健脾疏肝颗粒对乙硫氨酸诱导非酒精性脂肪肝大鼠药效学研究

目的:探讨健脾疏肝颗粒对乙硫氨酸诱导的大鼠非酒精性脂肪肝的影响。方法:84只SD大鼠随机分为空白组,模型组,三七脂肝丸组(1.5 g·kg-1·d-1),易善复组(136.8×10-3g·kg-1·d-1),健脾疏肝颗高、中、低剂量组(18.6、9.3、4.7 g生药·kg-1·d-1)。给药组连续灌胃给药8 d,1次/d,给药容积10 m L·kg-1。给药第8天,给药2 h后,除空白组外,其余各组灌服1%乙硫氨酸15 m L·kg-1,14 h后灌服2%乙硫氨酸18 m L·kg-1,空白组灌服等量蒸馏水。36 h后,测定各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),并做肝脏HE染色和油红O染色,观察肝脏病理学改变。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清ALT含量明显升高(P0.01),血清AST含量有升高趋势但无统计学差异(P0.05),健脾疏肝颗粒中、低剂量组可以显著降低非酒精性脂肪肝大鼠血清ALT含量(P0.05,P0.01),高剂量组有降低大鼠血清ALT含量趋势(P0.05),健脾疏肝颗粒中、低剂量组有降低非酒精性脂肪肝大鼠血清AST含量趋势(P0.05)。病理结果显示,健脾疏肝颗粒可以明显降低非酒精性脂肪肝大鼠脂肪变性程度,对肝小叶结构完整性和肝索排列顺序也有所改善。结论:健脾疏肝颗粒对乙硫氨酸所致非酒精性脂肪肝具有调节脂质代谢、降酶保肝作用,其机制可能与降低相关酶的活性、调节脂质代谢、降低肝细胞脂肪变性程度有关。     

灵芝多糖对非酒精性脂肪肝大鼠PPARγ和环氧合酶-2表达的影响

目的:探讨灵芝多糖(GLPs)对非酒精性脂肪肝大鼠的防治作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法:SD大鼠72只随机分为6组,每组12只,正常对照组(N组),模型组(M组),灵芝多糖低、中、高剂量组(GLPs-L、GLPs-M、GLPs-H组)和辛伐他汀组(SV组)。用高脂饲料喂养建立大鼠非酒精性脂肪肝模型。经12周给药后,分别测定各实验组ALT、AST、脂联素和肿瘤坏死因子-α的含量;透射电镜观察肝组织超微结构;用逆转录聚合酶链反应法和Western Blot检测肝组织中PPARγ和COX-2 mRNA和蛋白的表达情况。结果:(1)灵芝多糖中、高剂量组血清ALT、AST和肿瘤坏死因子-α含量显著降低,而脂联素含量则明显升高(P<0.05或P<0.01),差异均有统计学意义;(2)肝组织病理学结果显示,M组大鼠肝组织中充满大小不等的脂滴,线粒体肿胀,染色体边集等;(3)M组肝组织PPARγmRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05或P<0.01),而COX-2 mR-NA和蛋白的表达显著升高(P<0.01),灵芝多糖中、高剂量组PPARγmRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05或P<0.01),同时COX-2 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05或P<0.01),差异均有统计学意义。结论:灵芝多糖能改善胰岛素抵抗,降低炎症因子的表达,对非酒精性脂肪肝有一定的防治作用。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏SSeCKS的表达

目的:探讨Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)在大鼠非酒精性脂肪性肝(NAFL)形成中的作用。方法:SD大鼠16只,随机分为正常对照组(正常组)和高脂饮食组(高脂组)。高脂饲料喂养14周后,观察肝脏组织病理改变;检测大鼠血脂及肝功能;免疫组化和westernblot方法研究大鼠脂肪肝形成中SSeCKS表达变化。结果:高脂组大鼠肝脏指数显著高于正常组(P均<0.01)。高脂组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)及丙氨酸转氨酶(ALT)均显著高于正常组(P均<0.01)。肝组织SSeCKS蛋白表达亦明显增强。结论:非酒精性脂肪肝大鼠肝组织SSeCKS表达变化与脂肪肝引起的脂质过氧化损伤程度密切相关。     

橙皮苷对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用及其机制的初探

目的 研究橙皮苷(HDN)对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用及其机制.方法 脂肪乳剂灌胃﹑饮用蔗糖溶液制备大鼠非酒精性脂肪肝模型.于9周末处死大鼠,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肝组织含量和白介素-6(IL-6)水平,免疫组织化学法检测CYP 2E1的表达.结果 HDN(160、320 mg/kg)组能显著降低模型大鼠血清ALT、AST、FFA、TNF-α、IL-6和肝匀浆MDA的含量,提高SOD含量,同时HDN(320 mg/kg)组可使肝组织CYP 2E1表达下降.电镜示HDN(160、320mg/kg)组肝细胞内脂滴变小、减少,与模型组相比,线粒体肿胀明显减轻,内膜上嵴粒增多.结论 HDN能明显减轻非酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂肪变和炎症程度,减轻脂质过氧化,并能显著降低血清TNF-α、FFA和IL-6水平,减少肝组织CYP 2E1表达,抑制肝细胞凋亡,这可能是其有效防治非酒精性脂肪肝的作用机制.     

粗叶悬钩子总生物碱对非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢关键酶的影响

目的探讨粗叶悬钩子总生物碱(TARAP)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠脂代谢关键酶表达的影响。方法 SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组、TARAP低剂量组和高剂量组,以高脂饲料喂养12周制备非酒精性脂肪肝大鼠模型。正常组、模型组予以生理盐水灌胃,东宝甘泰组予以东宝甘泰0.35 g·kg-1·d-1灌胃,TARAP低剂量组、高剂量组分别按0.72、1.44 g·kg-1·d-1灌胃,灌胃4周后取材。RT-PCR和免疫组化法检测激素敏感性甘油三酯脂酶(HSL)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂肪酸合成酶(FAS)的表达。结果 TARAP能显著抑制ACC和FAS的表达,而对HSL的表达无明显影响。结论 TARAP通过调节脂代谢关键酶ACC、FAS的表达是其治疗NAFLD的作用机制之一。     

降脂理肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠肠黏膜屏障的影响

目的观察降脂理肝汤对非酒精性脂肪肝大鼠肠黏膜屏障的影响,探讨降脂理肝汤干预非酒精性脂肪肝的机制。方法40只SD雄性大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(30只),采用高脂饮食喂养复制非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)大鼠模型,造模组大鼠再随机分为高脂饮食模型组、降脂理肝汤低剂量及高剂量组(4.6、9.2 g/kg),分别予以相应干预6周后取小肠和门静脉血液,检测肠黏膜结构、紧密连接蛋白(Occludin)和ZO-1蛋白水平以及血浆内毒素水平。结果与正常组比较,高脂饮食大鼠小肠绒毛稀疏且排列不整齐、小肠绒毛高度明显降低(P0.01),Occludin和ZO-1蛋白表达水平显著降低(P0.05),血浆内毒素水平显著上升(P0.01)。与高脂饮食模型组比较,高剂量降脂理肝汤组小肠绒毛排列较整齐,断裂较少,绒毛高度显著升高(P0.01),Occludin和ZO-1蛋白水平显著上升(P0.05),血浆内毒素水平明显降低(P0.01);而低剂量降脂理肝汤组仅显著降低了血浆内毒素水平(P0.01)。结论降脂理肝汤干预非酒精性脂肪肝的机制可能与其改善小肠绒毛结构,恢复Occludin和ZO-1蛋白水平从而减轻肠黏膜屏障损伤,降低血浆中的内毒素水平有关。     

糖肝康对糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠血清GSH、GSH-Px表达的影响

目的:观察以健脾益气、调肝解毒、活血为治法组方的糖肝康对糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠血清GSH、GSH-Px表达的影响。方法:50只大鼠随机分为正常对照组10只,余40只采用高脂高糖饮食+链脲佐菌素复制糖尿病脂肪肝大鼠模型。模型制作成功后,随机分为模型组,阳性对照组,糖肝康小剂量组、中剂量组、大剂量组。药物干预12周后,观察糖肝康对糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠血清中GSH、GSH-Px表达的影响。结果:糖肝康可升高糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠GSH、GSH-Px水平。结论:糖肝康可能通过改善GSH、GSH-Px活力的表达,防止过氧化作用而保护肝细胞。文献引用:钱秋海,钱卫斌,蔡欣蕊,等.糖肝康对糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠血清GSH、GSH-Px表达的影响[J].中医学报,2016,31(4):499-501,505.     

小陷胸汤化裁方对非酒精性脂肪肝病模型大鼠内质网GRP78蛋白表达的影响

目的:探讨经方小陷胸汤化裁方通过影响内质网应激防治非酒精性脂肪肝病模型大鼠可能的作用机制。方法:健康纯种雄性SPF级SD大鼠适应性饲养1周,随机分为空白对照组,模型组,小陷胸汤化裁方高剂量组、中剂量组、低剂量组及西药组。采用高脂饮食饲养12周,建立非酒精性脂肪肝病模型,中药各剂量组给予中药复方[7.26 g·(kg·d)~(-1)、2.42 g·(kg·d)~(-1)、0.81 g·(kg·d)~(-1)]5周,取肝脏组织进行HE染色及免疫组织化学和Western-Blot法检测GRP78蛋白表达。结果:模型组大鼠肝细胞体积增大,有大量的空泡状细胞,肝细胞脂肪变性明显,细胞核被挤向一边,部分出现气球样变;中药各剂量组和西药组的肝脏病理有不同程度的改善,其脂滴与模型组基本相似,炎症细胞浸润程度明显减轻,差异有统计学意义(P0.05)。模型组肝组织中蛋白GRP78的含量明显高于正常组,中药各剂量组与西药组的蛋白GRP78的表达均显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。与西药组比较,中药各剂量组蛋白GRP78表达均显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:小陷胸汤化裁方能够明显延缓肝脏损害的进展,其作用机制可能与下调GRP78蛋白的表达有关。     

α-硫辛酸防治非酒精性脂肪肝大鼠的作用机制

目的探讨α-硫辛酸对非酒精性脂肪肝大鼠的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠90只,随机分为正常组(n=15)和实验组(n=75)。正常组普通饮食,实验组高脂饮食,8周末实验组再分为α-硫辛酸组(n=45)、维生素E组(n=15)和模型对照组(n=15)。12周末处死大鼠,检测肝指数并用生物化学法测定氨基转移酶、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、血糖(GLU)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果与模型对照组相比,α-硫辛酸组大鼠肝指数、氨基转移酶、GLU明显降低;同时FFA、MDA明显降低,SOD明显升高。结论α-硫辛酸可通过抗氧应激和脂质过氧化防治治疗大鼠非酒精性脂肪肝。     

天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究

目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1))处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组(以5-氟尿嘧啶处理)。观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)比活性的变化情况。建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况。结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10~(-4)g·mL~(-1)时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P0.05);10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均会使SW480细胞的AKP比活性升高,且以10~(-2)g·mL~(-1)时的AKP比活性最高,且显著高于其他各组(P0.05或P0.01)。阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的面积均值及积分光密度均显著降低(P0.01)。结论:天马颗粒剂可显著抑制人结肠癌细胞株SW480增殖,原因可能与其诱导SW480细胞成熟分化或抑制SW480细胞Ki-67及PCNA基因表达相关。