市售覆盆子药材DNA条形码鉴定研究

目的基于ITS2条形码序列检测市场销售覆盆子药材,为保证覆盆子药材使用的正确性和安全性提供一种新的鉴定手段。方法获取掌叶覆盆子及其5种常见同属易混种ITS2序列,以及GenBank上下载的共计48条序列。使用Gene Tool软件分析ITS2序列长度,GC含量和变异位点等情况,利用Clustal X和MEGA 7.0软件计算遗传距离和构建邻接系统发育聚类树。同时随机检测24份市售覆盆子药材,利用中药材DNA条形码鉴定系统和构建邻接系统发育聚类树确定物种,鉴别真伪。结果掌叶覆盆子基原植物可与其同属易混种进行明显区分;市售药材中正品22份,伪品1份,混合物1份。结论基于ITS2序列的DNA条形码技术能够成功鉴定市场销售的掌叶覆盆子及其混伪品。     

基于matK和ITS2及二级结构对药材香薷及其混伪品的鉴别研究

目的 快速、准确鉴别药材香薷及其混伪品,保障香薷的药材质量和用药安全。方法 收集石香薷、江香薷和香薷植物材料分别进行matK和ITS2序列的扩增与测序,测序结果经Codon Code Aligner软件校对,同时从GenBank下载石香薷、江香斋及其易混品种海州香薷、香薷、密花香薷、牛至等物种的matK和ITS序列。其中,ITS序列经隐马尔可夫模型去除两端的5.8S和28S序列,共得到16个物种的ITS2序列50条;经Clustal软件校对共获得9个物种的matK序列28条。通过Mega7.0软件分析matK和ITS2序列,计算所有物种种内和种间遗传距离,构建邻接法(neighbor joining,NJ)聚类树,通过ITS2 Database预测ITS2二级结构,采用4Sale软件比对二级结构,通过ProfDistS软件构建基于联合ITS2一级序列及其二级结构的剖面邻接(profile neighbor-joining,PNJ)系统发育树。结果 基于matK和ITS2序列的遗传距离均表明香薷正品与其各种混伪品之间存在明显barcoding gap。NJ和PNJ进化树的拓扑关系一致,可以区分药材香薷及其混伪品。香薷的ITS2二级结构与其各混伪品具有显著差异。结论 建议matK和ITS2序列均可以作为鉴别香薷与其混伪品的DNA条形码,ITS2二级结构信息的加入可丰富鉴定结果,为香薷药材的准确鉴别、香薷属与石荠苎属植物的科学分类提供参考。     

基于ITS2序列及二级结构对易混淆药材牛尾独活、当归、独活和羌活的鉴别研究

本文利用ITS2序列及其二级结构对传统中药材牛尾独活、当归、独活和羌活进行分类鉴定.通过GenBank数据库中下载牛尾独活等药材共7个物种26条ITS序列,采用隐马尔可夫模型注释获得ITS2序列.采用MEGA软件计算种内、种间K2P遗传距离,构建NJ系统发育树.同时利用ITS2 Database预测各样本ITS2二级结...     

基于ITS2序列的三棱及其混伪品的分子鉴定

摘 要 目的：通过分析三棱及其混伪品的ITS2条形码序列,探索鉴定三棱及其混伪品的新方法。方法: 采集三棱及其混伪品共5个物种8个样本,并从Genbank网上下载三棱及其混伪品共6个物种23条ITS2序列,用MEGA5.0软件计算上述ITS2序列的种间、种内遗传距离,并构建系统发育树。结果: 三棱种内最大K2P距离为0.038,与混伪品种间最小K2P距离为0.697。由所构建的系统发育树可以看出,正品三棱的不同样品聚在一支,并能很好地与混伪品区分开。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定三棱与其混伪品,为三棱及其混伪品的鉴别提供了新的方法。     

川贝母的本草考证与DNA条形码鉴定研究

通过分析GenBank数据库下载序列的种内与种间变异与遗传距离,构建系统发育树,评价序列的鉴定能力。土贝母、老鸭瓣、浙贝母、湖北贝母与川贝母分别代表了不同时期的贝母药材主流品种;贝母道地产区经历了中国北方向南方的迁移过程;不同贝母药材品种存在药效性味的差异获得历史验证。结合基于ITS1与ITS2的分子系统发育关系分析,证实仅从形态学特征无法准确鉴定川贝母与其易混淆品,但能从DNA水平进行有效鉴定。为川贝母药材的质量控制、资源保护及临床用药提供依据,确保了中医临床疗效。     

通关藤及其常见混伪品的ITS2条形码鉴别研究

目的:采用ITS2序列分析,对通关藤及其混淆品进行鉴别,确保用药安全。方法:从GenBank下载通关藤序列,使用MEGA5.0软件对测序序列及下载序列进行对比分析,统计变异位点、计算遗传距离、构建样品NJ树,运用NCBI Blast进行物种鉴定,并与性状鉴别结果进行核对。结果:ITS2序列分析与遗传距离计算结果显示各通关藤样品间有明显差异,NJ树聚类结果能明显区分通关藤正品与伪品。结论:ITS2可准确鉴别通关藤及其伪品,可用于中药材真伪的快速鉴别,应用前景广阔。     

陕西关中野生商陆资源的ITS2和psbA-trnH条形码序列研究

为探讨DNA条形码在陕西关中野生商陆资源中的鉴定作用,本研究采用通用引物ITS2和psbA-trnH对29份商陆样品DNA进行PCR扩增和测序,用Codon CodeA-ligner V3.0进行序列拼接和校对,随后进行BLAST比对鉴定分析;同时运用MEGA 6.0分析序列特征、K2P遗传距离及种内或种间变异,并构建系统进化树,评价两对引物对该区域商陆及其混伪品的鉴别能力。研究结果表明, ITS2和psbA-trnH序列的PCR扩增和测序成功率均为100%; NJ系统进化树显示ITS2和psbA-trnH序列均可明显将所有样本分别聚为商陆、垂序商陆并与其同属近源种鄂西商陆、日本商陆及两种混伪品各自聚为不同分支; ITS2序列在种间遗传距离上较psbA-trnH有一定优势。ITS2和psbA-trnH序列均可作为DNA条形码对商陆及其混伪品进行识别和鉴定,为商陆资源品种现状与分布研究及合理开发利用提供理论依据。     

重楼属药用植物DNA条形码鉴定研究

为评价DNA条形码候选序列对重楼属药用植物的鉴定作用, 探讨重楼属药用植物鉴定新方法, 本研究对重楼属11个物种17份样品的psbA-trnH、rpoB、rpoC1、rbcL、matK和核ITS2序列进行PCR扩增和测序, 比较各序列扩增和测序效率、种内和种间变异, 进行barcoding gap分析, 采用BLAST1和Nearest Distance方法评价不同序列的鉴定能力。结果显示, ITS2序列在所研究的重楼属药用植物中的扩增和测序效率均为100%, 其种内种间变异、barcoding gap与其他DNA条形码候选序列相比具有明显的优势, ITS2序列在重楼属中的鉴定成功率达到100%, 而生物条形码协会 (CBOL) 植物工作组推荐的matK和rbcL序列的鉴定成功率分别为52.9% 和5.9%, 二者联合鉴定能力没有提高, 对于ITS2序列扩大至29个物种67份样品依然具有100%的鉴定成功率。实验结果表明, ITS2序列能够准确鉴定重楼属药用植物, 可以作为潜在的药用植物通用条形码序列。     

6种红树林植物的ITS2条码鉴定

摘要：目的 研究红树林植物红树、拉关木、秋茄树、海桑、玉蕊、阔苞菊的ITS2（DNA内转录间隔区2,internal transcribed spacer 2）条码鉴定方法,为红树植物药用价值的开发和优良种质资源的引进提供鉴定基础。方法 对样本进行DNA提取、PCR扩增和双向测序。用CodonCode Aligner软件进行序列拼接,通过MEGA5.1软件比较各序列间的变异性,计算遗传距离;采用邻接法构建NJ(近邻结合法,Neighbor-Joining)系统树及采用ITS2 数据库模拟各植物的二级结构。结果 6种红树林植物的ITS2序列间存在明显变异,这种差异不仅体现在序列的碱基种类和数量上,更体现在ITS2序列遗传变异和二级结构上。结论 ITS2序列可准确有效地鉴别不同红树植物。     

市售中药饮片DNA条形码鉴定研究

中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则已纳入《中国药典》,但目前尚缺乏应用于中药饮片的系统性研究.本研究共收集212份市售中药饮片,包含根及根茎、果实种子、全草、花、叶、皮、茎木等不同入药部位,验证中药材DNA条形码分子鉴定法对中药饮片基原物种鉴定的适用性和准确性.结果 表明,共有161份样本成功获得DNA条形码序列,占...     

羌活和独活药材气相色谱指纹图谱的建立及鉴别

目的为羌活和独活药材的鉴别提供科学依据。方法采用气相色谱(GC)-氢火焰离子化检测法。色谱柱:DB-1毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:起始柱温50℃,8℃.min-1升至85℃保持12 min,4℃.min-1升至155℃保持18 min,12℃.min-1升至250℃保持5 min;气化室温度:250℃;载气:氮气;流速:1.2 mL.min-1;进样量:1.0μL;分流比:10∶1;检测器温度:270℃。结果建立了羌活和独活药材的GC指纹图谱;对不同产地药材分别进行了相似度计算;指纹图谱和相似度计算结果显示,羌活和独活药材挥发油含量具有明显区别。结论本方法可用于羌活和独活药材的定性鉴别。     

羌活的质量控制研究进展

目的 综述羌活的质量控制研究现状,为羌活药材的进一步研究提供参考。 方法 针对近年来羌活药材的性状鉴别、组分含量、指纹图谱、重金属、农残以及无机元素含量测定方面的相关文献研究进行总结和归纳。结果与结论 羌活主要有效成分的含量测定方法有薄层扫描法、高效液相色谱法、气质联用色谱法、液质联用色谱法等。其中高效液相色谱法是最常用的检测方法,含量测定结果显示羌活有效成分的产地差异比较大。羌活中农药残留、重金属、人工与野生羌活的等效性方面的研究报道较少。     

Anti-austerity agents from Rhizoma et Radix Notopterygii (Qianghuo)

During a search for potent anticancer agents from natural products based on an anti-austerity strategy, we found that a CHCl3 extract of Rhizoma et Radix Notopterygii (Qianghuo), a Chinese crude drug, exhibited strong cytotoxicity against PANC-1 human pancreatic cancer cells, with a PC?? value of 17.5 μg/mL. Further fractionation and purification of this bioactive extract led to the isolation of 19 known compounds. The in vitro preferential cytotoxicity of the isolates was evaluated against two human pancreatic cancer cell lines, PANC-1 and PSN-1. Among the compounds isolated, ostruthin displayed the most potent activity against both PANC-1 (PC??, 7.2 μM) and PSN-1 (PC??, 7.8 μM) cells in nutrient-deprived medium (NDM) and may have induced necrotic nutrient-deprived PANC-1 cell death.     

治感佳胶囊中羌活与穿心莲水溶性成分的薄层鉴别

目的　建立羌活与穿心莲水溶性成分鉴别方法。方法　采用薄层色谱法。结果　同一供试品、展开剂、薄层板,可同时检出羌活与穿心莲的水溶性成分。结论　为水提制剂中的羌活与穿心莲质量控制提供了简便可行的鉴别方法     

RP-HPLC测定羌活中的总阿魏酸

目的 采用HPLC法测定羌活中总阿魏酸的含量.方法 色谱柱为Phenomenex Luna C_(18) (150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.085%磷酸溶液(17:83);流速1.0 mL·min~(-1);柱温35 ℃;检测波长316 nm.结果 阿魏酸0.0059～0.1181 μg与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.08%(RSD=1.71%,n=6).结论 所建方法简便、快捷、重复性好,可作为羌活药材中总阿魏酸的含最测定方法.     

Quality assessment of Rhizoma et Radix Notopterygii by HPTLC and HPLC fingerprinting and HPLC quantitative analysis

This paper describes an improved quality assessment method for Rhizoma et Radix Notopterygii (the rhizome and root of Notopterygium incisum Ting ex H.T. Chang or Notopterygium forbesii Boiss). The method was established by using fingerprinting and quantitation of marker compounds (isoimperatorin, notopterol and bergapten) in this herbal medicine. The authentication of Rhizoma et Radix Notopterygii using high performance thin-layer chromatography (HPTLC) fingerprinting was achieved by comparing the colors and Rf values of the bands in TLC fingerprints with those of the marker compounds. The HPLC fingerprints of 16 batches of herbal samples from different regions of China showed similar chromatographic patterns. Five peaks were selected as characteristic peaks, and three of these were identified by using LC-MS-MS techniques. The relative retention times of these characteristic peaks in the HPLC fingerprint were established as an important parameter for identification of Rhizoma et Radix Notopterygii. Finally, the pharmacologically active marker compounds isoimperatorin, notopterol and bergapten in this herb were quantitatively determined using a validated reverse-phase HPLC method.     

中药材羌活质量控制的气相色谱指纹图谱

目的建立羌活挥发油指纹图谱测定方法 ,为含羌活中药制剂制定指纹图谱奠定基础。方法采用水蒸气蒸馏法提取不同产地羌活的挥发油 ;用毛细管气相色谱技术测定指纹图谱 (GC FPS) ;选用聚类法分析比较。结果该方法灵敏度高 ,稳定性、重现性的RSD <3%。结论气相色谱指纹图谱分析法与聚类分析可作为羌活药材的质量控制方法     

Simultaneous analysis of six major compounds in Osterici Radix and Notopterygii Rhizoma et Radix by HPLC and discrimination of their origins from chemical fingerprint analysis

Osterici Radix, the dried roots of Ostericum koreanum Maximowicz, has long been used to treat cold, headache and arthralgia in Chinese medicine. Notopterygii Rhizoma et Radix, the dried rhizomes and roots of Notopterygium incisum Ting et H.T. Chang or Notopterygium forbesii Boiss (family: Umbelliferae), are well-known traditional Chinese medicines. These all herbal medicines were named kangwhoal in China, Japan and Korea. However no discrimination methods for the origin and no simultaneous analysis methods for bioactive components are currently available. We developed simultaneous analysis of six biomarkers including nodakenin (1), oxypeucedanin (2), bisabolangelone (3), notopterol (4), imperatorin (5), and isoimperatorin (6) using HPLC method. HPLC chromatographic separation was conducted with C18 column and mobile phase of acetonitrile (A) — water (B) (gradient, (A) 35%–65% (30 min)). The analytical condition was validated with specificity, selectivity, linearity (correlation coefficients of all bio marker were more than 0.999.), recovery (94.9–106.8%), precision and accuracy (intra and inter RSD < 2.99%). In addition, principal component analysis and cluster analysis was performed on analytical data of 38 commercial kangwhoal samples from different places. We confirmed to classify kangwhoal origins and this study was applied to quality evaluation and chemotaxonomy of medicinal herbs.     

铁丝威灵仙质量标准研究

目的完善铁丝威灵仙的质量标准。方法对铁丝威灵仙进行性状和显微鉴别;建立鉴别薯蓣皂苷元成分的薄层色谱法;建立测定白藜芦醇含量的高效液相色谱法,按2015年版《中国药典(四部)》通则0832水分测定法中烘干法、2302灰分测定法对样品进行相关检查。结果样品的性状和显微特征明显;薄层色谱显色清晰,与其他斑点分离良好,无干扰;样品中其他成分对白藜芦醇的测定无干扰;水分为2.42%~6.12%,总灰分为2.04%~8.66%,酸不溶性灰分为0.04%~6.34%,70%乙醇浸出物为5.51%~9.80%。结论该方法操作方便、准确度高、重复性好,可用于铁丝威灵仙的质量控制。     

大黄类药材的质量评价进展

大黄是传统常用中药材,其质量优劣关系到用药的安全性和有效性。本文对大黄性状及显微鉴定、薄层鉴定、化学成分评价、指纹图谱、分子鉴定等方面近十年研究进行归纳总结,并对今后大黄的质量评价研究方向进行展望,为大黄质量控制和进一步研究提供参考。