系统性红斑狼疮凋亡相关基因Fas sFas

Objective　To investigate the mRNA expression of Fas and sFas genes in SLE patients and their roles in the pathogenesis of SLE.Method　Fifty SLE patients,24 RA patients and 24 normal controls were chosen and the expression of Fas and sFas genes of peripheral white cells were detected by fluorescence-based RT-PCR semi-quantitative method.Results　① mRNA expression of Fas and sFas in SLE patients were significantly higher than that in normal controls (3.2±1.8 vs 2.1±0.6,P＜0.001 and 1.2±0.7 vs 0.58±0.27,P＜0.000 1,respectively),and relevant to activity of SLE,r＝0.521 8,P＝0.007 and r＝0.418 8,P＝0.037).② In RA patients,sFas was higher than that in normal controls (0.9±0.5 vs 0.58±0.27,P＜0.01),but expression of Fas had no statistical difference.Conclusion　The expression of Fas and sFas genes are abnormal in SLE and apoptosis may play certain role in the pathogenesis of SLE.     

老年系统性红斑狼疮患者血清sFas测定的意义

研究表明,红斑狼疮的发生、发展及其免疫学改变与自身反应性T淋巴细胞或B淋巴细胞的细胞凋亡缺陷有关,狼疮患者血清中可溶性Fas(sFas)水平明显升高。因此,我们测定了23例老年系统性红斑狼疮(SLE)患者血清sFas水平,并对其意义作了初步讨论。     

白细胞介素-18对系统性红斑狼疮患者淋巴细胞凋亡及Fas bcl-2基因表达的影响

系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)是一种典型的自身免疫病 ,主要表观为自身Ｔ、Ｂ淋巴细胞的激活 ,多种自身反应性抗体的产生等 ,研究已表明 ,ＳＬＥ病人外周血多种细胞因子的表达异常 ,细胞凋亡异常[1,2 ] ,但细胞因子与凋亡之间的相互关系目前研究较少 ,我们选择白细胞介素 18(ＩＬ 18)对ＳＬＥ病人外周血淋巴细胞的凋亡影响进行了研究。1　材料与方法1 1　对象 :ＳＬＥ患者 5 0例 ,男性 4例 ,女性 46例 ,均符合美国风湿病学会 (ＡＲＡ) 1982年修订的ＳＬＥ诊断标准 ,年龄 18～ 6 6岁 ,平均 31 6岁 ,活动期判断标准参照ＳＬＥＤＡＩ法[3 ] ,以≥ …     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞环氧合酶同工酶mRNA的表达

目的　探讨原生型环氧合酶 (COX 1)和诱生型环氧合酶 (COX 2 )在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞 (PBMC)中的表达水平及其在SLE发病机制中的作用及其意义。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 34例活动期SLE患者和 30名正常人PBMC中COX 1和COX 2mRNA的表达水平。结果　活动期SLE患者COX 1和COX 2的阳性表达率与正常对照组相比差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;活动期SLE患者PBMC中COX 2mRNA的平均表达水平 (0 6 6±0 2 7)明显高于正常对照组 (0 43± 0 16 ) ,差异有非常显著性 (P <0 0 1) ;活动期SLE组COX 1的平均表达水平与正常对照组处于同一表达水平 ,差异性无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　活动期SLE患者外周血单个核细胞中COX 2mRNA的表达增加 ,通过诱导前列腺素 (PGs)的产生参与SLE的发病过程。为特异性COX 2抑制剂应用于SLE的治疗提供了理论依据。     

系统性红斑狼疮患者外周血细胞Fas的表达及临床意义

系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是我国常见的、以淋巴细胞功能异常为特点的自身免疫性疾病。其病因及发病机制尚不清楚。有学者认为处于分化和成熟阶段的淋巴细胞的异常凋亡,使自身反应性淋巴细胞未被清除,导致了ＳＬＥ的发生。已研究发现〔１〕,ＳＬＥ患者的外周血淋巴细胞表面Ｆａｓ的表达增高,但尚未见到他们与临床相关性的报道。为此,我们应用ＦＩＴＣ标记的鼠抗人Ｆａｓ（ＣＤ９５）ＩｇＧ１单抗,在流式细胞仪下观察ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞Ｆａｓ的表达,以探讨Ｆａｓ在ＳＬＥ发病中的作用及其临床意义。１　资料与方法１１　检测…     

Fas,Fas 配体与系统性红斑狼疮

Ｆａｓ、Ｆａｓ配体与系统性红斑狼疮杨正国＊综述梅长林审校关键词细胞凋亡系统性红斑狼疮抗原ＣＤ９５中图法分类号Ｒ３２９．２８系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种典型的自身免疫性疾病，其特征是患者血中出现大量的自身抗体，并表现为多系统损害，其发病机理与多基因、...     

细胞因子受体基因多态性与系统性红斑狼疮

细胞与细胞之间需要相互传递信号才能协调发挥作用。动物细胞依靠信号分子来影响周围的其他细胞．细胞因子就充当了信号分子的角色，它通过两种受体发挥作用。     

系统性红斑狼疮患儿外周血单个核细胞IL-10、Foxp3和Fas mRNA的表达变化

目的 观察系统性红斑狼疮（SLE）患儿外周血单个核细胞IL-10、叉状头转录因子3（Foxp3）、Fas mRNA的表达.方法 采用实时定量RT-PCR测定30例SLE患儿（SLE组）及20例健康儿童（健康对照组）外周血单个核细胞IL-10、Foxp3、Fas mRNA表达.结果 SLE组、健康对照组IL-10 mRNA表达分别为0.78±0.12、0.12±0.03,P＜0.01;Foxp3 mRNA表达分别为1.38±0.16、0.68 ±0.13,P＜0.01;Fas mRNA表达分别为0.83 ±0.11、0.14±0.05,P＜0.01.结论 SLE患儿IL-10、Foxp3和Fas基因mRNA呈高表达.     

慢性乙型肝炎患者肝组织Fas的表达与血清sFas水平的关系

目的:探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者肝组织中Fas的表达与血清可溶性Fas(sFas)水平的关系。方法:应用免疫组化法和ELISA法检测60例慢性乙型肝炎患者肝组织Fas的表达和血清sFas的水平。结果:重度慢乙肝患者血清中sFas水平最高,中度次之,而轻度最低,3组均明显高于健康献血员;随着肝组织炎症程度的加重,肝组织Fas抗原的表达明显增强,血清中sFas水平也明显升高。结论:Fas可分泌或脱落至细胞外,成为sFas,抑制肝细胞Fas表达将有助于减轻肝细胞损伤的程度。     

凋亡相关基因Fas、Fas配体及bax在慢性病毒肝炎组织中的表达及意义

为探讨凋亡相关基因Ｆａｓ、Ｆａｓ配体及ｂａｘ在慢性病毒性肝炎中表达的意义。采用免疫组化技术研究４８例慢性肝炎（乙型肝炎３３例,丙型肝炎１５例）组织中Ｆａｓ、ＦａｓＬ及ｂａｘ的表达。结果：慢性乙型肝炎和丙型肝炎组织中Ｆａｓ、ＦａｓＬ及ｂａｘ表达均较正常肝增加,以细胞坏死和炎细胞浸润区域增加明显。结论：凋亡相关基因Ｆａｓ、Ｆａｓ及ｂａｘ可能参与了肝炎病毒致肝细胞的损伤过程。     

应用TaqMan实时荧光定量PCR技术研究系统性红斑狼疮疾病相关基因的表达

目的验证新发现的4个系统性红斑狼疮(SLE)相关基因与SLE发病的相关性,为SLE发病的分子机制研究提供资料。方法前期基因芯片工作中筛选得到4个在55例SLE患者及正常对照之间表达差异显著的基因,染色体定位发现其位于SLE连锁的染色体区段。应用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测该4种基因在SLE患者和正常对照外周血单核细胞及T、B淋巴细胞的表达。结果SLE患者外周血单核细胞中,TRIM基因ΔCt值显著低于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平为正常对照的0．61倍；IL-4R基因与EGR1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平分别为正常对照的2．62、2．03倍；KLRC1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的5．33倍。在SLE患者外周血T细胞,TRIM基因ΔCt值显著低于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的0．56倍；IL-4R基因与EGR1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平分别为正常对照的2．55、1．74倍；KLRC1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的5．19倍。在SLE患者外周血B淋巴细胞,由于B细胞淋巴所占淋巴细胞比率过低,基因检测数据不稳定,故未作统计学分析。4种狼疮疾病相关基因与狼疮活动指数SLEDAI无相关性。结论SLE患者TRIM,IL-4R,KLRC1和EGR1基因与正常人相比有明显差异,但与疾病活动程度无关。     

系统性红斑狼疮患者干扰素调节因子IRF1 IRF4 IRF8基因表达的研究

目的研究干扰素调节因子(IRF)家族中IRF1、IRF4、IRF8基因的实时定量表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的关联性。方法收集45例SLE患者与37名正常对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法在ABI PRISM 7900 HT实时定量PCR仪上检测患者组和对照组的IRF1、IRF4、IRF8的mRNA定量表达水平(以-ΔΔCt值表示)的差异。结果正常人外周血IRF1 mRNA、IRF4 mRNA、IRF8 mRNA的表达分别是-3．90±0．19、-8．04±0．25和3．60±0．15。与正常人相比,SLE患者组IRF1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0．05),而IRF4 mRNA的表达明显增高(-8．82±0．18,P=0．011)、IRF8 mRNA表达低于正常人(3．09±0．13,P=0．012)。结论SLE患者外周血存在IRF表达异常。     

系统性红斑狼疮患者干扰素诱导基因的表达及其与疾病活动性的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中5个干扰素(IFN)诱导基因(IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15)的表达及其与SLE疾病活动度的相关性.方法 运用SYBRgreen dye I实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测76例SLE患者与54名健康对照人的IFIT1、IFIT4、OASL、OASL及ISG15 mRNA表达水平(以-AACt值表示),并且与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、C4、抗核抗体(ANA)及抗dsDNA抗体等指标比较,分析IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平以及上述常规检测指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分之间的相关性.结果 ①SLE组与正常对照组相比,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达显著增高(P＜0.01);SLE活动组与SLE缓解组比较,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达增高(P＜0.05);SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平之间呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).②SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平均与SLEDAI积分呈显著正相关(r＞0.5,P＜0.05).③ESR、CRP、补体C3、C4、ANA与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分均无相关性,抗dsDNA抗体与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).结论 SLE患者IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15的表达水平在SLE患者中显著增高,并且与SLEDAI积分呈显著正相关,对SLE患者病情活动度和病情严重度的判断均有较大价值,抑制这5个基因的表达可能为SLE的治疗提供新的靶点.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

目的　探讨CD28在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其意义。方法　应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了34例活动期SLE患者和30名正常人PBMC中CD28mRNA的表达水平。结果　活动期SLE患者CD28的阳性表达率为20.6%,明显低于正常人对照组(70.0%),差异非常显著(P＜0.001);活动期SLE组CD28的平均表达水平(0.19±0.21)亦明显低于正常对照组(0.43±0.11),差异显著(P＜0.05)。结论　CD28的异常表达可能在SLE发病机制中起作用,CD28mRNA的低水平表达可能与外周血CD28＋T细胞凋亡增加或迁移到炎症部位有关。     

干扰素诱导基因与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 探讨实时定量测定干扰素诱导基因[抗黏病毒1(MX1)基因,2′5′-寡腺苷酸合成酶1(OAS1),干扰素诱导蛋白44(IFI44)基因]表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)临床表现及病情活动度的相关性.方法 收集100例SLE患者,40例非SLE其他自身免疫性疾病患者,40名健康对照的临床资料,取外周血抽提总RNA并反转录成cDNA,运用SYBR green dye Ⅰ实时定量聚合酶链反应(QT-PCR)在ABI PRISM 7000基因测序仪上检测患者和对照组的MXI、OAS1和IFI44定量表达水平(以△CT值表示)的差异,并与各临床指标及病情活动度进行相关性分析.采用方差分析和Spearman相关分析进行统计学处理.结果 ①SLE患者总体的MX1、OAS1、IFI44 mRNA △CT值(3.4±1.8,4.2±1.5,8.8±2.2)明显高于非SLE患者组(2.4±0.4,3.4±0.7,5.4±2.1)和健康对照组(2.3±1.2,2.6±0.7,5.2±2.0);②SLE患者组的OAS1、IFI44 mRNA △CT值在不同活动度的SLE组内[非活动组(3.8±1.4,3.2±1.8);轻度活动组(4.8±1.5,8.0±2.2);重度活动组(6.0±1.4,12.1±2.4)]差异具有统计学意义;③SLE患者组的OAS1、IFI44 mRNA△CT值与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分之间有相关性(r=0.338,0.380);④在有关节炎的SLE患者中,其MX1、OAS1、IFI44表达水平升高,与无关节炎患者比较差异具有统计学意义;⑤在狼疮肾炎组内,IFI44mRNA △CT值表达(2.2±1.1)与非狼疮肾炎组(3.2±2.1)比较差异有统计学意义;⑥SLE组内3个基因表达存在高相关性且具有统计学意义(P均＜0.05).结论 干扰素诱导基因MX1、OAS1、IFI44在SLE患者中均有表达上调现象,OAS1、IFI44 mRNA实时定量表达水平对SLE患者的病情活动度判断有意义,且三者在SLE的发生发展中亦存在密切联系.     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞双链RNA依赖蛋白激酶基因表达

 目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血白细胞双链RNA依赖蛋白激酶（PKR）基因表达水平,探讨其与SLE临床及病情活动的相关性。方法 分离100例SLE患者、40例非SLE患者、40例健康人外周血白细胞,抽提总RNA并逆转录成cDNA,实时定量PCR检测所有受试者PKR基因表达水平,并进行相关性分析。以2^-ΔCt代表PKR mRNA的起始拷贝量。结果 （1）SLE患者PKR mRNA起始拷贝量（14.69±7.62）高于非SLE患者（5.09±4.73;P=0.012）和健康人（4.79±3.49;P=0.005）,差异有统计学意义。（2）SLE疾病活动指数（SLEDAI）≥15分的SLE患者PKR mRNA起始拷贝量为22.57±2.61,明显高于SLEDAI≤4分（8.85±2.17;P=0.000）和SLEDAI 5～14分的SLE患者（12.94±2.41;P=0.000）。（3）有狼疮肾炎的SLE患者PKR mRNA起始拷贝量（16.85±7.32）高于无狼疮肾炎的SLE患者（8.35±2.04;P=0.034）。（4）SLE患者PKR mRNA起始拷贝量与SLEDAI、外周血白细胞计数、24 h尿蛋白、血清HDL-C呈正相关（r=0.32, P=0.000;r=0.46,P=0.000;r=0.21,P=0.000;r=0.21,P=0.022）,与Hb、抗核糖核蛋白（RNP）抗体水平呈负相关（r=-0.22,P=0.035;r_s=-0.21,P=0.025）。结论 SLE患者外周血白细胞PKR基因表达上调,且在重度SLE患者中更明显,提示PKR基因可能与狼疮的发病相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血TB淋巴细胞Fas FasL表达及与凋亡的关系研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T、B淋巴细胞Fas、FasL表达及与凋亡的关系.方法采用流式细胞术(FCM)检测了30例SLE活动期患者、30例SLE非活动期患者和30名正常人外周血T、B淋巴细胞的凋亡率及Fas、FasL表达率.结果T、B淋巴细胞的Fas表达率依次为:活动期组＞非活动期组＞正常对照组(P＜0.01);FasL的表达率除B淋巴细胞在SLE活动期显著高于正常对照组外(P＜0.01),其余各组间差异无统计学意义;细胞的凋亡率在活动期显著高于非活动期(P＜0.01),而非活动期与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05):SLE的活动性与T或B细胞的Fas、FasL表达率间无相关关系,而与T或B细胞的凋亡率呈正相关(P＜0.01);无论是T或B细胞,Fas、FasL的表达率与凋亡率间无相关性.结论SLE患者体内外周血淋巴细胞的凋亡受到多种因素影响,但最终仍表现为凋亡率的异常增高,特别是活动期SLE,推测外周血淋巴细胞凋亡率的增高在SLE发病机制中起着重要作用.     

活动期系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡状态的研究

目的 探讨活动期ＳＬＥ患者体内淋巴细胞凋亡的变化。方法 应用流式细胞仪技术测定淋巴细胞凋亡变化,了解Ｔ、Ｂ淋巴细胞的调亡改变及与ＳＬＥ有关实验室指标变化的关系。结果 ①活动期ＳＬＥ患者中血淋巴细胞凋亡百分率低于正常对照组,ＤＮＡ断裂百分率也低于正常（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０１）;②Ｂ淋巴细胞凋亡明显减少（Ｐ〈０．０１）;③淋巴细胞凋亡的变化与ＳＬＥ有关实验室指标的变化具有相关性。结论 细胞凋亡的     

人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)在系统性红斑狼疮(SLE)中的感染状况,探讨HCMV活动性感染与SLE病情及发病的相关性. 方法 选择63例SLE患者,将外周血白细胞接种于人胚成纤维细胞(HF)进行病毒分离,再分别用问接免疫荧光(HF)、聚合酶链反应(PCR)检测HF中HCMV pp65抗原及HCMV UL54 DNA,分析SLE患者的HCMV活动性感染率,以及与SLE病情、临床表现、实验室指标等之间的关系. 结果 ①SLE患者HCMV活动性感染率明显高于健康对照(27%与0%,P＜0.05).②病情活动组SLE患者的HCMV活动性感染率明显高于非活动组(39%与13%,P＜0.05).③HCMV活动性感染组的SLE患者尿蛋白定量(24 h)、红细胞沉降率(ESR)、SLE疾病活动指数(SLEDAI)明显高于非活动性感染组[(1.7±1.3) g/d与(0.8±0.8) g/d,(64±38) mm/1 h与(38±29) mm/1 h,15±6与9±6,P＜0.05].④HCMV活动性感染组SLE患者关节炎的发生率以及抗舣链DNA(dsDNA)抗体、抗核小体抗体(AnuA)、β2糖蛋白1(β2-GPI)阳性率均高于非活动性感染组(35%与13%,47%与17%,53%与22%,47%与13%,P＜0.05).⑤初发SLE患者的HCMV活动性感染率高于非初发患者(35%与22%),但两者差异无统计学意义. 结论 SLE患者的HCMV活动性感染率明显高于健康对照,HCMV活动性感染可能导致SLE病情活动并且与SLE患者蛋白尿、关节炎以及抗dsDNA抗体、AnuA、β2-GP1等自身抗体的产生有关,HCMV活动性感染可能参与SLE发病.     

系统性红斑狼疮初发患者Th细胞异常分化相关分子基因表达研究

目的：研究系统性红斑狼疮（SLE）患者存在Th1/Th2失衡与其调控细胞因子及其受体密切相关的基础，探讨SLE患者在调控Th1/Th2分化的其他环节上也存在有基因表达的异常。方法：采用TaqMan Real Time PCR的方法研究38例初发SLE患者调控Th类细胞分化的细胞转录调控水平（IkB,IRF-1,STAT4,GATA3,IL-4R)，细胞趋化，粘附和迁移有关的基因（CCR1、CCR2、CCR4、CCR5）、与细胞凋亡相关的基因（caspase1)、参与信号传导（CD38）基因的表达，并以28名正常人和50例类风湿关节炎（RA）患者作为对照。结果：（1）与正常人比初发SLE患者调控向Th1分化的白细胞介素（IL）－12／IL－2Rβ／STAT4通路中STAT4的表达水平并示见显著降低，反倒升高（P＜0．01）；IRF－1的水平无明显改变（P＞0．05），调控向Th2分化的IL－4／IL－R／GATA3通路中GATA3的表达降低（P＜0．01）。（2）以Th1占优势的RA患者中，调控向Th2分化的IL－4R表达降低（P＜0．01），但GATA3的表达却升高（P＜0．01），较初发SLE患者STAT4升高（P＜0．01）,IkB,IRF-1的基因表达水平降低（P＜0．01）；GATA3，IL－4R也升高（P＜0．01）。结论：在SLE患者中IL－12、IL－18通过和IL－12R在发挥调控Th1/Th2中的异常可能还通过其他的调控途径或STAT4，GATA3磷酸化及转位存在缺陷引起；RA和SLF患者在调控Th1/Th2分化的信号转导因子表达水平中未出现明显的以Th1或Th2占优势异常的格局；以及疾病的不同阶段，其调控基因的表达有差异；CCR1、CCR2、CCR4、CCR5的升高在RA的发病中起着重要的作用。