酶法测定结合胆红素的方法学评价

目的评价胆红素酶法测定血清结合胆红素(CB il),并与干化学法作比较。方法在pH值5.5、120mmol/L苯二甲酸氢钾缓冲液中,胆红素氧化酶(BOD)选择性地氧化CB il,引起450 nm处吸光度(A)值下降,求得CB il浓度。加入氟化钠(NaF)和N-乙酰半胱氨酸(NAC),抑制BOD对未结合胆红素(UB il)和δ-胆红素(δB il)的氧化,消除其干扰。结果BOD法测定的线性范围达230μmol/L,批内变异系数(CV)为4.1%(低值)、1.4%(高值),批间CV为11.65%(低值)、10.26%(高值),平均回收率为97.8%。BOD法与干化学法比较,Y干化学法=1.016 0X酶法 1.603 1,r=0.990 7。结论该法能有效地抑制BOD对UB il和δB il的氧化,特异性的检测CB il,并可用于自动生化分析仪。     

血清结合胆红素的酶法测定

目的 建立用胆红素氧化酶（ＢＯＤ）作为催化剂，选择性地测定血清结合胆红素（ＣＢ）的新方法。方法 测定条件为：０．１ｍｏｌ／Ｌ甘氨酸缓冲液、ｐＨ１０．０，ＢＯＤ活性０．５～０．８Ｕ／反应管，反应时间２分钟。结果 线性至少可达到２２０μｍｏｌ／Ｌ；精密度为批内ＣＶ１．７１～３．９８％、批间ＣＶ８．０～９．７２％；正常参考值范围为０～３．１４μｍｏｌ／Ｌ；与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的Ｃ     

结合胆红素酶法测定的一种新方法

目的 建立一种特异性更高的酶法血清结合胆红素(CB)测定的新方法。方法 在pH5．5、有氟化钠(NaF)和N—乙酰半肮氨酸(NAC)的存在下，胆红素氧化酶(BOD)选择性氧化CB，引起450nm吸光度下降，计算CB的浓度。结果 批内精密度，n＝20，-↑x＝17．65μmol／L，s＝1．15，CV＝6．52％和-↑x＝301．49μmol/L，s＝1．01，CV＝0．33％；批间精密度，n＝20，-↑x＝31．50μmol／L，s＝3．12，CV＝9．90％和-↑x＝184．12μmol/L，s＝5．01，CV＝2．72％；线性范围至少可达320μmol／L；选择性抑制物的最适浓度，NaF2．5mmol/L，NAC2．5mmol/L；与重氮法的相关性，Y(酶法)＝0．839X(重氮法)—7．965，r＝0．9690。结论 该研究建立的反应条件，能有效地抑制BOD对游离胆红素的“非特异性”氧化，提高CB测定的准确性。     

酶法测定直接胆红素的评价

目的根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案评价胆红素氧化酶（BOD）法直接胆红素（DBil）测定试剂盒,并观察其临床应用的可能性。方法采用BOD法测定血清DBil,并对其精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果低值与高值的批内精密度（CV）分别为0.9%、0.5%;批间精密度（CV）分别为1.27%、0.92%;线性范围至少可达844μmol/L。BOD法（Y）与日本关东化学株式会社试剂盒（X）的测定结果比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,相关方程为Y=0.976X-0.528,r=0.991。血红蛋白（Hb）≤5.0 g/L、维生素C≤500 mg/L、乳糜≤5 000单位对BOD法无干扰。不同厂家的试剂盒对DBil的测定灵敏度、特异性有所不同。结论采用BOD法测定DBil具有良好的分析特性,可在临床推广使用。     

三种方法测定血浆直接胆红素的方法学比较

目的分析改良Malloy-Evelyn法、钒酸盐氧化法和干化学法在测定血浆直接胆红素(DBIL)时的偏倚,为室间评估结果提供参考依据.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件,分别用三种方法测定样本直接胆红素含量并进行相关回归分析和偏倚估计.结果以干化学法(X)为对比方法,对钒酸盐氧化法(Y)和改良Malloy-Evelyn法(Z)进行评估.钒酸盐氧化法(Y)和干化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Y=1.012X+1.992,相关系数r2=0.999;改良Malloy-Evelyn法(Z)和于化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Z=0.725X+2.334,相关系数r2=0.988.DBIL浓度为10μmmol/L、100μmol/L、300μmol/L时,钒酸盐氧化法(Y)的相对偏倚分别为21.1%、3.2%和1.9%,改良Malloy-Evelyn法(Z)的相对偏倚分别为4.2%、25.2%和26.7%.结论钒酸盐氧化法与干化学法在测定血浆DBIL时,测定结果的相对偏倚随DBIIL浓度增加而降低;改良Malloy-Evelyn法与干化学法在测定血浆DBIL时,测定结果的相对偏倚随DBIL浓度增加而增加;建议临床实验室建立本实验室直接胆红素测定的参考值范围,以保证实验结果判断的准确性.     

三种方法测定血浆直接胆红素的方法学比较

[目的]分析改良Malloy—Evelyn法、钒酸盐氧化法和干化学法在测定血浆直接胆红素(DBIL)时的偏倚，为室问评估结果提供参考依据。[方法]依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLs)EP9-A文件，分别用三种方法测定样本直接胆红素含量并进行相关回归分析和偏倚估计。[结果]以干化学法(X)为对比方法，对钒酸盐氧化法(Y)和改良Malloy—Evelyn法(Z)进行评估。钒酸盐氧化法(Y)和干化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Y：1．012X 1．992，相关系数r=0．999；改良Malloy—Evelyn法(z)和干化学法(X)测定DBIL的回归方程式为Z=0．725X 2．334，相关系数r=0．988。DBIL浓度为10μmol／L、100μmol／L、300μmol／L时，钒酸盐氧化法(Y)的相对偏倚分别为21．1％、3．2％和1．9％，改良Malloy—Evelyn法(Z)的相对偏倚分别为4．2％、25．2％和26．7％。[结论]钒酸盐氧化法与干化学法在测定血浆DBIL时，测定结果的相对偏倚随DBIL浓度增加而降低；改良Malloy—Evelyn法与干化学法在测定血浆DBIL时，测定结果的相对偏倚随DBIL浓度增加而增加；建议临床实验室建立本实验室直接胆红素测定的参考值范围，以保证实验结果判断的准确性。     

结合胆红素和非结合胆红素的直接测定在高胆红素血症中的应用

目的评价结合胆红素（CBil）和非结合胆红素（UBil）的直接测定在胆汁瘀积性黄疸（CJ）、肝细胞性黄疸（HJ）和新生儿溶血性黄疽（NHJ）中的价值以及δ胆红素／总胆红素（δBil／TBil）比值对CJ患者手术疗效判断的意义。方法用Vitros 250型干式生化仪及配套干片测定18例CJ患者和20例HJ患者血浆TBil、CBil和UBil,计算δBil;13例CJ患者在行胆总管切开引流术后3d、5d、7d复测。同法测定22例NHJ患儿血浆CBil和UBil,计算新生儿总胆红素（NBil）。结果CJ组CBil／TBil比值与HJ组比较差异有统计学意义（P=0．000）,而UBil／TBil比值、δBil和δBil／TBil比值2组间差异均无统计学意义（P=0．241、0．067、0．090）。6例经胆总管切开引流术治疗后排泄良好的CJ患者的TBil、CBil和UBil在术后第3d起逐渐下降,δBil缓慢下降,δBil／TBil比值由术前的0．16～0．44升至0．52～0．78。7例治疗后排泄不良的CJ患者其TBil、CBil和UBil在术后5d～7d缓慢减低,δBil变化甚微,δBil／TBil在0．20～0．46范围内波动。NHJ患儿血浆NBil、UBil及UBil／NBil比值均明显增高。结论CBil和UBil的直接测定及δBil／TBil比值对CJ、HJ和NHJ的诊断和／或鉴别诊断以及CJ患者手术疗效的判断均有很好的应用价值。     

血清结合胆红素酶法测定在自动生化分析仪上的应用

目的　建立酶法测定血清结合胆红素的全自动分析方法 ,并在肝胆疾病患者中临床应用。方法　通过试剂的合理组合 ,分析参数和操作程序的设定 ,建立结合胆红素 (CB)的全自动分析方法 ,同时对总胆红素进行自动化酶法测定。结果　酶法CB测定 :精密度 ,批内n =2 0 , x =6 .4 8μmol/L ,s=0 .11,CV =1.7%和n =2 0 , x =77.9μmol/L ,s=0 .4 2 ,CV =0 .5 3% ;批间n =10 , x =9.4 6 μmol/L ,s=0 .17,CV =1.83%和n =10 , x =5 9.7μmol/L ,s=1.4 3,CV =2 .39% ;线性范围至少可达 340 μmol/L ;比对实验 :与Beckman重氮法试剂 (在BeckmanCX7型生化分析仪上 )比较 ,Y(酶法 ) =0 .75 9X1- 2 .82、r =0 .991,与IagnosticumRT重氮法试剂 (日立 76 0 0 0 2 0型分析仪 )比较 ,Y =0 .84 1X2 - 4 .39、r=0 .96 3。临床研究显示 :与重氮法直接胆红素值相比 ,本法测定CB值能够更灵敏地反映黄疸患者的胆红素分泌功能。结论　建立的CB全自动分析方法具有良好的分析特性 ,可在临床推广应用。     

测定血清总胆红素和结合胆红素

评价一种测定血清总胆红素和结合胆红素的方法——钒酸氧化法。本方法操作简便,基本上无溶血干扰,无叠氮 钠影响,且试剂稳定。总胆红素批内不精密度0.44％-0.82％,日间1.63％-2.92％;结胆批内不精密度0.35％-2.91％,日间2. 84-3.0％。测定总胆红素的准确度好,在684μmol/L内线性较佳。测定BC的准确度稍差。在205mmol/L内线性还欠佳。     

酶法测定血清钠离子的评价

目的评价酶法测定钠离子的性能。方法评价血清钠离子酶法试剂的准确性、精密度、开盖稳定性、线性、与电极法的相关性、回收率及抗干扰性。结果酶法测定钠离子的变异系数(CV)<2%,定标周期能够维持5 d,准确度满足朗道质控品要求,线性范围达到100～160 mmol/L,与电极法具有很好的相关性[相关系数(r)=0.989 9],回收率为100.9%,在胆红素≤600μmol/L、甘油三酯≤20 mmol/L、维生素C≤0.5 g/L、血红蛋白≤10 g/L、铵离子≤25 mmol/L、钾离子≤10 mmol/L、镁离子≤5 mmol/L、钙离子≤5 mmol/L、锌离子≤50 mmol/L、铜离子≤50 mmol/L对钠离子测定无明显干扰。结论钠离子酶法试剂有较好的重复性、准确性和稳定性,线性良好,抗干扰能力强,能满足临床使用要求。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对,分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％,批间CV为2．94％;血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％,批间CV为2．7％;平均回收率TBil为101．1％,DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰,三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

Vitros 350干化学分析仪检测胆红素的临床性能评估

目的评价强生Vitro350干化学检测系统测定胆红素的临床性能,保证检验质量。方法应用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP15-A2文件评价干化学法检测总胆红素(TBIL)、非结合胆红素(Bu)、结合胆红素(Bc),并分析其精密度、准确度和可报告范围等性能;同时对TBIL和Bu、Bc的参考区间进行诊断性能验证。结果干化学法检测TBIL和Bu、Bc的精密度与准确度均在原卫生部临检中心规定的允许误差内;TBIL可报告范围为6.57~428.83μmol/L,Bu 4.5~320.1μmol/L,Bc 4.5~364.9μmol/L。结论胆红素干化学检测系统的技术性能和诊断性能能够满足临床的需要。     

Improved method for enzymatic determination of serum triglycerides.

I describe an enzymatic method for determing serum triglycerides (triacylglycerols). The triglycerides are hydrolyzed by a mixture of lipase and esterase. The glycerol released is determined by kinetic fixed-time analysis, with use of glycerol kinase, pyruvate kinase, and lactate dehydrogenase. Through addition of the competitive inhibitor ATP the Michaelis constant of pyruvate kinase is apparently increased, considerably extending the linearity of the assay. There is no need for serum blanks or reagent blanks. The method has been adapted to a centrifugal analyzer (the ENI GEMSAEC). It yields satisfactory results with regard to precision, accuracy, and insensitivity to interferences.