复方格列本脲片人体药物动力学及生物等效性研究

目的研究复方格列本脲片在健康人体内的药物动力学及评价复方格列本脲片相对于格列本脲片与二甲双胍片联用是否具有生物等效性.方法采用随机自身交叉双周期设计方法,将18名健康男性受试者随机分为2组,分别单次交叉口服等剂量供试制剂或参比制剂(格列本脲2.5 mg,二甲双胍500 mg)后,采用HPLC法测定不同时间点的血药浓度,计算其主要药物动力学参数,评价两制剂的生物等效性.结果供试制剂和参比制剂格列本脲AUC0～10分别为(150.13±54.64)ng·h·mL-1和(158.85±59.15)ng·h· mL-1,cmax分别为(46.23±14.29)ng·mL-1和(44.16±15.16)ng·mL-1,tmax分别为(2.40±0.30)h和(2.40±0.30)h,t1/2分别为(1.73±0.71)h和(1.70±0.49)h.供试制剂和参比制剂二甲双胍AUC0～12分别为(7.79±2.17)μg·h·mL-1 和(8.11±2.06)μg·h· mL-1,cmax分别为(1.47±0.44)μg·mL-1和(1.54±0.43)μg·mL-1,tmax分别为(2.10±0.50)h和(2.00±0.70)h,t1/2分别为(2.93±0.44)h和(2.83±0.48)h.上述结果经统计学分析无显著性差异(P>0.05).供试制剂中格列本脲和二甲双胍相对于参比制剂的生物利用度分别为(96.4%±15.8%)和(96.9%±16.2%).结论单剂量口服复方格列本脲片与口服相当剂量的格列本脲片和二甲双胍片具有生物等效性.     

顶空气相色谱法检查葡萄糖酸钠中残留溶剂

目的：建立葡萄糖酸钠原料药残留溶剂的测定方法。方法：采用DB-624毛细管色谱柱（30m×0.32mm）、顶空进样法,以FID检测。结果：乙醇、丙酮均在1～200μg·mL-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.8%、96.1%,RSD分别为2.0％、1.7％。结论：所建立方法专属性好,简便准确,可用于葡萄糖酸钠原料药残留溶剂的限度检查。     

复方盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍和格列本脲的HPLC测定

建立了HPLC法测定复方盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍和格列本脲的含量.以双氯芬酸钠为内标,采用Hypersil BDs C18柱,流动相为甲醇-3mmol/L十二烷基硫酸钠溶液(含0.1%三乙胺,pH 3.5)(67:33),流速1m1/min,检测波长分别为232和300am.盐酸二甲双胍和格列本脲分别在0.03～0.3μg(r=0.9998)和0.5～4μg(r=0.9999)范围内线性关系良好.方法平均回收率分别为100.1%(RSD 0.22%)和99.9%(RSD 0.36%).     

HPLC法测定水杨酸原料药的有关物质

目的:建立RP-HPLC法测定水杨酸原料药的有关物质。方法:采用Phenomenex Luna C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶1),流速1.0 mL.min-1,检测波长270 nm。结果:水杨酸与4-羟基苯甲酸、4-羟基间苯二甲酸和苯酚分离度良好,3种杂质在0.958～19.16μg.mL-1、0.4912～9.824μg.mL-1、0.214～4.28μg.mL-1之间线性关系良好,检测限分别为0.025μg.mL-1、0.025μg.mL-1、0.04μg.mL-1。结论:本方法简便、准确,专属性好,灵敏度高,可作为水杨酸原料药有关物质的检查方法。     

卡马西平中残留溶剂的研究

目的:用气相色谱的顶空进样法建立卡马西平中的残留溶剂氯苯、甲醇和乙醇的测定方法.方法:使用配置顶空进样器的气相色谱仪,采用HP-INNOWAX(交联聚乙二醇),30m×0.32mm×0.25μm色谱拄,以氮气为载气,FID检测器,顶空进样.通过外标法计算残留溶剂的含量.结果:卡马西平中有残留溶剂甲醇、乙醇检出.标准曲线的线性范围:氯苯为0.07～3.62μg·mL-1(r=0.9992),甲醇为0.60～30.1μg·mL-1(r=0.9978),乙醇为1.00～50.08μg·mL-1(r=0.9986),定量限氯苯为0.1μg·mL-1,甲醇为0.7μg·mL-1,乙醇为0.4μg·mL-1;平均回收率氯苯为99.12%(RSD=2.52%,n=6),甲醇为97.51%(RSD=4.31%,n=6),乙醇为98.52%(RSD=3.12%,n=6).结论:本方法简便,灵敏度高,重复性好,结果准确.     

高效液相色谱法测定人血浆中格列本脲浓度

目的:建立测定人血浆中格列本脲浓度的高效液相色谱法.方法:格列本脲血浆样品在酸性条件下以二氯甲烷-正己烷(50:50)提取,以格列齐特为内标.Nova-pakC18柱(4.6 mm×250 mm,4μm),流动相为乙腈-0.03 mol·L-1磷酸二氢钾(pH 3.0)(44:56),流速1.2 mL·min-1,检测波长228 nm.结果:标准曲线线性范围25～600μg·L-1(r=0.9992),血浆中格列本脲最低检测限为15μg·L-1.平均提取回收率为(81.9±3.6)%,平均方法回收率为(101.1±6.8)%,日内RSD≤5.0%,日间RSD≤9.1%.结论:该方法具有良好的准确性、精密性和较高的灵敏度,适用于格列本脲的药动学研究及治疗药物浓度监测.     

参芪降糖颗粒中非法添加格列本脲的检测

目的:建立降糖中药制剂参芪降糖颗粒中非法添加格列本脲的检测方法。方法:采用薄层色谱法进行鉴别;采用高效液相色谱法测定格列本脲的含量:色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为磷酸二氢铵溶液(用磷酸调pH3.15)-甲醇(25:75),检测波长为240nm。结果:格列本脲的检测浓度在0.0301～0.4816mg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9992);平均回收率为98.62%,RSD=0.54%(n=9)。结论:本方法灵敏可靠、简单可行,可用于降糖中药制剂中非法添加格列本脲的检测。     

HPLC法检测降糖中药制剂中非法添加的格列本脲

目的建立降糖中药制剂中所添加的格列本脲的定性、定量检测方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.1 mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(53∶47);流速1.0 mL·min-1;柱温35℃;检测波长300 nm。结果 1种供试品中检出格列本脲。格列本脲浓度在0.051～1.014 4 mg·mL-1范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数r=1.000,平均回收率为99.97%,RSD为1.3%。结论本方法简便易行、准确可靠,可作为监测降糖中药制剂非法添加格列本脲的有效方法。     

复方盐酸二甲双胍胶囊人体生物等效性研究

目的评价国产的复方盐酸二甲双胍胶囊(试验制剂)与市售的盐酸二甲双胍片联合格列本脲片(参比制剂)的人体相对生物利用度。方法18名健康男性志愿者随机交叉口服试验制剂2粒(每粒含二甲双胍250mg,格列本脲1.25mg)或参比制剂盐酸二甲双胍片(250mg)2片、格列本脲片(2.5mg)1片。二甲双胍的血药浓度采用离子对高效液相色谱法(HPLC)测定,格列本脲的血药浓度采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定,计算两者的药动学参数并评价试验制剂的相对生物利用度。结果受试者单次服用试验制剂或参比制剂后,二甲双胍的主要药动学参数如下:AUC0-24分别为(5.90±1.36)和(5.95±1.35)μg·h·mL-1,AUC0-∞分别为(6.17±1.36)和(6.28±1.36)μg·h·mL-1,Cmax分别为(0.82±0.21)和(0.82±0.14)μg·mL-1,tmax分别为(1.43±0.88)和(1.54±0.98)h,相对生物利用度为(100.21±14.10)%;格列本脲的主要药动学参数如下:AUC0-16分别为(270.28±61.82)和(268.70±61.99)ng·h·mL-1,AUC0-∞分别为(287.13±61.97)和(284.17±67.85)ng·h·mL-1,Cmax分别为(62.83±10.89)和(61.44±12.11)ng·mL-1,tmax分别为(2.53±0.79)和(2.81±0.75)h,相对生物利用度为(101.67±14.54)%。结论经统计学分析,试验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间差异无统计学意义,试验制剂与参比制剂生物等效。     

气相色谱法测定瑞格列奈原料药的有机溶剂残留量

目的:建立瑞格列奈原料药残留溶剂的测定方法。方法:采用Agilent DB-FFAP毛细管色谱柱(50 m×0.32mm)、顶空进样法,以FID检测。结果:正己烷、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲苯分别在7.3～58.4、125.7～1 005.5、125.3～1 002.7、125.9～1 007.2和22.4～179.5μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.5%、95.6%、96.6%、97.8%和94.8%,RSD分别为1.4%、1.6%、1.7%、1.2%和1.2%。结论:所建立方法专属性好,简便准确,可用于瑞格列奈原料药残留溶剂的限度检查。     

反向离子对色谱法测定格列吡嗪原料药中5-甲基-2-吡嗪羧酸的含量

目的：建立格列吡嗪原料药中5-甲基-2-吡嗪羧酸的含量测定方法。方法：采用反向离子对色谱法。色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相：50 mmol?L-1NaH2PO4溶液（含0.05%四丁基氢氧化铵）-甲醇（梯度洗脱）,流速为1.0 mL?min-1,柱温为30 ℃,检测波长为276 nm,进样量为20μL。结果：5-甲基-2-吡嗪羧酸质量浓度线性范围为0.0385~1.4453μg?mL-1（r＝0.9999,n＝5）,检测限为0.01155μg?mL-1,定量限为0.0385μg?mL-1;平均回收率为100.94%,RSD为1.4%（n=9）;系统精密度、重复性、中间精密度试验结果良好;对照品和供试品溶液8h稳定;3批原料药中5-甲基-2-吡嗪羧酸的量分别为0.0083%、0.0085%、0.0092%。结论：本方法操作简便、方法灵敏、结果准确可靠,可用于格列吡嗪原料药中微量杂质5-甲基-2-吡嗪羧酸的测定。     

气相色谱法测定荧光素钠原料药中的残留溶剂

目的建立气相色谱法测定荧光素钠原料药中残留溶剂。方法选用毛细管柱DB-WAX(30.0m×0.25mm×0.25μm),氢火焰离子化检测器(FID),色谱条件:初温60℃(保持10min),以100℃·min-1升至200℃(保持1min),进样口温度:230℃,检测器温度:250℃。选择正丙醇作为内标,进样量1μL。结果二氯甲烷在(62.97~176.31)μg·mL-1浓度范围内与峰面积/内标峰面积比值呈良好的线性关系,检测限为25.19μg·mL-1,溶剂和内标对测定无干扰,3批样品均未检出二氯甲烷。结论经方法学验证,本方法简便灵敏,准确,可用于荧光素钠原料药中残留溶剂的检测。     

气相色谱法测定吡非尼酮中残留溶剂含量

目的建立了吡非尼酮中6种有机溶剂残留量的分离测定方法。方法采用溶液直接进样气相色谱法,色谱柱为HP-INNOWAX毛细管柱(30 m×0.53 mm×2.65 m),载气为氮气,以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,测定了吡非尼酮原料药中异丙醚、丙酮、二氯甲烷、乙腈、二氧六环与吡啶的残留量。结果 6种有机溶剂完全分离,在所考察的浓度范围内线性关系良好,其中异丙醚、丙酮、二氯甲烷、乙腈、二氧六环与吡啶的线性范围分别为10.16~1 016μg.mL-1(r=0.999 99),9.92~992μg.mL-1(r=0.999 99),1.272~127.2μg.mL-1(r=0.999 8),0.848~84.8μg.mL-1(r=0.999 8),0.785~78.5μg.mL-1(r=0.999 9),0.416~41.6μg.mL-1(r=0.999 9)。各残留溶剂的精密度试验RSD均小于5%,平均回收率在96.22%~99.97%之间。结论本实验所建立的方法简便、灵敏、准确,可用于吡非尼酮中有机溶剂残留量的测定。     

HPLC测定消渴丸中格列本脲的含量

目的制订消渴丸中格列本脲含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定格列本脲的含量。结果格列本脲在2.5μg～7.5μg范围内线性良好,平均回收率为95.69%,RSD为1.77%。结论含量测定方法简便易行,重现性好。     

降糖保健食品中非法添加盐酸苯乙双胍和格列本脲的检测

目的:建立检测降糖保健食品中非法添加化学成分盐酸苯乙双胍和格列本脲的定性、定量检测方法.方法:采用薄层色谱法、高效液相色谱-二极管阵列检测法、LC/MS/MS联用技术进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法测定其中盐酸苯乙双胍和格列本脲的含量.结果:在抽取的9种市售样品中,有3种检出了盐酸苯乙双胍和格列本脲,1#～3#阳性样品中添加的盐酸苯乙双胍和格列本脲分别为8.54、6.51、10.53 mg/g和6.01、4.04、2.70 mg/g.结论:该方法快速、准确、灵敏、可靠,可用于有效监测保健食品中非法添加的盐酸苯乙双胍和格列本脲.     

毛细管气相色谱法检测右丙亚胺中的残留溶剂

目的:建立毛细管气相色谱法定量检测右丙亚胺原料药中的残留溶剂.方法:色谱柱为OV-101(30 m×0.53 mm,1 μm),柱温采用程序升温,载气为氮气,采用氢离子火焰检测器;以1,2-二氯乙烷为内标,测定右丙亚胺中的有机残留溶剂为甲醇、二氧六环、N,N-二甲基甲酰胺.结果:在本色谱条件下,测得各组分的线性关系良好(r均在0.996 5以上);平均回收率分别为100.1%、99.8%、99.0%;最低检测限分别为0.1024、0.199、0.448 μg·mL-1.结论:方法灵敏,准确,适用于右丙亚胺中残留溶剂的检测.     

二甲双胍格列本脲片中两种成分的离子对HPLC法测定

目的：建立用离子对HPLC法测定二甲双胍格列本脲片（复方盐酸二甲双胍片）中盐酸二甲双胍和格列本脲含量的方法。方法：以地西泮为内标,采用Symmetry C18柱（150mm×4．6mm,5ym）,流动相为甲醇～2mmol／L十二烷基磺酸钠溶液（58：42）,流速1．0mL／min．检测波长分别为232nm（盐酸二甲双胍）和300nm（格列本脲）。结果：盐酸二甲双胍和格列本脲分别在0．500～16．016μg／mL（r=0．9995）和20．040～120．240μg／mL（r=0．9998）范围内线性关系良好。平均方法回收率分别为（100．14±1．79）%（RSD=0．62％,n=3）和（99．95±1．16）％（RSD=0．56％,n=3）。结论：本方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于二甲双胍格列本脲片的质量控制。     

顶空气相色谱法测定托伐普坦原料药中的4种残留溶剂

目的:建立测定托伐普坦原料药中4种溶剂(甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃)残留量的方法。方法:采用顶空进样毛细管气相色谱法。色谱柱为6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷(DB-624)毛细管柱,氢火焰离子化检测器,程序升温,氮气为载气,顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为30min。结果:甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃检测浓度线性范围分别为60.06～600.6(r=0.9996)、12.04～120.4(r=0.9997)、100.7～1007(r=0.9993)、14.46～144.6(r=0.9991)μg·mL-1,平均回收率分别为98.8%、101.3%、101.6%、98.4%,RSD分别为0.51%、1.38%、0.95%、1.33%,最低检测限分别为0.5、0.5、0.25、0.01μg·mL-1。结论:建立的方法简便、灵敏、准确,适用于托伐普坦原料药中溶剂残留量的测定。     

复方盐酸二甲双胍片的人体相对生物利用度

目的研究国产复方盐酸二甲双胍片(含盐酸二甲双胍和格列本脲)与盐酸二甲双胍片和格列本脲片的人体相对生物利用度。方法采用随机交叉、自身对照试验设计,18名健康男性志愿者单剂量口服复方盐酸二甲双胍片(含盐酸二甲双胍500 mg,格列本脲2.5 mg)或同时口服盐酸二甲双胍片500 mg和格列本脲片2.5 mg,在不同时间点取静脉血,盐酸二甲双胍血药浓度采用HPLC-UV测定,格列本脲血药浓度采用HPLC-MS测定。以方差分析对主要药动学参数进行差别检验,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果单剂量口服复方盐酸二甲双胍片(含盐酸二甲双胍500 mg,格列本脲2.5 mg)或同时服用盐酸二甲双胍片500 mg和格列本脲片2.5 mg后,盐酸二甲双胍的药动学参数:AUC0~24分别为(6 252.9±2 628.3)、(6 270.6±2 202.6)ng.h.mL-1,AUC0~∞分别为(6 764.4±2 895.2)、(7 195.1±4 153.1)ng.h.mL-1,Cmax分别为(1 082.4±348.2)、(1 111.0±343.3)ng.mL-1,tmax分别为(1.5±0.5)、(1.7±0.6)h。试验制剂中盐酸二甲双胍的相对生物利用度为99.72%±13.59%。格列本脲的药物动力学参数AUC0~36分别为(533.5±247.0)、(495.7±223.3)ng.h.mL-1,AUC0~∞分别为(578.8±263.8)、(525.4±253.5)ng.h.mL-1,Cmax分别为(94.1±19.1)和(87.39±20.72)ng.mL-1,tmax分别为(1.8±0.4)和(1.9±0.4)h。与参比制剂相比,试验制剂中格列本脲的相对生物利用度为103.83%±12.94%。方差分析结果表明试验制剂与参比制剂的主要药物动力学参数之间无明显差异,双单侧t检验结果表明试验制剂与参比制剂为生物等效制剂。结论复方盐酸二甲双胍片与同时口服相同剂量的盐酸二甲双胍片和格列本脲片生物等效。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测中成药中添加格列本脲、格列吡嗪

目的:建立快速、准确、高灵敏度的检测中成药降糖制剂中非法添加格列本脲、格列吡嗪的分析方法。方法:采用 C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)柱分离,以乙腈-0.01 mol·L~(-1)乙酸铵(0.1%乙酸)缓冲溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),以多反应检测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的二级碎片离子分别为 m/z 321(格列吡嗪)和 m/z 369(格列本脲)。结果:格列吡嗪和格列本脲的线性范围分别为4.98～498 ng·mL~(-1)和4.96～496 ng·mL~(-1)。结论:此方法选择性强,灵敏度高,可作为中成药中非法添加格列本脲、格列吡嗪的分析检测方法。