胶质母细胞瘤8号、22号染色体等位基因杂合性丢失的研究

目的：寻找胶质母细胞瘤（GBM）8号，22号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失（LOH）区域。为发展和定位肿瘤抑制基因（TSG）提供线索和依据。方法：应用聚合酶链反应（PCR）方法，采用荧光标记的引物和377型DNA序列自动分析仪，分别分析了21例GBM8号，22号染色体上14个，7个微卫星多态性标记的LOH。结果：本组病例8号染色体LOH率为23．8％，在16．3％能提供信息位点检测到LOH，8P的LOH率明显高于8q，分别为23．8％，14．3％，8q上所有位点的LOH率都在15％以上，以8p22-23上D8S550和D8S549的LOH率较高，分别是27．8％，30．0％，染色体22q的LOH率为47．6％，在30．0％可提供信息位点存在LOH，以22q13.2-13.3上D22S274的LOH率最高（41．2％），结论：8号，22号染色体等位基因杂合性丢失可能在GBM的分子发病机制中发挥着重要作用。在8p22-23上D8S550和D8S549位点间区域以及22q13.2-13.3上D22S274位点所在区域可能存在多个与GBM相关的肿瘤抑制基因。     

前列腺癌染色体8p22-8p12基因杂合性丢失研究

目的探讨中国人前列腺癌染色体8p22～8p12基因杂合性丢失的发生率及细胞生物的意义.方法采用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术,对32例前列腺癌组织及癌旁组织进行8p22-8p12区域内的5个微卫星多态标志物等位基因杂合性丢失(LOH)分析.结果5个微卫星平均发生率为76.6%,其中LPL-3GT位点LOH发生率最高(88.9%),D8S87位点最低(59.1%);8p22-p12位点LOH发生率与肿瘤分化密切相关.其中D8S133和D8S135位点LOH发生率与肿瘤分化程度呈正相关(P＜0.01),LPL-3GT、NEFL和D8S87位点LOH与肿瘤细胞分化程度无统计学意义(P＞0.05).结论研究结果提示,前列腺癌p22-8p12是LOH的频发区域,该区域等位基因LOH与前列腺癌的发生密切相关.不同位点LOH的发生其细胞生物学意义不同,提示可能存在生物学功能不同的肿瘤抑制基因.     

非霍奇金淋巴瘤中的17p杂合性丢失

采用ＡＢＣ和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）检测了４８例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）中１７ｐ杂合性丢失（ＬＯＨ）的情况，发现１２例发生ＬＯＨ，阳性率为２５．０％，尤其是在恶性程度较高的弥漫型大细胞性淋巴瘤（ＤＬＣＬ）中阳性率为６２．５％，显著高于非ＤＬＣＬ中的１７．５％（Ｐ＜０．０１），提示１７ｐＬＯＨ与ＮＨＬ的病理类型有一定的相关性；而且，ＬＯＨ与突变型ｐ５３的表达也有相关性，在有突变型ｐ５３蛋白表达的ＮＨＬ中ＬＯＨ为６６．７％，在无突变型ｐ５３蛋白表达的ＮＨＬ中ＬＯＨ为３３．３％（Ｐ＜０．０５）。作者认为，在国人ＮＨＬ中可同时存在ｐ５３突变和１７ｐＬＯＨ，与ＮＨＬ中ＤＬＣＬ的发生和发展有较明显的相关性。     

胃癌组织中琥珀酸脱氢酶基因周围微卫星杂合性丢失的研究

①目的研究胃癌组织中由核DNA编码的琥珀酸脱氢酶（SDHD）基因位点的改变情况。②方法选取与SDHD基因紧密连锁的3个微卫星D11S5017、D11S1347和D11S1328,通过PCR—SSLP的方法检测了35例新鲜胃癌组织中3个微卫星位点的杂合性丢失（LOH）情况。③结果胃癌组织中,D11S5017位点LOH检出率为12．0％,D11S1347位点LOH检出率为10.0％,D11S1328位点LOH检出率为14．3％。3个位点LOH总检出率为19．4％。④结论在胃癌组织中存在着在SDHD基因LOH的现象,说明了它可能是胃癌中的一种特殊类型的肿瘤抑制因子。     

STUDY OF LOSS OF HETEROZYGOSITY AT DCC AND APC/MCC GENETIC LOCI OF GASTRIC CANCER

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＩｎｔｈｅｃｏｕｒｓｅｏｆｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍａｌｉｇｎａｎｔｔｕｍｏｒｓ,ｔｈｅｌｏｓｓｏｆｃｅｒｔａｉｎｆｒａｇｍｅｎｔｓｏｆａｓｐｅｃｉｆｉｃｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｒｅｇｉｏｎｆｒ...     

白血病微卫星杂合性缺失的研究

①目的 检测白血病微卫星杂合性缺失（LOH）频率,探讨LOH在白血病发病中的作用。②方法 利用合成的11,12号染色体上的10个微卫星位点引物进行PCR扩增,用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测法分析30例不同类型白血病病人的LOH。③结果 30例白血病病人中,有13例发生了1个以上位点的LOH,约占43.3%,其中18例急性白血病病人中有12例发生LOH,12例慢性白血病病人中仅有1例出现LOH,并于检出后60d发生了急粒变,二者LOH频率比较,差异有显著性（P=0.019）。④结论 LOH是急性白血病发病过程中的频发事件,检测LOH是寻找与急性白血病发生密切相关的抑癌基因的有效筛选方法。     

急性白血病9号染色体微卫星复制错误的研究

目的 研究急性白血病(AL)9号染色体微卫星复制错误(RER)现象,探讨微卫星在白血病发病过程中的作用和用于检测染色体微小缺失的意义.方法 选取AL病人53例,其中急性髓细胞白血病(AML)33例,急性淋巴细胞白血病(ALL)20例.在9号染色体共选择5个微卫星位点,对骨髓细胞DNA及作为对照的自身口腔黏膜细胞DNA进行多重PCR扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染,观察微卫星不稳定性(MSI)和杂合性缺失(LOH)的发生情况.结果 53例AL中,共36例发生了至少1个位点的MSI,AML中有15例发生了MSI,10例发生了LOH;ALL中有5例发生了MSI, 4例发生了LOH.其中位于9p21上的D9Sl62、D9S1748、D9S171 微卫星位点LOH发生率分别为0(0/53)、5.7%(3/53)和7.5%(4/53), MSI发生率分别为15.1%(8/53)、7.6%(4/53)和11.3%(6/53);位于9q34上的D9S61和D9S67位点在AL中LOH发生率分别为11.3%(6/53)和5.6%(3/53),MSI发生率分别为5.6%(3/53)和9.4%(5/53).其中D9S61位点LOH均发生于AML,发生率为18.1%,显著高于ALL,差异有显著性(P=0.046).至少发生2个位点MSI即RER 的有6例,占11.3%.结论 AL 较高的RER 表达率提示,广泛的MSI与AL的发生发展有关;AML在D9S61上检测出较高的LOH提示,该区域可能存在与AML发生有关的基因改变;微卫星标记技术为研究AL一种新的、有价值的方法.     

分子遗传标记在鱼类遗传多样性研究中的应用

本文简要介绍了分子遗传标记在鱼类种及种群遗传结构分析与个体识别、系统发育研究、基因组作图、辅助育种与种质资源管理上应用的现状，并探讨了分子标记在鱼类遗传多样性研究应用前景。     

特发性尿路结石患者骨代谢的变化

目的:探讨特发性尿路结石患者骨代谢生化指标的变化.方法:采用放免法测定60例特发性尿路结石患者和25例健康献血者的血清骨钙素(BGP)、降钙素(CT)、甲状旁腺激素(PTH)、25羟基维生素D(25-OH-D)、Ⅰ型胶原羧基端交联肽原(ICTP)和Ⅰ型前胶原氨基端伸展肽(PINP)的水平.结果:特发性尿路结石患者的血清BPG、PINP和ICTP水平明显高于正常对照组(P＜0.01),两组之间的CT、25-OH-D和PTH水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:特发性尿路结石患者存在明显的骨代谢紊乱,主要表现为血清成骨细胞活性增强,同时伴有破骨细胞功能增强,骨转换活跃,这可能是特发性尿路结石形成的病因之一.     

STUDY OF BRCAI GENE IN HEREDITARY BREAST AND OVARIAN CANCER

Objective. To investigate the BRCA1 gene in hereditary breast and ovarian cancer, early-onset breast cancer and sporadic ovarian cancer. Methods. The exons of 2, 11 and 20 of BRCA1 gene were analyzed, Polyrnerase chain reaction-single strand conformation analysia(PCR-SSCP) and PCR SSCP combined by restriction enzymes were used to screen for mutations. Mutations were further indentifed by sequencing. The loss of heterozygosity (LOH) were also investigated at the BRCA1 genetic loci D17S855 in 10 hereditary ovarian cancer. Results. A insertion mutation was detected in H7. “C“ was inserted ay nucleotide 797. It would result in truncation of the BRCA1 protein at cndon 277. A missen mutation was detected in an early-onset breast cancer(diagnosed at age 24). At nueleotide position 3732, the substitution of a “G“ to a “C“ in codon 1205 changes a Gly to a Arg. A missen mutation were also detected in three sporadic ovarian cancers. At nu-cleotide position 2051, the substitution of a “T“ to a “G“ in cndon 644 changes a Cys to a Trp. H3 and H7 patients show LOH. Conclusions. BRCA1 gene has an important effect in Chinese hereditary breast and ovarian cancer, its effect on early-onset breast cancer and sporadic ovarian cancer are still to be studied. BRCA1 gene is a tu-mor -suppressor gene.     

一氧化氮——一氧化氮合酶系统对卵巢切除鼠骨丢失的影响

目的观察一氧化氮(NO)供体硝酸异山梨酯(Isosorbride Dinitrate,ID)及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂氨基胍(Aminoguanidine,AG)对双侧卵巢切除(0VX)大鼠股骨的作用。方法49只雌性大鼠随机分成7组,每组7只。①假手术(Sham)组、②卵巢切除(OVX)组、③卵巢切除+雌激素(OVX+E)组、④卵巢切除+NO供体(OVX+ID)组、⑤卵巢切除+NO供体和雌激素(0VX+ID+E)组、⑥卵巢切除+N0S抑制剂(OVX+AG)组、⑦卵巢切除+NOS抑制剂和雌激素(0VX+AG+E)组。实验10周后处死大鼠,测定大鼠股骨的重量和骨密度(BMD);并测定血清N0、NOS水平。结果与Sham组相比,OVX组、0VX+AG组、OVX+AG+E组大鼠股骨重量减轻、BMD减少(P<0.05);而0VX+E组、0VX+ID组、0VX+ID+E组与Sham组之间无明显差异(P>0.05)。结论N0供体预防OVX鼠骨丢失,N0S抑制剂则阻止雌激素预防OVX鼠骨丢失的作用。     

联用四种肿瘤标志对鉴别卵巢恶性肿瘤的价值

应用放射免疫方法对卵巢恶性肿瘤患者２１例、卵巢良性肿瘤患者２１例子手术前测定血清中ＣＡ２７．２９、ＣＡ１２５、ＣＡ１９－９及铁蛋白的含量。测定结果表明卵巢恶性肿瘤患者血清ＣＡ２７．２９、ＣＡ１９－９及铁蛋白的阳性率明显高于良性肿瘤患者（Ｐ＜０．０５），而良性肿瘤患者ＣＡ１２５的假阳性率较高。同时测定四项肿瘤标志结果显示ＣＡ２７．２９、ＯＡ１２５及铁蛋白的联合检测阳性预计值为１００％，阴性预计值为７７．７８％。资料提示ＣＡ２７．２９与铁蛋白为卵巢恶性肿瘤的较佳标志；ＣＡ２７．２９、ＣＡ１２５及铁蛋白的联合检测不失为鉴别卵巢良、恶性肿瘤的一种较为可靠的方法。     

儿童急性淋巴细胞白血病TEL基因微卫星不稳定性检测的临床意义

目的 检测12号染色体TEL基因微卫星不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）情况,以探讨其与儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）发生、发展及预后的关系。方法 选取53例初诊儿童ALL作为病例组,15例良性血液病作为病例对照,5例正常儿童作为正常对照。采用多重PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术检测了12号染色体上TEL基因附近的4个微卫星位点（D12s89、D12s98、D12s269、D12s358）的MSI和LOH发生情况,并对其中18例病儿进行了初诊、缓解和复发期MSI和LOH情况的检测。结果53例初诊ALL病儿MSI和LOH总的发生率分别为3．77％和43．40％,其中D12s89位点LOH的发生率最高,为39．62％,D12s269位点LOH的发生率最低,为9．43％（x^2=5．24,P（0．01）;动态检测其中的18例病儿发现,初诊期LOH的发生率为61．11％,缓解期为11．11％,复发期为66．67％,初诊和复发期各位点LOH的发生率明显高于缓解期（x^2=8．88、11．69,P〈0．01）;3例初诊未检测出LOH的病儿,复发期3位点同时检测到LOH;2例病儿在初诊、缓解和复发期均检测到LOH。5例正常对照和15例良性血液病对照均未检测到LOH及MSI的发生。结论 TEL基因与儿童ALL的发生、发展有关,微卫星不稳定性的检测可用于白血病的诊断、鉴别诊断及预后判断,并可作为临床上微小残留白血病的检测方法之一。     

多肿瘤标志物联合检测和分析对肺癌诊断的临床价值

目的：研究多肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断的应用价值。方法：使用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统检测已确诊肺癌患者、肺部良性疾病和健康体检者的肿瘤标志物信息,并进行统计学分析。结果：肺癌患者中有75.8%血清肿瘤标志物显示阳性,良性疾病组有27.5%的肿瘤标志物高于正常值,而体检对照组的阳性率为8.5%。肺癌诊断的敏感性为75.8%,特异性为91.5%。结论：多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的临床诊断有一定的参考价值,且适合肿瘤高危人群的定期筛查体检。     

小鼠SRS腹水瘤和L783淋巴细胞性白血病细胞分化标志的检测

对新建的两种淋巴细胞性腹水瘤体外克隆,SAC和LAC-1细胞的分化状态检测,结果表明SAC及其未克隆的SRS细胞无T、B细胞标志,相当于淋巴干细胞;LAC-1细胞为Thy-1.1~+,无其他分化标志,相当于早期幼稚胸腺细胞。这两种瘤细胞的酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应主要呈M样。另外,用这两种瘤细胞对两个新单克隆抗体(C⑩,G(12))进行了辅助鉴定,还对正常小鼠不同成熟度的胸腺细胞和不同淋巴器官中淋巴细胞的ANAE作了检测。     

慢性乙肝病毒携带者血清IgE与乙肝病毒血清标志物关系的初步研究

对慢性乙肝病毒携带者血清IgE与乙肝病毒血清标志物的关系进行研究,结果表明:所有病人的血清IgE升高明显(P<0.01),与肝脏损害程度一致,IgE随HBsAg滴度增加而增高,HBV—DNA和HBeAg阳性者与阴性者之间IgE水平无统计学差异。研究结果提示:血清IgE能准确地表示肝脏损害程度,慢性乙型肝炎发病机制中Ⅰ型变态反应的有无值得进一步研究。     

COA：止血带对于全膝关节置换术失血量的临床影响

Background To study perioperative blood loss and its clinical relevance in total knee replacement surgery after applying a tourniquet. Methods From June 2009 to October 2009, 60 consecutive patients who underwent routine total knee arthroplasty were randomly divided into two groups and were treated with or without a tourniquet (30 patients/group). There were no differences in patient characteristics between the two groups. We compared the two groups of patients in terms of intra- and postoperative bleeding, invisible or visible bleeding, and total blood loss. Results None of the patients showed poor wound healing, lower extremity deep venous thrombosis or other complications. The amount of blood loss during surgery was lower in the tourniquet group than in the control group (P < 0.01). However, postoperative visible bleeding (P < 0.05) and occult bleeding (P < 0.05) were significantly greater in the tourniquet group than in the control group. There was no difference in the total amount of blood loss between the two groups (P > 0.05).     

围术期体温保护对肝癌患者行肝叶切除术中出血量的影响

目的探讨肝叶切除术中固术期保温对肝癌患者出血量的影响。方法择期肝癌手术患者60例,随机分为观察组和对照组各30例。对照组术中不采用任何升温装置,观察纽患者术中采用输液加温器及充气保温毯加温。所有患者用鼻咽温度探头监测其术前、术中、术后体温变化、凝血功能指标及术中出血量,并进行比较。结果观察组体温高于对照组体温（P〈0．05）,使用保温毯加温后30min体温明显高于入室后体温（P〈0．05）,使用保温毯加温30min以后不同时间点体温比较差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组出血量与对照组比较明显减少,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论对肝癌患者行肝叶切除手术过程中使用输液加温器和保温毯,可有效维持患者正常体温,减少术中出血量。     

慢性粒细胞白血病8p22杂合性缺失的检测及意义

目的探讨8号染色体短臂(8p22)的杂合性缺失(LOH)在慢性粒细胞白血病(CML)发生和演变中的作用。方法采用多聚酶链反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术,检测8p22上D8S511和D8S258位点的LOH。结果22例慢性期和8例加速期CML病人在8p22D8S511和D8S258位点均未发生LOH。4例急变期CML病人在D8S511位点上均未检出LOH,仅1例在D8S258位点发生LOH。5例正常对照组均未发生LOH。结论8p22上D8S511位点的LOH与CML各期的发生和演变无关;D8S258位点的LOH与CML慢性期和加速期的发生和演变无关,但可能与CML急变有关。     

慢性粒细胞白血病微卫星不稳定性的检测及其意义

目的 探讨不同位点微卫星不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）与慢性粒细胞白血病（CML）各期的关系。方法 应用多重PCR技术检测CML病人不同时期8、9、17号染色体上5个微卫星位点的MSI和LOH。结果 在D8S555位点,CML加速、急变期（AP＋BC）病人的MSI发生率明显高于慢性期（CP）病人,差异有显著意义（P=0．009）;8号染色体上D8S555、D8S559位点MSI发生率明显高于9、17号染色体上D9S67、TP53A1／A2、AFMal27xg9位点,AFMa127xg9位点LOH发生率明显高于其他4个位点,差异有显著性（x^2=1．858～9．946,P〈0．05、0．01）。结论 微卫星遗传不稳定性是CML发生和转化过程中的常见事件;不同位点微卫星不稳定性在CML病情演变中所起作用不同;AFMa127xg9位点附近可能存在与CML发生、发展密切相关的新抑癌基因。