补肾活血中药血清对高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响

目的 探讨补肾活血中药血清对体外高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响。     

补肾活血中药对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的 探讨补肾活血中药对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响。方法 以链脲佐菌素造成大鼠糖尿病模型。利用微机图像分析技术夺视网膜神经细胞胞体中Ｎｉｓｓｌ小体进行定量测定和分析。结果 中药治疗组的糖尿病大鼠视网膜神经节细胞胞体中Ｎｉｓｓｌ小体减少程度明显低于阴性对照组和阳性对照Ⅰ组。结论 补肾活血中药有减轻实验性糖尿病视网膜神经节细胞病理损害的作用。     

糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡及补肾活血中药抑制其凋亡的机制

目的 探讨糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡及补肾活血中药抑制凋亡的机制。方法 以链脲佐菌素造成大鼠糖尿病模型，给予补肾活血中药加降糖灵混悬液，连续6月，采用甲苯胺蓝—伊红染色及免疫组化染色结含图像分析半定量检测RGC数目、尼小体、bcl—2、bax、NT—3的含量，计算bcl—2／bax蛋白的比值，并使用逐步引入剔除模型进行多元线性回归分析。结果 与正常组相比，模型组RGC数目明显减少(P＜0．001)，尼氏小体、bcl—2、NT—3、bcl—2／bax蛋白含量显著降低(P＜0．001)，bax含量显著增高(P＜0．001)；与模型组相比，补肾活血中药组RGC细胞数目明显增多(P＜0．001)，尼小体、bcl—2、NT—3、bcl—2／bax蛋白含量显著增高(P＜0．001)，bax含量显著降低(P＜0．001)。回归分析结果显示RGC数目和尼小体含量分别与bcl—2／bax蛋白比值呈正相关，前者r＝0．754，P＜0．001，后者r＝0．578，P＜0．001。结论 糖尿病大鼠RGC凋亡及补肾活血中药抑制其凋亡的可能机制之一是通过调节bcl—2／bax的比值，神经营养因子NT—3量的改变也有一定的作用。     

补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜神经节细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

目的:观察补肾活血中药对SD大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型视网膜神经节细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用烙闭上巩膜静脉法,制作大鼠慢性EIOP模型,随机分为模型对照组,补肾活血高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白对照组。连续灌胃8周,并于8周末处死大鼠,观察其对EIOP大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡基因的影响。结果:补肾活血中药可上调大鼠EIOP视网膜神经节细胞抗凋亡基因Bcl-2、抑制凋亡促进基因Bax。结论:补肾活血中药可调控大鼠EIOP视网膜神经节细胞凋亡基因的表达。     

补肾活血中药对TGF-β_2及高糖状态下体外培养的视网膜Müller细胞活力的影响

目的探讨高糖及转化生长因子-β2（Transforming growth factor,TGF-β2）和高糖同时存在条件对体外培养的Müller细胞活力的影响,以及补肾活血中药的干预作用。方法以改良酶消化法体外培养大鼠Müller细胞,将P3细胞分别置于模拟正常、高糖、TGF-β2及TGF-β2和高糖同时存在条件下进行培养,并以补肾活血中药复方含药血清进行干预。实验分为正常对照组、TGF-β2组、高糖组、TGF-β2＋高糖组、正常中药干预组、TGF-β2＋高糖中药干预组;分别在试验干预12h、24h及48h后,以490型酶标仪测定各组细胞外液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）的漏出量。结果 TGF-β2组和高糖组12h和24h的LDH漏出量与正常对照组比较均无明显差异（P〉0.05）,但48h的LDH漏出量均较正常对照组增多（P〈0.05）;TGF-β2组24h的LDH漏出量较高糖组增多（P〈0.05）;TGF-β2＋高糖组24h和48h的LDH漏出量均较TGF-β2组减少（P〈0.05）;TGF-β2＋高糖组48h的LDH漏出量较高糖组减少（P〈0.05）;补肾活血中药血清能降低24h时TGF-β2和高糖同时存在条件下LDH的漏出量,降低各时段正常条件下的LDH漏出量（P〈0.05）。结论 Müller细胞对短期高糖状态以及浓度为150pg/ml的TGF-β2短期干预可能有一定的耐受性,但当高糖（50mol/l）以及TGF-β2（150pg/ml）干预48h后Müller细胞活力明显降低;补肾活血中药复方含药血清能提高正常及高糖和TGF-β2同时存在条件下视网膜Müller细胞膜的稳定性、增强Müller细胞活力可能是补肾活血中药复方防治糖尿病性视网膜病变的另一药物干预途径。     

益气养阴活血方药对高糖培养下视网膜神经节细胞生长抑制作用的影响

目的：观察益气养阴活血中药对高糖条件下大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）生长抑制作用的影响。方法：体外培养新生大鼠视网膜神经节细胞,分为正常对照组、正常中药干预组、高糖组及高糖中药干预组。应用CCK-8测定各组RGCs不同培养时间的细胞生长抑制率。结果：高糖对RGCs呈时间依赖性抑制其生长（P〈0．01）,益气养阴活血中药血清可降低高糖培养下RGCs的生长抑制率（P〈0．01）。结论：益气养阴活血中药能在一定程度上减轻高糖对视网膜神经节细胞的生长抑制作用,对高糖条件下RGCs具有保护作用。     

补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型多焦视网膜电图的影响

目的：观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压（elevated intraocular pressure,EIOp）模型视功能损害的干预作用。方法：采用烙闭上巩膜静脉的方法诱导产生慢性EIOP大鼠模型,将52只SD大鼠随机分为补肾活血高、中、低剂量组、模型组、空白组。连续灌胃8周,于8周末进行多焦视网膜电图（mulfifocal electroretinogram,mfERG）检测。结果：通过对大鼠mfERG-阶函数核（first older kernel,FOK）的观察发现,补肾活血中药有助于总波及1、2、3、4环P1波反应密度、总波P1波峰潜时、2环及3环N1波反应密度,3环、4环N1波峰潜时的恢复。结论：补肾活血中药可以改善大鼠慢性EIOP模型的视功能,有助于mfERG反应密度和波峰潜时的恢复。     

补肾活血法中药(糖络通)对糖尿病大鼠视网膜病变中RAGE mRNA表达的影响

目的观察和验证补肾活血通络法为治则组成的糖络通胶囊对防治糖尿病视网膜病变的疗效并探讨其作用机制。方法随机将33只正常雄性Wistar大鼠分为正常对照组(N)11只,糖尿病对照组(D)11只,糖络通治疗组(DT)11只。糖尿病大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素造模。D组与DT组均用长效胰岛素2U隔日皮下注射。DT组同时用糖络通胶囊连续给药8周后观察肾皮质RAGE mRNA的表达水平。结果与结论糖络通具有降低大鼠视网膜RAGE mRNA表达水平的作用,可延缓糖尿病视网膜病变的发展。     

补肾活血方干预高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞损伤的研究

目的在细胞水平探索补肾活血方干预高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞损伤的研究。方法在体外实验中采用高糖高脂刺激小鼠脑微血管内皮细胞。实验分组为:空白对照组、模型组[25 mmol/L葡萄糖(HG),200μmol/L棕榈酸(PA)]、补肾活血方30、60、120 mg/L组。CCK-8细胞增殖实验方法检测补肾活血方对高糖高脂诱导的细胞存活率的影响;采用试剂盒检测各组细胞部分氧化应激因子[活性氧(ROS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)、血管内皮生长因子(VEGF)]、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)和部分炎症因子[IL-6、细胞黏附因子1 (ICAM-1)、TNF-α、转化生长因子β1(TGF-β_1)]的含量变化。采用实时荧光定量PCR法检测iNOS和TNF-αmRNA表达。结果 (1)与空白对照组(100%±2.3%)比较,模型组细胞的细胞存活率显著降低(62.6%±0.5%,P0.01);与模型组比较,补肾活血方30、60、120 mg/L组细胞的存活率显著升高[(70.5%±4.0%),(76.3%±2.8%),(80.5%±2.7%),P0.05,P0.01]。(2)与空白对照组比较,模型组细胞的部分氧化应激因子(ROS、iNOS、NO、VEGF)、MMP-2、MMP-9、TIMP-1以及炎症相关因子(IL-6、ICAM-1、TNF-α、TGF-β_1)含量显著上升(P0.05,P0.01)。与模型组比较,补肾活血方30、60、120 mg/L组作用后各检测因子的表达降低(P0.05,P0.01)。(3)荧光定量PCR结果显示,与空白对照组比较,模型组iNOS和TNF-αmRNA表达均增加(P0.01),与模型组比较,BSHX 120 mg/L组iNOS mRNA表达及BSHX 60、120 mg/L组TNF-αmRNA表达均降低(P0.05,P0.01)。结论高糖高脂能够促进ROS、iNOS、NO、VEGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和部分炎症因子等相关指标的表达,使细胞活力降低,而补肾活血方可以改善高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞的损伤。     

补肾活血中药加克罗米芬治疗多囊卵巢综合征所致不孕的临床观察

目的：观察补肾活血中药加克罗米芬治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)所致不孕的临床疗效。方法：将排卵障碍所致不孕的62例PCOS患者随机分为治疗组(32例)与对照组(30例),治疗组采用补肾活血中药加克罗米芬治疗,对照组采用剂量与治疗组相同的克罗米芬治疗。结果：治疗组治疗后内分泌激素水平较治疗前明显好转,雄激素、黄体生成素水平较治疗前明显下降。雌激素水平较治疗前明显升高(P<0．01)。治疗组的周期排卵率达87．0％,总妊娠率为65．6％,未发生卵泡过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)及黄体化卵泡未破裂综合征(1uteinized unruptured follicle syndrome,LUFS)。而对照组周期排卵率为66．0％,总妊娠率36．6％．,有4例并发LUFS。两组疗效比较差异有显著性(P<0．05)。结论：补肾活血中药加克罗米芬治疗PCOS所致的不孕疗效明显高于单纯的克罗米芬治疗。     

活血药、益气活血药对不同阶段Lewis肺癌转移影响的实验研究

目的揭示活血药、益气活血药在Lewis肺癌转移过程中差异的分子机制,为中药逆转免疫逃逸提供实验依据。方法观察各组小鼠肺转移抑制率;流式细胞术检测各组小鼠脾CD4^＋;T淋巴细胞Thl7/Treg细胞百分比动态变化;ELISA法检测各组小鼠CD;T淋巴细胞培养上清中白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-23（IL-23）、γ干扰素（IFN-γ）动态水平;RT—PCR检测各组小鼠CD4＋T淋巴细胞Foxp3、RORγtmRNA动态表达水平。结果从各组药物抑制肺转移率看出,益气活血药苏木加黄芪优于单纯活血药苏木（P〈0．05）,与环磷酰胺组相似（P〉0．05）;除苏木黄芪组外,各荷瘤组小鼠脾Thl7与Treg细胞随时间迁移呈现出上升趋势;Thl7与Treg细胞的效应因子IL-17、IL-23、IFN-γ以及Thl7与Treg细胞关键转录分子RORTt、Foxp3呈现出与Thl7和Treg细胞相应的动态改变。结论益气活血药苏木加黄芪组在抑制肿瘤免疫耐受的形成和肿瘤形成过程中的免疫炎症反应优于单纯活血药苏木组和环磷酰胺组;各组药物对肿瘤转移机制均有一定的抑制作用,但益气活血药优于单纯活血药和化疗药物。     

养阴益气活血方药不同配伍对VSMC的影响

目的：探讨养阴益气活血方药不同配伍对高胰岛素、高脂血清诱导血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的拈抗作用。方法：通过MTT比色测定及形态学方法观察养阴益气活血方药各组药物血清的作用效果。结果：人参与麦冬组药物血清有较明显的抗VSMC增殖作用，形态学观察显示各组药物血清可不同程度缓解高胰岛素、高血脂造成的形态学改变。结论：养阴益气活血方药物各药物血清治疗瘀血的机制与血管平滑肌细胞有密切联系。     

养阴益气活血方药不同配伍对VSMC的影响

目的:探讨养阴益气活血方药不同配伍对高胰岛素、高脂血清诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的拮抗作用。方法:通过MTT比色测定及形态学方法观察养阴益气活血方药各组药物血清的作用效果。结果:人参与麦冬组药物血清有较明显的抗VSMC增殖作用,形态学观察显示各组药物血清可不同程度缓解高胰岛素、高血脂造成的形态学改变。结论:养阴益气活血方药物各药物血清治疗瘀血的机制与血管平滑肌细胞有密切联系。     

银杏叶提取物对大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的研究急性高眼压缺血再灌注模型中银杏叶提取物对视网膜神经节细胞的保护作用。方法实验用SD大鼠30只分为3组,分别为阴性对照组、阳性对照组、用药组,每组各10只。大鼠右眼为损伤眼,分别行前房穿刺灌注形成110mmHg的眼压维持60min,左眼未做损伤,作为正常对照。阴性对照组于损伤后2h及此后每日腹腔分别灌胃生理盐水5mL/kg。按这种给药方法,阳性对照组给予1%灯盏细辛5mL/kg,用药组给予1%银杏叶提取物5mL/kg,实验持续时间28d。动物安死术前5d用3%荧光金双上丘注射,逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜定向铺片,距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片。利用彩色颗粒分析软件做节细胞计数,计算各组节细胞的存活率并做统计分析。结果阴性对照组、阳性对照组、用药组节细胞存活率分别为61.46%、72.73%、76.20%。用药组与阴性对照组的节细胞存活率存在显著性差异(P<0.05),用药组与阳性对照组无显著性差异(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论在急性高眼压缺血再灌注模型中,银杏叶提取物能有效地保护视网膜节细胞,与阳性对照药灯盏细辛比较,保护节细胞的效果两者接近。     

养阴活血法预防小鼠肝纤维化的实验研究

目的:观察养阴活血中药复方制剂肝结散对实验性肝纤维化的治疗效果。方法:用 CCl_4诱导小鼠肝纤维化,同时分别以肝结散、秋水仙碱进行治疗,实验第14用处死动物。作肝组织学检查。测定肝功能、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、血清和肝组织匀浆的过氧化脂质(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)。结果:与对照组比较,给药组小鼠外周血中丙氨酸氨基转换酶(ALT)明显降低,白蛋白明显升高,肝功能明显改善,且肝组织中胶原含量及肝纤维化程度明显减轻;与秋水仙碱组比较,肝结散组小鼠血清及肝组织匀浆中 SOD 和 GSH 含量增加,而LPO 含量降低。结论:肝结散和秋水仙碱都能显著减轻肝脾肿胀,保护肝细胞,降低肝脏纤维化程度,肝结散并能促进自由基代谢。提示养阴活血法可能是一种抗肝纤维化的有效方法。     

补肾活血法防治慢性肾功能衰竭的实验研究

[目的]探讨依据补肾活血法组方肾衰排毒颗粒对慢性肾功能衰竭的治疗作用。[方法]采用5／6肾切除法制备大鼠CRF模型,与假手术组及对照组比较,观察肾衰排毒颗粒对实验性CRF大鼠的死亡率、肾功能及肾组织病理损伤程度的影响。[结果]肾衰排毒颗粒降低CRF大鼠死亡率,改善肾功能,增加白蛋白及Hb含量,减轻肾组织的病理损伤,较对照组有显著性差异(P＜0.01)。[结论]肾衰排毒颗粒具有改善CRF大鼠肾功能,减轻其肾组织病理损伤程度,延缓CRF病程进展的作用。     

益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠模型降糖降脂作用研究

目的 观察益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠模型降糖、降脂作用研究.方法 将50只SPF级雄性SD大鼠随机取10只作为空白对照组,其余大鼠随机分为模型4周组、模型12周组、给药4周组、给药12周组,每组10只大鼠.模型对照组、空白组灌胃给予蒸馏水,益气养阴活血方组每天上午灌服用蒸馏水稀释的益气养阴活血方,给予18 g生药/...     

益气活血药配合常规西药治疗冠心病心绞痛临床研究

目的观察益气活血药配合常规西药治疗冠心病心绞痛的疗效。方法将83例冠心病心绞痛患者随机分为治疗组（53例）和对照组（30例）,治疗组采用常规西药＋益气活血中药治疗,对照组仅用常规西药治疗。观察2组患者治疗前后临床症状、心电图及血清白细胞介素-6（IL-6）的变化情况。结果治疗组心绞痛缓解、心电图改善与IL-6降低情况明显优于对照组（户〈0．05）,尤其对心悸、气短、胸闷改善作用显著（P〈0．05或P〈0．01）。结论益气活血药配合常规西药可有效治疗冠心病心绞痛。