长链非编码RNA CDKN2BAS 在子宫内膜癌组织表达及其生物学功能研究

目的 探讨长链非编码RNA CDKN2BAS（long non-coding RNA CDKN2BAS,LncRNA CDKN2BAS）在子宫内膜癌（endometrial cancer,EC）组织表达,以及沉默该基因对人EC 细胞HEC-1B 生物学功能的影响。方法 收集2018 年3 月～ 2021 年3 月在黄石市中心医院接受手术治疗的107 例EC 患者资料,实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)检测癌组织和癌旁组织中LncRNA CDKN2BAS 表达。培养HEC-1B 细胞,分成siRNA 组、si-NC 组和C 组,分别转染LncRNA CDKN2BAS 抑制序列、对照序列和不作任何处理,并分别采用qRT-PCR,MTT 实验和Transwell 实验检测细胞中LncRNA CDKN2BAS 表达及其对HEC-1B 细胞增殖活性、迁移和侵袭力影响。结果 EC 组织中LncRNACDKN2BAS 表达量为2.73±0.25,高于癌旁组织中的1.00±0.13,差异具有统计学意义（t=63.903,P<0.001）;LncRNA CDKN2BAS在FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期（2.83±0.25）、组织学分级G3级（2.85±0.24）和出现淋巴结转移（2.84±0.26）的EC 组织中的表达量较Ⅰ～Ⅱ期（2.67±0.23）,G1 ～ G2 级（2.67±0.22）和未出现淋巴结转移（2.68±0.22）的EC 组织明显升高（t=3.246,3.894,3.270,均P<0.05）;siRNA 组细胞中LncRNA CDKN2BAS 表达量低于si-NC 组和C 组（0.30±0.12 vs 1.02±0.10,1.01±0.12）,差异具有统计学意义（F=77.210,P<0.05）;siRNA 组细胞24,48,72 和96h 时A 值低于si-NC 组和C 组,差异具有统计学意义（F=5.003 ～ 8.495,均P<0.05）;siRNA 组迁移细胞数和侵袭细胞数低于si-NC 组和C 组,差异具有统计学意义（F=21.956,22.407,均P<0.05）。结论 EC 组织中LncRNACDKN2BAS 表达量升高,沉默人EC 细胞HEC-1B 中LncRNA CDKN2BAS 表达可抑制细胞增殖活性,减少细胞迁移和侵袭数量。     

RNA干扰抑制高迁移率族蛋白1表达对子宫内膜癌细胞株HEC-1A的增殖抑制作用及对细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨通过RNA干扰阻滞高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达水平对子宫内膜癌(EC)细胞株HEC-1A中的细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法将细胞分为以下三组:空白对照组(HEC-1A细胞未感染)、阴性对照组(HEC-1A细胞感染无关序列)、干预组(慢病毒转染HEC-1A细胞)。通过Western blot法对三组HEC-1A细胞中的HMGB1蛋白表达水平进行检测,并采用实时荧光定量PCR对HMGB1 mRNA相对表达量进行检测。采用MTT法对HEC-1A细胞增殖情况进行检测,用流式细胞术对HEC-1A细胞周期变化进行检测,同时用Annexin VFITC/PI法对HEC-1A细胞凋亡情况进行检测。采用Western blot法对转染HMGB1-siRNA后细胞cyclin D1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及磷酸化Akt(p Akt)蛋白表达进行检测。结果相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1蛋白表达水平显著下降(P 0. 01)。经实时荧光定量PCR检测结果可知相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1 mRNA相对表达量显著下降(P 0. 01)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组cyclin D1和p Akt蛋白表达显著下降(P 0. 01);而三组Akt蛋白表达水平的比较,并无显著差异(P 0. 05)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组HEC-1A细胞在570 nm波长处的吸光度值显著下降(P 0. 01)。干预组HEC-1A细胞G0/G1期比率在整个细胞周期分布中的比率最高,其较空白对照组、阴性对照组显著升高(P 0. 01);干预组HEC-1A细胞S期比率、G2/M期比率较空白对照组、阴性对照组显著下降(P 0. 01)。干预组HEC-1A细胞凋亡比率较空白对照组、阴性对照组显著升高(P 0. 01)。结论 HMGB1表达降低可有效阻滞EC细胞株HEC-1A的增殖,使得细胞于G0/G1期受阻,同时可有效促进细胞凋亡,其作用机制可能在于降低cyclin D1蛋白表达和干扰磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路。     

原癌基因Wip1在子宫内膜癌组织中表达水平的研究

目的观察子宫内膜癌患者临床分期、预后与Wip1表达量的关系。方法收集唐山市妇幼保健院2002年1月至2012年1月手术的120例子宫内膜癌患者,经手术切除子宫内膜癌蜡块标本作为实验组,标本均被病理证实,同期活检正常的子宫内膜标本120例作为对照组。检测Wip1在2组中的表达水平。结果 (1)Wip1免疫组化染色结果:正常子宫内膜组织细胞中,Wip1免疫组化染色阴性或微弱。子宫内膜癌组织中Wip1染色呈浅黄色至黄褐色不等。Wip1蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为77.5%(93/120),高于正常内膜组织22.5%(27/120),差异具有统计学意义(P0.05)。(2)Wip1蛋白在子宫内膜癌组织、正常内膜组织Western blot结果:Wip1蛋白在子宫内膜癌组织的相对含量为0.635±0.023。高于正常内膜组织的0.325±0.018,两组之间比较差异具有统计学意义(P0.05)。(3)各样品实时荧光定量PCR结果:Wip1mRNA表达在子宫内膜癌组织高于正常内膜组织,基因表达值分别为0.628±0.053、0.191±0.009,两组之间比较差异具有统计学意义(P0.05)。(4)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关(P0.05),与P53表达水平存在关联(P0.05)。结论 (1)子宫内膜癌中Wip1表达量高,而正常内膜组织表达量低。(2)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关,与P53表达水平存在关联。     

血清N-myc下游调节基因2和雷帕霉素靶蛋白与急性缺血性脑卒中患者早期神经功能恶化的关系

目的 观察急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清N-Myc下游调节基因2(N-Myc downstream regulated gene 2,NDRG2)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)水平变化,探讨其与 AIS 患者发生早...     

子宫内膜癌组织中COX-2和MMP-9的表达及临床意义

目的探讨COX-2和MMP-9在人子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测45例人子宫内膜癌组织中COX-2和MMP-9的表达，并以30例正常子宫内膜组织作为对照。对COX-2和MMP-9的表达采用平均光密度测定，并对临床相关资料进行统计学分析。结果子宫内膜癌组织中COX-2和MMP-9的平均光密度值（OD）为（19．85±7．34）和（18．81±7．56）显著高于正常子宫内膜组织的表达[（12．49±4．87）和（11．46±4．82），P〈0．01]，癌组织中COX-2和MMP-9的表达与性别、年龄、部位、组织类型、分化程度无相关性，而与肿瘤直径、TNM分期、淋巴转移、远处转移相关（P〈0．05），同时经相关性分析发现在子宫内膜癌组织中，COX-2与MMP-9表达有显著相关性（r=0．473，P=0．005，7=0．437，P=0．001）。结论COX-2可能诱导MMP-9的表达而促进肿瘤血管的生成和侵袭转移。     

女性外周血来源γδ T淋巴细胞对子宫内膜癌细胞的杀伤效果

目的 观察女性外周血来源γδT淋巴细胞体外扩增能力,探讨其对子宫内膜癌细胞的杀伤效果。方法 青年女性3例为青年组,围绝经期女性4例为围绝经期组,采集2组肘静脉血4 mL,采用固相抗体包被法联合白细胞介素-2体外扩增外周血γδT淋巴细胞。扩增14 d,记录γδT淋巴细胞数量、扩增倍数,采用流式细胞术检测γδ及Vδ1、Vδ2 T淋巴细胞比率。取子宫内膜癌HEC-1A、Ishikawa细胞,分别以11、51、101、201和401效靶比加入青年组及围绝经期组γδT淋巴细胞处理24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。取HEC-1A、Ishikawa细胞,分为卡铂组、γδT淋巴细胞组、联合组,卡铂组使用卡铂处理72 h,γδT淋巴细胞组使用20∶1效靶比青年组γδT淋巴细胞处理24 h,联合组使用卡铂处理72 h后加入201效靶比青年组γδT淋巴细胞继续处理24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。结果 (1)扩增14 d,青年组γδT淋巴细胞计数[(5.76±0.43)×10⁶/mL]多于围绝经期组[(3.19±0.48)×10⁶/mL](t=3....     

miR-181c-5p通过靶向N-myc下游调控基因2调控人胶质母细胞瘤生物学行为机制研究

目的 探讨miR-181c-5p通过靶向N-myc下游调控基因2(NDRG2)调控人胶质母细胞瘤生物学行为的机制。方法 选取2021年4月至2022年4月海南省第二人民医院收治的30例非功能区胶质瘤患者术中的胶质母细胞瘤（GBM）组织标本及邻近正常脑组织标本进行研究。应用实时定量聚合酶链式反应（q RT-PCR）检测GBM组织标本、正常脑组织标本中miR-181c-5p的表达水平;荧光素酶检测miR-181c-5p靶向调控NDRG2基因情况;应用q RT-PCR及免疫印迹试验（Western Blot）检测GBM组织标本中NDRG2的基因及蛋白表达水平;检测GBM细胞增殖、迁移和侵袭情况。结果 GBM组织中NDRG2 m RNA相对表达量高于正常组织标本（P<0.05）;双荧光素酶实验显示,miR-181c-5p模拟物（miR-181c-5p mimics）组NDRG2野生型（NDRG2 WT）的相对荧光素酶活性低于模拟物对照（NCmimics）组（P <0.05）;miR-181c-5p抑制剂（miR-181c-5p inhibitor）组U87细胞中NDRG2 m RN...     

子宫内膜癌组织中c-Ets-1基因表达及临床意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中原癌基因c-Ets-1的表达及其与子宫内膜癌的临床分期、病理分级、分型及预后关系.方法:采用免疫组化方法检测c-Ets-1蛋白在67份子宫内膜癌组织及34份正常子宫内膜组织中的表达.采用荧光原位杂交方法对其中12份子宫内膜癌标本及10份正常内膜组织中的c-Ets-1mRNA进行检测.结果:免疫组化结果显示 c-Ets-1蛋白在子宫内膜癌组织中阳性表达率为86.5%,临床分期Ⅰ期、病理分级高分化、无肌层浸润及无复发的子宫内膜癌组织中c-Ets-1蛋白含量及阳性表达率明显低于临床分期Ⅱ、Ⅲ期、低分化、肌层浸润大于1/2及有复发的组织标本(P＜0.05);而在正常子宫内膜中,仅呈阴性及少量呈弱阳性的改变.荧光原位杂交技术检测结果与免疫组织化学表达相符,在子宫内膜癌中阳性表达率为90.4%,而正常子宫内膜组织中,仅有少量呈阳性.结论:与正常对照相比,c-Ets-1有肿瘤特异性,其表达与子宫内膜癌的临床分期、病理分级及分型、转移及临床预后相关.     

端粒酶hTRT在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨子宫内膜组织中端粒酶催化亚单位(hTRT)表达对子宫内膜癌的诊断意义.方法 采用原位杂交法对40例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生及8例正常子宫内膜组织的hTRT表达进行检测.结果 子宫内膜癌组织hTRT表达阳性率为87.5%,明显高于子宫内膜不典型增生与正常子宫内膜组织(P<0.01);子宫内膜不典型增生组织hTRT表达阳性率(40%)较正常子宫内膜组织(12.5%)高,但差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 从正常子宫内膜到子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌,hTRT表达阳性率逐渐增高,提示hTRT阳性表达与子宫内膜癌的发生发展高度相关,对子宫内膜癌的诊断具有重要意义.     

基质金属蛋白酶-2在子宫内膜癌的表达及临床意义的Meta分析

目的系统评价基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平与子宫内膜癌及其临床病理特征的关系。方法检索国内外公开发表的关于子宫内膜癌组织中MMP-2的表达及其与临床病理特征关系的文献,按照纳入和排除标准筛选文献,应用RevMan5.2软件进行统计分析。结果最终纳入15个研究,共1 573例受试者。Meta分析结果显示:(1)MMP-2在子宫内膜癌组与健康对照组及子宫内膜良性病变组的表达差异均有统计学意义(P0.05)。(2)MMP-2表达与肿瘤分化程度(P=0.000 8)、淋巴结转移(P=0.004)、肌层浸润深度(P0.05)相关,与临床分期无关(P=0.07)。结论 MMP-2在子宫内膜癌中呈高表达,提示其可能在肿瘤发生、发展和转移过程中起着重要的作用。     

POLE2基因在肺癌组织中的表达及意义

目的探讨DNA聚合酶ε的第二大亚基(POLE2)基因在肺癌组织中的表达及与肺癌患者临床资料的相关性。方法收集2017年7月至2017年12月于唐都医院胸外科实施肺癌根治术的肺癌患者的肺癌组织及癌旁组织,共20对,详细记录纳入患者的一般资料及临床病理信息。采用免疫组织化学法(IHC)进行POLE2基因表达水平的检测;分析POLE2基因表达水平与患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、肿瘤分化程度等的关系。结果20例患者的肿瘤组织中,POLE2基因在肺癌组织中的阳性表达率为80.0%,高于癌旁组织的15.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。POLE2基因的表达水平与患者的一般资料(性别、年龄、吸烟史)、肿瘤大小、肿瘤分化程度等无显著相关性(P>0.05)。结论POLE2基因在肺癌组织中的表达程度明显高于正常癌旁组织,与肿瘤病理特征未见明显相关性。POLE2基因可能成为未来治疗肺癌的一个潜在靶点,值得临床进一步研究。     

肺癌组织中FHIT和TPX2基因的表达及临床意义的研究

目的探讨FHIT和TPX2基因在肺癌中的表达与临床病理因素的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法,检测FHIT和TPX2基因在肺癌组织和癌旁正常肺组织中的表达。结果FHIT基因的表达水平在肺癌组织中的水平比正常肺组织低,差异有统计学意义（P〈0．05）,失表达率达74．2％。TPX2基因的表达水平在肺癌组织中的水平比正常肺组织高,差异有统计学意义（P〈0．05）,高表达率达64．5％。FHIT的表达异常与吸烟存在相关（P〈0．05）,TPX2的表达异常与临床病理因素均无关,两者之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论FHIT基因的失表达和TPX2基因的过表达在肺癌的发生发展中起重要作用,吸烟可能导致FHIT基因表达下降诱发肺癌。     

MiR-101在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。方法:收集乳腺癌组织及对应的癌旁组织,以qRT-PCR方法测定miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。在乳腺癌细胞中转染miR-101 mimics、mimics control,以qRT-PCR方法检测上调效果,MTT方法测定细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Transwell小室测定细胞迁移和侵袭数目变化,蛋白质印迹法测定细胞中cleaved caspase-3和MMP-2蛋白表达变化。结果:miR-101在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。与miR-NC比较,miR-101细胞中miR-101表达水平升高,细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移数目下降,细胞内的cleaved caspase-3蛋白水平表达升高,MMP-2蛋白表达水平减少(P<0.05)。结论:MiR-101在乳腺癌组织中表达下调,上调miR-101抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞凋亡。     

子宫内膜癌患者血清及癌组织中microRNA-195的表达水平及意义

目的观察microRNA-195在子宫内膜癌患者血清及组织中的表达情况,并分析其诊断价值及与病理学指标的关系。方法子宫内膜癌癌组织及对应肿瘤边缘2~5 cm处的癌旁组织来源于2018年1—4月石家庄心脑血管病医院接受子宫内膜癌分期手术治疗的60例患者(病例组),并抽取其术前外周静脉血;同时抽取同期入院行妇科体检的30例健康志愿者作为对照(健康组)。采用实时荧光定量PCR检测血清及组织中microRNA-195的相对表达量,并分析其与病理学指标的关系。结果与健康组相比,病例组血清microRNA-195表达水平明显低,差异有统计学意义(P<0.05)。血清microRNA-195对诊断子宫内膜癌的受试者工作特征曲线下面积为0.778(95%CI:0.692~0.864),确定最佳阈值后诊断子宫内膜癌的灵敏度、特异度分别为76.67%、73.33%。与癌旁组织相比,子宫内膜癌癌组织中microRNA-195相对表达量明显低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同的年龄、病理类型、病理分级、ER、PR表达强度的子宫内膜癌癌组织microRNA-195表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);而microRNA-195表达水平Ⅰ期癌组织>Ⅱ期癌组织>Ⅲ期癌组织,浸润深度≥1/2肌层的癌组织microRNA-195表达水平明显高于浸润深度<1/2肌层的癌组织,Her-2阴性的癌组织癌组织microRNA-195表达水平明显高于Her-2阳性的癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-195在子宫内膜癌患者血清及癌组织中呈低表达,对子宫内膜癌的诊断有一定价值,且可能对子宫内膜癌的发生发展有一定促进作用。     

细胞增殖抑制基因、p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的 探讨细胞增殖抑制基因(HSG/Mfn2)、p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及相关性.方法 采用免疫组化SP法检测92例非小细胞肺癌中HSG/Mfn2、p21WAF1蛋白的表达.结果 HSG/Mfn2在肺鳞癌、腺癌、非癌肺组织中吸光度值分别为15.06±2.73、12、21±2.96、10.36±3.60,差异有统计学意义(P<0.05),并与肺癌分化程度有关.p21WAF1蛋白在肺鳞癌、腺癌、非癌肺组织中吸光度值分别为3.16±0.98、3.44±0.22、0.06±0.32,肺鳞癌和腺癌组织与非癌组织比较差异均有统计学意义(均P<0.05),与分化程度、淋巴结转移有关.结论 HSG/Mfn2,p21WAF1蛋白与肺癌发生、发展密切相关.二者在肺癌组织中的表达呈正相关.     

结直肠癌组织中lncRNA FOXC2-AS1与EZH2的表达及临床意义

目的 探讨结直肠癌(CRC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)RNA FOXC2-AS1、Zeste基因增强子同源物2(EZH2)表达及临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测86例CRC癌组织和癌旁组织中lncRNA FOXC2-AS1、EZH2的表达.采用免疫组化法检测癌组织和癌旁组织中EZH2的蛋白表达.采...     

FHL2在大肠癌组织中的表达及其作用

目的:探讨FHL2基因在大肠癌中的表达及其临床意义.方法:用免疫组织化学方法检测35例大肠癌组织、15例大肠息肉组织和15例正常结肠黏膜组织中FHL2蛋白的表达情况,并分析其与相关临床病理因素的关系.结果:FHL2蛋白表达阳性率在大肠癌组织中显著高于正常大肠黏膜组织和大肠息肉组织.结论:FHL2蛋白在大肠癌组织中高度表达,但表达程度与癌症病理分级无明显相关性.     

CIT基因在前列腺癌中的表达特点及其对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的调控作用研究

目的 研究CIT基因在前列腺癌中的表达特点及其对PC-3细胞生物学行为的调控作用。方法 采用回顾性研究,收集哈尔滨医科大学附属肿瘤医院收治的106例前列腺癌患者的临床资料,将前列腺癌旁正常组织作为对照,检测患者CIT基因表达量。根据前列腺癌患者CIT基因表达量中位数,分为低表达组(53例)与高表达组(53例),比较两组患者临床病理特征的差异以探讨CIT基因表达量与患者临床病理特征的关系。对人前列腺癌PC-3细胞进行培养,根据siRNA技术干扰CIT基因的表达,分为正常对照组(细胞未进行任何转染)、阴性对照组(转染非特异性对照序列siRNA)和CIT-siRNA组(转染CIT-siRNA)。通过CCK-8实验检测CIT基因对三组PC-3细胞增殖能力的影响,并采用划痕实验检测细胞迁移能力,通过Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果 相比前列腺癌旁正常组织,CIT基因高表达于前列腺癌组织(P <0. 01)。低表达组与高表达组Gleason评分、N分期、M分期和前列腺特异抗原水平的比较,均存在显著差异(P <0. 05);而两组在年龄、T分期和精囊侵袭上的比较,均无显著差异(P> 0. 05)。在siRNAs细胞转染48 h后,阴性对照组和CIT-siRNA组PC-3细胞中CIT蛋白和mRNA表达量较正常对照组均明显下调(P <0. 01)。CCK-8实验结果显示,siRNAs转染PC-3细胞2、3 d后,阴性对照组和CIT-siRNA组细胞增殖能力较正常对照组均明显下降(P <0. 01)。划痕实验和Transwell实验结果发现,CIT特异性siRNAs转染细胞48 h后,阴性对照组和CIT-siRNA组PC-3细胞迁移距离较正常对照组均明显缩短,且侵袭细胞数量较正常对照组均明显减少(P<0. 01)。结论 CIT基因在前列腺癌组织中具有高表达的特点,通过沉默该基因表达,可有效干扰PC-3细胞生物学行为,提示CIT基因可能是前列腺癌的一种重要致病基因。