伤害性刺激内脏神经对某些内脏器官活动的影响及针刺效应的观察(摘要)

本文观察记录伤害性刺激内脏大神经时内脏器官活动的反应规律,并对针刺作用原理和延髓网状结构的作用做进一步分析。 30只猫在氯醛糖和鸟拉坦作静脉浅麻醉下手术。方波电刺激一侧内脏神经中枢端(强度10伏、波宽1毫秒、频率32赫、持续刺激5——10秒)时,主要表现为类似疼痛时的血压升高、呼吸暂停后加强、小肠活动抑制及瞳孔扩大等交感神经系统活动加强的现象。105例次实验中出现血压升高反应的93例次(占88.6％),上升值为14.03±0.74毫米汞柱(均值±     

体表脉冲电刺激对昆明小鼠心电活动的影响

背景:使用不同强度、频率及时间的电刺激作用于人体,可能产生各种不同的病理生理反应。目的:观察体表脉冲电刺激对小鼠心律及心率的影响。方法:将30只昆明小鼠随机分为3组,每组10只,用BL-420F型生物机能实验系统提供刺激电源,对3组昆明小鼠分别予以不同电压、不同时间、不同频率的体表电刺激,然后观察Ⅱ导联心电图、小鼠得全身反应与局部变化。结果与结论:≤10 V的电刺激对小鼠心率无明显影响,并且未出现心律失常;电压≥15 V时,电刺激可使小鼠心率减慢,停止30 min后心率恢复正常;电压≥35 V时,小鼠出现心率减慢和心律失常,并且停止刺激后心率不能恢复正常;电压75 V后,小鼠出现室颤。电压为10 V时,脉冲电刺激时间和频率变化对小鼠心电活动影响不显著。说明脉冲电刺激对小鼠心电活动的影响主要由所用电压高低不同引起,电压≤10 V时对小鼠心电活动无影响;脉冲电刺激时间与电场频率对小鼠心电活动影响不明显。     

脉冲电刺激对内皮细胞形态和功能的影响

探求脉冲电刺激对内皮细胞的形态、增殖以及蛋白表达的影响.选择在25 mV,频率分别为1、5、10、20、50和100 Hz的电刺激6 h作用于内皮细胞.MTT检测,分析细胞增殖.检测NO和ET-1值,分析内皮细胞蛋白表达.结果发现在10～100 Hz脉冲电刺激作用下,内皮细胞增殖明显.NO的表达在20～100 Hz电刺激作用下明显高于对照组.在1 Hz脉冲电刺激作用下ET-1的分泌量低于对照组,而20～100 Hz时则明显高于对照组.可以看出,脉冲电刺激对内皮细胞的增殖和NO、ET-1表达都产生了影响.尤其是50 Hz脉冲电刺激对于加强内皮细胞功能、维持血管生物学特性有着积极的作用.     

高刺激率测试BAEP对TIA眩晕的观察

目的 :探讨常规脑干听觉诱发电位 (BAEP)检查和高刺激率测试BAEP对短暂脑缺血发作 (TIA)眩晕的诊断价值。方法 :对 5 6例TIA发作所致的眩晕患者 ,进行了口服西比灵前后BAEP检测 ,同时以 5 0例正常人作为对照组 ,分别进行 10～ 90Hz高刺激率 (自 10Hz开始 ,每次增加 10Hz ,至 90Hz结束 )的BAEP检测。结果 :瞬间眩晕发作时 (本实验室把瞬间眩晕时间暂定为 10s以内 ,TIA眩晕时间为 10s以上 ,2 4h以内恢复 )。 10Hz检查时Ⅲ、Ⅴ波潜伏期 (PL)延长 ,发作停止后各波PL恢复正常 ,再行 30Hz、5 0Hz刺激时Ⅲ波PL延长 0 2 1± 0 0 4ms ,Ⅴ波PL延长 0 4 4± 0 0 9ms。TIA患者 10Hz检查时 ,Ⅲ、Ⅴ波PL延长 ,发作停止后各波PL均正常 ,再行 30～ 5 0Hz刺激时Ⅴ波PL延长 0 4 4± 0 0 9ms,Ⅲ波延长 0 2 1± 0 0 4ms。口服西比灵 8h后 ,临床症状已经改善 ,患者头晕减轻或已经消失 ,在 30～ 5 0Hz刺激时 ,Ⅴ波PL仍然延长。 5 0例正常人在作各频段检查时 ,10Hz各频段时各波PL均无改变 ,30Hz、5 0Hz刺激时Ⅲ、Ⅴ波PL延长 ,其中 5 0Hz时 ,波Ⅲ延长 0 2± 0 0 3ms ,波Ⅴ延长 0 4 2± 0 0 9,6 0～ 90HzPL亦延长。结论 :BAEP检测对各种原因引起的缺血是比较敏感的 ,而高刺激率检查比较适合于科研     

IL-10对小鼠肺泡巨噬细胞清道夫受体及CD14表达的影响

本研究旨在观察IL-10对肺泡巨噬细胞（AM），清道夫受体（SR），CD14表达的影响。探讨IL-10在内毒素血症时防止AM由免疫防御向炎症效应转变中的作用。分离培养小鼠AM，以不同剂量（0,0.01,0.1,1,10,100μg/L）IL-10刺激细胞16h或以100μg/LIL-10刺激细胞不同时间（0,2,4,6,8,12,16h)，采用免疫细胞化学及RT-PCR方法观察SR，CD14表达变化。结果显示低至10μg/LIL-10刺激16h或100μg/LIL-10刺激12-24h能显著增强SRmRNA并抑制CD14mRNA表达，SR蛋白表达也显著增强，但CD14蛋白表达无明显变化，IL-10刺激下对SR蛋白表达的增强能降低AM对LPS的反应性，在内毒素血症时防止AM由免疫防御型向炎症效应型转变中发挥重要作用。     

睡眠脑波调制的与常规的重复经颅磁刺激治疗原发性失眠症的脑电图研究

目的：探讨睡眠脑波调制重复经颅磁刺激与常规重复经颅磁刺激在治疗原发性失眠症中的脑电图（EEG）动态特征及其与临床疗效的关系。方法：按完全随机的方法,将126例原发性失眠症患者分为睡眠脑波调制重复经颅磁刺激组（睡磁组）44例、常规重复经颅磁刺激组（常磁组）42例和假磁刺激治疗组（假磁组）40例。每次持续刺激30min,每日1次,疗程10d。分别观察治疗前、治疗10d时和治疗结束后30d时的Krakow睡眠积分（KSS）、EEG及平均α波绝对功率谱的变化。结果：两磁疗组治疗10d时的KSS显著降低（均P〈0．05）,平均α波绝对功率谱显著升高（均P〈0．05）,尤以睡磁组突出,且持续至治疗结束后30d。治疗10d时磁疗患者平均α波绝对功率谱与其KSS呈显著负相关（n=86,r=0．2136,P〈0．05）。结论：睡眠脑波调制重复经颅磁刺激和常规重复经颅磁刺激对原发性失眠症的异常EEG均有显著的良性调节作用,其疗效与提高平均α波功率谱相关,前者优于后者。     

不同电刺激信号对大鼠雪旺细胞增殖的影响

目的研究不同的电刺激信号对大鼠雪旺细胞(RSC96)增殖的影响。方法实验使用RSC96细胞系(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库),经过2次传代培养,以1.25×10~4/孔的密度种植于24孔细胞培养板中,次日电刺激信号分别采用不同的电压(10、100、500、1 000、5 000、10 000 m V/cm)、不同的频率(0.1、1.0、100.0、1 000.0、10 000.0、1 000 000.0 Hz)、不同的脉冲占空比(5%、10%、30%、50%、70%、90%)及不同的波形(正脉冲波、矩形波、三角波、正弦波、杂波、直流波)对细胞进行电刺激,每组设置3个平行样,细胞每天刺激30 min,持续刺激4 d。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖率。结果当电刺激频率为100.0 Hz、脉冲占空比为50%、波形为矩形波时,电压500 m V/cm时对细胞的增殖具有抑制作用。当电刺激频率为100.0 Hz、脉冲占空比为50%、电压为500 m V/cm时,正脉冲波、正弦波、矩形波和三角波都能够促进细胞的增殖。当电刺激波形为矩形波、脉冲占空比为50%、电压为500 m V/cm时,频率100.0~1 000.0 Hz组细胞增殖率最高。当电刺激波形为矩形波、频率为100.0 Hz、电压为500 m V/cm时,不同的脉冲占空比对细胞增殖的影响不明显。结论不同的电刺激信号条件对细胞增殖的影响较大。电压≤500 m V/cm、有规律的脉冲波形、频率为100.0~1 000.0 Hz电刺激信号能够获得较好的RSC96增殖的效果。实验所获得的优化电刺激参数在外周神经修复中具有非常大的应用前景。     

IL-2受体的表达与T细胞内IP_3的变化

本文用不同浓度的IL-2刺激静息T淋巴细胞,其细胞内IP_3无明显改变,但ConA刺激则使IP_3增加45%。在IL-2依赖性T细胞,IL-2R表达率达83%,IL-2刺激时IP_3的变化依浓度不同而异,10u-50U/m     

白三烯D4和白介素13对人肺成纤维细胞白三烯受体1 mRNA表达及嗜酸粒细胞趋化因子产生的影响

探讨白三烯D4(LTD4)和白介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞白三烯受体(CysLT1R)表达和eotaxin产生的影响。采用培养人肺成纤维细胞株(MRC-5),以不同浓度的IL-13进行刺激,用实时定量RT-PCR法测定CysLT1R mRNA表达的变化。再以不同浓度的LTD4和IL-13刺激,用ELISA法测定上清液中eotaxin的浓度,并观察Montelukast对eotaxin的产生是否有抑制作用。结果显示,培养的人肺成纤维细胞上存在着CysLT1R mRNA的低表达,以10 ng/ml IL-13刺激时,随着刺激时间延长,CysLT1R mRNA表达逐渐增高,48 h达高峰,较未刺激时表达增加(18.56±7.41)倍(P<0.01)。当以10 ng/ml和100 ng/ml的IL-13浓度刺激48 h时,较未刺激细胞CysLT1R mRNA表达分别增加(17.33±3.81)倍和(20.11±5.05)倍(P<0.01)。IL-13也能促进成纤维细胞产生eotaxin,以10 ng/ml和100 ng/ml的IL-13刺激成纤维细胞时,eotaxin浓度分别为(155.43±15.95)pg/ml和(221.31±17.23)pg/ml,较未刺激细胞(31.67±3.49)pg/ml明显增加(P<0.01)。单独给予LTD4刺激时,eotaxin浓度则无明显变化。但是以1×10-7mol/L和1×10-6mol/L浓度的LTD4分别联合10 ng/ml的IL-13共同刺激时,产生eotaxin的浓度分别为(204.4±25.4)pg/m和(255.1±38.3)pg/ml;较仅给予10 ng/ml的IL-13刺激时(155.4±16.0)pg/ml明显增加(P<0.01)。在LTD4+IL-13刺激组中,加入Mointelukast后eotaxin浓度为(148.3±15.7)pg/ml,较不加Montelukast(204.4±25.4)pg/ml明显降低(P<0.01)。人肺纤维细胞存在着CysLT1R mRNA的低表达,IL-13能够上调其表达,呈现时间与浓度依赖性。IL-13和LTD4对人肺成纤维细胞分泌的eoitaxin具有协同刺激作用,这可能与IL-13上调成纤维细胞CysLT1R mRNA表达有关,而Montelukast对这种刺激具有拮抗作用。     

外周神经的逆向阻断技术——频率相关

本文报导作者使用10～100Hz的重复频率,对作者先前提出的引起单向传导神经动作电位的刺激技术进行了测定。从刺激点开始,单相刺激情况下,单向传导阻断可高至50Hz,而双相刺激情况下,单向传导阻断的频率则为30Hz。在高频时,使用长刺激脉冲,单向传导阻断显著恶化。本文叙述了使用此技术时痉挛性运动神经放电的逆向电流阻断,并就其临床意义进行了讨论。引言前文我们介绍了引起外周神经单向传导动作电位的电刺激技术。发展此技术是为了以逆向电流阻断运动神经。本文所述的     

支配肺血管的脊髓交感神经中枢定位

在大鼠毁髓模型上,对由脊髓C_7～T_(10)节段发出的交感节前纤维逐节进行电刺激时,发现肺循环阻力(PVR)均有不同程度的升高,但在刺激脊髓C_7～T_4节段时PVR升高最为显著(对照值的28%),明显高于其余各节段电刺激后PVR增加的水平。刺激的脊髓节段愈高,△PVR/△SVR比值也愈大。体循环阻力(SVR)的升高则以低位脊髓节段的电刺激时更明显。提示在大鼠脊髓C_7～T_4节段存在支配肺血管运动的交感神经中枢。     

氧化低密度脂蛋白诱导泡沫细胞形成过程中细胞因子水平的变化

目的:研究泡沫细胞形成过程中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-12p40和IL-18水平的变化。方法:将人THP-1细胞来源的巨噬细胞以无血清培养基培养24h同步化后,以氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激,油红O染色和酶法检测泡沫细胞形成的情况,用ELISA法检测泡沫细胞形成过程中培养上清中TNF-α和IL-1β的水平。用实时PCR检测IL-1β、IL-10、IL-12p40和IL-18 mRNA的表达。结果:以无血清培养基培养24h后,流式细胞术(FCM)检测显示G0～G1期的细胞占81.07%。巨噬细胞受oxLDL刺激后48h,巨噬细胞内有脂质沉积,胆固醇酯的含量大于总胆固醇含量的50%。培养上清中TNF-α的水平在50mg/L oxLDL刺激12h时最高,刺激48h时最低;而IL-1β在刺激后的各时间点基本维持在较高水平。加入50mg/L oxLDL刺激后2h时,巨噬细胞中IL-1β、IL-10和IL-12p40 mRNA的表达上升(P0.01),与oxLDL刺激2h相比,刺激50h时IL-1β和IL-18 mRNA的表达上升(P0.01),IL-10 mRNA的表达显著上升(P0.01),IL-12 mRNA的表达显著下降(P0.01)。结论:巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞过程中,细胞因子呈现急性炎症到慢性炎症的变化过程。     

电刺激脊髓损伤模型兔肛周皮肤调控神经源性膀胱内压

背景：以往研究表明通过不同频率电刺激阴部神经及其分支会抑制膀胱逼尿肌的过度活动,从而治疗神经源性膀胱,基于此,能否通过电刺激阴部神经分支来抑制逼尿肌过度活动呢？ 目的：探讨电刺激脊髓损伤兔肛周皮肤调控神经源性膀胱内压可行性。 方法：选择成年雌性兔10只,在T9-T10水平横断脊髓,饲养4周后开始进行实验,电刺激采用一对钩状电极刺激肛门周围的皮肤,在膀胱内插入双腔球囊导管注入生理盐水,测量膀胱内压力。 结果与结论：当膀胱灌注量高于排尿容积阈值时,以低于10 Hz的频率电刺激肛周,会显著抑制膀胱逼尿肌过度活动;当膀胱灌注量低于排尿容积阈值时,刺激频率在20-50 Hz时,会引起膀胱收缩。最佳抑制刺激    (6 Hz)能显著增加膀胱容积(30±10)%,最佳的兴奋刺激(25 Hz)能引起大幅度(超过25 cm H2O即24.5 kPa)、长时间(20 s)的膀胱收缩。结果表明电刺激脊髓损伤兔肛周皮肤可以有效调控神经源性膀胱压力。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

Ghrelin促进大鼠胰岛素合成及高葡萄糖诱导的胰岛素分泌

Ghrelin是由胃黏膜分泌的小分子脑肠肽。本研究探讨了Ghrelin对于大鼠胰岛细胞合成与分泌胰岛素的影响。将分离培养的大鼠胰岛分为Ghrelin处理组和对照组 :(1)在高浓度葡萄糖 (16 7mmol L)刺激时加入不同浓度Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 8mol L孵育 6 0min ,测定胰岛素分泌量。 (2 )在培养液中加入不同浓度Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 8mol L预处理 2 4h后 ,用RT PCR方法检测胰岛内前胰岛素原mRNA表达 ,并测定不同浓度葡萄糖 (5 6mmol L ,16 7mmol L)刺激时胰岛素分泌量。离体大鼠胰岛 ,在高糖刺激时加入Ghrelin 10 - 1 1 ～ 10 - 1 0 mol L共同培养 6 0min ,胰岛素分泌量增加高于对照组 (P <0 0 5 )。Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 1 0 mol L预处理 2 4h后 ,高糖刺激时胰岛素分泌量增加高于对照组 (P <0 0 5 ) ,同时Ghrelin 10 - 1 0 mol L促进胰岛内前胰岛素原mRNA表达高于对照组 (P <0 0 5 )。一定浓度的Ghrelin促进胰岛在高葡萄糖诱导下的胰岛素分泌 ,经Ghrelin预处理 2 4h后该作用更为显著。Ghrelin增加大鼠胰岛内前胰岛素原mRNA的表达 ,促进胰岛素合成。     

不同体外刺激对小鼠腹腔产生IL-10的B细胞的影响

目的:探索不同体外刺激对小鼠腹膜腔B细胞产生IL-10的影响.方法:在不同刺激剂作用下,体外培养小鼠腹腔细胞5或48小时,流式细胞仪分析CD19+IL-10+ B细胞比例.结果:PIM刺激5小时后,小鼠腹腔CD19+IL-10+ B细胞比例明显升高至14.69%(P<0.01),在PIM刺激的基础上加入anti-IgM F(ab′)2或anti-CD40均不能进一步提高腹腔B细胞IL-10的表达(P>0.05),而加入IPS后,CD19+IL-10+ B细胞比例升高至平均26.53%(P< 0.01).LPS、anti-CD40刺激48小时可明显升高CD19+IL-10+ B细胞比例,但能够产生更强BCR信号的coated anti-IgM刺激抑制小鼠腹腔B细胞IL-10的表达.结论:体外刺激5小时,LPS+PIM是腹腔产生IL-10的B细胞活化的最佳刺激,刺激48小时,LPS和anti-CD40可进一步促进腹腔B细胞IL-10的表达,这一作用可能是通过诱导腹腔B10前体细胞成熟实现的.而anti-IgM刺激对腹腔B细胞产生IL-10的影响依赖于刺激时间和信号强度.     

小鼠CD4+T细胞活化后IL-10受体I表达的研究

目的:检测抗小鼠CD4+T淋巴细胞活化后表面白细胞介素10受体I(IL-10R1)表达变化,为进一步研究白细胞介素10(IL-10)相关免疫疾病的发病机制及进展提供有力支持.方法:取C57BL/6小鼠脾细胞,溶血后采用尼龙毛去除B淋巴细胞后,流式细胞仪无菌分选CD4+T淋巴细胞,利用anti-CD3和anti-CD28多克隆抗体刺激分选后细胞,分别在第0、12、24、48和72小时流式细胞术检测IL-10R1表达情况.结果:0小时时小鼠CD4+T淋巴细胞不表达IL-10R1,随着刺激时间的延长IL-10R1表达增加,24小时时达到最高,随后表达水平开始下降,72小时时表达情况与0小时基本相同.结论:CD4+T淋巴细胞活化后IL-10R1表达短暂,以24小时时表达最高.     

小鼠CD4~+T细胞活化后IL-10受体Ⅰ表达的研究

目的:检测抗小鼠CD4+T淋巴细胞活化后表面白细胞介素10受体I(IL-10R1)表达变化,为进一步研究白细胞介素10(IL-10)相关免疫疾病的发病机制及进展提供有力支持。方法:取C57BL/6小鼠脾细胞,溶血后采用尼龙毛去除B淋巴细胞后,流式细胞仪无菌分选CD4+T淋巴细胞,利用anti-CD3和anti-CD28多克隆抗体刺激分选后细胞,分别在第0、12、24、48和72小时流式细胞术检测IL-10R1表达情况。结果:0小时时小鼠CD4+T淋巴细胞不表达IL-10R1,随着刺激时间的延长IL-10R1表达增加,24小时时达到最高,随后表达水平开始下降,72小时时表达情况与0小时基本相同。结论:CD4+T淋巴细胞活化后IL-10R1表达短暂,以24小时时表达最高。     

基于高频双向电流的神经选择性兴奋

安全有效的神经选择性兴奋方法具有重要的科研和临床应用价值。提出使用单相位内小电量高频双向电流进行神经选择性兴奋,并在基于Frankenhaeuser-Huxley(F-H)方程的有髓神经单电缆神经纤维模型上进行仿真实验。小电量电刺激信号由具有一定频率的高频电流和具有一定延迟时间(d)的测试脉冲组成。通过改变测试脉冲出现的时间延迟(d)和高频电流频率,探讨选择性兴奋5～16μm范围内某一直径附近神经的可能性。结果显示,高频双向电流刺激停止后,较粗神经的兴奋阈值升高幅度较大。当延迟时间d为0.83、0.84、0.85、0.86、0.87、0.88和0.90 ms时,电刺激可以分别实现对5、7、8、9、10、11和15μm附近神经的选择性兴奋。当高频电流频率为5、6、7、8、9和10 kHz时,电刺激可以分别实现对7、8、10、11、14和16μm附近神经的选择性兴奋。相对于其他神经选择性兴奋方法,本研究使用的电刺激波形具有电量小的特点,对于提高神经电刺激的安全性、延长电刺激时间具有重要的意义。     

刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的生物学特性分析

目的 :分析可刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原(Mtb Ag)的某些生物学特性。方法 :以结核杆菌分泌蛋白与经透析或链霉蛋白酶处理的Mtb Ag体外分别刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)增殖 ,培养 10d时 ,采用流式细胞仪分析细胞的表型。结果 :透析后的Mtb Ag刺激γδT细胞增殖的活性未见明显降低 ;而经链霉蛋白酶处理的Mtb Ag促进γδT细胞增殖的活性则显著下降。另外 ,与结核杆菌分泌蛋白相比较 ,Mtb Ag刺激γδT细胞增殖的活性显著增强。 结论 :Mtb Ag中可刺激人γδT细胞增殖的成分是一种相对分子质量 (Mr)大于 10 0 0 0、非分泌性、对蛋白水解酶敏感的多肽抗原     

电刺激与磁刺激运动诱发电位的比较研究

在２２名正常成人志愿者的上下肢比较电与磁两种经皮运动皮层、脊髓刺激法所引出之运动诱发电位（ＭＥＰ）的差异。结果表明，电刺激诱发成功率为１００％，磁刺激在下肢肌诱发成功率为０％～１４．３％（皮层刺激）和０％～４２．９％（脊髓刺激）；电刺激ＭＥＰ波幅比磁刺激高２．４７～４１倍（平均１１．３倍）；电刺激ＭＥＰ潜时比磁刺激平均短２．７８ｍｓ（皮层刺激）和１．３４ｍｓ（脊髓刺激）。作者认为，易引出高大而可靠的ＭＥＰ的电刺激方法值得临床推广应用，而磁刺激法则应加强基础和方法学研究。