组织表达量比癌旁组织较高,其中,YAP1的非小细胞肺癌组织表达量水平明显高于miR-200a的表达量水平,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-200a、YAP1对非小细胞肺癌ROC曲线显示,miR-200a的ROC曲线下面积0.689比YAP1的0.666大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200a、YAP1表达量水平与非小细胞肺癌临床病理严重程度呈正相关,对非小细胞肺癌诊断有一定预测价值。     

miR-203在恶性肿瘤中的作用及其相关靶基因的研究进展

微小RNA是具有调控功能的非编码RNA,通过碱基互补配对的方式识别靶基因信使RNA(messenger RNA,mRNA)的3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR),根据互补程度的不同降解靶mRNA或抑制靶mRNA翻译,在恶性肿瘤的发生、发展中发挥作用。miR-203在多种恶性肿瘤组织中异常表达,通过与下游靶基因结合调控恶性肿瘤的生长、分化及增殖。本文就miR-203在食管癌、结直肠癌、肺癌及其他恶性肿瘤中的作用及其相关靶基因的研究进展作一综述。     

血清miR-25在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨miR-25在不同病理类型肺癌的血清表达量与应用价值及其与临床参数的相关性。方法收集非小细胞肺癌(30例)、小细胞肺癌(28例)、健康人(30例)共88例样本,采用实时定量PCR对血清miR-25含量进行定量检测,并建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算敏感度及特异度,评价其对肺癌的诊断价值。结果 miR-25在健康人血清表达量比小细胞肺癌组(P=0.000)、非小细胞肺癌组(P=0.001)显著减低,且小细胞肺癌组血清miR-25含量比非小细胞肺癌组明显增高,差异具有统计学意义(P=0.001);进一步建立ROC曲线分析血清miR-25对肺癌的诊断价值,非小细胞肺癌患者的ROC曲线下面积为0.659,敏感度为56.7%,特异度为90%,对应的临界值为1.854;小细胞肺癌的ROC曲线下面积为0.869,敏感度为78.6%,特异度为97%,对应的临界值为2.424。Spearman秩相关表明,血清miR-25表达量与病理分型(r=0.422,P=0.001)、肿瘤分期(r=0.370,P=0.004)、淋巴结转移(r=0.670,P=0.000)、肿瘤标记物(r=0.372,P=0.004)显著相关。结论血清miR-25在肺癌患者中表达量明显升高,尤其是在小细胞肺癌中,可能是小细胞肺癌诊断的一个潜在肿瘤标记物。     

miRNA-155与恶性血液病

微小RNA（miRNA）是一系列在植物、动物及病毒中都可发现的非编码RNA,在转录后水平调控基因表达。miRNA-155（miR-155）是一种表达在造血细胞的miRNA,通过转录后调控靶基因的表达参与恶性血液病的发病机制。近来研究表明,miR-155通过影响参与细胞增殖、分化、凋亡的细胞信号转导途径,作为癌基因在恶性血液病的发生发展中起到重要作用。miR-155对恶性淋巴瘤、急性髓系白血病及骨髓增生异常综合征等恶性血液病的诊断治疗、预后具有重要临床意义。把能够下调miR-155表达的药物如反义寡核苷酸与经典的细胞毒性治疗联合应用,可有效控制恶性血液病的发展。本文综述了近年来miR-155对恶性血液病发病机制作用的研究进展并对其潜在的治疗靶点作用进行了展望。     

扶正抑癌散对晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒作用

运用扶正抑癌散加化疗(治疗组),治疗晚期非小细胞肺癌(气虚兼血瘀型)30例,并随机与单纯化疗(对照组)20例作对照。结果表明治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01)。治疗组对化疗所导致的毒副反应有明显改善作用,并能较好的防止白细胞计数、血红蛋白下降,提高T细胞亚群的活性。提示扶正抑癌散可增强化疗药物的抗癌作用,对非小细胞肺癌病灶有一定的缓解和稳定作用,对气虚兼血瘀患者疗效显著。     

microRNA-361-5p在人类恶性肿瘤中的研究进展

研究表明,microRNA(miRNA)在恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。miRNA通过各种机制参与细胞基因转录调控,其中与下游靶基因mRNA的特异性结合并使其降解为经典的调控机制。近年来,miR-361-5p在恶性肿瘤中的表达失调得到了验证,通过调节与肿瘤生长、转移、上皮-间质转化(EMT)等方面相关的靶基因,进一步参与恶性肿瘤的增殖、凋亡、转移以及耐药性等相关生物学过程,并为恶性肿瘤的诊断及预后预测提供重要依据。作者对miR-361-5p在不同肿瘤中的作用及相关机制进行综述,并展望其应用前景。     

miR-34a靶向调控HDAC1基因对急性髓系白血病细胞凋亡的影响

目的:探讨急性髓系白血病细胞中miR-34a对HDAC1的调控作用以及对细胞凋亡的影响。方法:将miR-34a mimics、miR-34a inhibitor、miR-34a scramble转染到HL-60细胞中,采用CCK8试验和流式细胞术分别检测miR-34a不同表达水平对HL-60细胞增殖和凋亡的影响。应用Western blot检测miR-34a表达改变后HDAC1蛋白表达水平。构建含HDAC1 3′UTR的双荧光素酶报告载体,应用双荧光素酶报告实验验证miR-34a与HDAC1的作用位点。构建不含HDAC1 3′UTR的表达载体,应用回复实验验证miR-34a与HDAC1的相互作用。结果:miR-34a过表达可导致HL-60细胞的增殖抑制、凋亡率增加。生物信息学分析表明,HDAC1是miR-34a的靶基因;Western blot结果显示,miR-34a高表达可下调HDAC1蛋白表达,双荧光素酶实验和回复实验显示,miR-34a可作用于HDAC1 3′UTR区,调理其表达。结论:miR-34a促进HL-60细胞凋亡,其作用可能与其对HDAC1表达调控有关。     

治疗高龄晚期非小细胞肺癌的体会

肺癌是发病率和病死率增长较快、对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤。即使是Ⅰ期非小细胞肺癌患者，也仍难免因远处转移和(或)复发而死亡。近年来研究发现以Ⅲ期非小细胞肺癌的治疗问题最为棘手。对于晚期(Ⅲ～Ⅳ期)非小细胞肺癌患者，化疗对延长患者的生存期、控制症状、改善生活质量等方面起着重要作用。高龄肺癌患者由于细胞功能衰退，对化疗的耐受力差，同时并发症较多、抵抗力差，易于化疗早期死于感染、出血和心、肺、肾功能的衰竭。为探讨老年人晚期非小细胞肺癌的治疗，我们自2001年4月至2003年2月，以HEP和NP方案治疗43例65岁以上晚期非小细胞肺癌，取得较满意疗效，现报道如下。     

m6A甲基转移酶METTL3介导miR-127调控非小细胞肺癌细胞系自噬的机制研究

目的　分析N6 甲基腺苷（m6A）甲基转移酶 3（methyltransferase-like 3, METTL3）和miR-127 在非小细胞肺癌（non small cell lung cancer cells, NSCLC）细胞系中的表达及其相关性,并探究METTL3 介导miR-127 调控非小细胞肺癌自噬的作用机制。方法　采用qRT-PCR 法检测正常肺上皮细胞BEAS-2B 与非小细胞肺癌细胞HCC827,A549 和H460 中METTL3 和miR-127 的表达水平;通过Linked Domics 数据库筛选出肺癌中与miR-127 共表达的基因,并分析METTL3 和miR-127 之间的相关性;选择H460 细胞传代培养至对数生长期后,将浓度接近的细胞随机分为三组,分别转染METTL3-siR,NC-siR 及Control,验证转染后H460 细胞中METTL3 和miR-127 表达;通过吖啶橙染色,Lyso-Tracker Red 染色观察METTL3 对细胞自噬的影响;利用Western blot 检测PTEN,AKT,mTOR,ULK1,Beclin-1等自噬相关蛋白的表达。结果　非小细胞肺癌细胞HCC827,A549,H460 中METTL3 相对表达分别为1.35±0.17,1.54±0.11 和1.78±0.21,明显高于正常肺上皮细胞BEAS-2B 中表达水平（0.91±0.11）,差异有统计学意义(F=34.037,P=0.002)。非小细胞肺癌细胞HCC827,A549,H460 中miR-127 相对表达分别为1.56±0.21,1.85±0.19 和2.11±0.25,较正常肺上皮细胞BEAS-2B 中表达（1.02±0.20）亦显著升高,差异有统计学意义（F=28.152,P=0.005）。肺癌中METTL3 与miR-127 共同表达呈正相关性（r=0.452,P ＜ 0.001）。METTL3-siR 组细胞中METTL3 表达水平（0.61±0.15）较Control 组（1.71±0.28） 和NC-siR 组（1.65±0.19） 显著降低, 差异有统计学意义（F=78.357,P ＜ 0.001）。METTL3-siR 组细胞中miR-127 表达水平（0.48±0.15）较Control 组（2.02±0.33）和NC-siR 组（1.97±0.25）亦显著下降,差异有统计学意义（F=105.216,P ＜ 0.001）;吖啶橙和Lyso-Tracker Red 染色分别观察到METTL3-siR 组细胞酸性自噬小泡增多,自噬溶酶体数量也明显增加。与Control 组和NC-siR 组相比,METTL3-siR 组细胞中PTEN,ULK1,Beclin1 蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义（F=62.420~175.615,均P<0.001）;p-AKT 和p-mTOR 表达水平显著下降,差异均有统计学意义（F=148.781,87.147,均P<0.001）。结论　METTL3 和miR-127 在非小细胞肺癌细胞系中均呈高表达,且它们之间呈正相关性,沉默METTL3 基因可以抑制miR-127 表达,促进非小细胞肺癌H460 细胞发生自噬,其调控机制可能与PTEN/AKT/mTOR 通路有关。     

小细胞肺癌侵袭转移相关蛋白的研究进展

侵袭转移是恶性肿瘤的生物学特征之一,在恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。肿瘤的浸润、转移是一个相当复杂的多步骤过程,主要包括细胞黏附、基质分解及远处转移3个环节。小细胞肺癌约占肺癌的20%,其侵袭力强,极易发生早期转移。现就小细胞肺癌侵袭转移相关蛋白的研究近况,为小细胞肺癌的诊断和治疗提供有效的途径。     

miR-181b与肿瘤

microRNA(miRNA)是一类在转录后水平调控基因表达的单链非编码小分子RNA。miRNA能够调控机体多种生理和病理过程,如细胞增殖、分化、发育、凋亡、激素分泌和肿瘤形成等。在肿瘤中miR-181b与靶基因结合,作用相关信号通路,促进或抑制肿瘤生长,可作为判断某些肿瘤的生物标志物。对miR-181b与恶性肿瘤的发生、发展机制的研究具有重要意义,可为恶性肿瘤的诊断与治疗提供新的思路。     

miR-429与肿瘤相关性研究进展

微小RNA（microRNA,miR）是一类长度为20~25个核苷酸的小分子非编码RNA,以转录后调节的方式改变靶基因的表达水平,在多种肿瘤的发生、发展中起重要作用。miR-429在多种肿瘤中表达上调或下调,并通过与多个靶基因作用抑制或促进细胞增殖、凋亡、侵袭、转移及耐药,发挥类似癌基因或抑癌基因的作用。miR-429有望成为肿瘤治疗的新靶点,对肿瘤的诊断、耐药、治疗和预后有潜在临床应用价值。本文对miR-429与肿瘤相关性的研究进展作一综述。     

miR-34a调控下游基因FUT8表达介导乳腺癌多药耐药的实验验证

目的探究miR-34a及FUT8的异常表达对乳腺癌多药耐药性的调控机制,明确乳腺癌耐药的诊疗靶点。方法采用Real-time PCR及western blot技术检测MCF-7和MCF-7/ADR中miR-34a和FUT8的表达水平; Real-time PCR技术检测乳腺癌细胞系中miR-34a的转染效率;通过生物信息学方法预测并采用双荧光素酶报告实验验证FUT8与miR-34a之间的靶向关系;特异性调控miR-34a的表达后,分别通过Real-time PCR、western blot以及免疫荧光染色检测转染细胞系中FUT8基因及蛋白质水平变化;采用CCK8实验、免疫荧光实验检测其对MCF-7和MCF-7/ADR细胞增殖、耐药性的调控作用。结果 miR-34a在MCF-7中的表达水平明显高于MCF-7/ADR(P=0.002 6);FUT8基因在MCF-7/ADR中的表达水平明显高于MCF-7(P=0.001 6);FUT8是miR-34a调控乳腺癌耐药性的靶点(P=0.001 9);特异性上调MCF-7/ADR细胞中miR-34a的水平可明显抑制FUT8的表达,并抑制该细胞的多药耐药性及增殖性;而下调MCF-7细胞中miR-34a表达后,FUT8的表达水平明显升高,同时增强了细胞多药耐药及增殖能力。结论 miR-34a通过调控下游基因FUT8的表达介导乳腺癌多药耐药。     

AAPR在肿瘤预后中的作用研究进展

白蛋白与碱性磷酸酶的比例(albumin-to-alkaline phosphatase ratio,AAPR)是实验室指标的一种比值。近年来,在肝癌、胆管癌、鼻咽癌、胰腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、尿路上皮癌、肾癌、宫颈癌等肿瘤疾病中发现,低AAPR值与其预后不良密切相关。探讨AAPR在恶性肿瘤中的预后意义有助于预测恶性肿瘤患者术后生存期,并有望指导肿瘤的临床治疗。本文主要讲述AAPR在肿瘤预后中的作用研究进展。     

MicroRNA-148/152家族在血液恶性肿瘤中的表达

MicroRNA(miRNA)是一种包含18~22个核苷酸单链的非编码小RNA,通过与靶基因的3'-非编码区相互作用而调控基因的表达。MicroRNA-148/152家族包括microRNA-148a(miR-148a),microRNA-148b(miR-148b)和microRNA-152(miR-152),其在不同的组织中有不同的表达。一些研究已经证实miR-148/152家族成员在许多肿瘤性疾病中存在差异表达,并通过调控靶基因的表达而发挥着调节肿瘤生长、增殖、凋亡、血管新生以及对药物敏感性等多种生物学功能。MiR-148/152家族成员的表达受其本身Cp G岛甲基化的调控,并能靶向作用于其下游的靶基因-DNA甲基转移酶(DNMT1/3b),因此DNMT1/3b反向局限于miR-148a/152的表达。DNMT1/3b过表达促进MiR-148/152家族Cp G岛甲基化,阻碍其发挥作用,导致DNMT1/3b进一步升高。因此,MiR-148/152-DNM T1/3b循环可能是存在的。表观遗传学的异常,尤其是启动子高甲基化在血液恶性肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。去甲基化治疗已成为治疗恶性血液病的又一重要途径。本文对miR-148/152家族在血液恶性肿瘤中的表达做一总结,旨在阐述DNA甲基化修饰与micro-RNA在血液肿瘤研究中的重要提示意义。