姬松茸不同提取物对UVB致HaCaT细胞光损伤的保护作用研究

[目的]研究姬松茸不同提取物对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)致人永生化角质形成细胞(HaCaT)光损伤的保护作用。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同剂量UVB对正常HaCaT细胞存活率的影响,姬松茸不同提取物对正常HaCaT细胞存活率的影响,以及姬松茸不同提取物对UVB所致光损伤的HaCaT细胞存活率的影响。[结果](1)不同剂量UVB照射后细胞存活率均下降,且呈剂量依赖性,当UVB达20mj/cm2时,细胞存活率为53.23%。(2)姬松茸水提物浓度在0.2~4mg·m L~(-1)、醇提物在0.1~2mg·m L~(-1)、粗多糖在0.2~1mg·m L~(-1)时具有促进HaCaT细胞增殖的作用,醇提物和粗多糖浓度增大则抑制细胞生长。(3)姬松茸水提物浓度在1~4mg·m L~(-1)、醇提物在1~2mg·m L~(-1)、粗多糖在0.5~1mg·m L~(-1)均能显著提高20mj/cm2 UVB照射后HaCaT细胞的存活率(P0.01)。[结论]姬松茸不同提取物可以在一定程度上减轻UVB诱导的HaCaT细胞的光损伤,具有抗皮肤光老化的潜力。     

枸杞多糖在UVB辐射人角质形成细胞氧化损伤中的保护作用

目的利用中波紫外线辐射体外培养的人角质形成细胞（HaCaT）建立紫外线损伤模型,探讨枸杞多糖（LBP）在紫外线辐射HaCaT氧化损伤中的作用及其机制,为抗氧化剂的研发提供理论依据。方法在HaCaT培养的基础上设置空白对照组、UVB照射组和不同浓度的LBP干预组,采用UVB辐射HaCaT进行造模,运用酶生化法检测不同浓度的枸杞多糖对UVB辐射HaCaT后的细胞增殖及抗氧化酶的影响。结果 UVB辐射对HaCaT造成明显损伤,LBP可提高UVB辐射后HaCaT细胞增值活性（MTT）,提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,降低丙二醛（MDA）产生。（P〈0.05）。结论 UVB对HaCaT细胞有损伤作用,LBP可拮抗UVB所致HaCaT细胞抗氧化酶活性的降低,从而具有抗氧化光保护作用。     

紫外线对HaCaT细胞损伤作用的研究

目的 探讨中波紫外线(UVB)对人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)的损伤影响,建造UVB损伤人表皮细胞的模型,以方便进行实验室光损伤研究.方法 取培养的HaCaT细胞,用10、30、50、70、90 mJ/cm 的UVB照射后继续培养24 h,在光学显微镜下观察细胞的形态学改变,以MTT法检测细胞的增殖活性,以ELISE法测定细胞上清液中TNF-α的水平,以流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 随UVB照射剂量的增加,在光镜下可见HaCaT细胞不同程度的损伤,其增殖活性降低,P＜0.01;细胞上清液中TNF-α的水平增加,P＜0.01;凋亡率增加,P＜0.01.结论 UVB可损伤HaCaT细胞,降低增殖活性,增加细胞上清液中TNF-α的水平,诱导细胞凋亡,并且呈剂量依赖性.在实验中,可根据需要调节不同的UVB照射剂量,建造所需的细胞损伤模型.     

参芩仿生化提取物对中波紫外线照射致生物体损伤的保护作用

目的通过人参、黄芩仿生化提取物,对中波紫外线(UVB)照射致人永生化角质形成细胞(HaCaT)及小鼠皮肤损伤的保护作用进行研究,为中药抗辐射提供理论依据。方法采用MTT法检测HaCaT细胞生存率,黄嘌呤氧化酶法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中丙二醛(MDA)含量变化。结果参芩仿生化提取物能够显著提高UVB照射损伤细胞的活性,明显升高细胞溶解液及小鼠皮肤组织匀浆中SOD活力,降低MDA含量。结论参芩仿生化提取物对UVB辐射致HaCaT细胞和小鼠皮肤损伤均有明显的保护作用,能够有效的抵抗UVB所致的氧化损伤。     

芦荟多糖对UVB辐射人角质形成细胞氧化损伤的保护作用

目的利用中波紫外线辐射体外培养人永生化角质形成细胞株（HaCaT细胞株）建立紫外线损伤人表皮细胞的模型,探讨芦荟多糖（AP）在紫外辐射HaCaT细胞氧化损伤中的保护作用及其机制。方法在HaCaT细胞培养的基础上,采用UVB辐射HaCaT后,立即加入AP进行干预,同时设置空白组与UVB对照组,分别运用MTT法及生化比色法检测不同浓度的芦荟多糖对UVB辐射人角质形成细胞增殖及抗氧化酶活性的影响。结果 UVB辐射对HaCaT造成明显损伤,AP可提高UVB辐射后HaCaT细胞增值活性,提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,降低脂质过氧化物酶（MDA）活性（P〈0.05）。结论 UVB对HaCaT细胞有损伤作用,AP可拮抗UVB所致HaCaT细胞抗氧化酶活性的降低,具有光保护作用。     

柴达木黑果枸杞花青素减轻中波紫外线辐射后人皮肤成纤维细胞氧化及炎性损伤的研究

目的 探讨柴达木黑果枸杞花青素减轻中波紫外线(UVB)辐射后人皮肤成纤维细胞(HSFs)氧化及炎性损伤。方法 将体外培养的HSFs细胞采用随机数字表法分为空白对照组(不进行任何处理)、UVB辐射组(30 mJ/cm²照射30 min)、UVB+花青素低剂量组(0.1 mg/mL+30 mJ/cm²照射30 min)、UVB+花青素中剂量组(0.5 mg/mL+30 mJ/cm²照射30 min)、UVB+花青素高剂量组(1 mg/mL+30 mJ/cm²照射30 min)。柴达木黑果枸杞花青素于UVB照射前24 h加入细胞培养基中,24 h后收集细胞。采用倒置显微镜观察细胞形态;台盼蓝染色观察细胞死亡情况;MTT法测细胞增殖活力;酶标法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)活力、谷胱甘肽(GSH-PX)含量、丙二醛(MDA)的含量。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测并比较白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)表达水平。结果 倒置显微镜下各组细胞形态：花青素中、高剂量组细...     

Tempol对紫外线照射所致HaCaT细胞损伤保护作用

目的 观察氮氧化物4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对中波紫外线(UVB)照射所致人角质形成细胞(HaCaT细胞)损伤的保护作用,并探讨其发生机制.方法 在HaCaT细胞培养系统中加入不同浓度的Tempol进行培养,12 h后洗掉培养液中的Tempol,用30 mJ/cm2 UVB照射细胞后,重新加入培养液继续培养24 h.用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术测定细胞凋亡率.RT-PCR方法测定FoxO3a和 BubR1基因的表达.结果 UVB照射组与正常对照组相比,细胞增殖活性明显降低(F=27.71,q=13.57,P<0.05), FoxO3a mRNA的表达明显增强(F=13.93,q=9.79,P<0.05),BubR1 mRNA的表达明显减弱(F=29.69,q=14.54,P<0.05), 凋亡率明显增高(χ2=93.69,P<0.05);与UVB照射组相比,不同浓度的Tempol可以恢复UVB照射细胞的增殖能力(q=3.24～13.60,P<0.05),降低照射细胞的凋亡率(χ2=12.02～101.02,P<0.05),下调FoxO3a mRNA的表达(q=2.92～9.95,P<0.05),上调BubR1 mRNA的表达(q=2.97～14.61,P<0.05).结论 Tempol可以保护HaCaT细胞免受UVB照射造成的损伤.     

蒿甲醚对紫外线照射后HaCaT细胞表达Fas和Bcl-2的影响

目的为探讨一定剂量不同波长紫外线照射HaCaT细胞后,不同浓度蒿甲醚对HaCaT细胞表达凋亡相关蛋白Fas和Bcl-2的影响.方法采用45.00 mJ/cm2剂量的UVB及4.00 J/cm2剂量的UVA照射培养的HaCaT细胞(永生化角质形成细胞),以羟氯喹及不同浓度的蒿甲醚进行干预处理,应用流式细胞仪检测紫外线辐照及羟氯喹和蒿甲醚处理后HaCaT细胞Fas和Bcl-2蛋白水平的变化.结果(1)与未照射组相比UVA、UVB照射均可使HaCaT细胞表达Fas增加;(2)与UV组相比UVA加羟氯喹,UVB、UVA加25μg/mL蒿甲醚组使HaCaT细胞表达Fas减少;(3)与未照射组相比UVA、UVB照射可使HaCaT细胞表达Bcl-2减少;(4)与UV组相比UVA加25μg/mL蒿甲醚组和UVB加100μg/mL蒿甲醚组可以使HaCaT细胞表达Bcl-2增加.结论小剂量(25μg/mL、50μg/mL)蒿甲醚与凋亡相关的Fas和Bcl-2的表达有关.     

窄谱中波紫外线调控γ干扰素诱导角质形成细胞分泌胸腺活化调节趋化因子的机制

目的 探讨窄谱中波紫外线(UVB)照射HaCaT细胞对胸腺活化调节趋化因子(thymus and activation-regulated chemokine,TARC)的影响,并探讨其内在机制.方法 HaCaT细胞被分为经窄谱UVB照射的实验组和未经窄谱UVB照射的对照组.窄谱UVB照射剂量为10 mJ/cm2.采用...     

葛根素对中波紫外线损伤HaCaT细胞的抗氧化作用

目的研究葛根素不同处理方式对其抗氧化能力的影响。方法以30mJ/cm2中波紫外线(UVB)和1.0mg/mL葛根素处理HaCaT细胞。实验分为阴性对照组、模型组、UVB照射前给药组、UVB照射后给药组和UVB照射前后给药组。UVB照射后24h收集细胞,检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)。结果 UVB照射前给药处理和UVB照射前后给药处理,使细胞内T-AOC、CAT、GSH-Px升高,而ROS和MDA降低(P<0.05);UVB照射后给药处理可以升高SOD(P<0.05),但对其他指标无影响(P>0.05)。结论葛根素不同处理方式影响其抗氧化能力,其中预防性结合治疗性处理效果最佳,单纯预防性处理其次,单纯治疗性处理最差。