斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗恶性胸腔积液的临床观察

恶性胸腔积液是癌症晚期常见的并发症之一,严重影响患者的生存质量,并会迅速导致病情恶化,而单纯胸穿或引流并注入抗肿瘤药物,虽有一定疗效,但不良反应较大。我们进行了向胸腔注入斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗恶性胸腔积液的临床观察。对象与方法1.对象:我院2003年~2005年12月合     

氯丙嗪协同斑蝥酸钠维生素B6对Hep-2细胞的增殖抑制作用

目的探讨盐酸氯丙嗪联合斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞株的增殖抑制作用及其对细胞周期进程的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测单独斑蝥酸钠维生素B6制剂及盐酸氯丙嗪联合斑蝥酸钠维生素B6制剂对Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期进程的变化。结果单独斑蝥酸钠维生素B6组对Hep-2细胞增殖有明显的抑制作用,而斑蝥酸钠维生素B6联合氯丙嗪效果明显高于单独斑蝥酸钠维生素B6组。流式细胞仪结果显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,且细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6对Hep-2细胞生长、增殖及其对细胞周期进程均有抑制作用,尤其是氯丙嗪联合斑蝥酸钠维生素B6组效果显著。     

斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的探讨斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)增殖抑制率、凋亡率及其细胞周期进程的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测斑蝥酸钠维生素B6对Hep-2细胞增殖抑制率、流式细胞仪定量检测经斑蝥酸钠维生素B6作用后的Hep-2细胞周期进程变化及凋亡率。结果不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液对Hep-2细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,Hep-2细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞生长、增殖有明显的抑制作用,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,从而使S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,诱导Hep-2细胞凋亡。     

去甲斑蝥酸钠对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的观察去甲斑蝥酸钠对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,探讨其抗胃癌的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度去甲斑蝥酸钠对人胃癌SGC-7901细胞生长的抑制率,其中实验组的去甲斑蝥酸钠浓度分别为0.4、1.0、2.5、6.0 mg/L,对照组不加去甲斑蝥酸钠。采用流式细胞仪检测SGC-7901细胞的增殖周期,并计算细胞增殖指数。结果浓度0.4、1.0、2.5、6.0 mg/L去甲斑蝥酸钠的实验组的OD值均低于对照组(t=2.871、5.295、10.100、13.836,P均0.05)。随着去甲斑蝥酸钠浓度的提高,对SGC-7901细胞的抑制率随之增大。经过流式细胞仪的检测,与对照组相比,实验组的G0/G1期细胞比例显著增高(P0.05),而S期细胞比例和细胞增殖指数明显降低(P0.05),均呈现出时间、浓度依赖性。结论去甲斑蝥酸钠在体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,体现出抗癌活性,在胃癌治疗方面具有广阔的应用前景。     

去甲斑蝥酸钠对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的观察去甲斑蝥酸钠对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法取常规培养的HepG2细胞,接种于24孔板,SNCID组分别加入5、2．5、1、0．5μg／ml的注射用去甲斑蝥酸钠1ml,对照组不添加任何药物。培养24、48、72h后用流式细胞术检测细胞周期,并计算增殖指数PI。结果SNCID组G0／G1期的细胞比例明显增高,而S期细胞比例、PI降低,此效果呈时间和浓度依赖性（P均〈0．05）。结论去甲斑蝥酸钠培养可阻滞人肝癌HepG2细胞于G0／G1期,抑制HepG2细胞增殖。     

斑蝥酸钠维生素B6注射液联合化疗对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响

目的探讨斑蝥酸钠维生素B6注射液联合化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及对患者免疫功能的影响。方法选择2011年1月至2014年12月在该院就诊的NSCLC患者106例,随机分成对照组和观察组各53例。对照组给予GP化疗方案治疗,观察组给予GP化疗方案联合静脉滴注斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组CD3+、CD3+CD4+、CD16+CD56+、CD4/CD8水平与治疗前相比均有所下降,且观察组均高于对照组(均P<0.01)。治疗后,观察组躯体功能(67.2±16.6)分、情绪功能(73.8±17.2)分、社会功能(66.7±20.4)分、整体生活质量(83.5±25.7)分均高于对照组躯体功能(55.7±14.5)分、情绪功能(62.9±15.1)分、社会功能(54.6±19.2)分、整体生活质量(72.7±22.6)分(P<0.05或P<0.01)。观察组患者的血红蛋白下降、白细胞下降、肝肾功能损伤以及恶心呕吐等不良反应的发生率均低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液联合化疗治疗NSCLC,能够调节患者的免疫功能、提高患者的生活质量,降低化疗期间患者的不良反应。     

斑蝥酸钠维生素B6联合X射线诱导肝癌细胞HepG2凋亡

目的:探讨斑蝥酸钠维生素B6(艾易舒)注射液联合放射疗法对人肝癌细胞HepG2的抑制作用.方法:采用MTT法观察不同浓度的斑螯酸钠维生素B6注射液,对HepG2生长的影响;斑蝥酸钠维生素B6作用于HepG2细胞24 h后接受不同剂量的X射线照射.克隆形成法检测放射增敏比,Annexin-V FITC/P双染法检测HepG2的早期凋亡.倒置荧光显微镜观察肝癌细胞凋亡的形态学变化.结果:斑蝥酸钠维生素B6组、放疗处理组及斑蝥酸钠维生素B6联合放疗组均对HepG2增殖产生抑制作用,与空白对照相比,斑蝥酸钠维生素B6对HepG2有明显抑制作用.并呈现浓度依赖性特点,斑蝥酸钠维生素B6浓度为5.0 mg,L、作用时间为72 h,斑蝥酸钠维生素B6对HepG2细胞的抑制率最大.斑螯酸钠维生素B6与放疗联合处理组对HepG2的抑制率明显高于单纯斑蝥酸钠维生素B6组和单纯放疗组.提示斑蝥酸钠维生素B6与X射线对HepG2的抑制效果具有协同作用.流式细胞分析显示:2.5 mg/L斑蝥酸钠维生素B6作用于HepG2细胞24 h后,11.15%的肝癌细胞发生凋亡.4 Gy的X射线作用HepG2细胞24 h,10.10%的肝癌细胞发生凋亡.5.0 mg/L斑蝥酸钠维生素B6作用于H印G2细胞24 h后对其行X射线照射,23.75%的细胞发生凋亡.克隆形成实验结果显示,斑蝥酸钠维生素B6可以增强肝癌细胞的放射敏感性.结论:斑蝥酸钠维生素B6能够显著抑制H印G2增殖,诱导HepG2凋亡,增强HepG2对X射线照射的敏感性,具有临床意义.     

维生素E对肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

动物实验研究表明维生素Ｅ(ＶｉｔＥ)具有抗肝纤维化作用[1] ,但其具体机制不明。目前认为肝星状细胞 (ＨＳＣ)在肝纤维化形成中起关键作用[2 ] 。为探讨ＶｉｔＥ抗肝纤维化的细胞学机制 ,我们以白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )及肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)作为刺激因素观察了ＶｉｔＥ对大鼠ＨＳＣ增殖和胶原合成的调控作用。—、材料和方法1 实验动物 :雄性ＳＤ大鼠 ,体重 5 5 0ｇ。2 大鼠ＨＳＣ的分离和培养 :采用链酶蛋白酶和胶原酶液原位循环灌注消化肝脏 ,经 11%Ｍｅｔｒｉｚａｍｉｄｅ液一步密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ。将分离的ＨＳＣ按 2…     

斑蝥酸钠维生素B6对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖抑制作用

目的观察斑蝥酸钠维生素B6对体外培养的人卵巢癌细胞株(SKOV3细胞)的增殖抑制率、凋亡率及其对细胞周期的影响。方法应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6对SKOV3细胞的增殖抑制率。流式细胞仪定量检测经斑蝥酸钠维生素B6作用后的SKOV3细胞周期进程的变化及凋亡率。结果不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6制剂对SKOV3细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果显示G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,SKOV3细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6制剂对SKOV3细胞生长增殖有显著的抑制作用,抑制SKOV3细胞G1期向S期转化进程,从而使S期细胞减少,造成G2/M期细胞相对增多,诱导SKOV3细胞凋亡。     

斑蝥酸钠维生素B_6对非放化疗的中、晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响

<正>由于缺乏早期特异性的症状及其他一些因素,40%左右的非小细胞肺癌患者就诊时往往已处于晚期,错过了根治性手术的最佳时机。由于化疗病人全身不适反应明显及靶向治疗费用较高等因素,还不能被患者广泛接受。中医药在各种肿瘤治疗中有着较长的历史,发挥了积极的作用。本文拟评估斑蝥酸钠维生素B6注射液对非放化疗中、晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响。1资料与方法1.1一般资料2013年1月至2014年10月应用斑蝥酸钠维     

调节性T细胞对肝星状细胞增殖及透明质酸分泌的影响

目的研究CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肝星状细胞(HSC)增殖及透明质酸(HA)分泌的影响。方法 MASC法分离慢性乙型肝炎患者血中CD4+CD25+Treg细胞;传代培养人HSC LX-2(空白组),不同比例CD4+CD25+Treg细胞与HSC直接共培养(共培养组),不同剂量的重组人转化生长因子(TGF)β1和HSC共培养(对照组);使用CCK-8法检测HSC增殖、放射免疫法检测HA分泌情况。组间比较采用单因素方差分析。结果共培养组与空白对照组(0.6623±0.02702)相比,在比例为2.5∶1时HSC增殖最为明显(0.6836±0.00560),比例为1∶1、5∶1及7.5∶1时HSC增殖均明显减少,且随着比例升高其增殖水平逐渐降低,各组与空白对照组相比有统计学差异(F=11.421,5.272,84.514,490.639;均P<0.05)。不同浓度TGFβ1对照组的HSC均比空白对照组(0.3883±0.00189)细胞增殖明显(0.6720±0.00753,0.6773±0.00585,0.5373±0.00387),并于8 ng/μl时增殖达到高峰,各亚组与空白组相比有统计学差异(F=196.175,799.624,236.461;P<0.01)。共培养组与对照组中细胞上清液中HA浓度与HSC增殖呈正相关(r=0.661、0.871,均P<0.01)。结论 CD4+CD25+Treg细胞促HSC增殖并促进其分泌HA,并在体外证实CD4+CD25+Treg细胞在慢性乙型肝炎进展过程中发挥重要作用。     

胆红素对肝星状细胞-T6增殖及细胞周期的影响

[目的]观察胆红素对肝星状细胞(HSC)-T6增殖及细胞周期影响.[方法]将培养细胞分成正常组和胆红素不同浓度(10 μmol/L、30 umol/L、50 /μmol/L、70 μmol/L、100 μmol/L)干预组,采用MTT法观察胆红素对HSC-T6增殖的影响,流式细胞仪观察各组细胞周期的变化.[结果]①不同浓度胆红素对HSC-T6均有促进增殖作用,且呈一定的量效关系,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05);②10 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L浓度胆红素作用HSC-T6后,G0/G1期减少,S期增加,G2/M期增加,与正常组比较均P＜0.05.[结论]胆红素对HSC-T6均有促进增殖作用.     

大鼠肝星状细胞大电导钙激活钾通道特性与细胞增殖的关系

目的探讨肝星状细胞（HSC）钙激活钾通道特性,以及钾通道对HSC增殖的影响。方法以胶原酶循环灌流法分离大鼠HSC,用结蛋白抗体及α-抗平滑肌抗体进行分离细胞鉴定,采用单通道细胞膜片钳技术检测传代HSC钾通道的特性,通过MTT法、流式细胞术分别检测钾离子通道阻滞剂四乙胺（TEA）对HSC的增殖、细胞周期的影响。结果所分离细胞为HSC。传代活化的HSC有单通道存在,其电导值为（210.86±5.49）pS（n=7）,属于大电导通道;其通道表现出明显的电压依赖性以及对钙敏感性,TEA可明显减少外向钾离子通道开放概率。TAE对HSC的增殖抑制效应具有时间依赖与剂量依赖的特点,可使细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 HSC上大电导钙激活钾通道可能参与了HSC活化增殖。     

龙血素B对肝星状细胞增殖及细胞外基质分泌的影响

目的观察龙血素B对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及细胞外基质分泌的影响。方法用不同浓度的龙血素B处理大鼠HSC;MTT法计算药物的抑制率;放射免疫法测定细胞上清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)。结果随药物浓度的升高,龙血素B对HSC-T6增殖的抑制作用逐渐增强,有明显的量效关系。细胞上清中HA、LN和Ⅳ-C的含量与对照组相比降低,其中龙血素B浓度为0.300μg/μL时降低最明显。结论龙血素B可抑制HSC-T6增殖,并不同程度抑制HA、LN和Ⅳ-C的分泌。     

Inhibition of hepatic stellate cells proliferation by mesenchymal stem cells and the possible mechanisms

Aim: During fibrosis, hepatic stellate cells (HSCs) undergo a complex activation process characterized by increased proliferation and extracellular matrix deposition. Previous studies have suggested that mesenchymal stem cells (MSCs) may ameliorate fibrogenesis and represent a promising strategy for cell therapy. However, the underlying mechanisms are not fully understood. Methods: Hepatic stellate cells were treated with or without MSCs. Then cell proliferation and cell cycle were analyzed. Production of soluble factors by MSCs and its relation with cell proliferation suppression was evaluated by transwell co‐culture and RNA interference. Effects of MSCs on the gene expression of collagen were also evaluated. Results: MSCs induced G₀/G₁ arrest of HSCs growth partly through secreting soluble factors TGF‐β3 and HGF, which resulted in up‐regulation of p21^Cip1 and p27^Kip1 expression and down‐regulation of cyclinD1. MSCs inhibited the phosphorylation of extracellular signal‐regulated kinase (ERK) 1/2 and reduced gene expression of collagen type I and III. MSCs did not reverse the proliferation and collagen type I gene expression of HSCs provoked by PDGF. Conclusions: The growth inhibition of HSCs induced by MSCs through an arrest in the G₀/G₁ phase of the cell cycle is partially mediated by secretion of TGF‐β3 and HGF. MSCs inhibit HSCs activation through decreasing phosphorylation of extracellular signal‐regulated kinase (ERK) 1/2. These results further support MSCs may be used as a novel therapy for treating fibrotic diseases in human.     

肝素对肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖及分泌的影响及其作用机制

目的观察肝素在体外对肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖及分泌的影响,并探讨其作用机制。方法应用Nycodenz分离肝纤维化大鼠的肝星状细胞置培养板中,并分为三组。A、B组分别加入1000μg/ml及2000μg/ml肝素,C组不用药。应用MTT比色法检测各组肝星状细胞的增殖状况,免疫细胞化学检测各组肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果OD值A组为0.0626±0.0137,B组为0.0746±0.0131,C组为0.1106±0.0198,A、B组均显著低于C组(P均<0.05),B组低于A组(P>0.05);C组肝星状细胞胞质中可见α-SMA、TGF-β1和LN明显表达,A、B组各指标表达均低于C组(P分别<0.01和<0.05),A组表达低于B组(P<0.05)。结论肝素可抑制肝纤维化大鼠肝星状细胞的增殖及胶原分泌,作用机制可能是抑制肝星状细胞表达TGF-β1。     

姜黄素对肝星状细胞增殖及分泌细胞外基质的影响

观察姜黄素对大鼠肝星状细胞 (HSC)增殖及分泌细胞外基质的影响。用不同浓度的姜黄素处理大鼠肝星状细胞 ;以MTT比色法测定细胞的增殖 ;放射免疫法测定透明质酸和层粘连蛋白 ;酶联免疫吸附法 (ELISA)测定Ⅰ型胶原的水平。姜黄素可剂量依赖性地抑制HSC增殖 ,不同程度抑制Ⅰ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白分泌。姜黄素可显著抑制HSC的增殖及分泌细胞外基质。     

HBV介导的肝星状细胞和天然免疫细胞的相互作用

肝脏非实质细胞在HBV相关的肝脏疾病中发挥着至关重要的作用,而肝星状细胞(HSC)的激活以及与肝内细胞之间的相互作用是导致肝纤维化的主要原因。主要介绍了HBV诱导的肝脏炎症以及天然免疫细胞与HSC的相互作用,简述了HBV作用下单核/巨噬细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)对HSC的激活和杀伤作用以及HSC的肝脏免疫调节作用。     

KN-93, a specific inhibitor of CaMKⅡ inhibits human hepatic stellate cell proliferation in vitro

AIM: To investigate the effects of KN-93, a CaMKⅡ selective inhibitor on cell proliferation and the expression of p53 or p21 protein in human hepatic stellate cells. METHODS: Human hepatic stellate cells (LX-2) were incubated with various concentrations (0-50 mmol/L) of KN-93 or its inactive derivative, KN-92. Cell proliferation was measured by CCK-8 assay, and the expression of two cell cycle regulators, p53 and p21, was determined by SDS-PAGE and Western blotting. RESULTS: KN-93 (5-50 mmol/L) decreased the proliferation of human hepatic stellate cells in a dose- dependent manner from 81.76% (81.76% ± 2.58% vs 96.63% ± 2.69%, P < 0.05) to 27.15% (27.15% ± 2.86% vs 96.59% ± 2.44%, P < 0.01) after 24 h treatment. Incubation of 10 mmol/L KN-93 induced the cell growth reduction in a time-dependent manner from 78.27% at 8 h to 11.48% at 48 h. However, KN-92, an inactive derivative of KN-93, did not inhibit cell proliferation effectively. Moreover, analysis of cell cycle regulator expression revealed that KN-93 rather than KN-92 reduced the expression of p53 and p21.