慢性胃炎1号对T淋巴细胞IL-2、CSFs表达的影响

目的:探讨慢性胃炎1号对脾(阳)气虚模型T淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)、集落刺激因子(CSFs)的影响.方法:以ConA活化的小鼠淋巴细胞作为反应细胞,测定大鼠脾条件培养液(SCM)和混合SCM中IL-2水平;以骨髓细胞作为反应细胞,测定大鼠SCM和混合SCM以及小鼠肺条件培养液(LCM)中CSFs活性.结果:该方药能显著促进脾(阳)气虚证大鼠脾淋巴细胞和混合脾淋巴细胞分泌IL-2(P均＜0.01),显著或明显促进大鼠脾淋巴细胞和混合脾淋巴细胞分泌CSFs(P＜0.01),显著促进小鼠肺组织自发性分泌CSFs(P＜0.01).结论:慢性胃炎1号有显著增强脾(阳)气虚证模型细胞免疫和骨髓造血功能的作用.     

益母草多糖对小鼠免疫调节作用的影响

目的:探讨益母草多糖对小鼠免疫调节作用的影响.方法:采用水提醇沉法提取益母草多糖,用卵清蛋白为抗原给小鼠注射后,将48只小鼠随机分为4组,分别为益母草多糖低、中、高剂量组及对照组,每组12只.各组小鼠灌胃7天,检测相应抗体生成水平和血清中γ-干扰素(IFN-γ)生成水平.结果:益母草多糖中剂量组卵清抗体生成水平、IFN-γ激发水平均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01).结论:益母草多糖对正常小鼠机体免疫功能有增强作用.     

补肾生血药对衰老小鼠Bcl-2mRNA表达的影响

“肾生骨髓”是中医肾生理功能的重要组成部分。因此,肾生髓理论的现代研究在肾本质研究中占有重要的地位。我们实验室自20世纪70年代末以来一直致力于肾生髓理论的现代研究,研究的重要成果之一是补肾生血药的研制成功。该药由熟地黄、何首乌、山茱萸、枸杞子、阿胶等11味中药组成,具有滋阴补肾,益髓生血等功能。20多年来,我们通过对补肾生血药的药效机理的研究,来阐述中医经典理论肾生髓的现代内涵。基因是决定生命结构和功能的最根本物质,与     

大枣多糖对小鼠红细胞免疫功能的影响

目的:观察大枣多糖对正常及环磷酰胺(CY)致免疫抑制小鼠红细胞免疫功能的影响.方法:①选择40只小鼠,随机分成空白组和大枣多糖高、中、低剂量组,分别口服自来水和16、8、4g·kg-1的大枣多糖.②选择30只小鼠,随机分成3组,即空白组,免疫抑制组和免疫抑制多糖组,于1、2、3、4周眼眶静脉丛采血进行红细胞计数,同时采用酵母菌花环法,测定大枣多糖对正常及免疫抑制小鼠红细胞免疫黏附功能的影响.结果:大枣多糖能明显增加小鼠红细胞C3b受体(RBC-C3bR)花环率和红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环率,并能使CY引起的下降的RBC-C3b花环率和RBC-CI花环率显著回升.结论:大枣多糖能增强小鼠红细胞免疫功能并对CY所致的红细胞免疫功能的抑制具有明显的拮抗作用.     

巴戟天对人体及小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的:探讨巴戟天体外免疫调节的作用机制。方法:用体外细胞培养法观察巴戟天对丝裂原诱导的健康老人的淋巴细胞增殖及对丝裂原诱导的小鼠淋巴细胞增殖的影响及小鼠巨噬细胞产生肿瘤坏死因子(TNF)的影响。结果:巴戟天可促进刀豆蛋白A(ConA)活化的人体淋巴细胞的增殖;可促进ConA和细菌多糖(LPS)活化的小鼠淋巴细胞的增殖;并提高小鼠巨噬细胞产生TNF的水平。结论:研究结果为巴戟天做为免疫调节剂提供了细胞水平的实验依据。     

色象中药对人A375黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响

目的:研究黑白两类中药水提取物对人A375黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法:MTT法测定中药对细胞增殖的影响;NaOH裂解法测定黑素合成含量。结果:与对照组相比,黑色组中药大部分对黑素细胞增殖及黑素合成有明显促进作用(P<0.05或P<0.01),而白色组大部分则有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01)。另外,研究发现白蒺藜、白芷、白茯苓、白芍、熟地这五味药物具有双向调节作用,而桃仁虽为白色,但却起着促进作用。结论:中药材的颜色与色素代谢调节之间存在一定的相关性,色象中药在色素代谢障碍性皮肤病的临床治疗中具有应用前景。     

大叶蛇葡萄乙醇提取物对2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的实验研究

目的：研究大叶蛇葡萄乙醇提取物的抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：将大叶蛇葡萄乙醇提取物作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变（CPE）观察药物对2215细胞的毒性,用酶联免疫测定法（ELISA）检测药物对培养8天的2215细胞分泌的表面抗原（HBsAg）和e抗原（HBeAg）表达的抑制作用。结果：大叶蛇葡萄乙醇提取物的半数毒性浓度（TC50）为250μg/ml,最大无毒浓度（TC0）为125μg/ml;乙醇提取物对培养8天的2215细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度（IC50）分别为43.1μg/ml、54.8μg/ml,治疗指数（TI）值分别为5.8、4.7。结论：大叶蛇葡萄乙醇提取物具一定的体外抗乙肝病毒的作用,为有效物质部位。     

白僵蚕粗提物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型TYR及其相关蛋白TRP-1、TRP-2mRNA表达的影响

1材料 1．1药物白僵蚕：购自北京同仁堂制药集团哈尔滨药店,水煎醇沉,用MEM增养基配制成0．5、1．0g／L。     

炒紫苏子醇提取物对小鼠智力的影响

目的:研究炒紫苏子醇提取物对衰老小鼠智力的影响.方法:将100只15月龄的老年小鼠与20只25日龄的青年小鼠随机分6组:青年组,老年衰老模型组,炒紫苏子醇提物268mg/kg、134mg/kg、67mg/kg剂量组,脑复康组每组雌、雄各10只.灌胃21d后各组用Y-迷宫和跳台法对大鼠的学习记忆能力进行测定.结果:炒紫苏子醇提物3剂量组智力明显优于老年模型对照组(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),智力与脑复康对照组接近,不同剂量组间有明显的剂量效应关系.结论:炒紫苏子醇提取物具有较强的益智作用.     

不同炮制方法、给药途径及浓度的茜草水煎醇沉液对小鼠凝血作用的影响

目的:观察茜草水煎醇沉液对小鼠凝血时间的影响,比较不同炮制方法、不同给药途径、不同浓度的茜草水煎醇沉液对小鼠凝血时间影响的差异性,为临床用药提供实验依据。方法:采用毛细玻璃管小鼠眼内眦球后静脉丛取血法,测定小鼠凝血时间。实验分二批处理,均设止血敏组(阳性对照)和生理盐水组(空白对照),实验一:观察灌服不同浓度生、炒茜草(炭)水煎醇沉液对小鼠凝血时间的影响;实验二:观察腹腔注射不同浓度生、炒茜草(炭)水煎醇沉液对小鼠凝血时间的影响。结果:灌服、腹腔注射各组同生理盐水组比较,凝血时间均明显缩短,差异极显著(P<0.01),且随着剂量的增加其促凝作用增强,同等剂量的生茜草作用强于茜草炭。结论:茜草水煎醇沉液对小鼠的凝血时间有明显缩短作用。     

复色2号方对鼠黑素瘤B16细胞酪氨酸酶的影响

目的:探讨复色2号方治疗白癜风的分子学作用机制。方法:采用MTT法测定复色2号方对B16细胞增值的影响,在酶标仪下测定并记录B16细胞增殖情况;采用酪氨酸酶多巴速率氧化法测定复色2号方对酪氨酸酶活性的影响;采用NaOH裂解法测定B16细胞黑素含量。结果:复色2号方药物浓度在1～1000g/L对黑素瘤B16细胞增殖无统计学意义(P0.05),但对酪氨酸酶活性和黑素合成有统计学意义(P0.05),呈浓度依赖性。结论:复色2号方对黑素瘤B16细胞增殖无影响,但对酪氨酸酶活性和黑素合成有较强的剂量相关性促进作用,可以达到治疗白癜风的目的。     

维泰醇对小鼠黑色素瘤B16F0糖酵解的影响

目的:研究维泰醇对小鼠黑色素瘤B16F0细胞糖酵解水平的影响并初步探究其机制。方法:以小鼠黑色素瘤B16F0细胞为研究对象,不同浓度维泰醇处理小鼠黑色素瘤B16F0细胞,另设空白组,采用磺酰罗丹明(SRB)法检测维泰醇对细胞增殖的影响,反向高效液相色谱法检测维泰醇对B16F0细胞ATP含量影响,试剂盒检测B16F0细胞培养液中乳酸含量影响,放射同位素法测定维泰醇对B16F0细胞葡萄糖摄取影响,试剂盒检测维泰醇对B16F0细胞己糖激酶(HK),丙酮酸激酶(PK),乳酸脱氢酶(LDH)活性影响。结果:与空白组比较,维泰醇可浓度依赖性的抑制B16F0细胞ATP的产生和乳酸的释放,减少B16F0细胞对葡萄糖的摄取,浓度依赖性的降低PK和LDH的活性(P0.05,P0.01),但对HK的活性无显著性影响。结论:维泰醇可抑制B16F0细胞糖酵解水平,其机制可能与抑制葡萄糖摄取,下调糖酵解的关键酶PK和LDH的活性有关。     

甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响

目的:探讨甘草中黄酮类化合物甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外迁移能力的影响。方法:取对数生长期B16F10细胞按8 000个/孔接种于96孔板中,磺酰罗丹明B(SRB)法测定LCA(0,5,10,15,20μmol·L-1)作用24 h对细胞活力影响;取对数生长期B16F10细胞按1×105个/孔接种于24孔板中,划痕实验检测LCA(0,5,10,15μmol·L-1)作用24 h细胞体外迁移能力;取对数生长期B16F10细胞按5×105个/瓶接种于细胞培养瓶中,LCA(0,5,10,15μmol·L-1)作用24 h后,明胶酶谱法检测细胞培养上清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性;ELISA检测MMP-2和MMP-9蛋白含量;实时荧光定量PCR(Q-PCR)和半定量PCR(RT-PCR)法检测MMP-2和MMP-9基因表达水平。结果:5~15μmol·L-1的LCA对小鼠黑色素瘤B16F10细胞作用24 h,对细胞活力没有显著的影响;划痕试验结果说明,LCA可剂量依赖性地降低B16F10细胞的体外迁移能力;明胶酶谱结果显示,LCA可明显抑制B16F10细胞分泌MMP-2和MMP-9的活性;ELISA试验表明,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9蛋白表达;Q-PCR和RT-PCR结果显示,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9的mRNA基因表达量。结论:甘草查尔酮A能抑制B16F10小鼠黑色素瘤细胞体外转移侵袭作用,其机制可能与抑制MMP-2和MMP-9表达有关。     

黄芪和天花粉对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖和迁移及E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的影响

目的观察黄芪、天花粉及其配伍对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖和迁移的影响,探讨其作用机制。方法 MTT法检测B16细胞增殖,根据结果计算细胞生长抑制率为0%时对应的各药物浓度(IC0)、为25%时对应的各药物浓度(IC25)、为50%时对应的各药物浓度(IC50)。设空白组、配伍组(黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC0、黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC25、黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC50、黄芪注射液IC25+天花粉水煎剂IC0、黄芪注射液IC25+天花粉水煎剂IC25)。细胞划痕实验检测B16细胞迁移,Westernblot检测B16细胞迁移相关蛋白E-cadherin、N-cadherin表达。结果 MTT检测结果表明,不同剂量黄芪和天花粉均可抑制B16细胞增殖,具有浓度依赖性;细胞划痕实验结果显示,黄芪和天花粉均影响B16细胞划痕愈合,抑制细胞迁移,具有浓度依赖性;两药不同比例配伍的细胞增殖抑制率明显高于单味中药,差异有统计学意义(P<0.05);Westernblot检测结果显示,黄芪和天花粉均增加E-cadherin蛋白的表达,降低N-cadherin蛋白的表达。结论黄芪、天花粉及其配伍均可抑制小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖及迁移,且两药配伍效果优于单味中药,黄芪和天花粉抑制细胞迁移的机制与E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达相关。     

复色1号方对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的 探讨复色1 号方对小鼠B16 黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响.方法 采用MTT 法测定不同浓度的复色1 号方对小鼠B16 黑素瘤细胞增殖的影响,多巴速率氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响,对其结果进行统计分析.结果 复色1 号方浓度在0.001～0.01g/l,范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞的增殖与对照组相比无统计学意义(P＞0.05),0.05～0.1g/l 浓度范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞的增殖与对照组相比有显著意义(P＜0.05),呈现一定的抑制作用;复色1 号方在0.001～0.1g/l 浓度范围内对小鼠B16 黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性的影响与对照组相比,各浓度含药培养基组的A 值均有显著性差异(P＜0.05),呈剂量依赖性激活作用.在0.001～ 0.01g/l 浓度范围内,复色1 号方的最佳激活浓度为0.01g/l.结论 复色1 号方没有促进小鼠B16 黑素瘤细胞增殖的作用;在一定浓度范围内(0.001～0.1g/l),对小鼠B16 黑素瘤细胞酪氨酸酶的活性呈剂量依赖型激活作用.     

健脾理气中药对荷B16黑色素瘤小鼠肝转移的干预作用

目的观察健脾理气中药对C57BL/6小鼠肝转移的干预作用。方法雌性小鼠50只,随机分为空白组、荷瘤组、脾虚荷瘤组、中药荷瘤组、中药脾虚荷瘤组,每组各10只。以异位接种法在C57BL/6小鼠中建立B16黑色素瘤肝转移模型。空白组、荷瘤组予灌胃冷开水,脾虚荷瘤组灌胃大黄合剂,中药荷瘤组灌胃健脾理气合剂,中药脾虚荷瘤组予灌胃大黄合剂与健脾理气合剂。连续给药12d,停药后次日将所有动物脱椎处死,眼球摘除法取血进行血浆分离;对血清DNA进行定量并观察健脾理气中药对荷瘤肝转移小鼠生存质量、肿瘤生长和肝转移的影响。结果在正常小鼠中,血循环DNA为(62.4±25.52)ng/ml、荷瘤伴有肝转移小鼠为(241±73.7)ng/ml(P<0.01);用健脾理气中药抑制肿瘤生长和转移的同时,荷瘤小鼠血循环DNA也同步下降。结论健脾理气中药可显著地抑制小鼠B16黑色素瘤脾脏种植瘤的生长,能降低脾虚荷瘤组肝转移的发生率,降低脾虚荷瘤组肝转移的分期,降低荷瘤小鼠血微量DNA。     

小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(tyrosinase related protein-2,TRP-2)mRNA表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高质量浓度分别为0.1,1,2.5 g·L-1用于实验,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测B16细胞中TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达。结果:与正常组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1,TRP-2的基因表达、蛋白合成3方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。     

榄香烯诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的实验研究

目的:观察榄香烯对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度榄香烯体外处理小鼠黑色素瘤B16细胞,采用MTT比色法、流式细胞仪分析技术及荧光染色等方法,检测榄香烯对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响。结果:榄香烯能抑制B16细胞增殖,使细胞停滞于G0/G1期,S期细胞明显减少,其作用呈明显浓度依赖性。形态学及流式细胞术分析结果均提示:在本实验条件下,榄香烯可诱导B16细胞凋亡,其诱导作用亦显示明显的浓度依赖关系。在此基础上,进一步分析发现:榄香烯可诱导B16细胞原癌基因bcl-2表达降低,抑癌基因p53表达增强。结论:榄香烯在体外通过干扰细胞周期、诱导细胞凋亡明显抑制B16细胞增殖,其作用机制可能与其诱导癌基因bcl-2表达减少、p53表达增加有关。     

三氧化二砷抑制小鼠B16黑色素瘤肺转移作用的研究

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对小鼠B16黑色素瘤肺转移的抑制作用。     

人参总皂苷增强小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接功能的实验研究

目的探讨人参总皂苷(total ginsenosides,TGs)对小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接(Gap junction,GJ)功能的影响及其作用机制。方法 MTT法测TGs对B16细胞生长的影响,荧光显微镜结合荧光示踪法分析GJ功能变化,以各试验组受体细胞均数与对照组的比值作为评价GJ功能的指标,流式细胞仪检测对照组和实验组的绿色荧光供体细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)变化分析GJ功能改变,Western blot分析连接蛋白(Connexin,Cx)表达。结果 1~8μmol·L-1TGs处理B16细胞48 h对其生长状态无明显影响;用1,2,4,8μmol·L-1TGs处理细胞48 h后,荧光显微镜下观察,TGs能明显提高B16细胞荧光染料Calcein传递,对照组和实验组G4/G3比值分别是0.06±0.01,0.09±0.02,0.10±0.01,0.12±0.03和0.13±0.02,各实验组G4/G3值明显高于对照组(P0.01);Western blot分析结果显示,用1,2,4,8μmol·L-1TGs处理B16细胞48h对其连接蛋白Cx32表达有明显的增强作用,但对Cx43和Cx26表达无影响。结论体外较低浓度TGs能够有效促进B16细胞GJ功能,并具有一定的剂量-效应关系。1~8μmol·L-1TGs虽能显著促进B16细胞Cx32蛋白的表达,但在本试验浓度范围内并无明显的量效关系,且对Cx43和Cx26表达无明显影响。