复方藤梨根制剂对小鼠CT26移植瘤生长及对MVD影响的研究

目的:通过建立Balb/c小鼠CT26人工种植模型,研究复方藤梨根制剂对肿瘤抑制效果及对MVD表达的影响。方法:①100只7周龄雌雄各半Balb/c小鼠随机分为5组,即空白对照组、荷瘤对照组、低剂量给药组、中剂量给药组、高剂量给药组。各组分别皮下接种造模。②造模后第2 d开始连续灌胃3周。给药组予低浓度0.5 g/mL、中浓度1 g/mL、高浓度2 g/mL复方藤梨根制剂灌胃,空白对照组、荷瘤对照组每天以生理盐水灌胃。③所有小鼠第22 d处死,观察各组的瘤重、抑瘤率,免疫组化检测各组小鼠肿瘤CD34标记的MVD。结果:FFTLG低、中、高剂量组抑瘤率分别为-7.05%、23.03%、32.91%;中、高剂量给药组的瘤重与低剂量组和荷瘤组有明显差异(P<0.05),中、高剂量给药组的MVD对比荷瘤对照组有显著性差异(P<0.05)。结论:复方藤梨根制剂能抑制肿瘤生长,减少CT26瘤体中MVD,具有抗肿瘤血管生成作用。     

复方乌梅散对裸鼠胃癌组织COX-2、VEGF-C表达的影响

目的:探讨复方乌梅散对人胃癌SGC-7901细胞株裸鼠移植瘤生长及血管生成相关因子COX-2、VEGF-C表达的影响。方法:将人胃癌细胞SGC-7901通过皮下种植接种于裸鼠腋下,制备裸鼠移植瘤模型,造模成功后随机将裸鼠分为模型组、复方乌梅散小剂量组(10g/kg)、复方乌梅散中剂量组(15g/kg)、复方乌梅散大剂量组(20g/kg),每日灌胃1次,共11次,末次给药后剥离瘤组织称质量,计算移植瘤体积、抑瘤率。应用qRT-PCR检测瘤组织中COX-2和VEGF-C mRNA表达水平。用免疫组织化学法和Western blot法分别检测各组肿瘤组织中COX-2和VEGF-C蛋白的表达。结果:复方乌梅散小剂量组、中剂量组、大剂量组抑瘤率分别为31.83%、34.83%、55.26%,大剂量组抑制肿瘤生长的作用明显增强。免疫组化结果显示复方乌梅散各组移植瘤组织中COX-2和VEGF-C表达均有降低趋势,Western blot结果显示复方乌梅散各组移值瘤组织中COX-2和VEGF-C蛋白表达均呈降低趋势,qRT-PCR检测显示复方乌梅散各组移植瘤COX-2、VEGF-C mRNA的表达明显下调。结论:复方乌梅散可抑制SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长,抑制COX-2、VEGF-C的表达,且呈剂量依赖性。     

复方藤梨根制剂对胃癌细胞乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶-9mRNA表达的影响

目的:探讨复方藤梨根制剂抑制胃癌转移机制。方法:建立裸鼠胃癌腹腔移植瘤模型24只,随机分成生理盐水组、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量和高剂量组;18天后,给予复方藤梨根制剂灌胃21天。随后观察裸鼠生存天数和死亡后肿瘤转移浸润情况;用RT-PCR方法检测各组肿瘤组织中HPA、MMP-9 mRNA的表达。结果:对照组与低剂量治疗组转移部位的赋值评分显著高于中、高剂量组;对照组胃癌细胞的HPA mRNA表达高于中、高剂量组(P<0.05);对照组胃癌细胞的MMP-9 mRNA表达明显高于各给药组(P<0.05)。结论复方藤梨根制剂可能通过下调HPA、MMP-9基因的表达而抑制胃癌转移并延长生存时间。     

芪术抗癌方及其联合5-氟尿嘧啶对CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨芪术抗癌方抗结肠癌的可能作用机制。方法将90只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组,模型组,5-氟尿嘧啶(5-Fu)组,芪术抗癌方高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外其余各组小鼠建立CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型。术后24h空白组与模型组予生理盐水10ml/(kg·d)灌胃;5-Fu组予注射用5-Fu 25mg/(kg·d)腹腔注射给药,隔日1次;芪术抗癌方高、中、低剂量组分别灌胃芪术抗癌方药液24、12、6g/(kg·d),每日1次;联合高、中、低剂量组分别灌胃芪术抗癌方相应剂量和5-Fu腹腔注射给药,用药剂量和方法同上。各组均干预3周后处死小鼠取肿瘤组织,称重并计算抑瘤率;检测各组小鼠肿瘤组织中半胱天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,其余各组小鼠瘤体质量均降低(P0.01);联合高剂量组抑瘤率最高,达82.700%。各给药组对肿瘤组织中Caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达均不同程度上调,而Bcl-2蛋白及mRNA表达下调,并且芪术抗癌方及其联合5-Fu对Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA表达调节呈一定剂量依赖性(P0.05或P0.01)。结论芪术抗癌方可以抑制CT26.WT原位移植瘤的增殖,且与5-Fu同用具有增效作用,其机制可能与上调肿瘤组织中Caspase-3、Bax表达及下调Bcl-2表达有关。     

天麻熄风口服液对小鼠微循环障碍的影响

目的 观察不同剂量天麻熄风口服液对小鼠微循环障碍的影响.方法 将昆明种小鼠50只随机分为5组,每组10只,分别于尾静脉注射盐酸肾上腺素注射液造成小鼠微循环障碍,造模后立即给药.天麻熄风口服液低剂量组、中剂量组、高剂量组分别予5、10、20 g生药/kg灌胃,复方丹参滴丸对照组予复方丹参滴丸0.225 g/kg灌胃,空白...     

芪术蚤复方对乳腺癌模型小鼠的抑制作用及机制研究

目的:观察芪术蚤(QZZ)复方对乳腺癌模型小鼠的影响,并探讨其作用机制。方法:4T1乳腺癌细胞于右胸皮下注射,建立乳腺癌模型小鼠,取50只造模成功的模型小鼠随机分5组,每组10只,分别为模型对照组、阳性对照组、芪术蚤复方20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg组,阳性对照组腹腔注射顺铂(1mg/kg)、芪术蚤复方20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg组分别灌胃给予芪术蚤复方20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg,模型对照组给予等体积生理盐水,1次/日,连续给药2周。停药第二天分离瘤体、胸腺和脾脏,计算重量、抑瘤率、胸腺指数及脾指数、观察瘤体病理学结果; ELISA检测小鼠血清IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α水平,RT-PCR检测模型小鼠血清TGF-β1、TFN-γ、VEGF mRNA的表达水平,流式细胞仪检测各组腺癌模型小鼠外周血中CD4+、CD8+水平及值。结果:给药2周后与模型组相比,芪术蚤复方可显著抑制乳腺癌模型小鼠肉瘤的生长,提高胸腺指数和脾指数(P0. 05);通过病理学观察发现芪术蚤复方给药组癌细胞排列疏松,核固缩,血管较模型对照组减少明显;芪术蚤复方给药组小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α的水平也显著升高(P0. 05),TGF-β1、VEGF mRNA的表达水平显著降低(P0. 05),小鼠外周血中CD4+/CD8+的水平显著升高(P0. 05)。结论:芪术蚤复方可抑制肿瘤细胞生长,其机制可能是通过调节乳腺肿瘤微环境中调节性T细胞的数量及比例提高乳腺癌模型鼠免疫功能,进而抑制乳腺癌模型小鼠乳腺肿瘤组织的生长。     

西黄丸经Wnt信号转导通路关键蛋白β-catenin调控人肺癌干细胞增殖

目的:研究西黄丸经Wnt信号转导通路关键蛋白β-catenin调控人肺癌干细胞增殖的机制。方法:培养人肺腺癌细胞系LAC,应用流式细胞荧光激活(FACS)技术,筛选鉴定具干细胞特性的SP细胞;50只C57BL/6小鼠分为西黄丸高剂量组、中剂量组、低剂量组,环磷酰胺组、模型组5组,SP细胞调整细胞密度1×107/ml,每只小鼠右腋皮下接种0.2ml瘤细胞悬液,成瘤后,分组按32g/kg、16g/kg、8g/kg给以西黄丸药液灌胃,CTX组7.5mg/kg,模型组予等量生理盐水,连续给药14d,处死小鼠,剥取瘤块称瘤重,并计算抑瘤率。日本大耳白兔随机分为5组,按上述剂量和方法给药,各组连续给药3 d后腹主动脉采血,离心,获得含药血清。SP细胞密度调至2×107/ml,种入培养瓶,分为西黄丸高、中、低剂量组,CTX组、空白组5组,分别加入如前所述制备的各组含药血清(血清、培养液体积比30%),培养24h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western Blot)法分别检测β-catenin mRNA及蛋白表达。结果:西黄丸32g/kg、16g/kg可明显抑制C57BL/6小鼠体内肺癌移植瘤,同时可明显降低β-catenin mRNA及蛋白表达。结论:西黄丸可经由抑制β-catenin的表达,阻止肺癌干细胞Wnt信号转导通路激活,从而抑制肺癌干细胞增殖为肺癌细胞。     

复方大七气汤联合顺铂对上皮性卵巢癌的作用

目的:研究复方大七气汤联合顺铂对上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的作用及其相关机制,为上皮性卵巢癌的临床治疗提供新思路。方法:用人上皮性卵巢癌SKOV3细胞株构建60只裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只,分别为模型组(生理盐水),复方大七气汤低剂量组(15.16g/kg)、中剂量组(30.33g/kg)、高剂量组(60.66g/kg),顺铂组(3mg/kg),联合组(复方大七气汤30.33g/kg+顺铂3mg/kg),连续给药14天,每隔两天测量瘤体积,治疗结束后剥取瘤体称重。采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR和Western-blot检测肿瘤组织中信号转导子与转录激活子3(STAT3)、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA的表达。结果:与模型组相比,治疗组瘤体积、瘤重均显著减小,联合组瘤体积和瘤重均显著小于其余各组。治疗组STAT3与Bcl-2mRNA及蛋白表达均显著下调,Bax mRNA表达均显著上升,联合组STAT3、Bcl-2 mRNA及蛋白表达最低,Bax mRNA及蛋白表达最高。结论:复方大七气汤对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤具有抑制作用,能促进细胞凋亡,其机制可能与减少STAT3表达,上调Bax表达、下调Bcl-2表达有关。     

通莲汤对裸小鼠胃癌移植瘤生长及缺氧诱导因子-1α的影响

目的探讨复方通莲汤对胃癌MGC803细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,为该方临床应用提供实验依据。方法胃癌细胞株MGC803接种于裸鼠右前肢皮下。模型组灌胃生理盐水溶液10 m L/kg,阳性对照组灌胃消癌平片1.8 g(生药量)/kg的药液10 m L/kg,复方通莲汤高、中、低剂量组分别灌胃1.5,0.75,0.375 g(生药量)/L的药液10 m L/kg,各组连续给药3周,再连续观察3周,6周后处死小鼠,分离瘤组织,计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织HIF-1α表达。结果高剂量通莲汤显著抑瘤生长,瘤重(1.51±0.49)g,抑瘤率为(61.04±4.79)%,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);通莲汤可显著抑制HIF-1α表达,与模型组比较,阳性表达率χ2=4.286,P=0.0380.05。结论通莲汤可抑制裸鼠人胃癌MGC803细胞移植瘤生长,其抑瘤机制与下调肿瘤细胞HIF-1α蛋白表达有关。     

复方苦参注射液对结肠癌荷瘤裸鼠YAP/TAZ表达的影响

目的:观察复方苦参注射液(CKI)对人HT-29结肠癌裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用。方法:建立裸鼠异种移植瘤模型。实验分为空白对照组、CKI低剂量组、CKI高剂量组、奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)组共4组,每组10只Balb/c裸鼠。CKI低剂量组和高剂量组每天施用不同剂量的CKI[1. 0和4. 0 m L/(kg·d)],持续给药28 d,L-OHP干预组予以L-OHP干预(10 mg/kg),每隔48 h给药一次,持续28 d。每天观察移植瘤的生长并测量肿瘤体积。末次给药12 h后处死取材。通过q PCR法检测移植瘤组织中YAP、TAZ mRNA相对转录水平,免疫组化法检测移植瘤组织中YAP、TAZ、MMP2和MMP9蛋白表达情况。结果:不同剂量的CKI干预可抑制移植瘤的生长(P 0. 05 vs.对照组),高剂量组具有最佳抑制作用(P 0. 05 vs. CKI低剂量组)。不同剂量的CKI干预均可以下调移植瘤组织中YAP和TAZ的mRNA转录和蛋白表达水平(P 0. 05 vs.对照组),且高剂量组抑制作用更为显著(P 0. 05 vs. CKI低剂量组); L-OHP干预显著下调移植瘤组织中YAP和TAZ的mRNA转录和蛋白表达(P 0. 05 vs.对照组),与CKI高剂量干预组比较,差异具统计学意义(P 0. 05)。CKI和L-OHP干预均抑制移植瘤组织中MMP2和MMP9蛋白表达,其中,CKI高剂量组优于低剂量组(P 0. 05),L-OHP优于CKI高剂量组(P 0. 05)。结论:CKI可抑制裸鼠人HT-29结肠癌皮下移植瘤的发展,其作用机制可能是通过调控Hippo信号通路,抑制下游YAP/TAZ活性,并进一步下调MMPs的表达来实现的。     

藤茶双氢杨梅树皮素联合环磷酰胺抗肿瘤作用研究

目的:探讨藤茶双氢杨梅树皮素(APS)联合环磷酰胺(CTX)抗肿瘤的作用。方法:将接种H_(22)的小鼠按瘤体积大小随机分为6组:模型对照组、环磷酰胺组、APS高剂量组、APS低剂量+环磷酰胺组、APS中剂量+环磷酰胺组、APS高剂量+环磷酰胺组,每组14只。环磷酰胺组予环磷酰胺溶液灌胃,剂量为0.02 g/kg;APS高剂量组予双氢杨梅树皮素灌胃,剂量为0.60 g/kg;APS低剂量+环磷酰胺组:灌胃双氢杨梅树皮素0.15 g/kg+腹腔注射环磷酰胺0.02 g/kg;APS中剂量+环磷酰胺组:灌胃双氢杨梅树皮素0.30 g/kg+腹腔注射环磷酰胺0.02 g/kg;APS高剂量+环磷酰胺组:灌胃双氢杨梅树皮素0.60 g/kg+腹腔注射环磷酰胺0.02 g/kg;各组灌胃容积均为10 ml/kg。给药10 d后,计算小鼠的抑瘤率、脾指数、胸腺指数、肝脏指数,分析APS联合环磷酰胺抗肿瘤的作用。结果:APS可抑制H_(22)荷瘤小鼠肿瘤的生长,抑瘤率为20.72%;单用CTX组抑瘤率为33.5%,APS低、中、高剂量与CTX联用后抑瘤率分别为47.07%、48.52%和60.26%;与单用CTX组比较,联合用药明显提高了对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用(P0.05)。与模型对照组比较,CTX组脾指数和胸腺指数明显下降(P0.01);与CTX组比较,APS中、高剂量与CTX联合用药后可提高小鼠的脾指数和胸腺指数,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);APS低剂量与CTX联合用药后可明显提高小鼠的胸腺指数(P0.01);APS高剂量与CTX联合用药后还可明显提高小鼠的肝脏指数(P0.01)。结论:APS对H_(22)肿瘤具有抑制作用,与环磷酰胺联用能增强环磷酰胺对H_(22)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。     

黄芪解毒汤干预Wnt/β-catenin通路抑制上皮间质转化抗乳腺癌肺转移机制研究

目的观察黄芪解毒汤对荷瘤裸鼠乳腺癌肺转移的抑制作用, 探讨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路调控上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法将30只裸鼠按随机数字表法分为模型组、阿霉素组及黄芪解毒汤低、中、高剂量组, 每组6只。各组通过皮下注射小鼠乳腺癌4T1细胞制备荷瘤裸鼠模型。建模成功后, 黄芪解毒汤低、中、高剂量组灌胃黄芪解毒汤17.82、35.64、71.28 g/kg, 阿霉素组腹腔注射阿霉素0.05 g/kg, 模型组灌胃等体积的生理盐水, 均连续给药21 d。于造模后9、15、21 d测定瘤体积;给药结束后分离肿瘤组织, 称瘤重、计算抑瘤率;分离肺组织, 计数肺转移瘤结节数, 计算肺转移抑制率;HE染色观察组织形态, 评价模型的有效性;Western blot法检测肺组织β-catenin、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)表达;实时荧光定量PCR检测肺组织β-catenin、E-Cadherin、Vimentin mRNA水平。结果与模型组比较, 黄芪解毒汤低、中、高剂量组瘤体积、重量降低(P<0.01);黄芪解毒汤高剂量...     

天然牛磺酸对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的通过观察天然牛磺酸(NT)对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响,研究NT抑制肝细胞炎性状态、延缓肝纤维化进展的相关机制。方法将实验大鼠随机分为对照组、模型组、NT低剂量组(0. 3 g/kg)、NT中剂量组(0. 6 g/kg)、NT高剂量组(0. 9 g/kg),每组15只。对照组给予正常喂养;模型组与NT各组大鼠均给予皮下注射40%CCL_4橄榄油溶液3 m L/kg造模,首次剂量5 m L/kg,2次/w,共注射6 w,并饲以高脂饲料; NT各组在造模的同时予天然牛磺酸灌胃,连续给药6 w;实验结束时,称量大鼠体质量和肝脏质量,计算肝体系数,检测大鼠肝功能(ALT、AST、TBIL及ALB)、肝纤维化指标(HA、PCIII、IV-C及LN)、血清TNF-α水平及肝脏组织TNF-α mRNA表达量。结果与模型组相比,NT低剂量组肝体系数差异无统计学意义(P> 0. 05),NT中剂量组、高剂量组肝体系数明显降低; NT各组肝功能、肝纤维化显著改善,血清TNF-α水平及肝脏组织中TNF-α mRNA表达显著降低。结论 NT能维持肝功能、延缓肝纤维化进展,其机制可能与抑制TNF-α相关因子表达,降低炎性介质分泌,减轻炎症反应有关。     

左、右归丸对控制性超排卵小鼠子宫内膜VEGF及Ang影响的研究

目的:基于VEGF及Ang探讨补肾复方左、右归丸对控制性超排卵小鼠子宫内膜容受性的影响。方法:采用GnRH-a+PMSG+HCG建立控制性超排卵小鼠模型,将其分为模型组、左归丸组、右归丸组、阿司匹林对照组、同时设正常对照组。在造模的同时,左、右归丸组分别按6、3、1.5g/kg左、右归丸灌胃阿司匹林对照组按0.2g/kg阿司匹林灌胃,模型组、正常对照组以等体积生理盐水灌胃,每天1次,连用11天。采用免疫组化法对子宫进行病理切片制作,通过IPP7.0图像分析系统检测子宫内膜VEGF、VEGF-R、Ang-1、Ang-2及Tie-2蛋白表达水平,采用荧光定量PCR技术检测阴道组织VEGF、VEGF-R、Ang-1、Ang-2及Tie-2 mRNA表达水平。结果:正常对照组VEGF/VEGF-R蛋白表达、VEGF-R mRNA表达、Ang/Tie蛋白表达和Ang-1 mRNA表达均明显高于模型组,与模型组比较,右归丸3g/kg剂量组及6g/kg剂量组VEGF蛋白表达明显增高;右归丸3g/kg剂量组VEGF、VEGF-1 mRNA表达(2.02±0.92、2.10±0.39),6g/kg剂量组VEGF、VEGF-1 mRNA表达(1.52±0.33、1.89±0.22)明显升高;右归丸3g/kg剂量组及6g/kg剂量组Ang-1、Ang-2蛋白表达明显增高,左、右归丸1.5g/kg剂量组、3g/kg剂量组、6g/kg剂量组tie-2明显增高;右归丸1.5g/kg剂量组Ang-1、Ang-2、Tie-2 m RNA表达(3.52±0.98、1.84±0.23、2.68±0.82)升高;3g/kg剂量组Ang-1、Ang-2、Tie-2 m RNA表达(3.48±0.89、1.88±0.26、2.69±0.71)、6g/kg剂量组Ang-1、Ang-2、Tie-2mRNA表达(3.57±0.98、1.96±0.32、2.64±0.66)明显升高。结论:补肾复方左、右归丸可通过调节控制性超排卵小鼠子宫内膜VEGF/VEGF-R及Ang/Tie蛋白和mRNA表达而改善子宫内膜容受性,其中补肾阳的右归丸比补肾阴的左归丸效果明显。     

金仙胶囊不同提取工艺的急性毒性及其抗肿瘤作用研究

目的:研究不同提取工艺金仙胶囊的急性毒性及对小鼠S180实体瘤的抑制作用。方法:通过小鼠灌胃给药测定金仙胶囊急性毒性;无菌条件下,给小鼠腋皮下接种一定量S180实体瘤细胞悬液制备肿瘤小鼠模型。分别灌胃不同提取工艺的金仙胶囊(2.5g/kg、5g/kg、10g/kg)、环磷酰胺(20mg/kg),连续给药一定时间,计算肿瘤抑制率和胸腺指数。结果:急性毒性实验无小鼠死亡;小鼠腋下接种S180细胞液后,环磷酰胺可显著减小肿瘤重量,瘤重与模型组比较P0.01,抑瘤率为65.4%;金仙胶囊2高剂量组(10g/kg),金仙胶囊3中、高剂量组(5g/kg、10g/kg)抑瘤率均大于40%,且瘤重与模型组比较P0.05。胸腺指数与模型组比较胸腺指数均有不同程度的降低。其中,环磷酰胺组;金仙胶囊1低剂量(2.5g/kg)组;金仙胶囊2高、中剂量组(5g/kg、10g/kg);金仙胶囊3高、中、低剂量组(2.5g/kg、5g/kg、10g/kg)胸腺指数与模型组比较差异显著(P0.05)。结论:上述研究结果提示不同提取工艺金仙胶囊对小鼠均无明显急性毒性且在所研究的剂量范围内某些剂量对S180有一定的抑制作用。     

下瘀血汤诱导人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的 观察下瘀血汤对肝癌裸鼠移植瘤及核仁纺锤体相关蛋白1(Nusap1) mRNA和蛋白表达的影响,并探讨作用机制。方法 将32只雌性BALB/c裸鼠建立人肝癌移植瘤动物模型,将造模成功的20只裸鼠采用随机数字表法分为对照组及下瘀血汤低、中、高剂量组,每组5只。下瘀血汤低、中、高剂量组分别予0. 15、0. 3、0. 6 g/20 g下瘀血汤灌胃,对照组予等容积0. 9%氯化钠注射液灌胃,灌胃均每日2次,连续15 d。灌胃期间每3 d测量肿瘤大小,灌胃结束后处死取出肿瘤,称取肿瘤质量,采用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Nusap1 mRNA表达,采用免疫印迹法检测Nusap1蛋白的表达水平。结果 灌胃第12 d,下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05);灌胃第15 d,下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤体积低于对照组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤中、高剂量组裸鼠移植瘤平均质量均低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组裸鼠移植瘤平均质量低于下瘀血汤中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组移植瘤细胞凋亡率高于下瘀血汤低、中剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量均低于对照组(P 0. 05),下瘀血汤高剂量组Nusap1 mRNA相对表达量低于下瘀血汤低剂量组(P 0. 05)。下瘀血汤低、中、高剂量组可以抑制Nusap1蛋白的表达,且随着用药浓度的增加,抑制作用增强。结论 下瘀血汤可抑制Nusap1的表达,可减缓裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长,促进移植瘤细胞凋亡。     

白龙灵沙汤对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用研究

目的研究白龙灵沙汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用。方法将40只荷Lewis肺癌C57BL/6雄性小鼠随机分为模型组及白龙灵沙汤高、中、低剂量组,每组10只。取传代好的带瘤小鼠的实体瘤块,研磨后右腋下皮下接种。接种后次日,白龙灵沙汤高、中、低剂量组分别给予33. 33 g/(kg·d)、16. 67 g/(kg·d)、8. 33 g/(kg·d)白龙灵沙汤灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,连续28 d。期间观察各组小鼠的一般状况,末次给药24 h后取瘤块称质量,计算肿瘤抑制率,采用流式细胞仪检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率,采用免疫组化方法检测肿瘤组织中微血管密度。结果白龙灵沙汤高剂量组小鼠的一般状况明显好于模型组。白龙灵沙汤各剂量组小鼠瘤质量均明显低于模型组(P均0. 05),且白龙灵沙汤高、中剂量组均明显低于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤高、中剂量组抑瘤率均明显高于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤高、中剂量组G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均明显高于模型组和白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05),S期细胞比例明显低于模型组和白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤各剂量组小鼠肿瘤组织中微血管密度均明显低于模型组(P均0. 05),且白龙灵沙汤高、中剂量组均明显低于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05)。结论白龙灵沙汤能通过抑制细胞周期促进细胞凋亡,从而降低小鼠Lewis肺癌组织中微血管密度,具有明显抑瘤作用。     

桂枝茯苓丸对荷瘤小鼠瘤组织Survivin及P21~(waf/cip)的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸抑瘤作用的机制。方法:取30只小鼠,每只鼠右侧腋下皮下注射0.2ml的S180瘤细胞悬液,将其随机分为模型组、中药桂枝茯苓丸(GuizhiFuling Bolus,GFW)组、环磷酰胺(cyclophosphane,CY)组,每组10只,另取10只未荷瘤小鼠作为正常对照。模型组用生理盐水灌胃,每天0.2ml/10g;中药组用GFW给小鼠灌胃,每天0.2ml/10g;环磷酰胺组于小鼠腹腔注射CY,每天20mg/kg。各组小鼠均于接种后次日给药,每天给药1次,连续10d后,小鼠脱颈处死,取腋下实体瘤,计算抑瘤率。免疫组化法测定P21waf/cip蛋白表达,原位杂交法检测存活素(Survivin)mRNA表达。结果:GFW抑瘤率为38.93%,GFW上调肿瘤细胞P21waf/cip表达,下调Survivin表达。结论:GFW可抑制肿瘤细胞生长,其机制可能与上调P21waf/cip及下调Survivin mRNA表达密切相关。     

裴氏肝癌方对小鼠移植性肝癌H22作用的研究

目的:探讨中药裴氏肝癌方治疗原发性肝癌的作用。方法:将52只小鼠随机分为裴氏肝癌方高剂量组(56 g/kg)10只、裴氏肝癌方低剂量组(28 g/kg)10只、5-Fu组(0.02 g/kg)10只、复方斑蝥组(0.25 g/kg)10只及模型对照组12只。裴氏肝癌方两剂量组及复方斑蝥组按0.02 mL/g灌胃给药,5-Fu注射液按0.01 mL/g剂量腹腔注射给药,模型对照组以等容积的蒸馏水灌胃,1 d 1次,共11次。观察动物体质量等一般情况,检测血ALT、AST、TP、ALB及瘤重,计算抑瘤率、胸腺指数及脾脏指数。结果:裴氏肝癌方两剂量组体质量增加,但与模型对照组对比,差别无统计学意义。裴氏肝癌方高剂量组、5-Fu组瘤重与模型对照组对比,差别有统计学意义(依次为P<0.05,P<0.01)。裴氏肝癌方高剂量组动物血清ALT、AST较模型对照组降低,TP、ALB较模型对照组升高,其中AST及ALB与模型对照组对比,差别有统计学意义(P<0.01)。5-Fu组血清ALT、TP、ALB与模型对照组对比,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。裴氏肝癌方高剂量组及5-Fu组胸腺指数与模型对照组对比,差别有统计学意义(P<0.01);各药物组的脾脏指数与模型对照组对比,差别均无统计学意义(P>0.05)。结论:裴氏肝癌方对荷瘤小鼠原发性肝癌有抑制作用。     

复方861含药血清对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达影响的研究

观察复方 86 1含药血清对HSC T6细胞Ⅰ型胶原 (CoL Ⅰ )、Ⅲ型胶原 (CoL Ⅲ )mRNA表达影响。以不同剂量复方 86 1灌胃大鼠制备的含药血清 ,作用HSC T6细胞 4 8h ,应用逆转录定量PCR方法测定其对HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达的影响。结果表明 :复方 86 10 5、1.0、2 .0、6 .0g kg等不同剂量含药血清HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达。与空白对照组比较 ,具有显著性 (P <0 .0 5或P ,0 .0 1)。因此 ,复方 86 1可降低HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达水平 ,具有抗肝纤维化作用。