深低温下阜外改良器官保护液对大鼠胸主动脉内皮源性超极化因子介导的舒张功能的影响

目的探讨深低温下阜外改良（Fu Wai Modified，FWM）器官保护液对离体大鼠胸主动脉内皮源性超极化因子（EDHF）介导的舒张功能的影响。方法取大鼠胸主动脉，切成2mm的血管环，分别用FWM液、UW液、HTK液、Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液（KH）液在4℃缺氧条件下保存4h后，采用器官槽法，检测在环加氧酶阻断剂indomethacin（7μmol／L）和一氧化氮合成酶阻断剂LNNA（300μmol／L）作用下，前列腺素F2α（U46619 30nmol／L）及非受体介导钙离子载体（A23187—6log mol／1）引发的收缩舒张反应。结果A23187引发的舒张反应，FWM组高于KH组（P〈0．05），UW组低于KH组（P〈0．05），HTK组高于UW组（P〈0．01），FWM组与HTK组相比，差别无显著性（P〉0．05）。结论深低温下，FWM，HTK液对大鼠胸主动脉EDHF介导血管舒张功能有保护作用，UW液对其有抑制作用。     

家兔睾丸移植模型研究

目的 比较不同睾丸血管吻合方式及睾丸保存方式对移植后睾丸存活率及生精功能的影响。方法 分别将睾丸血管与睾丸血管、腹壁下血管、隐血管吻合，建立器官移植模型；分别用UW液和HTK液保存睾丸，建立器官低温保存移植模型。术后监测睾丸存活率、精子生成及雄激素分泌水平。结果端端吻合睾丸动静脉、输精管的睾丸阴囊原位移植方法最为简单易行，存活率高，术后生精功能良好；在0℃～4℃条件下，UW液和HTK液分别可保存兔睾丸72h和60h。结论 睾丸原位移植最为方便可靠，存活率高，术后生精功能良好；在0℃～4℃条件下，UW液和HTK液保存兔睾丸不宜超过72h和60h。     

各种心肌保存液对鼠心低温保存效果的形态学观察

目的 研究在冷缺血期3种液体对鼠心保存的效果。方法 将离体鼠心分别用HTK液，UW液及St.ThomasⅡ液灌注并4℃冷冻保存6h。利用离体鼠心非循环式Lan-gendorff灌流功能测定模型，复灌1h后，取心肌组织做心镜电镜观察。结果 经过HTK液保存后的鼠心细胞损伤较轻，UW液鼠心细胞损伤较重，但冠脉血管内膜剥脱较重。St.ThomasⅡ液鼠心细胞损伤最生。结论 HTK液心肌保存效果最好，高钾对血管内皮有损害。     

HTK液和UW液对大鼠原代心肌细胞冷保存的保护作用

目的 研究HTK液和UW液对体外培养的大鼠原代心肌细胞冷保存中的保护作用。方法 体外培养大鼠原代心肌细胞，分别用生理盐水，UW液和HTK(液在0℃-4℃保存心肌细胞6h、8h、10h、12h。检测保存液的AST和LDH-L，台盼蓝染色法计算心肌细胞的生存率。结果 UW液组和HTK液组的AST和LDH-L均比生理盐水组极显著低下，心肌细胞的生存率则极显著的高于生理盐水组。而在12h时，HTK液组的AST和LDH-L显著低于UW液组，心肌细胞的生存率在8h和10h也明显高于UW液组。结论 HTK液和UW液均对体外培养的大鼠原代心肌细胞的冷保存有明显的保护作用。而HTK液相对于UW液更能延长对心肌细胞的冷保存时间。     

上海多器官保存液保存离体大鼠肝脏的实验研究

目的:观察上海多器官保存液(Shanghai-mutil-organ solution,SMO液)对离体大鼠肝脏的保存效果,探讨应用SMO液保存离体供肝的可行性.方法:SD大鼠随机分为SMO液、UW液和HTK液保存组,建立离体肝脏单纯低温保存模型,保存液保存8、16、24、36 h分析肝脏组织能量代谢情况,观察肝组织形态学改变和肝脏细胞凋亡情况.结果:保存16、24、36 h,SMO液组肝组织三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷总量(TAN)及Atkinson能荷(AEC)均明显高于同时点HTK液组 (P＜0.05),与同时点UW液组无显著差异;形态学检查见SMO液组组织损伤较同时点HTK液组轻,除细胞肿胀较同时间点UW液组明显外,其余表现基本一致.保存24、36 h,SMO液组凋亡指数明显低于HTK液组(P＜0.05),而与UW液组无明显差异.结论:SMO液对大鼠离体肝脏的保存效果总体上与UW液相当,优于HTK液,仅在防止细胞水肿方面较UW液稍差.     

几种常用供心保存液对移植心脏低温保存效果的实验研究

目的 比较几种常用供心保存液对鼠心的低温保存效果.方法 将离体鼠心分别用St.Thomas液、Euro Collins液、UW液和HTK液4℃保存8h后,取出供心.在改良的非循环式Langendorff-Neely灌注模型上测定血流动力学指标、冠状动脉流量(CF)、冠状动脉血管舒张反应,肌酸激酶(CK)和高能磷酸盐水平.结果 HTK液组心功能恢复率、冠状动脉血管舒张反应及高能磷酸盐水平明显优于其他保存液组;CK释放量显著低于其他保存液组.结论 HTK液对心肌保存效果最好,可以最大限度地减轻心肌缺血再灌注损伤,改善离体供心延时保存效果.     

非去极化心脏停搏液短时常温保存对猪冠状动脉内皮依赖性舒张功能的影响

目的 探讨短时常温(1h,37℃)条件下,非去极化心脏停搏液(NDP)对猪冠脉内皮源性超极化因子(EDHF)介导的血管舒张功能的影响.方法 根据保存液的不同,将血管环分成四组,分别为对照(CON)组、St.Thomas (ST)组、HTK组、NDP组.采用器官槽法,将血管环分别置于Krebs-Hensleit (KH)液、ST液、HTK液、NDP液中,37℃条件下保存1h,加入一氧化氮合酶阻滞剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)和环加氧酶阻滞剂(Indomethacin),记录由前列腺素F2α(U46619)及缓激肽(Bradykinin)引起的血管收缩和舒张反应.结果 NDP组中EDHF介导的内皮依赖性血管舒张百分比最大,为(74.79±6.40)％,其余依次为HTK组(51.32±21.92)％、CON组(24.03±8.01)％、ST组(16.20±6.39)％.结论 短时常温(1h,37℃)条件下,NDP液对冠脉内皮的舒张功能具有保护作用,且优于HTK组、CON组和ST组.     

SMO保存液对犬肾低温保存期间Na~+-K~+ ATPase的影响

目的:研究SMO保存液对犬肾低温保存期间Na+-K+ATPase的影响。方法:建立犬离体肾脏单纯低温保存模型,对照组用0~4℃HTK保存液和UW保存液对供肾进行灌注和保存,试验组用0~4℃自制SMO保存液对供肾进行灌注和保存,分别于24、48、72h后取皮质标本,进行组织病理学观察及检测Na+-K+ATPase的活性。结果:SMO液组所见组织病理学改变,48h和72h比HTK液组轻,在各时间点与UW液组基本相似。Na+-K+ATPase活性,保存各时点,SMO液组与UW液组无明显差异;保存24h和48h,SMO液组与HTK液组无明显差异;保存72h,SMO液组Na+-K+ATPase活性明显高于HTK液组,存在明显差异。结论:SMO保存液在减轻细胞形态学改变和减缓Na+-K+ATPase活性下降方面显著优于HTK保存液,与UW保存液相当。     

乌拉坦增强延长离体大鼠心脏的低温保存效果

目的：观察乌拉坦对延长离体大鼠心脏的低温保存作用.方法：成年雄性SD大鼠分为两组（n=6）：对照组：HTK保存液; 试验组：HTK保存液加乌拉坦（30mmol/L）.心脏分别置入两种保存液4℃下保存6和18h.采用Langendorff心脏灌注装置进行保存前及保存后再灌注30min时心脏功能测定,比较心脏功能恢复率、ATP含量、细胞凋亡和超微结构变化.结果：低温保存后实验组左室功能恢复率较对照组明显升高,细胞凋亡及超微结构损伤较对照组减轻; 保存18h后实验组ATP含量显著高于对照组.结论：乌拉坦加入HTK心脏保存液能够显著增强离体大鼠心脏的低温保存效果.     

UW液、Celsior液和HTK液低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较

目的 比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果。方法 制备好的L-02细胞悬液分以下3组：UW液保存组（UW液组）;Celsior液保存组（CS液组）;HTK液保存组（HTK液组）。各组细胞于4℃低温保存72h后,分别测定细胞存活率及死亡率（流式细胞术）,ALT及LDH释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液较Celsior液和HTK液显著提高了4℃常规低温保存保存72h的L-02细胞的存活率[(60.05 ± 4.23)% vs (50.12 ± 3.99)%、(44.20 ±4.67)%],均P<0.05;降低了细胞死亡率[(39.95±4.23)%vs (49.88 ±3.99)%、(55.80%±4.67)%], 均P<0.05;抑制了ALT、LDH释放(均P <0.05);更好地维持了L-02细胞尿素合成功能[ (1.03 ± 0.23)mmol/L vs (0.80± 0.14)mmol/L、(0.48± 0.05)mmol/L]和白蛋白分泌功能[(8.36 ±1.38 )mg/L vs (6.41±1.25)mg/L、(5.19±0.41)mg/L), 均P<0.05。结论 同Celsior液和HTK液相比,使用UW液4℃常规低温保存L-02肝细胞可以明显的提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能,但保存时间不应超过72h。     

Sihler's溶液的配制改良

利用不同浓度的Sihler's溶液对人类死胎的膈肌进行Sihler's染色,比较膈肌的染色效果、皱缩程度及染色时间.按照1∶1∶9(1体积冰醋酸或Ehrlich's苏木精,1体积甘油,9体积1％水合氯醛)比例配制的Sihler's溶液染色效果最好,且染色所用时间少.     

应用晶体或胶体进行高容量血液稀释对血液流变特性的影响

目的　急性高容量血液稀释 (acutehypervolemichemodilutionAHH)是一项减少围术期异体血输入量的新技术。观察和比较骨科手术病人应用晶体溶液及胶体溶液进行AHH后血液流变特性的变化 ,为围术期AHH方案的制定、为临床合理应用血浆代用品提供实验依据。方法　骨科择期手术患者 6 0例 ,随机分为三组 :6 %羟乙基淀粉组 (H组 ,n =2 0 ) ,林格氏液组 (R组 ,n =2 0 ) ,4 %琥珀酰明胶组 (G组 ,n=2 0 ) ,于手术开始前 ,按 2 0ml/kg的容量以 0 5～ 0 75ml·kg-1·min-1的速度分别输注以扩充血容量 ,达到高容量血液稀释 ,维持血循环指标在正常范围 ,检测稀释前、稀释后 30min、稀释后 2h ,全血粘度、血浆粘度、Hct、红细胞聚集指数、红细胞变形指数。结果　 (1)AHH后患者循环功能稳定 ,围术期异体血输入量胶体液组明显少于晶体液组 ;(2 )AHH后三组患者全血粘度、Hct明显降低 ,红细胞聚集指数降低 ,红细胞变形指数H组升高。结论　术前AHH可以有效地维持术中血循环功能稳定 ,优化血液流变状态 ,利于微循环灌注 ,提高患者对失血的耐受性。应用胶体型血浆代用品进行AHH可以改善血容量相对不足状态 ,增加心脏前负荷 ,有利于维持循环功能的稳定     

托马斯液复合应用康斯特保护液对大鼠离体心肌保护作用的研究

目的：观察托马斯液（STH）复合应用不同剂量康斯特保护液（HTK）对大鼠长时间缺血心肌的保护作用。方法：雌性Wistar大鼠40只,体重230～280g,随机分为S、H、S＋H10、S＋H20和S＋H30共5组（n=8）。麻醉后开胸取出心脏立即连于langendorff灌注装置,制备心脏缺血再灌注模型,S组用STH液15ml／kg每30min灌注1次。H组用HTK液30ml／kg单次灌注,其余3组均先用STH液15ml／kg灌注后分别续灌HTK液10ml／kg、20ml／kg、30ml／kg。分别留取停搏前、再灌注15、30min时冠脉流出液2ml用于检测心肌乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）。实验末留取心尖部心肌组织,用于检测心肌组织三磷酸腺苷（ATP）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果：与S组比较,其余4组复灌15、30min后冠状动脉流出液心肌酶CK、LDH含量较低（P〈0．05,P〈0．01）;与S、H、S＋H10各组相比,复灌30min后,S＋H20组及S＋H30组心肌ATP、SOD含量增高（P〈0．05,P〈0．01）,心肌MDA含量降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论：STH液复合一定剂量的HTK液诱导并维持心脏停搏能增加大鼠离体心肌ATP、SOD含量,降低MDA含量．减轻缺血再灌注损伤。